DB63T 2359-2024 脫毒馬鈴薯制種及生產(chǎn)技術規(guī)程

ICS65.020CCSB05

DB63青 海 省 地 方 標 準DB63/T2359—2024脫毒馬鈴薯制種及生產(chǎn)技術規(guī)程2024-12-11發(fā)布 2025-01-10實施青海省市場監(jiān)督管理局??發(fā)布DB63/T2359DB63/T2359—2024II前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由青海省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：青海大學農(nóng)林科學院（青海省農(nóng)林科學院）、海東市樂都區(qū)農(nóng)業(yè)技術推廣中心、湟中區(qū)農(nóng)業(yè)技術推廣中心、互助縣農(nóng)業(yè)技術推廣中心。本文件主要起草人：納添倉、蒲秀琴、董宇、張綱、徐淑華、葉廣繼、劉世安、王生財、祁玉梅、陳賢齡、祁生蘭、賀雙成、王毅、何春玉、青ft、張建華、馬長鳳、祁惠蓮、李淑貞。本文件由青海省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳監(jiān)督實施。DB63/T2359DB63/T2359—2024PAGEPAGE1脫毒馬鈴薯制種及生產(chǎn)技術規(guī)程范圍本文件規(guī)定了脫毒馬鈴薯制種及生產(chǎn)的術語與定義、環(huán)境條件、脫毒組培苗的快繁、原原種生產(chǎn)、原種生產(chǎn)、一級種、二級種的生產(chǎn)、質量檢驗、產(chǎn)地檢疫、定級標準、生產(chǎn)檔案和標簽等技術。本文件適用于脫毒馬鈴薯制種及生產(chǎn)。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單）適用于本文件。GB3095 環(huán)境空氣質量標準GB5084 農(nóng)田灌溉水質標準GB7331 馬鈴薯種薯產(chǎn)地檢疫規(guī)程GB/T8321 農(nóng)藥合理使用準則(所有部分)GB15618 土壤環(huán)境質量農(nóng)用地土壤污染風險管控標準(試行GB18133 馬鈴薯種薯GB20464 農(nóng)作物種子標簽通則NY/T401 脫毒馬鈴薯種薯（苗)病毒檢測技術規(guī)程NY/T496 肥料合理使用準則通則NY/T1276 農(nóng)藥安全使用規(guī)范總則NY/T1606 馬鈴薯種薯生產(chǎn)技術操作規(guī)程NY/T1962 馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢測NY/T2678 馬鈴薯6種病毒的檢測法RT-PCRNY/T2744 馬鈴薯紡錘塊莖類病毒檢測核酸斑點雜交法術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1脫毒組培苗簡稱脫毒苗，是應用莖尖組織培養(yǎng)技術獲得的、經(jīng)檢測確認不帶PLRV、PVY、PVA、PVX、PVM或PVS等病毒和PSTVd的再生試管苗。3.2脫毒種薯用脫毒苗經(jīng)逐代繁殖種薯生產(chǎn)體系生產(chǎn)出來的各級種薯。脫毒種薯分為原原種、原種、一級種薯、二級種薯。3.3原原種GB18133型種薯。3.4原種GB18133薯。3.5一級種用原種做種薯，在相對隔離條件下生產(chǎn)的，經(jīng)檢測符合GB18133要求的，用于生產(chǎn)二級種的種薯。3.6二級種用一級種做種薯，在相對隔離條件下生產(chǎn)的，經(jīng)檢測符合GB18133要求的，用于生產(chǎn)商品薯的種薯?？