統(tǒng)考版2025屆高考生物二輪專項(xiàng)分層特訓(xùn)卷第一部分專題強(qiáng)化演練十六微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

專題強(qiáng)化演練十六微生物的培育與應(yīng)用1．[2024·北京卷]中學(xué)生物學(xué)試驗(yàn)中，下列試驗(yàn)操作能達(dá)成所述目標(biāo)的是()A．用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細(xì)胞視察質(zhì)壁分別B.向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無菌環(huán)境C.在目標(biāo)個(gè)體集中分布的區(qū)域劃定樣方調(diào)查種群密度D.對(duì)外植體進(jìn)行消毒以杜絕接種過程中的微生物污染2．[2024·山東卷]平板接種常用在微生物培育中。下列說法正確的是()A．不含氮源的平板不能用于微生物培育B．平板涂布時(shí)涂布器運(yùn)用前必需進(jìn)行消毒C．接種后未長出菌落的培育基可以干脆丟棄D．利用以尿素為唯一氮源的平板能分別出合成脲酶的微生物3.[2024·廣東卷]探討者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。依據(jù)堆肥溫度改變曲線(如圖)和選擇培育基篩選原理來推斷，下列最可能篩選到目標(biāo)菌的條件組合是()A．a(chǎn)點(diǎn)時(shí)取樣、尿素氮源培育基B．b點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培育基C．b點(diǎn)時(shí)取樣、蛋白胨氮源培育基D．c點(diǎn)時(shí)取樣、角蛋白氮源培育基4．[2024·浙江1月]某同學(xué)想從泡菜汁中篩選耐高鹽乳酸菌，進(jìn)行了如下試驗(yàn)：取泡菜汁樣品，劃線接種于肯定NaCl濃度梯度的培育基，經(jīng)培育得到了單菌落。下列敘述正確的是()A．培育基pH需偏堿性B．泡菜汁需多次稀釋后才能劃線接種C．需在無氧條件下培育D．分別得到的微生物均為乳酸菌5．[2024·全國乙卷]某探討小組設(shè)計(jì)了一個(gè)利用作物秸稈生產(chǎn)燃料乙醇的小型試驗(yàn)。其主要步驟是：先將粉碎的作物秸稈堆放在底部有小孔的托盤中，噴水浸潤、接種菌T，培育一段時(shí)間后，再用清水淋洗秸稈堆(清水淋洗時(shí)菌T不會(huì)流失)，在裝有淋洗液的瓶中接種酵母菌，進(jìn)行乙醇發(fā)酵(酒精發(fā)酵)。試驗(yàn)流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}。(1)在粉碎的秸稈中接種菌T，培育一段時(shí)間后發(fā)覺菌T能夠?qū)⒔斩捴械睦w維素大量分解，其緣由是________________________。(2)采納液體培育基培育酵母菌，可以用淋洗液為原料制備培育基，培育基中還須要加入氮源等養(yǎng)分成分，氮源的主要作用是________________________________________________________________________(答出1點(diǎn)即可)。通常，可采納高壓蒸汽滅菌法對(duì)培育基進(jìn)行滅菌。在運(yùn)用該方法時(shí)，為了達(dá)到良好的滅菌效果，須要留意的事項(xiàng)有________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。(3)將酵母菌接種到滅菌后的培育基中，擰緊瓶蓋，置于相宜溫度下培育、發(fā)酵。擰緊瓶蓋的主要目的是________________。但是在酵母菌發(fā)酵過程中，還需適時(shí)擰松瓶蓋，緣由是________________。發(fā)酵液中的乙醇可用________________溶液檢測(cè)。(4)本試驗(yàn)收集的淋洗液中的________可以作為酵母菌生產(chǎn)乙醇的原料。與以糧食為原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇相比，本試驗(yàn)中乙醇生產(chǎn)方式的優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________________________。6．[2024·北京卷]自然界中不同微生物之間存在著困難的相互作用。有些細(xì)菌具有溶菌特性，能夠破壞其他細(xì)菌的結(jié)構(gòu)使細(xì)胞內(nèi)容物釋出。科學(xué)家試圖從某湖泊水樣中分別出有溶菌特性的細(xì)菌。(1)用于分別細(xì)菌的固體培育基包含水、葡萄糖、蛋白胨和瓊脂等成分，其中蛋白胨主要為細(xì)菌供應(yīng)________________和維生素等。