T-CFIAS 6006-2024 釀酒酵母培養(yǎng)物中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的測定 高效液相色譜法

Determinationofmannanandβ-glucaninsaccharomycescerevisiaecultu—Highperformanceliquidchromatogra本文件起草單位：北京英惠爾生物技術(shù)有限公司、北京市獸藥飼料監(jiān)測中心、河南海瑞術(shù)有限公司、北京三元種業(yè)科技股份有限公司飼本文件主要起草人：張亞軍、李賢、黃吉波、梁廷銀、任澤林、王宏、姚婷、曹林、候釀酒酵母培養(yǎng)物中甘露聚糖和β-葡聚糖含量的測定高效液相色譜法本文件中甘露聚糖和β-葡聚糖檢出限為30mg/kg，定量限為100下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格試樣中的甘露聚糖和β-葡聚糖經(jīng)水解，生成單糖甘露糖和葡萄糖，對(duì)兩種）：）：），）：），）：2）：），瓶中，用水溶解并定容，混勻。2℃~8℃保存，有效期6個(gè)月。5.13混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液：準(zhǔn)確移取適量混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（5.12）于容量瓶中，用水稀釋定容，混平行做兩份試驗(yàn)。準(zhǔn)確稱取0.5g～1.0g試樣（精確至0.0001mg），于26.0mL鹽酸（5.2混勻，再加入50mL水混勻，將錐形瓶放入蒸汽滅菌鍋，121℃下水解60min。取出后冷卻，用氫氧化鈉溶液（5.6）將溶液調(diào)為中性（pH≈7），然后用水取不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和待測溶液各400μL，依a）色譜柱：C18柱，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5μm，b）流動(dòng)相：0.1mol/L乙酸銨溶液（pH=5.5）:乙腈=73），8.3.2混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和試樣溶混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中甘露糖PMP衍生物和葡萄糖PMP衍生物的高效液相色譜圖參見在儀器的最佳條件下，試樣溶液中待測物的保留時(shí)間應(yīng)與混和標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（質(zhì)量濃度相對(duì)應(yīng)糖的保留時(shí)間一致，其相對(duì)偏差在±2.5在相同試驗(yàn)條件下，以甘露糖和葡萄糖混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中待測物的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.99。試樣溶液中待測物的質(zhì)量濃度應(yīng)線的線性范圍內(nèi)。如超出范圍，應(yīng)將試樣溶液用水稀釋后衍生，重新測定。單點(diǎn)校準(zhǔn)定量時(shí)液中待測物的質(zhì)量濃度與標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度相差不超9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理9試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理V——試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL——試樣質(zhì)量，單位為克（g——標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的試樣濃度，單位為微克每毫升(μg/mLV——試樣溶液定容體積，單位為毫升（mL——稱取試樣的質(zhì)量，單位為克（g測定結(jié)果以平行測定的算術(shù)平均值表示，保留3位在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測定結(jié)果與其算術(shù)