(高清版)DB41∕T 2273-2022 肉?？焖贁U(kuò)繁技術(shù)規(guī)程

412022-06-29發(fā)布I 2 5 6 8本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定本文件起草單位：河南省畜牧總站、河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)施巧婷、郎利敏、黃輝、夏宗軍、丁涵、徐美李靜、王培育、朱肖亭、楚秋霞、付泰、王歐1肉?？焖贁U(kuò)繁技術(shù)規(guī)程4同期發(fā)情和人工授精24.1.1二次前列腺素（PG）法適配母牛任選一天肌肉注射PG，9d～134.1.2黃體酮緩釋陰道栓法4.2人工授精冷凍精液應(yīng)符合GB/T4143的要求。人工授精操作按照NY/T15.1供體牛選擇與飼養(yǎng)管理15月齡至8周歲。青年牛應(yīng)為15月齡～18月齡，體況中上等且至少有兩次正常發(fā)情記錄；經(jīng)產(chǎn)牛應(yīng)為產(chǎn)保持飼養(yǎng)環(huán)境良好，避免應(yīng)激反應(yīng)。提供合理的配合日糧和清潔飲水。超數(shù)排卵前3周加強(qiáng)飼養(yǎng)管5.2供體牛超數(shù)排卵及人工授精5.2.1.1同期發(fā)情方法5.2.1.2超數(shù)排卵方法5.2.1.3供體牛發(fā)情鑒定最后一次注射FSH后，每隔6h觀察是否發(fā)情，每次觀察不少于30mi精液劑量加倍，按照4.1.2規(guī)定操作，間隔12h重5.3非手術(shù)沖胚及胚胎質(zhì)量鑒定35.3.1.2將供體牛保定，清除糞便，在薦椎和第一尾椎結(jié)合處或第一尾椎和第二尾椎結(jié)合處注射普魯卡因?qū)嵭杏材ね饴樽恚敝廖舶退沙谌彳洘o(wú)張力。普魯卡因用量依5.3.1.3麻醉后將牛尾固定，清潔會(huì)陰部及外陰，酒精棉球或噴霧消毒外陰，用滅菌衛(wèi)生紙擦干。5.3.1.4用擴(kuò)張棒擴(kuò)張子宮頸，再用黏液棒抽出黏液。5.3.1.5此時(shí)直腸易進(jìn)空氣形成空洞，使用抽氣筒排出空氣，利于直腸把握。5.3.1.6沖胚管裝配內(nèi)芯，并用沖胚液潤(rùn)滑，慢慢插入一側(cè)子宮角，當(dāng)沖胚管到達(dá)子宮角大彎處，旋5.3.1.7給沖胚管氣囊充氣約8mL～14mL，抽出內(nèi)芯，把三通管與沖胚管5.3.1.8夾住三通管的回流端，將20mL～30mL沖胚液5.3.1.9完成后排出氣囊空氣，另一側(cè)子宮進(jìn)行相同操作。抽出沖胚管，使前端位于子宮體，灌注抗5.3.2.1搜集胚胎油的培養(yǎng)液中35℃~37℃暫存，撿胚完成后進(jìn)行等級(jí)鑒定。培養(yǎng)液可用10%牛血清M199或其它商用5.3.2.2胚胎發(fā)育期此時(shí)胚胎處于以下發(fā)育期：桑椹胚(M)、致密桑椹胚(CM)、囊胚(B)、擴(kuò)張囊胚(EXB)。胚胎發(fā)育形5.3.2.3胚胎質(zhì)量等級(jí)鑒定5.4胚胎冷凍保存及解凍5.4.1.1胚胎清洗4胚胎用冷凍液清洗4～6次，室溫下平衡5min。冷凍液使用乙二醇商用冷凍液。將平衡后的胚胎裝入0.25mL細(xì)管，裝管順序見(jiàn)圖1。裝管后做好胚胎情況標(biāo)記，內(nèi)容包括：生產(chǎn)日期、母牛號(hào)、公牛號(hào)、數(shù)量、發(fā)育期、質(zhì)量。衡5min,以0.6℃/min的速率下降至-35℃,平衡5min后投入液氮，記錄冷凍情況(見(jiàn)表A.2)。取出裝有胚胎的細(xì)管，空氣中停留5s~10s后，迅速放入35℃~37℃水浴45s。擦干細(xì)管，拔出細(xì)管塞，裝入移植槍并移植。骨盆較寬，體型勻稱，體高130cm以上，乳房發(fā)育良好，性情溫順，營(yíng)養(yǎng)良好，中等膘情。青年牛體重達(dá)到成年母牛體重的75%;經(jīng)產(chǎn)牛3胎以下，應(yīng)有兩個(gè)以上連續(xù)的正常發(fā)情周期，泌乳性能、產(chǎn)犢性能良好，無(wú)連續(xù)兩次人工授精未孕記錄。牛體健康，子宮彈性、厚薄正常，卵巢發(fā)育正常。單獨(dú)分群、編號(hào)、飼養(yǎng)，保持環(huán)境良好，避免應(yīng)激反應(yīng)，保證必要運(yùn)動(dòng)，滿足營(yíng)養(yǎng)需要。移植前6~8周開(kāi)始補(bǔ)飼，日增重應(yīng)保持在0.3kg~0.4kg。移植前5周補(bǔ)充維生素A、維生素D、維生素E及硒、鋅等微量元素。5.6.1受體牛同期發(fā)情55.6.3受體牛胚胎移植方法5.6.3.1以發(fā)情當(dāng)天定為0d5.6.3.3清洗消毒外陰部并擦干。對(duì)照胚胎記錄表和受體牛發(fā)情記錄，胚胎發(fā)育期與受體牛生理時(shí)間5.6.3.4裝好胚胎的移植槍套上硬外套管，再套上無(wú)菌外套膜。于子宮頸口撕破外套膜，使移植槍前5.6.3.5做好移植記錄。胚胎移植記錄6早晚左右左右左右7(資料性)早期胚胎發(fā)育