(2)A菌通常被用做溶菌對(duì)象。探討者將含有肯定濃度A菌的少量培育基傾倒在固體培育平板上，凝固形成薄層。培育一段時(shí)間后，薄層變渾濁(如圖)，表明________________________________________________________________________。(3)為分別出具有溶菌作用的細(xì)菌，須要合適的菌落密度，因此應(yīng)將含菌量較高的湖泊水樣____________后，依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培育一段時(shí)間后，能溶解A菌的菌落四周會(huì)出現(xiàn)________。采納這種方法，探討者分別、培育并鑒定出P菌。(4)為探究P菌溶解破壞A菌的方式，請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)假設(shè)，該假設(shè)能用以下材料和設(shè)備加以驗(yàn)證(主要試驗(yàn)材料和設(shè)備：P菌、A菌、培育基、圓形濾紙小片、離心機(jī)和細(xì)菌培育箱)________________________________________________________________________。7．[2024·四川成都石室中學(xué)模擬]微生物培育過程中，要非常重視無菌操作，以防止雜菌污染，請(qǐng)分析下列操作，錯(cuò)誤的是()①煮沸消毒可以殺死微生物的細(xì)胞和部分芽孢②接種操作要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行③培育基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌④加入培育基中的指示劑和染料不須要滅菌⑤紫外線消毒可以對(duì)接種室、超凈工作臺(tái)和操作人員進(jìn)行消毒，以殺死物體表面或者空氣中的微生物⑥在接種過程中，試管口、瓶口等易被污染的部位，也可以通過火焰灼燒來滅菌A．①②B．⑤⑥C．③⑤D．④⑤8．[2024·山東菏澤三模]下列操作不能從特定的培育基中分別出目的菌的是()A．利用僅以尿素作為唯一氮源的培育基，可以分別出土壤中能分解尿素的細(xì)菌B．利用僅以纖維素作為唯一碳源的培育基，可以分別出土壤中能分解纖維素的細(xì)菌C．利用不含氮源的培育基，可以分別出土壤中的固氮細(xì)菌D．利用不含氮源的培育基，可以分別出土壤中的硝化細(xì)菌9．[2024·浙江金華一中模擬]某愛好小組對(duì)土壤中細(xì)菌進(jìn)行分別并計(jì)數(shù)，利用選擇培育基篩選某種細(xì)菌，以下敘述正確的是()A．可配制以(NH4)2SO4為唯一氮源的培育基用于篩選硝化細(xì)菌B．全部培育基的成分均需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌C．脲酶將尿素分解成氨，使培育基的pH降低，加入酚紅指示劑后變紅D．本試驗(yàn)可采納稀釋涂布平板法或平板劃線法的接種方法10．[2024·遼寧試驗(yàn)中學(xué)模擬]根瘤菌是與豆科植物共生、形成根瘤并固定空氣中的氮?dú)夤┲参镳B(yǎng)分的一類桿狀細(xì)菌。某同學(xué)要分別純化某種大豆根瘤菌。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A．由于根瘤菌屬于自養(yǎng)微生物，所以培育基不應(yīng)添加氮源和碳源，進(jìn)而達(dá)到篩選的目的B．培育基滅菌后待冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰旁邊倒平板C．分別純化該微生物可以用稀釋涂布平板法，以便于獲得目的菌種的單菌落D．運(yùn)用后的培育基應(yīng)經(jīng)過高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄11．[2024·山東模擬]鐮刀菌引起的根腐病會(huì)導(dǎo)致玉米根莖腐爛，嚴(yán)峻影響玉米的產(chǎn)量。土壤中某些微生物能夠抑制鐮刀菌生長，某小組擬從土壤中篩選菌株用于根腐病的防治。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．可用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培育目的菌的培育基進(jìn)行滅菌B．試驗(yàn)中培育目的菌所用的培育基為選擇培育基C．須要將培育基倒入培育皿中后再進(jìn)行滅菌D．采集土壤時(shí)應(yīng)從不患根腐病的玉米植株根部旁邊取樣12．[2024·湖南長沙雅禮中學(xué)一模]獲得單一的優(yōu)質(zhì)菌種并擴(kuò)大培育是進(jìn)行發(fā)酵工程的前提，下列有關(guān)微生物的分別、純化培育敘述錯(cuò)誤的是()A．