地標-編制說明-混合型飼料添加劑中解熱鎮(zhèn)痛類藥物測定技術規(guī)范

混合型飼料添加劑中解熱鎮(zhèn)痛類藥物測定技術規(guī)范編制說明一、標準制定工作簡況本標準任務來源于上海市市場監(jiān)督管理局，由心負責起草，按照《上海市地方標準管理辦法》項目名稱為《混合型飼料添加劑中解熱鎮(zhèn)痛類藥（二）標準制定背景近年來飼料中解熱鎮(zhèn)痛類藥物非法添加現(xiàn)象屢禁不去是抗生素使用大國，長期以來解熱鎮(zhèn)痛類藥物并沒的關注，同時解熱鎮(zhèn)痛類藥物的違法違規(guī)使用并沒有全事故。另一方面因解熱鎮(zhèn)痛類藥物的治療用藥的特相關的殘留限量要求。因此，解熱鎮(zhèn)痛類藥物的監(jiān)管同比增長1.2%，本市總產值已達81.6億元。其中飼料添劑加工產品總產量6.0萬噸,同比增長40.9%，增速呈現(xiàn)強在畜牧業(yè)生產迅速發(fā)展的當下，本標準的建立可以加劑中解熱鎮(zhèn)痛類藥物的檢測技術空白，有助于本市參與開展“三年行動方案”（三）主要工作過程1.成立標準編制小組2021年12月，標準起草組成立，并舉行制大綱。對該標準的具體工作進行了任務分工，確2.查詢國內外相關標準和文獻資料2022年1月～4月，本標準編制組成員查詢資料，確立了建立標準的指導思想，制定了標準的3.確定標準修訂技術路線，主要內容2022年5月～7月，上海市獸藥飼料所召開制組介紹了對國內外相關分析方法的研究，標準制4.編寫標準征求意見稿在前期研究工作的基礎上，2024年11月完成了《混依據(jù)依據(jù)GB/T1.1—2020《標準化工作導則和起草規(guī)則》和GBT20001.5-2017《標準編寫規(guī)則第一部分：分析方法樣品采集和制備要求的確定，主要參考了GB/T14699以及GB/T20195規(guī)定的方法和程序進第二部分：分析方法試驗研究，包括樣品前處理第三部分：分析結果的判斷，包括不同儀器的判GB/T1.1－2020標準化工作導則第1部分：標準化文則GB/T20001.5-2017標準編寫規(guī)則第GB/T27417－2017合格評定化學分析方GB/T32465－2015化學分析方法驗證確認和GB/T23182－2008飼料中獸藥及其他化GB/T32467－2015化學分析方法驗證確認和內部質量控GB/T33464－2016化學分析標準操作程GB/T35655－2017化學分析方法驗證確認和內部質量控GB/T35656－2017化學分析方法驗證確認和內部質量控制實施指南報GB/T27417-2017（合格評定化學分析方法確認和驗證32467－2015（化學分析方法驗證確認和內在實際檢測過程中，主要依據(jù)樣品的種類選取適宜的樣品制備方式和前處理方式。樣品采集制備流程與GB/T14699以及GB/T20195兩個標準中描述的在選擇前處理技術時，應綜合考慮樣本特性和目標化合物的物理化學特性，同時確保與液相色譜和質譜系統(tǒng)的兼容性。本并確保最終樣本溶液與流動相兼容，避免色譜應針對解熱鎮(zhèn)痛類藥物的目標化合物，確保其完全提項目組摸索出了一套適用與解熱鎮(zhèn)痛類藥物的重現(xiàn)性試樣2g（精確至0.01g于50mL離心管中，準確加入25mL甲醇，渦旋1min，振蕩提取20min，9000r/min離心5min，準確移取上清液適量稀釋至適宜濃度，混勻，過膜上液相。取上清液適量，用0.質譜上機凈化過程如下：依次用3mL甲醇和3m備用液全部過柱，用3mL水淋洗，抽干小柱，用3mL5本標準基于高效液相色譜儀-二極管陣列檢測器的檢測原理，規(guī)定了液相色譜和質譜儀器的基本要求。參照公告和農業(yè)農村部第289號公告。根據(jù)實際檢測經驗，項液相色譜參考條件如下：a)色譜柱：C18柱，柱長250mm，內徑4.6mm，粒徑5.0μm，或性能相當者；b)柱溫：40℃;c)檢測波長：245nm；d)流速：1.0mL/min；e)進樣量：20μL。