s略語下列縮略語適用于本文件。PVX：馬鈴薯X病毒（PotatovirusX、馬鈴薯普通花葉病毒）PVY：馬鈴薯Y病毒（PotatovirusY、馬鈴薯重花葉病毒）PVS：馬鈴薯S病毒（PotatovirusS、馬鈴薯潛隱花葉病毒）PVM：馬鈴薯M病毒（PotatovirusM、馬鈴薯副皺縮花葉病毒）PVA：馬鈴薯A病毒（PotatovirusA、馬鈴薯輕花葉病毒）PLRV：馬鈴薯卷葉病毒（Potatoleafrollvirus）PYDV：馬鈴薯黃矮病毒（Potatoyellowdwarfvirus）PMTV：馬鈴薯帚頂病毒（Potatomop-topvirus）PSTVd：馬鈴薯紡錘塊莖類病毒（Potatospindletuber環(huán)境條件制種基地環(huán)境空氣質量符合GB3095要求，農(nóng)業(yè)灌溉水質符合GB5084要求，土壤環(huán)境質量符合GB15618要求。脫毒組培苗快繁脫毒組培苗的培育材料選擇選用生產(chǎn)上主栽的優(yōu)良品種塊莖的休眠芽、剛出土幼苗的莖尖或田間成株上的葉芽作莖尖剝離材料。培養(yǎng)基制備在每1000mlMS培養(yǎng)基中加GA0.2mg～0.3mg6-BA0.1mg～0.2mgNAA0.0lmg～0.05mg、泛酸鈣1.5mg～2.5mg，PH值調至5.8～6.0之間，分裝入管(瓶)。滅菌121℃壓力下高溫滅菌20min，冷卻備用。莖尖剝離接種將入選材料放入紗布袋，用自來水沖洗1h后，在無菌條件下，放入70%～75%酒精中浸20s～30s0.1%升汞液消毒8min～10min3%次氯酸鈉液加2滴4滴吐溫振蕩消毒15min～201個～2個葉原基(0.1mm～0.4mm)培養(yǎng)條件日溫20℃，夜溫15℃，光照時數(shù)12h/d～14h/d，光照強度20001x～30001x條件下培養(yǎng)。病毒檢測檢測方法PLRV、PVY、PVA、PVX、PVM或PVS等病毒，用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法檢測，無陽性反應再用指示植物鑒定。PSTVd用往復雙向聚丙胺凝膠電泳法(R)或聚合酶鏈反應(PCR)檢測，鑒定篩選出不帶PLRV、PVY、PVA、PVX、PVM、PVS和PSTVd的脫毒苗。脫毒苗復檢繼代擴繁中選留的脫毒苗，每年至少做一次病毒復檢。脫毒苗組培快繁脫毒組培苗來源經(jīng)6.2.1檢測合格的脫毒苗。培養(yǎng)基MS培養(yǎng)基。121℃壓力下高溫滅菌20min，冷卻備用?？旆睂⒚摱久缂羟谐?.0cm～2.0cm，帶一葉一芽的莖段接種于繼代培養(yǎng)基上,每瓶培養(yǎng)基接種10個～15個莖段待莖段長成高10.0cm左右小苗（培養(yǎng)15d～30d），進行切段轉接，反復繼代培養(yǎng)繁殖。培養(yǎng)條件日溫25℃，夜溫15℃，光照時數(shù)12h/d～14h/d，光照強度20001x～30001x條件下培養(yǎng)。原原種生產(chǎn)隔離網(wǎng)室建立環(huán)境條件在防蟲網(wǎng)室、溫室等隔離條件下栽培。建設要求隔離網(wǎng)室高3.0m～3.5m，寬6.0m～10.0m。防止網(wǎng)室內地表積水和網(wǎng)室外水流入。用孔徑60目～80目的隔離網(wǎng)紗。網(wǎng)室周圍10.0m范圍內不能有其它可能成為馬鈴薯病蟲害侵染源或蚜蟲寄主的植物。移栽前準備煉苗將苗齡30d左右，長到7片～8片葉的組培苗打開瓶蓋，煉苗2d～3d。苗床基質例2:1，鋪設厚度20.0cm～25.0cm。消毒隔離網(wǎng)室和工具每次使用前應用75%酒精消毒。工作人員進出網(wǎng)室須更換鞋和工作服，并做好消毒。