從土壤中篩選出某單一菌種一般用固體培育基，發(fā)酵工程一般用液體培育基B．平板劃線法和稀釋涂布平板法都是將樣液中的微生物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，再由單一細(xì)胞增殖形成單一菌落而達(dá)到分別純化的目的C．嚴(yán)格遵循無菌操作，既能防止雜菌污染培育物，又能防止培育物污染環(huán)境D．選擇培育基只允許特定種類的微生物生長，所以培育出來的肯定是純培育物13．[2024·山東德州二模]人們用木質(zhì)纖維素類生物材料生產(chǎn)燃料乙醇的過程中須要將纖維素轉(zhuǎn)化為單糖，再將單糖發(fā)酵轉(zhuǎn)化為乙醇?？蒲腥藛T分別得到了一種能將纖維素干脆轉(zhuǎn)化為乙醇的菌株A用于生產(chǎn)，發(fā)酵工藝經(jīng)過優(yōu)化后，乙醇的產(chǎn)量可達(dá)70%。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．篩選菌株A時(shí)可以運(yùn)用以纖維素為唯一碳源的選擇培育基B．可通過向培育基中添加較高濃度的乙醇來篩選產(chǎn)乙醇實(shí)力強(qiáng)的菌種C．纖維素轉(zhuǎn)化為單糖和單糖發(fā)酵產(chǎn)生乙醇的過程都只產(chǎn)生少量能量D．優(yōu)化后的發(fā)酵工藝不僅降低了生產(chǎn)成本，還降低了雜菌污染的風(fēng)險(xiǎn)14．[2024·山東濟(jì)寧二模]我國北方地區(qū)玉米秸稈還田時(shí)地溫低，秸稈降解慢?？蒲腥藛T從某冷涼地區(qū)弱酸性土壤中篩選出了具有高效降解纖維素實(shí)力的霉菌用來加速玉米秸稈低溫腐解。下列敘述錯(cuò)誤的是()A．可以采納稀釋涂布平板法對(duì)目標(biāo)菌株進(jìn)行分別和計(jì)數(shù)B．在擴(kuò)大培育目標(biāo)菌株時(shí)，須要在滅菌前將培育基調(diào)至弱酸性C．可以利用加入剛果紅染料的牛肉膏蛋白胨培育基篩選目標(biāo)菌株D．應(yīng)選擇在剛果紅培育基上菌落直徑與四周透亮圈直徑比值小的菌落進(jìn)行純化15．[2024·山東青島三模]如圖是探討人員從土壤中采集樣品，進(jìn)行纖維素分解菌的篩選過程示意圖，下列說法錯(cuò)誤的是()A．步驟②的培育過程可增加纖維素分解菌的濃度B．步驟③運(yùn)用蔗糖培育基，其中應(yīng)添加瓊脂和纖維素C．可依據(jù)選擇培育基上菌落的大小、形態(tài)和顏色等進(jìn)行初步篩選D．步驟④得到的纖維素分解菌可用顯微鏡干脆計(jì)數(shù)，活菌數(shù)量往往比計(jì)數(shù)結(jié)果低[答題區(qū)]題號(hào)1234789答案題號(hào)101112131415答案16．[2024·湖北武漢模擬]隨著人造板工業(yè)的不斷發(fā)展，人造纖維板在家具和裝修市場(chǎng)上的應(yīng)用日益頻繁。由于我國南方梅雨天氣的影響，導(dǎo)致南方地區(qū)纖維板較易發(fā)生霉變。霉變后的纖維板不僅影響產(chǎn)品外觀，而且嚴(yán)峻危害到運(yùn)用者的健康。在纖維板制作和運(yùn)用過程中利用防霉抗菌劑進(jìn)行防護(hù)處理，可以達(dá)到防霉的效果，提高纖維板的應(yīng)用價(jià)值。回答下列問題：(1)采集霉菌需用無菌棉簽，棉簽滅菌的常用方法是________________?，F(xiàn)供應(yīng)無菌棉簽、滅菌生理鹽水、剪刀和采樣管，寫出采集纖維板霉變微生物的簡要過程：________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(2)纖維板發(fā)生霉變主要是因?yàn)槊咕瑢?duì)采樣管中的霉菌，需利用________________法進(jìn)行菌株的分別培育，所用的培育基應(yīng)將pH調(diào)至________(填“酸性”“中性”或“堿性”)。(3)試驗(yàn)室常用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培育基(PDA培育基)培育霉菌，其配制配方如下：馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂20g、蒸餾水1L。其中馬鈴薯主要為霉菌生長供應(yīng)__________________________________(寫三項(xiàng))。現(xiàn)供應(yīng)PDA培育基、紫外燈、計(jì)時(shí)器和適量不同霉菌菌絲懸浮液。為探究紫外線輻照時(shí)長對(duì)不同霉菌生長的抑制作用，寫出試驗(yàn)思路：________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。