醫(yī)學教程 地中海貧血的分子基礎及產前診斷

地中海貧血的分子基礎及產前診斷

中山大學附屬第一醫(yī)院胎兒醫(yī)學中心黃軒中國南方地中海貧血人群攜帶率

地區(qū)攜帶率(%)

地貧β地貧

廣東8.532.54

廣西14.956.78

四川1.922.18

臺灣4.201.10

香港5.023.41Xu,etal.JClinPathol2004,57:517-22.

Cai,etal.ChiJEpidemiol

2002,23:281-5.

地貧攜帶者篩查及產前診斷流程被檢對象（婚前或孕中期）血液學分析（MCV

，HbA2變化）排除地貧地貧攜帶者遺傳咨詢，配偶檢查血液學分析（MCV

HbA2變化）地貧攜帶者排除地貧遺傳咨詢雙親基因分析胎兒產前診斷人類血紅蛋白結構血紅蛋白(Hemoglobin,Hb)是人體紅細胞內的一種主要蛋白質，由珠蛋白和血紅素結合而成，通過攜氧釋氧實現(xiàn)氧氣在人體內的運輸。血紅蛋白是由兩條α珠蛋白鏈(α、ξ)和兩條非α珠蛋白鏈(β、γ、δ、ε)組成的四聚體。人類珠蛋白肽鏈的發(fā)育演變HbGower1:ξ2ε2HbGower2:α

2ε2HbPortland:ξ2γ2HbF:α2γ2HbA2:α2δ2HbA:α2β2ε:elta/'i:t?/ξ：rho/rou/

γ:gamma

δ:delta

成人血紅蛋白成分正常成人血紅蛋白的主要成份

HbA(α2β2)96.5%-97.5%HbA2（α2δ2）

2.5%-3.5%正常成人中次要血紅蛋白均勻分布所有紅細胞中其生理功能特性和HbA幾乎一致漫長人類進化史上沒有被淘汰HbF（

α2γ2）

＜1%由于γ鏈有Gγ和Aγ兩種亞型，所以HbF也有兩種構成：α2Gγ2和α2Aγ2

。胎兒血紅蛋白（HbF)是胎兒和新生兒血液中的主要血紅蛋白臍血中HbF70%-80%出生后很快減少，至6個月后絕大部分被HbA替代許多性質與HbA不同具有明顯的抗堿性和抗酸性（酸洗脫法）抗原性較HbA大氧親合力較HbA大HbF增高的疾病HPFH、δβ-地貧β-地中海貧血、β-地貧復合其他地貧HbLeporeHbS病Fanconi貧血F細胞（有些RBC的HbF含量10%-30%，稱為F細胞）并非所有的紅細胞均含有HbF多數(shù)不含有HbFGγ/Aγ臍血中：7：3出生頭幾個月：3：2出生六個月后：4：6血蛋白病的定義及分類異常血紅蛋白?。河捎谘t蛋白發(fā)生結構上的異常而導致的貧血癥比如：鐮刀型細胞貧血?。℉bS）、HbC、HbD、HbE等地中海貧血：

由于某類血紅蛋白合成受到抑制所引起的溶血性貧血比如:α-地中海貧血、β-地中海貧血血紅蛋白病由于血紅蛋白在質量和數(shù)量上的異常而發(fā)生的一類遺傳性貧血病異常血紅蛋白病鐮刀型細胞貧血?。℉bS）β6–GluàvolHbC

β6–GluàLysHbDβ121–GluàGlnHbEβ26–GluàLys地中海貧血Thalasso即是“?！钡囊馑糎emia即是“血”的意思指“海洋性貧血”Thalassemia希臘語1925年，意大利第一例地中海貧血的臨床血液學分類α-地中海貧血靜止型α-地貧標準型α-地貧HbH病HbBart，s胎兒水腫病β-地中海貧血輕型β-地貧中間型β-地貧重型β-地貧少見的地中海貧血γ-地中海貧血δ-地中海貧血（γδ）0-地貧遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白增多癥（HPFH）與異常血紅蛋白病相互作用的地貧α-地貧+α-鏈變異體β-地貧+β-鏈變異體HPFHα-地中海貧血及β-地中海貧血其他HPFH定義當成人體內持續(xù)存在過量的HbF時,就稱：

遺傳性持續(xù)性胎兒血紅蛋白增高癥

(Hereditarypersistenceoffetalhemoglobin,HPFH)沒有定義HbF達到多少的比例是一組遺傳異質性很大的血紅蛋白病一般情況下是一個沒有貧血的“正常人”血紅蛋白量及紅細胞大小均正?；蚪咏＆林榈鞍祖溑c非α珠蛋白鏈維持正常的合成平衡注意與（γδ）0-地貧、β-地貧鑒別Pedigreefor-thalassemiainatypicalfamily.地中海貧血:常染色體隱性遺傳病地中海貧血的血液學表型特征

RBC參數(shù)

MCV

MCH

細胞形態(tài)變化

Hb電泳分析

HbA2

(

)或

(

)HbBart’sHbH(

)HbE(

)血紅蛋白電泳圖譜123451.正常人HB2.輕型

地貧3.異常HBE雜合子4.新生兒HBBart’s(

地貧標準型）5.HBHNormalAA2AEBart’sAFHA+-500V,25min

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導致α地貧的不同類型的基因缺失Differentpointmutationsreducing

globingeneexpressionEXON1IVS1

EXON2EXON3

IVS2PromotermutationRNAsplicingInitiationmutationFrameshiftNonsensePoly(A)signalRund.&Rachmilewitz.N.Engl.J.Med.

2005,353:1135-46.

地中海貧血的產前診斷

胎兒取樣技術

DNA診斷技術

-地貧的診斷

-地貧的診斷

植入前基因診斷

Preimplantationgeneticdiagnosis(PGD)

超聲產前診斷

Prenataldiagnosis:Ultrasoundmeasurement

母體外周血分離胎兒細胞進行產前診斷

Prenataldiagnosis:Fetalcellsinthematernalcirculation

母體血漿或血清中胎兒DNA分析

AnalysisoffetalDNAinmaternalplasmaandserum目前及今后的胎兒產前診斷新技術DNA診斷技術

多重PCR（multiplexPCR）

等位基因特異性性寡核苷酸雜交（ASO）

反向點雜交（RDB）

變性高效液相色譜（DHPLC）

基于微孔板

(microtiterwell-based)高通量檢測

實時PCR(real-timePCR)

-50kb-10kb0kb10kb20kb30kb

(--SEA)Deletion(-

4.2)Deletion(-

3.7)Deletion21導致α地貧的不同類型的基因缺失Locationofprimersanddetectionof--SEAdeletionbygap-PCRGenotypingofthe--SEAallelesbyGap-PCR

寡核苷酸探針雜交技術ASO探針檢測

-地貧基因診斷結果RDBanalysis:applicationtorapidprenataldiagnosisforeightβthalassaemiamutations.GenotypeFatherCDs41-42(