《離體蛙心灌流》課件

《離體蛙心灌流》實(shí)驗(yàn)課件本課件將介紹離體蛙心灌流實(shí)驗(yàn)，包含實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、原理、步驟、注意事項(xiàng)等。實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私怆x體蛙心灌流技術(shù)掌握離體蛙心灌流實(shí)驗(yàn)的具體操作方法和步驟，以及實(shí)驗(yàn)器材的使用方法。觀察心臟功能的影響因素通過觀察不同藥物對(duì)離體蛙心收縮力的影響，了解心肌功能受到藥物影響的機(jī)制。學(xué)習(xí)數(shù)據(jù)分析和結(jié)果解釋學(xué)會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和解釋，得出合理的結(jié)論，提高實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和分析能力。實(shí)驗(yàn)原理心臟生理蛙心在體外仍能保持自主跳動(dòng)，這是由于心臟本身具有自律性。灌流液灌流液模擬血液，提供氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)，維持蛙心正常功能。藥物作用腎上腺素、阿托品、乙酰膽堿等藥物會(huì)影響心臟收縮力，從而改變心跳頻率和強(qiáng)度。實(shí)驗(yàn)器材蛙心灌流裝置包含蛙心灌流瓶、蠕動(dòng)泵、滴液漏斗、試管架等。顯微鏡用于觀察蛙心搏動(dòng)情況，放大細(xì)節(jié)。手術(shù)器械包括剪刀、鑷子、血管鉗、解剖針等。實(shí)驗(yàn)溶液包含生理鹽水、林格液、腎上腺素、阿托品、乙酰膽堿等。實(shí)驗(yàn)步驟蛙心灌流實(shí)驗(yàn)步驟相對(duì)復(fù)雜，需要謹(jǐn)慎操作，并確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境干凈整潔，避免污染。首先，將麻醉后的蛙解剖，取出心臟，并小心地將其置于灌流裝置中。1預(yù)備工作準(zhǔn)備好器材，并熟悉操作步驟。2心臟摘取麻醉蛙，剖開心腔，小心取出心臟。3連接灌流裝置將心臟置于灌流裝置中，并連接吸引泵。4調(diào)節(jié)灌流速度根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，調(diào)節(jié)灌流速度。5觀察記錄觀察心跳情況，并記錄數(shù)據(jù)。預(yù)備工作準(zhǔn)備蛙心灌流裝置確保所有設(shè)備完好無損，連接管路無泄漏。將緩沖液調(diào)節(jié)至生理溫度，并將其加入灌流裝置的儲(chǔ)液瓶中。準(zhǔn)備蛙選擇體型適宜的青蛙，并將其麻醉。麻醉完成后，用清水清洗蛙體，并將其固定在解剖板上。麻醉蛙并剖開心腔1麻醉蛙用MS-222麻醉蛙，直至蛙失去反射，靜止不動(dòng)。2固定蛙將麻醉后的蛙用繩子固定在蛙板上，背部朝上，露出心臟位置。3剖開心腔在蛙體背部心臟位置處用剪刀剪開皮膚，小心避開血管，露出心臟。放置心臟并連接吸引泵1固定心臟將蛙心固定在蛙心灌流裝置的支架上，確保心臟處于合適的位置，方便連接灌流液管和吸引泵管。2連接灌流液管將灌流液管連接到蛙心的主動(dòng)脈弓，確保灌流液能夠順利進(jìn)入心臟。3連接吸引泵管將吸引泵管連接到蛙心的靜脈竇，以便將流經(jīng)心臟的灌流液引流到收集瓶中。連接吸引泵管時(shí)，要注意管道的密封性，避免灌流液泄漏。同時(shí)，要注意控制吸引泵的速度，確保灌流液能夠順利流經(jīng)心臟，并及時(shí)收集。調(diào)節(jié)灌流速度選擇合適的灌流速度灌流速度過快，會(huì)導(dǎo)致蛙心壓力過大，影響心臟功能。逐漸增加灌流速度灌流速度過慢，會(huì)導(dǎo)致蛙心供氧不足，影響心臟功能。保持蛙心正常跳動(dòng)觀察蛙心跳動(dòng)情況，根據(jù)需要調(diào)節(jié)灌流速度。觀察心跳情況在心率、節(jié)律、心音等方面觀察心跳情況，記錄變化趨勢。1心率每分鐘心跳次數(shù)2節(jié)律心跳的規(guī)律性3心音心跳發(fā)出的聲音記錄數(shù)據(jù)11.心率記錄每分鐘心跳次數(shù)，并計(jì)算平均值。22.心臟收縮力記錄心臟收縮幅度，可使用滴水法測量。33.心律變化記錄加入藥物前后心跳頻率和規(guī)律變化。44.實(shí)驗(yàn)時(shí)間記錄每個(gè)步驟的開始和結(jié)束時(shí)間，方便分析實(shí)驗(yàn)過程。