17．[2024·四川成都石室中學(xué)模擬]生物愛好小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下試驗(yàn)，并勝利篩選到能降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培育基成分如表所示，試驗(yàn)步驟如圖所示。請(qǐng)分析回答問題：KH2PO41.4gNa2HPO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10g尿素1g瓊脂15g溶解后蒸餾水定容到1000mL(1)本試驗(yàn)所運(yùn)用的培育基按功能來分應(yīng)為________培育基。在飼料中添加尿素后，奶牛小腸總蛋白質(zhì)增加60%～85%，其緣由是__________________________________。(2)用來篩選分解尿素細(xì)菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(3)試驗(yàn)是否須要振蕩培育來提高溶氧量：______(填“是”或“否”)，緣由是________________________________________。轉(zhuǎn)為固體培育時(shí)，常采納__________________________________法接種，獲得單菌落后接著篩選。(4)若在稀釋倍數(shù)為105的三個(gè)培育基中，菌落數(shù)分別是156、174、183，則每克內(nèi)容物中尿素分解菌的數(shù)目為________個(gè)。(5)分別分解尿素的細(xì)菌試驗(yàn)時(shí)，甲同學(xué)從培育基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落。甲同學(xué)試驗(yàn)結(jié)果差異的緣由可能有________(填序號(hào))。①取樣不同②培育基污染③操作失誤④沒有設(shè)置比照(6)假如想要進(jìn)一步鑒定篩選出來的細(xì)菌是尿素分解菌，還應(yīng)當(dāng)怎么做？________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(7)為進(jìn)一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培育皿放置在37℃恒溫培育箱中培育24～48h，視察并統(tǒng)計(jì)具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果見表，其中合理的稀釋倍數(shù)為________。稀釋倍數(shù)103104105106107菌落數(shù)>500367248361818.[2024·寧夏石嘴山模擬]黃曲霉是常見的真菌，多見于發(fā)霉的糧食、糧制品及其它霉腐的有機(jī)物上。黃曲霉素是由黃曲霉產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，具有極強(qiáng)的毒性和致癌性?？蒲腥藛T用黃曲霉素B1(AFB1)的結(jié)構(gòu)類似物——香豆素(C9H6O2)篩選出能高效降解AFB1的菌株，詳細(xì)過程如圖所示，其中序號(hào)代表過程。請(qǐng)回答：(1)為了篩選到AFB1降解菌，應(yīng)在____________________________________上采樣。若將樣品稀釋液再稀釋10倍，詳細(xì)操作過程是______________________________。篩選AFB1降解菌試驗(yàn)時(shí)，圖中1號(hào)培育基的碳源是________，過程③所須要的工具有________________________________________________________________________(答出兩種)。(2)菌體對(duì)有機(jī)物的降解途徑有胞外分泌物降解和菌體吸附降解兩種。試驗(yàn)小組對(duì)降解菌的發(fā)酵液進(jìn)行離心，發(fā)覺上清液中AFB1的殘留率明顯低于菌沉淀液的。可推想，菌體降解AFB1的途徑主要是____________________。(3)經(jīng)檢測(cè)發(fā)覺上清液中存在多種蛋白質(zhì)，為驗(yàn)證蛋白質(zhì)K是降解AFB1的有效成分，科研小組設(shè)計(jì)了試驗(yàn)過程，如下表，表中①、②、③分別表示________(用“＋”或“－”表示)。假如驗(yàn)證勝利，則④與⑤的大小比較關(guān)系是________。不同處理或測(cè)定試管甲試管乙培育過降解菌的上清液①②蛋白質(zhì)K水解酶＋③一段時(shí)間后，分別加入含AFB1的培育基測(cè)定培育基中AFB1含量④⑤注：表中“＋”表示添加，“－”表示不添加，甲乙試管所加物質(zhì)的量均相同19．