埃希菌幻燈片

埃希菌

大腸桿菌（E.coli）為埃希氏菌屬(Escherichia)代表菌。埃希菌是人類和動(dòng)物腸道中的正常菌群出生后數(shù)小時(shí)就進(jìn)入腸道，并終生伴隨以大腸埃希氏菌（E.coli）最為重要大腸桿菌（E.coli）埃希菌正常菌群，一般不致病1、條件致病某些帶有致病基因的血清型，引起腸道感染兩大原因可以致病細(xì)菌居住部位改變引起的腸外感染：尿路感染最常見2、致病菌株埃希菌一、生物學(xué)特性G-無芽胞桿菌多數(shù)有周鞭毛有菌毛有的有多糖類包膜（微莢膜）E.coli(0157:H7)⒈形態(tài)與染色：埃希菌大腸桿菌（圖）埃希菌大腸桿菌（圖）埃希菌

大腸桿菌（E.coli）埃希菌培養(yǎng)特性與生化反應(yīng)

在普通培養(yǎng)基中生長良好，形成灰白色、直徑2～3mm的光滑型菌落。在鑒別性或選擇性培養(yǎng)基（SS、EMB）上因分解乳糖產(chǎn)酸，形成有色菌落。大部分菌株發(fā)酵乳糖等多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。典型IMViC試驗(yàn)為“++--”。埃希菌IMViC試驗(yàn)I-吲哚（indol）試驗(yàn)M-甲基紅（methylred）試驗(yàn)V-VP（Voges-Proskauer）試驗(yàn)C-枸櫞酸鹽利用（citrateutilization）試驗(yàn)埃希菌I-吲哚（indol）試驗(yàn)色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚↑

吲哚試劑

-+大腸埃希菌、變形桿菌、霍亂弧菌等埃希菌M-甲基紅（methylred）實(shí)驗(yàn)葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇

甲基紅-葡萄糖→丙酮酸

甲基紅+

-+產(chǎn)氣腸桿菌—pH>5.4-大腸埃希菌—pH<5.4+埃希菌V-VP（Voges-Proskauer）試驗(yàn)葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇→二乙?！t色化合物+

胍基化合物葡萄糖→丙酮酸××乙酰甲基甲醇

--+大腸埃希菌—乙酰甲基甲醇產(chǎn)氣腸桿菌—埃希菌C-枸櫞酸鹽利用（citrateutilization）試驗(yàn)利用枸櫞酸鹽生長+不能利用-

-+大腸埃希菌—產(chǎn)氣腸桿菌—埃希菌E.coli在中國藍(lán)平板24h菌落埃希菌大腸埃希菌在麥康凱瓊脂平板上粘稠菌落的特征（18-24h）埃希菌大腸桿菌O157菌落（SS平板）埃希菌KIA雙糖管

（發(fā)酵葡萄糖和乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，H2S–，動(dòng)力+）埃希菌腸桿菌科細(xì)菌在克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）埃希菌抵抗力對(duì)熱的抵抗力較強(qiáng)，55℃經(jīng)60min或60℃加熱15min仍有部分細(xì)菌存活。在自然界的水中可存活數(shù)周至數(shù)月，在糞便中存活更久。膽鹽、煌綠等對(duì)大腸桿菌有抑制作用。埃希菌二、致病性（一）致病物質(zhì)

