灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程（征求意見稿）編制說明

《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》(征求意見稿)陜西省地方標(biāo)準(zhǔn)編制說明根據(jù)陜西省市場監(jiān)督管理局《關(guān)于下達(dá)2024年第二批地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂計劃灰樹花又名千佛菌、栗子蘑、蓮花菌、云蕈、舞茸等，于上世紀(jì)80我國馴化栽培成功，目前已發(fā)展出工廠化栽培、大棚袋栽、覆土仿野生栽培等多種模式，近年來在我國各項農(nóng)業(yè)優(yōu)惠政策的扶持下已形成一定生產(chǎn)規(guī)模。我省灰樹花栽培已有十多年歷史，種植規(guī)模也逐年提升，2023年栽培量約260萬袋，產(chǎn)量占全國總產(chǎn)量的10%。菌種是食用菌品質(zhì)高產(chǎn)的基礎(chǔ)，是產(chǎn)業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展的關(guān)鍵。目前，我省灰樹花菌種生產(chǎn)中存在菌種來源不明確、技術(shù)水平低、管理不規(guī)范等問題，從而導(dǎo)致了菌種性能退化、生產(chǎn)周期長、污染率高等，直接影響了栽培產(chǎn)量和質(zhì)量，甚至出現(xiàn)減產(chǎn)、絕產(chǎn)等事故。因此，有必要根據(jù)我省灰樹花菌種生產(chǎn)中存在的實際情況，制定《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)個環(huán)節(jié)進(jìn)行規(guī)范，科學(xué)指導(dǎo)菌種生產(chǎn)過程，以提升菌種生產(chǎn)者技術(shù)水平，提高我省灰樹花菌種生產(chǎn)質(zhì)量，保障栽培成功率、產(chǎn)品產(chǎn)量和質(zhì)量，增強(qiáng)我省灰樹花產(chǎn)品國際國內(nèi)市場競爭力，促進(jìn)企業(yè)增產(chǎn)農(nóng)民增收。通過《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》的制定，可引導(dǎo)菇農(nóng)規(guī)范菌種生產(chǎn)，促進(jìn)產(chǎn)業(yè)良性發(fā)展，形成我省在本標(biāo)準(zhǔn)編制過程中，我們遵循了“科學(xué)性、實用性、統(tǒng)一性、規(guī)范性以及（1）本標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格遵守GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化（3）標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容與現(xiàn)行有關(guān)法律、法規(guī)和有關(guān)上級強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)相一致，不2（4）力求結(jié)合本項目實際情況，在指標(biāo)上力求科學(xué)、先進(jìn)、可行，為大量本標(biāo)準(zhǔn)重點圍繞灰樹花生產(chǎn)活動中有關(guān)菌種生產(chǎn)的質(zhì)量和安全，立足于我省灰樹花產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀，同時充分關(guān)注行業(yè)發(fā)展趨勢，以相關(guān)科研成果為依據(jù)，積極借鑒國內(nèi)先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)，對灰樹花菌種生產(chǎn)技使本標(biāo)準(zhǔn)能夠在灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)的選擇和使用中起到規(guī)范作用，引導(dǎo)我省灰樹花栽培行業(yè)水平提高一個層次，從而有利于我省灰樹花栽培行業(yè)的長遠(yuǎn)發(fā)展。