[2024·廣西玉林模擬]水污染是全球性的環(huán)境問題，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇(PVA)是存在于化工污水中的一種難以降解的大分子有機(jī)物，PVA分解菌能產(chǎn)生PVA酶分解PVA，PVA與碘作用時(shí)能產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，當(dāng)PVA被分解時(shí)藍(lán)綠色復(fù)合物消逝，形成白色透亮斑，請(qǐng)回答下列問題：(1)下表是篩選出能高效分解PVA的細(xì)菌的培育基配方，表中X物質(zhì)最可能為____________。試驗(yàn)中還應(yīng)設(shè)置完全培育液比照組，將菌液稀釋相同的倍數(shù)，比照組培育基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯________(填“多于”或“少于”)選擇培育基上的數(shù)目，從而說明選擇培育基具有篩選作用。成分MgSO4蛋白質(zhì)X物質(zhì)水瓊脂用量5g10g7g1000mL20g(2)要測(cè)定土壤稀釋液中微生物的數(shù)目，可在顯微鏡下用________________干脆計(jì)數(shù)。若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋104倍后，取0.1mL稀釋液勻稱涂布在選擇培育基表面，測(cè)得菌落數(shù)的平均值為160個(gè)，空白比照組平板上未出現(xiàn)菌落，則100mL原菌液中有PVA分解菌________個(gè)。(3)要鑒定分別出的細(xì)菌是否為PVA分解菌，培育PVA分解菌的培育基中除了加入必需的養(yǎng)分物質(zhì)外還須要加入________用于鑒別PVA分解菌。若用上述培育基比較不同菌株降解PVA實(shí)力大小，請(qǐng)簡要寫出設(shè)計(jì)思路：______________________________________________________________________________________________________________。

專題強(qiáng)化演練十六微生物的培育與應(yīng)用1．答案：A解析：成熟的植物細(xì)胞有中心大液泡，用高濃度蔗糖溶液處理，細(xì)胞會(huì)失水，成熟植物細(xì)胞能發(fā)生質(zhì)壁分別，因此用高濃度蔗糖溶液處理成熟植物細(xì)胞能視察到質(zhì)壁分別，A正確；向泡菜壇蓋邊沿的水槽中注滿水形成內(nèi)部無氧環(huán)境，不能創(chuàng)建無菌環(huán)境，B錯(cuò)誤；在用樣方法調(diào)查種群密度時(shí)，應(yīng)當(dāng)做到隨機(jī)取樣，而不是在目標(biāo)個(gè)體集中分布的區(qū)域劃定樣方調(diào)查種群密度，C錯(cuò)誤；對(duì)外植體進(jìn)行消毒可以削減外植體攜帶的微生物，但不能杜絕接種過程中的微生物污染，D錯(cuò)誤。2．答案：D解析：不含氮源的平板可用于固氮菌的培育，A錯(cuò)誤；平板涂布時(shí)涂布器運(yùn)用前必需浸在酒精中，然后在火焰上灼燒滅菌，這種操作屬于滅菌，不屬于消毒，B錯(cuò)誤；運(yùn)用后的培育基即使未長出菌落也要在丟棄前進(jìn)行滅菌處理，不能干脆丟棄，以免污染環(huán)境，C錯(cuò)誤；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素為唯一氮源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素獲得氮源而進(jìn)行生長繁殖，但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氮源而無法生長，因此以尿素為唯一氮源的平板能分別出合成脲酶的微生物，D正確。3．答案：D解析：探討目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌，因此既要耐高溫，又要能夠高效降解角蛋白，所以在c點(diǎn)取樣，并且用角蛋白氮源培育基進(jìn)行選擇培育，所以D正確，A、B、C錯(cuò)誤。4．答案：C解析：因?yàn)槿樗峋?jīng)過無氧呼吸產(chǎn)生乳酸，故其生活的環(huán)境是酸性，培育基pH需偏酸性，A錯(cuò)誤；平板劃線接種時(shí)不須要稀釋，B錯(cuò)誤；乳酸菌是厭氧型微生物，所以需在無氧條件下培育，C正確；泡菜汁中還有酵母菌等，因此分別得到的微生物不只有乳酸菌，D錯(cuò)誤。5．