Ⅰ.侵襲力：

III型分泌系統(tǒng)：是指能向真核靶細(xì)胞內(nèi)輸送毒性基因產(chǎn)物的細(xì)菌效應(yīng)系統(tǒng)，約由20余種蛋白質(zhì)組成。1、莢膜2、黏附素：使細(xì)菌黏著在泌尿道和腸道細(xì)胞上，有高特異性定植因子抗原Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ（CFA/Ⅰ,CFA/Ⅱ,CFA/Ⅲ）3、菌毛：P、Dr、Bfp等埃希菌致病物質(zhì)Ⅱ.毒素：內(nèi)毒素外毒素：志賀毒素Ⅰ和Ⅱ（Stx-Ⅰ,Stx-Ⅱ）耐熱腸毒素a,b(STa,STb)不耐熱腸毒素Ⅰ和Ⅱ（LT-Ⅰ，LT-Ⅱ）溶血素A（HlyA）埃希菌（二）所致疾病1.腸道外感染（機(jī)會(huì)感染，內(nèi)源性）多數(shù)大腸埃希菌在腸道內(nèi)不致病，但如移位至腸道外引起腸外感染。（1）泌尿道感染（2）化膿性感染（3）敗血癥（4）新生兒腦膜炎埃希菌2．胃腸炎（外源性感染，某些血清型）①腸產(chǎn)毒素性大腸埃希菌(enterotoxingenicE.coli,ETEC)致病物質(zhì)定植因子：使細(xì)菌黏附到小腸上皮細(xì)胞上腸毒素：LT、ST埃希菌

耐熱腸毒素

（Heatstableenterotoxin,ST）對(duì)熱穩(wěn)定，100℃經(jīng)20分鐘仍不被破壞分子量小，免疫原性弱。ST可激活小腸上皮細(xì)胞的鳥苷酸環(huán)化酶，使胞內(nèi)cGMP增加，在空腸部分改變液體的運(yùn)轉(zhuǎn)，使腸腔積液而引起腹瀉。ST與霍亂毒素?zé)o共同的抗原關(guān)系。埃希菌②腸侵襲性大腸埃希菌(enteroinvasiveE.coli,EIEC)不產(chǎn)腸毒素，侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞，與志賀菌相似。細(xì)菌侵入結(jié)腸上皮細(xì)胞生長繁殖，破壞空泡進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)增殖殺死感染細(xì)胞導(dǎo)致組織破壞和炎癥發(fā)生所致疾病：侵犯較大兒童，成人，癥狀類似菌痢埃希菌③腸致病性大腸埃希菌（enteropathogenicE.coli,EPEC）病菌在十二指腸，空腸和回腸上段黏膜表面大量繁殖，破壞微絨毛，造成一系列損傷所致疾?。簨胗變焊篂a，嚴(yán)重可致死

致病原因：無腸毒素及其他外毒素，無侵襲力靠Bfp、III型分泌系統(tǒng)埃希菌④腸出血性大腸埃希菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）致病原因：產(chǎn)志賀毒素Stx-Ⅰ，Stx-Ⅱ，破壞腸絨毛結(jié)構(gòu)（干擾蛋白質(zhì)合成）所致疾?。撼鲅越Y(jié)腸炎，溶血性尿毒綜合癥HUS（5歲以下兒童易感）主要血清型O157：H7埃希菌重要血清型：O157：H7埃希菌O157讓“衛(wèi)生大國”蒙羞日本歷來自稱“衛(wèi)生大國”，一種自豪感溢于言表。然而，有一種名不見經(jīng)傳的“尤物”——O157，卻屢屢肆虐日本列島，讓這個(gè)“衛(wèi)生大國”蒙羞。