加入腎上腺素1準(zhǔn)備腎上腺素溶液使用合適的濃度和體積的腎上腺素溶液，通常為0.1%~0.5%的腎上腺素溶液，并用生理鹽水稀釋。2緩慢滴加腎上腺素溶液將準(zhǔn)備好的腎上腺素溶液緩慢滴加到蛙心灌流液中，觀察蛙心跳動(dòng)頻率和強(qiáng)度的變化。3記錄數(shù)據(jù)記錄腎上腺素加入前后蛙心跳動(dòng)頻率和強(qiáng)度的變化，并進(jìn)行對(duì)比分析。觀察心跳變化1心率變化腎上腺素刺激心臟，使心率加快。2心肌收縮力心肌收縮力增強(qiáng)，心輸出量增加。3心律心律可能會(huì)出現(xiàn)短暫的不規(guī)則變化，但總體上仍保持規(guī)律跳動(dòng)。觀察心臟灌流液顏色是否出現(xiàn)明顯變化，并記錄觀察到的所有變化現(xiàn)象。記錄數(shù)據(jù)記錄表格使用表格記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，包括時(shí)間、心率、心律、心肌收縮力等指標(biāo)。數(shù)據(jù)分析根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制圖表，例如心率變化曲線，分析藥物對(duì)蛙心的影響。實(shí)驗(yàn)筆記詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)過程，包括操作細(xì)節(jié)、觀察結(jié)果、數(shù)據(jù)分析等，為后續(xù)研究提供參考。加入阿托品加入阿托品溶液將已配制好的阿托品溶液緩慢滴加至蛙心灌流液中，觀察蛙心搏動(dòng)情況。觀察心跳變化記錄加入阿托品前后蛙心搏動(dòng)頻率、幅度和心律的變化情況。分析作用機(jī)制阿托品是一種抗膽堿藥物，可以阻斷乙酰膽堿與心臟中的M受體結(jié)合，從而抑制迷走神經(jīng)對(duì)心臟的抑制作用，導(dǎo)致心率加快。觀察心跳變化仔細(xì)觀察蛙心搏動(dòng)情況，記錄心率、心律、心肌收縮力等指標(biāo)。比較加入阿托品前后的心跳變化，觀察藥物對(duì)蛙心收縮力的影響。1心率變化2心律變化3心肌收縮力變化記錄數(shù)據(jù)，并與正常蛙心情況對(duì)比，分析阿托品對(duì)蛙心收縮力的影響。記錄數(shù)據(jù)11.心率變化記錄加入阿托品前后蛙心搏動(dòng)頻率變化。22.心臟收縮力變化觀察并記錄加入阿托品前后蛙心收縮力變化。33.灌流液流量記錄實(shí)驗(yàn)過程中的灌流液流量，確保灌流液流量穩(wěn)定。44.實(shí)驗(yàn)時(shí)間記錄實(shí)驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)間，以及每個(gè)步驟的持續(xù)時(shí)間。加入乙酰膽堿1準(zhǔn)備乙酰膽堿溶液準(zhǔn)確稱取乙酰膽堿，用生理鹽水溶解，制成所需濃度的溶液。2緩慢滴加乙酰膽堿溶液將乙酰膽堿溶液緩慢滴加到蛙心灌流液中，觀察心跳變化。3記錄數(shù)據(jù)記錄加入乙酰膽堿前后，蛙心每分鐘跳動(dòng)的次數(shù)，并觀察心跳節(jié)律的變化。乙酰膽堿是一種神經(jīng)遞質(zhì)，可以作用于心臟的迷走神經(jīng)末梢，抑制心臟的跳動(dòng)。觀察心跳變化心跳頻率記錄每分鐘心跳次數(shù)，觀察乙酰膽堿是否降低了心跳頻率。心跳幅度觀察心跳的收縮強(qiáng)度，判斷乙酰膽堿是否減弱了心跳幅度。心律觀察心跳的規(guī)律性，乙酰膽堿可能導(dǎo)致心律不規(guī)則。其他變化注意觀察是否有其他變化，例如心臟收縮力減弱、心臟停止跳動(dòng)等。記錄數(shù)據(jù)心率記錄每次加入藥物前后，蛙心的跳動(dòng)頻率，單位為次/分鐘。心搏幅度觀察蛙心收縮的強(qiáng)度，記錄每次藥物加入前后，蛙心收縮的明顯程度。其他現(xiàn)象仔細(xì)觀察蛙心的形態(tài)變化、顏色變化、搏動(dòng)是否規(guī)律等，并及時(shí)記錄。實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析心跳變化通過記錄數(shù)據(jù)，分析腎上腺素、阿托品和乙酰膽堿對(duì)蛙心搏動(dòng)頻率和幅度的影響，可以得出藥物對(duì)心臟的調(diào)節(jié)作用。腎上腺素可使心跳加快和加強(qiáng)，阿托品可阻斷迷走神經(jīng)對(duì)心臟的抑制作用，乙酰膽堿可減慢心跳頻率。