答案：（1）菌T能夠分泌纖維素酶（2）為合成微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)供應(yīng)原料（微生物細(xì)胞中的含氮物質(zhì)，如核酸、蛋白質(zhì)、磷脂）①把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底解除后，將鍋密閉；②為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min；③無菌包不宜過大，不宜過緊，各包袱間要有間隙，使蒸汽能對(duì)流易滲透到包袱中心，有利于蒸汽流通；④滅菌完成后，應(yīng)使鍋內(nèi)蒸氣壓力緩慢降低，排氣時(shí)間不少于10～12min（3）制造無氧環(huán)境排出二氧化碳酸性重鉻酸鉀（4）葡萄糖節(jié)約糧食、廢物利用、清潔環(huán)保、不污染環(huán)境、生產(chǎn)成本低、原料來源廣解析：（1）菌T能夠分泌纖維素酶，纖維素酶能將纖維素最終分解為葡萄糖，因此在粉碎的秸稈中接種菌T，培育一段時(shí)間后發(fā)覺菌T能夠?qū)⒔斩捴械睦w維素大量分解。（2）培育基的主要成分：水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，其中氮源主要為合成微生物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)供應(yīng)原料（微生物細(xì)胞中的含氮物質(zhì)，如核酸、蛋白質(zhì)、磷脂）。高壓蒸汽滅菌法的留意的事項(xiàng)有①把鍋內(nèi)的水加熱煮沸，將其中原有的冷空氣徹底解除后，將鍋密閉。假如高壓鍋內(nèi)的空氣未解除或未完全解除，則蒸汽不能達(dá)到飽和，蒸汽的溫度未達(dá)到要求的高度，結(jié)果導(dǎo)致滅菌的失敗；②為達(dá)到良好的滅菌效果，一般在壓力為100kPa，溫度為121℃的條件下，維持15～30min；③無菌包不宜過大，不宜過緊，各包袱間要有間隙，使蒸汽能對(duì)流易滲透到包袱中心，有利于蒸汽流通；④滅菌完成后，應(yīng)使鍋內(nèi)蒸氣壓力緩慢降低，排氣時(shí)間不少于10～12min，否則鍋內(nèi)蒸氣壓力突然降低，液體突然沸騰，沖走瓶蓋，使液體噴出或使容器裂開。（3）酒精的生產(chǎn)原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，將酵母菌接種到滅菌后的培育基中進(jìn)行酒精發(fā)酵，酒精發(fā)酵須要在無氧的條件下進(jìn)行，此時(shí)擰緊瓶蓋的主要目的是制造無氧環(huán)境。酵母菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，在發(fā)酵過程中密閉，所以須要依據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放出二氧化碳，酒精可用酸性重鉻酸鉀溶液來檢測(cè)，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。（4）與以糧食為原料發(fā)酵生產(chǎn)乙醇相比，利用纖維素為原料生產(chǎn)乙醇具有節(jié)約糧食、廢物利用、清潔環(huán)保、不污染環(huán)境、生產(chǎn)成本低、原料來源廣等優(yōu)點(diǎn)。6．答案：（1）氮源、碳源（2）A菌能在培育平板中生長繁殖（3）稀釋溶菌圈（4）假設(shè)P菌通過分泌某種化學(xué)物質(zhì)使A菌溶解裂開解析：（1）蛋白胨主要為細(xì)菌供應(yīng)氮源、碳源和維生素等。（2）將含有肯定濃度A菌的少量培育基傾倒在固體培育平板上，凝固形成薄層。培育一段時(shí)間后，薄層變渾濁，表明A菌能在培育平板中生長繁殖。（3）將含菌量較高的湖泊水樣稀釋后，依次分別涂布于不同的渾濁薄層上。培育一段時(shí)間后，能溶解A菌的菌落四周會(huì)出現(xiàn)溶菌圈。（4）依據(jù)供應(yīng)的試驗(yàn)材料和設(shè)備，圓形濾紙小片可用于汲取某種物質(zhì)，離心機(jī)可用于分別菌體和細(xì)菌分泌物，為探究P菌溶解破壞A菌的方式，可假設(shè)P菌通過分泌某種化學(xué)物質(zhì)使A菌溶解裂開。7．答案：D解析：100℃煮沸5～6min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢，①正確；酒精燈火焰旁邊存在一個(gè)無菌區(qū)，為了無菌操作，接種操作要在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行，②正確；培育基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌，該方法應(yīng)留意將壓力達(dá)到預(yù)定要求，③正確；指示劑和染料混有微生物，故加入培育基前需滅菌，④錯(cuò)誤；接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在運(yùn)用前，可以用紫外線消毒，但不能對(duì)操作人員進(jìn)行紫外線消毒，⑤錯(cuò)誤；將微生物的接種工具，如接種環(huán)、接種針或其他金屬工具，干脆在酒精燈火焰的充分燃燒層灼燒，可以快速徹底地滅菌，此外，在接種過程中，試管口或瓶口等簡單被污染的部位，也可以通過火焰灼燒來滅菌，⑥正確。