本標(biāo)準(zhǔn)在制定過程中，參考了以下相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)——本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)本標(biāo)準(zhǔn)由陜西省市場監(jiān)督管理局組織制定。起草單位為陜西省微生物研究所、陜西理工大學(xué)、陜西省園藝技術(shù)工作站、渭南市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、漢中市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣與培訓(xùn)中心、寶雞市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、漢中康田生物科技有限公表1標(biāo)準(zhǔn)主要起草人及職責(zé)分工工作單位承擔(dān)的工作研究員陜西省微生物研究所項目負(fù)責(zé)人，負(fù)責(zé)項目整體實施和標(biāo)準(zhǔn)編制張文雋副研究員陜西省微生物研究所標(biāo)準(zhǔn)編制解修超副教授陜西理工大學(xué)校驗雷麗農(nóng)藝師陜西省園藝技術(shù)工作站材料整理簡紅忠高級農(nóng)藝師漢中市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣與培訓(xùn)中心校驗王璞農(nóng)藝師渭南市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院材料收集馬婧嘉助理研究員陜西省微生物研究所標(biāo)準(zhǔn)編制李雅茹研實員陜西省微生物研究所標(biāo)準(zhǔn)編制韓根鎖高級農(nóng)藝師寶雞市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院校驗吳建海技術(shù)總監(jiān)漢中康田生物科技有限公司材料收集技術(shù)人員管理人員技術(shù)人員管理人員起草標(biāo)準(zhǔn)成果收集意見征詢《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)起草標(biāo)準(zhǔn)成果收集意見征詢《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》實施方案標(biāo)準(zhǔn)檢驗前驗證技術(shù)成果技術(shù)規(guī)程類討論驗證生產(chǎn)單位或基地驗證第三方材料證明檢測驗證第三方檢測報告項目組實施方案標(biāo)準(zhǔn)檢驗前驗證技術(shù)成果技術(shù)規(guī)程類討論驗證生產(chǎn)單位或基地驗證第三方材料證明檢測驗證第三方檢測報告項目組評審與發(fā)布標(biāo)準(zhǔn)文本修改標(biāo)準(zhǔn)評審專家評審與發(fā)布標(biāo)準(zhǔn)文本修改標(biāo)準(zhǔn)評審專家省技監(jiān)局標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布省技監(jiān)局標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布42022年8月1日，陜西省微生物研究所、陜西理工大學(xué)、陜西省園藝技術(shù)工作站、渭南市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、漢中市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣與培訓(xùn)中心、寶雞市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、漢中康田生物科技有限公司等單位就本標(biāo)準(zhǔn)的編制事宜進(jìn)行了協(xié)商，成立了《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》編制項目組。