結(jié)論實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了心交感神經(jīng)和心迷走神經(jīng)對(duì)心臟活動(dòng)的調(diào)節(jié)作用，以及腎上腺素、阿托品和乙酰膽堿等藥物對(duì)心臟的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以幫助學(xué)生更好地理解心臟的生理機(jī)制，并為進(jìn)一步研究心臟疾病提供參考。實(shí)驗(yàn)中應(yīng)注意事項(xiàng)時(shí)間控制操作應(yīng)盡量快，保證蛙心處于正常狀態(tài)，減少灌流液溫度變化對(duì)蛙心影響。溶液溫度灌流液應(yīng)提前準(zhǔn)備，并保持在室溫，避免溫度變化對(duì)蛙心造成傷害。蛙心位置準(zhǔn)確放置蛙心，確保灌流液能夠順利流過蛙心，保證灌流效果。實(shí)驗(yàn)安全注意事項(xiàng)佩戴安全眼鏡以保護(hù)眼睛免受蛙心灌流液濺射。使用一次性手套以防止細(xì)菌感染。準(zhǔn)備急救箱，以備不時(shí)之需。保持安全距離，遠(yuǎn)離電源和火源。實(shí)驗(yàn)中常見問題灌流液流量不穩(wěn)定可能原因：灌流瓶高度變化、泵速調(diào)節(jié)不當(dāng)、管路堵塞。解決方案：調(diào)整灌流瓶高度、重新設(shè)置泵速、檢查管路是否通暢。蛙心收縮無力或停止跳動(dòng)可能原因：蛙心損傷、麻醉深度過深、灌流液溫度過低。解決方案：檢查蛙心是否完整、調(diào)整麻醉劑濃度、控制灌流液溫度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果小結(jié)灌流效果良好蛙心在灌流液的作用下保持了良好的搏動(dòng)，能夠觀察到明顯的收縮和舒張現(xiàn)象。藥物影響明顯加入腎上腺素、阿托品和乙酰膽堿后，蛙心的搏動(dòng)頻率和幅度發(fā)生了明顯的改變，證明了藥物對(duì)心臟功能的影響。數(shù)據(jù)記錄完整實(shí)驗(yàn)過程中的數(shù)據(jù)記錄完整且準(zhǔn)確，為分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果提供了可靠的依據(jù)。實(shí)驗(yàn)啟示細(xì)致觀察蛙心灌流實(shí)驗(yàn)要求學(xué)生對(duì)蛙心解剖結(jié)構(gòu)有深入了解，并能細(xì)致觀察心臟的跳動(dòng)情況。精密操作實(shí)驗(yàn)需要學(xué)生進(jìn)行精細(xì)的操作，包括心臟的摘取、連接灌流裝置以及調(diào)節(jié)灌流速度。科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果需要進(jìn)行科學(xué)分析，得出結(jié)論，并對(duì)實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行反思。實(shí)驗(yàn)意義和應(yīng)用11.心臟生理學(xué)研究離體蛙心灌流實(shí)驗(yàn)是研究心臟生理功能的重要模型，有助于理解心臟的收縮、舒張機(jī)制，以及心肌細(xì)胞的興奮性和傳導(dǎo)性。22.藥理學(xué)研究該實(shí)驗(yàn)可以用于研究各種藥物對(duì)心臟功能的影響，例如腎上腺素、阿托品、乙酰膽堿等藥物對(duì)心率和心肌收縮力的影響。33.臨床應(yīng)用該實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可以為心臟病的診斷和治療提供參考，例如通過觀察心臟對(duì)不同藥物的反應(yīng)，可以判斷患者的心臟功能狀況。實(shí)驗(yàn)反思和改進(jìn)實(shí)驗(yàn)精度灌流液溫度、流量等參數(shù)控制精度直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。蛙心健康蛙心健康狀況影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。記錄數(shù)據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄需要準(zhǔn)確、完整，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。課后思考題11.影響蛙心收縮力的因素有哪些？實(shí)驗(yàn)中加入了腎上腺素、阿托品和乙酰膽堿，這些物質(zhì)分別是如何影響蛙心收縮力的？22.實(shí)驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象如何解釋？觀察到蛙心在不同藥物作用下的收縮力變化，這與藥物的作用機(jī)