綜上所述，錯(cuò)誤的是④⑤。A、B、C不符合題意，D符合題意。8．答案：D解析：利用僅以尿素作為唯一氮源的培育基，可以分別出土壤中能分解尿素的細(xì)菌，釋放脲酶，能分解尿素，A正確；以纖維素作為唯一碳源的培育基，可以分別出土壤中能分解纖維素的細(xì)菌，B正確；利用不含氮源的培育基，可以分別出土壤中的固氮細(xì)菌，將空氣中的游離氮轉(zhuǎn)化為化合態(tài)氮，C正確；硝化細(xì)菌屬于自養(yǎng)型細(xì)菌，能利用銨鹽氧化釋放出的能量將CO2轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物，須要在含氮源的培育基上生長，可以運(yùn)用不含有機(jī)物的培育基分別硝化細(xì)菌，D錯(cuò)誤。9．答案：A解析：以無機(jī)氮源（NH4）2SO4為唯一氮源的培育基屬于選擇培育基，可用于篩選硝化細(xì)菌，A正確；對(duì)于維生素等熱穩(wěn)定性不強(qiáng)的成分，不能用高壓蒸汽滅菌，B錯(cuò)誤；脲酶將尿素分解成氨，氨呈堿性，使培育基的pH上升，加入酚紅指示劑后變紅，C錯(cuò)誤；若本試驗(yàn)須要計(jì)數(shù)，只能采納稀釋涂布平板法，D錯(cuò)誤。10．答案：A解析：根瘤菌為固氮菌，可利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，所以培育基不添加氮源，但根瘤菌不能將無機(jī)物合成有機(jī)物，只能利用現(xiàn)成的有機(jī)物，培育基中須要加入碳源，A錯(cuò)誤；培育基滅菌后待冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰旁邊倒平板，因?yàn)樵摐囟葪l件剛好不燙手，且培育基為液態(tài)，有利于操作，B正確；分別純化該微生物可以用稀釋涂布平板法，也可用平板劃線法，以便于獲得目的菌種的單菌落，C正確；運(yùn)用后的培育基應(yīng)經(jīng)過高壓蒸汽滅菌處理后再丟棄，避開對(duì)環(huán)境和操作者造成影響，D正確。11．答案：C解析：對(duì)培育基常采納高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，A正確；試驗(yàn)中培育目的菌所用的培育基為選擇培育基，B正確；培育基應(yīng)先進(jìn)行滅菌，然后再倒入培育皿中，C錯(cuò)誤；該試驗(yàn)的目的是從土壤中篩選能夠抑制鐮刀菌生長的菌株，因此，采集土壤時(shí)應(yīng)從不患根腐病的玉米植株根部旁邊取樣，D正確。12．答案：D解析：選擇培育基一般用固體培育基，發(fā)酵工程一般在發(fā)酵罐中用液體培育基，A正確；平板劃線法和稀釋涂布平板法都可以分別純化微生物，都是通過將微生物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，再由單個(gè)細(xì)胞增殖形成單一菌落，B正確；培育前滅菌，可以防止雜菌污染培育物；培育完成后進(jìn)行滅菌，可以防止培育物污染環(huán)境，C正確；選擇培育基通過條件限制，只允許特定種類的微生物生長，例如以尿素為唯一氮源的選擇培育基篩選出尿素分解菌，但尿素分解菌不只一種，故培育出來的不肯定是純培育物，D錯(cuò)誤。13．答案：C解析：分析題意可知，本試驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選能將纖維素干脆轉(zhuǎn)化為乙醇的菌株，則培育基應(yīng)以纖維素為唯一碳源，在該培育基上只有能利用纖維素的菌株能生存，A正確；要篩選的目的菌能夠?qū)⒗w維素干脆轉(zhuǎn)化為乙醇，可通過向培育基中添加較高濃度的乙醇來篩選產(chǎn)乙醇實(shí)力強(qiáng)的菌種，B正確；纖維素轉(zhuǎn)化為單糖不產(chǎn)生能量，單糖發(fā)酵產(chǎn)生乙醇的過程是無氧呼吸過程，該過程中只有第一階段產(chǎn)生少量能量，C錯(cuò)誤；發(fā)酵工藝經(jīng)過優(yōu)化后，乙醇的產(chǎn)量可達(dá)70%，該過程不僅降低了生產(chǎn)成本，同時(shí)利用酵母菌進(jìn)行發(fā)酵還降低了雜菌污染的風(fēng)險(xiǎn)，D正確。14．