標(biāo)準(zhǔn)起草項目組組建后，按照起草部署會議的計劃，在總結(jié)本標(biāo)準(zhǔn)制定起草組前期科學(xué)研究成果的基礎(chǔ)上，廣泛查閱相關(guān)國家標(biāo)準(zhǔn)、其他相關(guān)省市地方標(biāo)準(zhǔn)和具有權(quán)威采信價值的文獻(xiàn)資料，同時密切聯(lián)系以漢中康田生物科技有限公司為主的灰樹花菌種生產(chǎn)實踐，多次赴寶雞、渭南、漢中等栽培區(qū)進(jìn)行灰樹花菌種生產(chǎn)調(diào)查研究，2023年4月21日項目組召開了工作會議的步驟、分工和實施方案，對工作組成員分工、工作進(jìn)度和要求作了具體安排。2023年6月13日，項目組對標(biāo)準(zhǔn)起草情況及存在問題進(jìn)行了討論。2023年10月20日，項目組召開標(biāo)準(zhǔn)通稿會，審閱了標(biāo)準(zhǔn)初稿，會議確定了標(biāo)準(zhǔn)的制定原則，對標(biāo)準(zhǔn)格式、表達(dá)方式、主要內(nèi)容等按照GB/T1.1《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)2024年5月26日，項目組組織召開了征求意見會議，邀請有關(guān)科研院所、農(nóng)技推廣單位、菌種生產(chǎn)企業(yè)和省標(biāo)準(zhǔn)化研究院等單位相關(guān)人員，對項目項目組從2022年開始對陜西省灰樹花主產(chǎn)區(qū)的菌種生產(chǎn)情況進(jìn)行了調(diào)查研究，2022-2023年分別在寶雞、渭南、漢中建立了3個菌種生產(chǎn)站、6個試驗示范點，對規(guī)范灰樹花菌種生產(chǎn)培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)溫度等進(jìn)行了試驗研究，試驗5（3）馬鈴薯200g（浸出汁麩皮100g（浸出汁葡萄糖20g，磷酸二（5）馬鈴薯200g（用浸出汁蔗糖15g，蛋白胨15g，瓊脂20g，水（6）木屑25g（浸出汁葡萄糖10g，酵母膏2g，蛋白胨1g，瓊脂選用18mm×180mm的玻璃試管，培養(yǎng)基灌入量為五分之一，試管口用硅膠塞封口，高壓滅菌表2不同母種培養(yǎng)基灰樹花菌絲生長情況編號菌絲生長速度（mm/d）菌絲生長勢菌絲顏色配方13.63濃密配方23.65濃密配方33.71濃密配方43.68濃密配方52.95較濃密配方63.27較濃密6量以滅菌后達(dá)到總?cè)莘e的1/2為好，松緊適度。將菌種瓶口和外壁擦拭干凈后，用無棉塑料蓋封口，牛皮紙包扎瓶口。高壓滅菌后接表3不同原種（栽培種）培養(yǎng)基灰樹花菌絲生長情況編號菌絲生長速度（mm/d）菌絲生長勢菌絲顏色配方1濃密配方22.98濃密配方33.10濃密配方43.04濃密配方53.08濃密配方62.21較濃密配方72.65較濃密表4不同培養(yǎng)溫度灰樹花菌種生長時間菌種類別培養(yǎng)溫度(℃)菌絲生長速度（mm/d）生長時間菌絲生長勢母種23±13.01濃密25±13.80濃密27±13.65較濃密原種23±12.6340濃密25±135濃密27±13.0236較濃密栽培種23±12.5442濃密25±13.1036濃密27±13.0937較濃密從表4可以看出，灰樹花母種、原種、栽培種在溫度25℃±1℃條件下，菌按照《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》對灰樹花配方、質(zhì)量要求等進(jìn)行規(guī)范，可以使灰樹花菌種的優(yōu)證，從根本上提高灰樹花生產(chǎn)的產(chǎn)量和質(zhì)量，增加7表5非標(biāo)準(zhǔn)菌種和標(biāo)準(zhǔn)菌種的銷售價格對比菌種類別非標(biāo)準(zhǔn)菌種（元）標(biāo)準(zhǔn)菌種（元）增幅（%）母種203050原種825栽培種5620表6不同液體培養(yǎng)基灰樹花菌絲生長情況編號生長時間（h）菌絲量（濕重）g/L配方196配方296配方396配方496配方59697表7不同裝液量灰樹花菌絲生長情況菌種類別裝液量（%）生長時間（h）菌絲量（濕重mg/mL）4055搖瓶5075菌種607048液體菌種50%9660%96870%9692從表7可以看出，搖瓶菌種在裝液量60%時，菌絲量最高，濕重量為80mg/mL，其次是50%；液體菌種裝液量60%時，菌絲量最高，濕重量為表8搖床不同振蕩頻率灰樹花菌絲生長情況菌種類別振蕩頻率（r/min）生長時間（h）菌絲量（濕重mg/mL）65搖瓶菌種21053表9不同接種量灰樹花菌絲生長情況菌種類別接種量（%）生長時間（h）菌絲量（濕重mg/mL）液體菌種5%96979696從表9可以看出，液體菌種