管理移栽將煉苗后的脫毒苗按每平米300株移栽到苗床，脫毒苗移栽后，輕細均勻噴水，使基質相對濕度保持在90%～95%。施肥7d～10d)0.2%～0.3%N:P:K=2:1:34次每7d～10d噴一次。澆水基質相對濕度保持在50%～60%，收前7d～10d停止?jié)菜２∠x害防治發(fā)現(xiàn)病株連同薯塊拔除，帶出網(wǎng)室外銷毀。防治方法按照GB/T8321、NY/T496、NY/T1276執(zhí)行。收獲、包裝、貯存收獲定植后早熟品種60d～6565d～7075d～80d械損傷和品種混雜。收后攤晾4d～7d，剔除爛薯、病薯、傷薯及雜物。分級按種薯個體重量大小依次分為5.0g以上、3.0g～5.0g、1.0g～2.9g三個分級。包裝2000各掛標簽。貯存1℃～370%～80的三分之二，平堆厚度為30.0cm左右。原種生產(chǎn)種薯準備播種前15d～2020℃～30內，使其自然通過休眠發(fā)芽，促芽變綠。10.0g以上的薯塊可切塊播種，每塊帶2個以上芽眼。播種底肥每公頃施腐熟農(nóng)家肥22.500t～30.000t（1500.00kg/667m2～2000.00或商品有機肥3.000t～4.500t（200.00kg/667m2～300.000.075t～0.150t（5.00kg/667m2～10.000.300t～0.450t（20.00kg/667m2～30.000.225t～0.300t（15.00kg/667m2～20.00kg/667m2）。播種期5月上、中旬。播種密度行距70.0cm～80.0cm，株距20.0cm～25.0cm。播種方法人工點播或機械播種，5.0g以下的原原種播種深度6.0cm～8.0cm；5.0g以上的原原種播種深度8.0cm～10.0cm。田間管理追肥、中耕、除草、培土齊苗后及時追施每公頃N0.075t（5.007葉～8葉時第二K2O0.150t（10.00病蟲害防治7d～10d7d～10d蚜蟲一次，連續(xù)3次～4次。防治方法按照GB/T8321、NY/T496、NY/T1276。收獲、包裝、貯存收獲7d～10d35d，適當降低水分，剔除爛薯、病薯、傷薯、畸形薯及雜物后入庫保存。包裝采用噸包、木箱或網(wǎng)袋包裝，做好標記。貯存窖貯，碼垛，避光貯存，空調庫可散儲，貯存溫度1℃～3℃，相對濕度70%～80%。一級種薯、二級種薯生產(chǎn)種薯準備前推15d～20d10℃～153層～4隔5d～7d1.0cm～1.5種薯切塊切刀消毒將配好的消毒藥液(0.10.175切刀浸入藥液中，切塊時切刀交替使用。發(fā)現(xiàn)病薯或可疑薯塊即淘汰，并更換切刀。切塊50.0gg30.0g～50.01個2個芽眼。播種播種方式及密度采用單壟單行或單壟雙行種植，壟距70.0cm～120.0cm，根據(jù)不同播種方式確定。單壟單行壟距70.0cm，株距20.0cm～25.0cm；壟距90.0cm，株距15.0cm～20.0cm。采用單壟雙行，壟距110.0cm～120.025.0cm～30.0cm667m2播種5000.00～5500.00667m24500.00～5000.00667m2底肥同7.2.2。播種期播種期應根據(jù)氣侯條件和品種特性確定，5月上、中旬播種。田間管理同7.3。收獲、包裝、貯存同7.4。質量檢驗種薯質量原原種、原種和一級種薯、二級種薯的質量符合GB18133的要求。田間檢驗原原種溫室(網(wǎng)棚)中，組培苗定植后30d～40d,全部植株目測檢查一次。原種、一、二級種薯采30d并做好記錄。檢查時，應避開中午強光照時段。塊莖檢驗GB18133401的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫檢測法或NY/T2678的RT-PCR法；PSTVd采用NY/T401的往返電泳檢測法或NY/T1962檢測方法或NY/T2