DB22-T 1678-2012 豆芽中4-氯苯氧乙酸鈉殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜質(zhì)譜法

ICS67.060DB22DB22/T1678—2012豆芽中4-氯苯氧乙酸鈉殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法Determinationof4-Chlorophenoxyaceticacidinbeansprout——LC-MS/MSmethod吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB22/T1678—2012本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009和GB/T20001.4-2001給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由吉林出入境檢驗(yàn)檢疫局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：吉林出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：楊帆、張勛、楊璐、宋清蓮、顧婷婷、張代輝。DB22/T1678—2012本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了豆芽中4-氯苯氧乙酸鈉殘留量的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于豆芽中4-氯苯氧乙酸鈉殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。試料中的4-氯苯氧乙酸鈉用稀堿提取后，在酸性條件下用固相萃取柱將其吸附，甲醇洗脫，液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測定，外標(biāo)法定量。4試劑材料除另有說明外，所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級水。4.1氫氧化鈉(NaOH)：優(yōu)級純。4.2磷酸二氫鈉（NaH2PO4·2H2O）：優(yōu)級純。4.3磷酸（H3PO4）。4.4甲醇（CH3OH色譜純。4.5氫氧化鈉溶液(0.01mol/L)：準(zhǔn)確稱取0.40g氫氧化鈉（4.1），溶于水并稀釋至1000mL。4.650%的磷酸溶液：取100mL磷酸，加水稀釋至200mL。4.7磷酸鹽緩沖液(0.01mol/L)：稱取1.56g的磷酸二氫鈉（4.2）加水溶解，并定容至1000mL，用50%的磷酸溶液(4.6)調(diào)節(jié)pH值至4.0。4.84-氯苯氧乙酸鈉（C8H7ClO3Na，4-Chlorophenoxyaceticacid，CAS號：13730-98-8純度≥99%。4.94-氯苯氧乙酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液儲備液（100mg/L）：準(zhǔn)確稱取適量4-氯苯氧乙酸鈉標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（4.8）用甲醇溶解并全部轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混勻，0℃~4℃可避光保存6個月。4.104-氯苯氧乙酸鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制：準(zhǔn)確吸取1.0mL標(biāo)準(zhǔn)溶液儲備液（4.9）置于100mL容量瓶中用甲醇稀釋成1.0mg/L的稀釋液，準(zhǔn)確吸取該稀釋液適量于容量瓶中，用甲醇依次配制成濃度為0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。4.11HLB固相萃取柱：6mL/500mg。使用前依次用5mL甲醇、5mL水活化，保持柱體濕潤。4.12濾膜：0.22μm，有機(jī)系。DB22/T1678—20125儀器5.1液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀：配備電噴霧離子源（ESI）。5.2高速勻漿機(jī)。5.3高速離心機(jī)：10000r/min。5.4旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。5.5天平：感量0.0001g和0.01g。5.6渦旋混合器6試樣的制備取有代表樣品采用四分法分樣后，經(jīng)粉碎機(jī)粉碎，混勻，密封，作為試料，標(biāo)明標(biāo)記。7分析步驟7.1提取稱取樣品10.0g（精確至0.01g）于50mL離心管中，加入20mL0.01mol/L氫氧化鈉溶液（4.5用高速勻漿機(jī)混勻3min，10000r/min離心3min，上清液轉(zhuǎn)入50mL容量瓶，殘?jiān)俜謩e用15mL、定容至刻度，搖勻，備用。7.2凈化將7.1中的提取液加入2mL50%磷酸溶液（4.6），慢速通過已活化的HLB小柱，用2mL0.01mol/L磷酸鹽緩沖液（4.7）去雜質(zhì),棄去全部流出液，用5mL甲醇洗脫，收集洗脫液在40℃下用氮?dú)獯抵两?，用甲醇溶解并定容?mL，經(jīng)0.22μm濾膜，供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜分析。7.3空白試驗(yàn)除不稱取試料外，均按7.1、7.2進(jìn)行。7.4測定7.4.1色譜參考條件色譜參考條件如下：a)色譜柱：C18色譜柱，150mm×2.1mm（i.d.粒徑3.5μm；b)柱溫:30℃;;c)流速：0.2mL/min；d)進(jìn)樣量：10μL；e)進(jìn)樣方式：無分流；f)流動相：0.1%甲酸水-乙腈；g)流動相、流速及梯度洗脫條件見表1。DB22/T1678—2012表1流動相、流速及梯度洗脫條件7.4.2質(zhì)譜參考條件質(zhì)譜參考條件如下：a)電離方式：電噴霧電離（ESI）；b)掃描方式：正離子掃描，多反應(yīng)監(jiān)測（MRMc)去簇電壓：-50V；d)離子源溫度：550℃;e)霧化氣：1.5MPa；f)輔助氣：1.5MPa；g)監(jiān)測離子：見表2。表2目標(biāo)化合物的監(jiān)測離子對、去簇電壓和碰撞能量νν7.4.3定性分析在同一色譜/質(zhì)譜條件下進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品溶液的測定，如果樣品溶液中檢出的色譜峰的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜峰的保留時間一致，所選擇的兩對子離子的質(zhì)荷比也一致，而且樣品定性離子的相對豐度與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的定性離子的相對豐度相比較，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在該物質(zhì)。標(biāo)準(zhǔn)溶液的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖參見附錄A。表3定性確定時相對離子豐度的最大允許偏差>50%>20%至50%>10%至20%7.4.4定量測定根據(jù)試料中被測樣液中被測組分的含量情況，選取響應(yīng)值相近的標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行分析，對于高濃度樣品須適當(dāng)進(jìn)行系列稀釋。標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液中被測組分的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。在上述色譜條件下，4-氯苯氧乙酸鈉的參考保留時間為6.68min，外標(biāo)法定量。8結(jié)果的計(jì)算和表述DB22/T1678—2012用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)或按公式（1）計(jì)算試樣中4-氯苯氧乙酸鈉殘留含量，計(jì)算結(jié)果需扣除空白值。X=c×V.......................................mX——試料中被測組分殘留量，單位為毫克每千克（mg/kg）；c——從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀出的被測組分溶液濃度，單位為微克每毫升(μg/mLV——樣液最終定容體積，單位為毫升（mL）；m——樣液所代表的最終試料的質(zhì)量，單位為克（g）。計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。9定量限、回收率、重復(fù)性和再現(xiàn)性9.1定量限本方法定量限為0.01mg/kg。9.2回收率樣品中4-氯苯氧乙酸鈉的添加濃度及其回收率參見附錄B。10精密度在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不大于這兩個測定結(jié)果的算術(shù)平均值的15%。10.2再現(xiàn)性在再現(xiàn)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值不大于這兩個測定結(jié)果的算術(shù)平均值的20%。DB22/T1678—2012（資料性附