接種量10%時，菌絲量最高，濕重量為表10不同通氣量灰樹花菌絲生長情況菌種類別通氣量生長時間菌絲量（濕重mg/mL）菌球形狀液體菌種96近球狀，大小不均勻96球狀、均勻96球狀、均勻96球狀、均勻9690近球狀或絲狀，較均勻表11不同培養(yǎng)時間灰樹花菌絲生長情況菌種生長時間菌絲量菌絲類別（d/h）（濕重mg/mL）生長情況9458球狀、較均勻、較緊密搖瓶579球狀、均勻、緊密菌種6球狀、均勻、緊密7球狀、均勻、緊密872球狀、較均勻、較疏松液體菌種4876球狀、較均勻、較緊密72球狀、均勻、緊密球狀、均勻、緊密96球狀、均勻、緊密98球狀、較均勻、較疏松從表11可以看出，搖瓶菌種培養(yǎng)6d時，菌絲生物量最大，濕重量為86mg/mL，菌球球狀、均勻，且質(zhì)地緊密；其次是培養(yǎng)7d和5d時。液體菌種培養(yǎng)84h時菌絲生物量最大，濕重量為133mg/mL，菌球球狀、均勻，且質(zhì)地緊按照《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》生產(chǎn)灰樹花固體菌種和液體，菌種產(chǎn)量和質(zhì)量得到了大幅提升，擴(kuò)大了生產(chǎn)規(guī)模，提高了經(jīng)濟(jì)效益；菌種生產(chǎn)污染率得到了控制，降低了灰樹花生產(chǎn)風(fēng)險，保護(hù)了廣大同時，項目組根據(jù)試驗結(jié)果，并對國內(nèi)相關(guān)研究成果進(jìn)行系統(tǒng)整理，積極借鑒國內(nèi)先進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)，在所獲資料和數(shù)據(jù)的基礎(chǔ)上，反復(fù)斟酌，編制了《灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》草案，草案由專家進(jìn)行逐條討論、修改完善形成標(biāo)準(zhǔn)征求場地選擇應(yīng)符合NY/T528；環(huán)境空氣質(zhì)量應(yīng)符合GB3095；水質(zhì)應(yīng)符合2.2.1廠房內(nèi)應(yīng)設(shè)有原材料庫、配料室、滅菌室、無菌接種室、恒溫培養(yǎng)室、發(fā)酵罐培養(yǎng)室、檢驗室等，按照液體菌種生產(chǎn)工藝流程合理布局，無菌區(qū)與有菌2.2.2廠房地面、墻壁和天花板應(yīng)能防水、防腐蝕、防滲漏、防滑，易清洗，易消毒，地面應(yīng)有1.0%~1.5%的排水坡度和良好的排水系統(tǒng)。門窗應(yīng)設(shè)置防蚊蠅2.3.2.1高壓蒸汽滅菌鍋、超凈工作臺、恒溫回旋式振蕩器、恒溫培養(yǎng)箱、液體菌種培養(yǎng)器、液體菌種接種器、空氣壓縮機(jī)、空氣過濾器、冰箱、顯微鏡、磅2.3.2.2滅菌室、無菌接種室、恒溫培養(yǎng)室、液體菌種培養(yǎng)室、檢驗室均應(yīng)具備使用種性清楚，高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)、抗逆性強(qiáng)、商品性能良好的品種。菌種生產(chǎn)30d~40d，栽培種培養(yǎng)35d~45d，當(dāng)菌絲長滿瓶（袋即可用于栽培種或栽培恒溫25℃±1℃遮光靜置培養(yǎng)24h，以振蕩頻率150r/min~180r/min，繼續(xù)各級菌種都應(yīng)留樣備查，母種每個批號3支~5支，原種、栽培種5瓶菌液形態(tài)：菌液稍粘稠，有大量球狀、絮狀菌絲體懸浮、分布均勻、不上顯微鏡下菌絲形態(tài)：灰樹花菌種液體培養(yǎng)特有的球狀和絮狀菌絲體大量分搖瓶菌種使用時取樣30mL~40mL，發(fā)酵罐實消后的空白培養(yǎng)基取樣30mL~40mL，放罐前48h從發(fā)酵罐中取樣30mL~40mL，發(fā)酵終止后取樣菌種和液體菌種生產(chǎn)過程中的生產(chǎn)人員、生產(chǎn)場地、生產(chǎn)廠房、設(shè)施設(shè)備、菌種選擇、生產(chǎn)技術(shù)和質(zhì)量控制等各個環(huán)節(jié)，極大程度的提高我省灰樹花菌種生產(chǎn)技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化水平，為灰樹花栽培奠定可靠的菌種質(zhì)量保證，從而提高栽培成功率和產(chǎn)質(zhì)量，增加生