1990年，日本浦和市白鷺幼兒園就曾因園內(nèi)的井水被污染，造成了O157感染，導(dǎo)致319人患病，2名幼兒死亡。

199l～1994年，日本每年約發(fā)現(xiàn)100例O157感染者。其中，13歲以下的兒童占83％：除幼兒園、學(xué)校出現(xiàn)集體發(fā)病外，還發(fā)現(xiàn)有家庭的零星發(fā)病。埃希菌O157讓“衛(wèi)生大國”蒙羞1996年5月下旬，日本又被O157攪得“天翻地覆”。土界市的一些學(xué)校中，因食用受O157污染的蘿卜幼苗而相繼發(fā)生6起集體食物中毒事件，中毒人數(shù)多達(dá)1600人，導(dǎo)致3名兒童死亡，80多人入院治療。同時(shí)，日本仙臺(tái)市和鹿兒島縣也發(fā)現(xiàn)了集體食物中毒事件，中毒兒童增加到3791人，住院兒童達(dá)202人。到7月底，中毒人數(shù)超過1萬人，死亡11人，波及44個(gè)都府縣。這就是曾引起全世界極大關(guān)注的“O157中毒事件”，并被世界衛(wèi)生組織(WHO)稱之為“創(chuàng)紀(jì)錄的發(fā)病數(shù)”。調(diào)查研究人員發(fā)現(xiàn)，蘿卜幼苗食用部分受到O157的嚴(yán)重污染，是這次0157中毒事件的根本原因。埃希菌O157讓“衛(wèi)生大國”蒙羞2001年4月初，日本再度發(fā)生O157，集體感染事件，東京、千葉、琦玉、神奈川、茨木、群馬等地已有125人受到感染。其實(shí)，這次集體感染于3月12日首先在千葉縣柏市被發(fā)現(xiàn)。經(jīng)調(diào)查表明，患者是由于食用了一些工廠生產(chǎn)的不潔凈食品而被感染的。

2002年8月，在距離日本首都東京約100千米的宇都宮市，報(bào)德會(huì)宇都宮醫(yī)院及其老人保健中心相繼發(fā)生了集體食物中毒事件。據(jù)當(dāng)?shù)毓賳T說，7月29日，該醫(yī)院及其老人保健中心有876人在午餐中食用了雞和菠菜沙拉，致使138人受到O157感染，7人死亡。其中，絕大多數(shù)是老人。這次食物中毒事件還是由O157引起的。埃希菌⑤腸集聚型大腸桿菌

（enteroaggregativeE.coli,EAggEC）可產(chǎn)生毒素和粘附素（Bfp

、AAF/I、AAF/II）引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，脫水，偶有血便。毒素：腸集聚耐熱毒素粘附素：凝聚性粘附菌毛

使菌體磚狀排列埃希菌

引起腹瀉的大腸埃希菌

菌株作用部位疾病與癥狀致病機(jī)制ETEC小腸旅行者腹瀉；嬰幼兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，腹痛，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)LT和（或）ST腸毒素，大量分泌液體和電解質(zhì)EIEC大腸水樣便，繼以少量血便，腹痛，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞28ac、29、112ac、1244、152、164、167EPEC小腸嬰兒腹瀉；水樣便，惡心，嘔吐，發(fā)熱質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞上皮細(xì)胞2、55、86、111、114、119、125、126、127、128、142、158EHEC大腸水樣便，繼以大量出血，劇烈腹痛，低熱或無，可并發(fā)HUS、血小板減少性紫癜溶原性噬菌體編碼SLT-I或SLT-II，中斷蛋白質(zhì)合成157、26、111EAEC小腸嬰兒腹瀉；持續(xù)性水樣便，嘔吐，脫水，低熱質(zhì)粒介導(dǎo)集聚性粘附上皮細(xì)胞，阻止液體吸收并產(chǎn)生毒素42、44、3、86等常見O血清型6、8、15、25、27、78、148、159埃希菌三、微生物學(xué)檢查（一）臨床標(biāo)本的檢查標(biāo)本采集：中段尿，血，膿，腦脊液，糞便等分離培養(yǎng)與鑒定腸道外感染：涂片染色，分離培養(yǎng)，鑒定：IMVic（++--），生化反應(yīng)尿路感染尚需計(jì)數(shù)菌落數(shù)，每ml≥10萬才有診斷價(jià)值。腸道內(nèi)感染：糞便接種鑒別培養(yǎng)基（SS）ELISA，核酸雜交，PCR埃希菌大腸埃希菌在飲水和食品衛(wèi)生學(xué)中，常用作被糞便污染的檢測(cè)指標(biāo)。

≤3個(gè)大腸菌群/1L飲水≤100個(gè)細(xì)菌總數(shù)/1ml飲水(二)衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)意義大腸菌群指數(shù)每1000ml水中大腸菌群數(shù)我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：