f)流動相：A相為磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鈉3.0g，加水1000mL，用磷酸調pH值至7.0），B相為乙腈，梯度洗脫程序見表1。表1梯度洗脫程序%%液相色譜參考條件如下：a）色譜柱：C18柱，柱長100mm，內徑2.1mm，粒徑1.7μm，或性能相當者；b）流動相：A相為0.1%甲酸溶液,B相為乙腈,梯度洗脫程序見表2；c）柱溫：35℃;d）流速：0.3mL/min；e）進樣量：2μL。表2梯度洗脫程序%%質譜參考條件質譜參考條件如下：a)電離方式：電噴霧電離，正離子模式（ESI+b)檢測方式：多反應監(jiān)測（MRM）；c)脫溶劑氣：800L/Hr；d)反吹氣：50L/Hr；e)霧化器溫度：500℃;f)電離電壓：2.5kV；g)離子源溫度：150℃。h)多反應監(jiān)測（MRM）離子對、錐孔電壓及碰撞能量見表3。表3各目標物多反應監(jiān)測（MRM）離子對、錐孔電壓及碰撞能量參考值m/zm/zVm/zm/zV為定量離子本部分主要針對解熱鎮(zhèn)痛類物質識別和確證的測定要求專門做了相應規(guī)范。主要參考了歐盟有關食品飼控和確認要求、國內標準如農業(yè)農村部第289號公告中規(guī)定物的保留時間應與濃度相近的標準溶液中待測物的保留時無在我國，根據(jù)GB31650-2019《食品中獸藥最大殘留限量》中明確規(guī)定安獸藥的非法添加等。在現(xiàn)有檢測技術規(guī)范中，農業(yè)部第2448號公告規(guī)定了黃芪多糖注射液中非法添加解熱鎮(zhèn)痛類、抗病毒類、抗生素類、氟喹酮類等11種化學藥物（物質）檢查方法；以及阿莫西林可溶性粉中非法添加解熱鎮(zhèn)痛類藥物的檢查方法。同時《中華人民共和國獸藥典》2020年版對安乃近、對乙酰氨基酚、安替比林、氨基比林均有收載，并規(guī)定采用高效液相色譜法、滴定法、紫外—可見分光光度法對以上藥物進行含目前已被30多個國家禁用。歐盟對安乃近在牛奶及食源性動物組織均設定了嚴格的限量要求。美國環(huán)境保護署（EPA）在1694號方法（Pharmaceuticals但是，國內外對飼料中解熱鎮(zhèn)痛類藥物的檢測方法少飼料添加劑中的解熱鎮(zhèn)痛類藥物檢測方法和技術標準更表2國內外相關標準文獻分析方法匯總表標準名稱測定方法檢測條件適用范圍EPA1694:《PharmaceuticalsandPersonalCareProductsinWater,Soil,Sediment,andBiosolidsbyHPLC/MS/MS(2007)》液相色譜-串聯(lián)質譜法酸性提取，電噴霧正離子化（ESI+）流動相：乙腈-0.1%的甲酸水溶液（1:9）梯度水《中華人民共和國獸藥典》一部液相色譜、紫外分光光度法、容量法甲醇：水（40:60）檢測波長241獸藥BJS201713飲料、茶葉及相關制品中對乙酰氨基酚等59種化合物的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法甲醇或0.1%甲酸甲醇提取流動相：5mmol/L甲酸銨溶液（含0.1%的甲酸）-0.1%甲酸乙腈，梯度飲料、茶葉及相關制品DB65/T3951-2016水質多種藥物殘留的測定液相色譜串聯(lián)質譜法液相色譜-串聯(lián)質譜法流動相：乙腈-2mM乙酸銨（pH3.2）水GB/T20747-2006牛和豬肌肉中安乃近代謝物殘留量的測定液相色譜-紫外檢測法和液相色譜-串聯(lián)質譜法液相色譜、液相色譜-串聯(lián)質譜法硫酸鈉溶液提取液相流動相：水-甲醇，梯度質譜流動相：5mmol/L乙酸銨溶液（pH4.5）-乙腈，梯度牛和豬肌肉GB/T22971-2008牛奶和奶粉中安乃近代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法液相色譜-串聯(lián)質譜法流動相：5mmol/L乙酸銨溶液（pH3.0）-甲醇，梯度牛奶、奶粉農業(yè)農村部第2333號公告《扶正解毒散中非法添加茶堿、安乃近檢查方法》、《黃連解毒散中非法添加對乙酰氨基酚、鹽酸溴己新檢查方法》液相色譜流動相：磷酸二氫鈉