兩種方法檢查新生兒溶血病的比較課件

新生兒溶血病兩種檢查方法的比較分析第三軍醫(yī)大學(xué)西南醫(yī)院輸血科肖瑞卿林武存等兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

新生兒母嬰血型不合溶血病，是由于孕婦與嬰兒血型不合引起的溶血病，主要包括ABO和Rh溶血病，主要檢測方法是患兒紅細(xì)胞上直接抗人-IgG（DAT）試驗(yàn)、血清游離抗體檢測及患兒紅細(xì)胞放散液鑒定三項(xiàng)試驗(yàn)。我們用兩種方法對母嬰血型不合進(jìn)行檢測并進(jìn)行了比較，現(xiàn)將結(jié)果分析報(bào)道如下：兩種方法檢查新生兒溶血病的比較11材料與方法

2.1標(biāo)本作ABO及Rh（D）血型鑒定，根據(jù)不同血型分為相合與不相合兩組。ABO血型不合的患兒標(biāo)本，離心分出上清，將紅細(xì)胞洗滌三次，分別配成3-5%的紅細(xì)胞混懸液及壓積紅細(xì)胞備用。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

2.2ABO不合三項(xiàng)檢查：患兒紅細(xì)胞做DAT試驗(yàn)患兒紅細(xì)胞放散抗體患兒血漿游離抗體

兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

2004年以前用抗人-IgG試驗(yàn)(試管）法鑒定。2004年后檢測紅細(xì)胞上不完全抗體，用DAT試驗(yàn)；患兒血漿游離抗體試驗(yàn)，患兒紅細(xì)胞放散及自身對照，用戴安娜卡式系統(tǒng)鑒定（抗體釋放用56℃熱放散法）。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

2.3洗滌A、B、O紅細(xì)胞及O型譜細(xì)胞，分別配成3-5%備用。

2.4母嬰ABO血型相合，用卡式鑒定，母血清加患兒紅細(xì)胞做交叉配血試驗(yàn)，患兒自身對照，陰性即可停止試驗(yàn)。試驗(yàn)陽性按ABO相合的要求，用Rh標(biāo)準(zhǔn)譜細(xì)胞做游離抗體與放散試驗(yàn)，譜細(xì)胞由上海血液生物醫(yī)藥有限公司提供。不相合按照ABO血型不合的做三項(xiàng)試驗(yàn)。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較12結(jié)果

3.1

585例中ABO血型相合的235例，不合350例，其中檢測出抗-A106例，抗-B58例。Rh抗體6例（抗-D4例、抗CD1例、抗cE1例）,共檢測出抗體170例，占29%。無抗體415例，占71%。Rh血型抗體中，2例ABO血型不合，4例ABO血型相合，兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

3.2用抗人-IgG法檢測210例，陽性51例，占24.29%。用卡式檢測375例，陽性119例，占31.7%，詳細(xì)見表1。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

表1兩種方法檢查新生兒溶血病的比較方法

ABO

Rh相合

ABO相合ABO不相合抗-A抗-B抗-D抗CD抗cE抗人-IgG29174192118戴安娜卡式77411143232

兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

3.3

164例ABO陽性病例分析三項(xiàng)試驗(yàn)均為陽性108例，占65.9%；DAT試驗(yàn)陽性118例，占71.9%；放散試驗(yàn)陽性160例，占97.6%；游離抗體試驗(yàn)陽性150例，占91.5%。詳細(xì)結(jié)果表2。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1表2164例ABO新生兒溶血病三項(xiàng)試驗(yàn)不同陽性比較項(xiàng)目

ABO

抗-A抗-B合計(jì)百分比

直抗、游離、放散792910865.9

游離、放散15233823.2

直抗、放散4263.7

單獨(dú)放散5384.9

直抗、游離3142.4注:6例Rh不合兩種方法三項(xiàng)試驗(yàn)均是陽性兩種方法檢查新生兒溶血病的比較13討論

新生兒血型不合溶血病，是指母、嬰血型不合引起的新生兒同種免疫性溶血疾病。至今發(fā)現(xiàn)的人類26個(gè)血型系統(tǒng)中，以A、B、O血型不合新生兒溶血病為最常見，其次為Rh血型系統(tǒng)。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

上海血液中心曾報(bào)告檢測834例新生兒溶血病，其中A、B、O溶血病712例（85.3％），Rh溶血病122例（14.6％）。我們檢測ABO不合占96.47%，Rh血型不合占3.5%。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

三項(xiàng)試驗(yàn)，以放散陽性比例最高，DAT試驗(yàn)陽性比例最低，可能為新生兒由于發(fā)育不成熟，紅細(xì)胞上A、B抗原相對較少，DAT試驗(yàn)常顯陰性結(jié)果，紅細(xì)胞DAT試驗(yàn)結(jié)果陰性，不等于沒有結(jié)合IgG，只是抗體的數(shù)量還沒有達(dá)到DAT試驗(yàn)陽性的要求。應(yīng)以放散結(jié)果為準(zhǔn)，如果單是DAT試驗(yàn)與游離抗體試驗(yàn)陽性應(yīng)于臨床癥狀結(jié)合予以治療。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

游離抗體和放散液鑒定結(jié)果：抗人-IgG法檢測210例，陽性51例(24.29%?？ㄊ綑z測375例，陽性121例，占例31.7%?？ㄊ疥栃詸z出率明顯高于傳統(tǒng)的抗人-IgG法，結(jié)果同報(bào)道相符。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

卡式法是生物化學(xué)凝膠過濾技術(shù)和免疫學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的產(chǎn)物，通過調(diào)節(jié)凝膠的濃度來控制凝膠間隙的大小。使其間隙只能允許游離的RBC通過，抗原抗體結(jié)合的紅細(xì)胞則不能通過，通過離心法，使游離RBC與凝集RBC分離。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

游離的紅細(xì)胞通過離心RBC沉積在凝膠管底部，則表明RBC未發(fā)生凝聚凝集，呈陰性反應(yīng)。若RBC聚集在凝膠帶上部或凝膠中，則表明RBC發(fā)生凝集，呈陽性反應(yīng)。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1凝膠中已加抗人-IgG，加入樣本即可，從而簡化了操作。結(jié)果穩(wěn)定且易保存，靈敏度高，能檢測到十分微弱的抗原抗體凝集反應(yīng)。樣本用量少，利于新生兒及少血樣本的檢測，重復(fù)性好。操作標(biāo)準(zhǔn)化，減少了人員的隨意性操作，是一種可靠的試驗(yàn)方法。兩種方法檢查新生兒溶血病的比較1

HDN應(yīng)早檢測、早診