答案：C解析：稀釋涂布平板法是將待分別的菌液經(jīng)過大量稀釋后，勻稱涂布在培育基表面，經(jīng)培育后可形成單個(gè)菌落，可以采納稀釋涂布平板法對(duì)目標(biāo)菌株進(jìn)行分別和計(jì)數(shù)，A正確；為防止雜菌污染，培育基制備時(shí)須要先調(diào)pH后滅菌，由于培育的是霉菌，須要將pH調(diào)制弱酸性，B正確；分析題意，本試驗(yàn)?zāi)康氖呛Y選具有高效降解纖維素實(shí)力的霉菌，則應(yīng)以纖維素為唯一碳源，而不能用牛肉膏蛋白胨，C錯(cuò)誤；由于剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，因此在纖維素分解菌四周會(huì)因纖維素被分解形成透亮圈，透亮圈越大，分解纖維素的實(shí)力越強(qiáng)，因此須要選擇菌落直徑與透亮圈直徑比值小的菌落進(jìn)行純化，D正確。15．答案：B解析：步驟②是富集培育，可增加纖維素分解菌的濃度，A正確；步驟③運(yùn)用以纖維素為唯一碳源的培育基，其中應(yīng)添加瓊脂作為凝固劑，B錯(cuò)誤；不同的微生物形成的菌落特征一般不同，纖維素分解菌的初步篩選可以依據(jù)菌落的大小、形態(tài)和顏色等進(jìn)行，C正確；篩選出的纖維素降解菌可用顯微鏡干脆計(jì)數(shù)，由于該方法不能區(qū)分死菌與活菌，因此實(shí)際數(shù)量往往比統(tǒng)計(jì)結(jié)果低，D正確。16．答案：（1）高壓蒸汽滅菌（法）用浸有滅菌生理鹽水的無菌棉簽在霉變纖維板表面反復(fù)涂抹多次，剪去與手接觸部分的棉棒，將棉簽放入含肯定量滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)（2）稀釋涂布平板酸性（3）無機(jī)鹽、碳源和氮源等無菌條件下取適量不同霉菌菌絲懸浮液，涂布于PDA培育基中，于紫外燈下分別照耀10min、15min和30min（不同時(shí)間）后，在相宜條件下培育5d（肯定時(shí)間），比照組不經(jīng)紫外燈照耀處理，視察菌落生長狀況解析：（1）微生物培育的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，其中對(duì)棉簽的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌（法）；采集纖維板霉變微生物的方法：用浸有滅菌生理鹽水的無菌棉簽在霉變纖維板表面反復(fù)涂抹多次，剪去與手接觸部分的棉棒，將棉簽放入含肯定量滅菌生理鹽水的采樣管內(nèi)。（2）分別培育采樣管中的霉菌，通常采納稀釋涂布平板法；不同微生物對(duì)于pH的要求不用，其中霉菌屬于真菌，相宜在酸性條件下培育。（3）馬鈴薯能為霉菌生長供應(yīng)無機(jī)鹽、碳源和氮源等；探究紫外線輻照時(shí)長對(duì)纖維板霉變微生物生長的抑制作用，試驗(yàn)的自變量是輻照時(shí)長，因變量是對(duì)微生物的抑制作用，試驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循比照與單一變量原則，故試驗(yàn)思路：無菌條件下取適量不同霉菌菌絲懸浮液，涂布于PDA培育基中，于紫外燈下分別照耀10、15和30min（不同時(shí)間）后，在相宜條件下培育5d（肯定時(shí)間），比照組不經(jīng)紫外燈照耀處理，視察菌落生長狀況。17．答案：（1）選擇增加了瘤胃中微生物的氮源，被微生物利用合成微生物蛋白質(zhì)（2）為細(xì)菌生長供應(yīng)無機(jī)鹽，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定（3）否瘤胃中的微生物多為厭氧菌，接觸空氣后會(huì)死亡平板劃線法或稀釋涂布平板（4）1.71×108（5）①②③（6）一是設(shè)置比照試驗(yàn)，用該培育基不接種樣品視察；再配制一組完全培育基，接種該樣品培育視察。二是最終要對(duì)該微生物進(jìn)行鑒定，用酚紅指示劑鑒定該微生物的菌落，看指示劑是否變紅（7）106或105解析：（1）培育基中加入尿素的目的是篩選能高效降解尿素的目的菌，這種培育基屬于選擇培育基。在飼料中添加尿素后，奶牛小腸總蛋白質(zhì)增加60%～85%，其緣由是增加了瘤胃中微生物的氮源，被微生物利用合成微生物蛋白質(zhì)。（2）用來篩選分解尿素細(xì)菌的培育基含有KH2PO4和Na2HPO4，可以為細(xì)菌生長供應(yīng)鉀、鈉、磷等無機(jī)養(yǎng)分，同時(shí)，二者構(gòu)成緩沖對(duì)，作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定。（3）依據(jù)題意，目的菌為來自于牛和山羊的瘤胃中的微生物，因此，試驗(yàn)中不須要振蕩培育來提高溶氧量，因?yàn)榱鑫钢械奈⑸锒酁閰捬蹙佑|空氣后會(huì)死亡。轉(zhuǎn)為固體培育時(shí)，為了獲得單菌落，常采納平板劃線法或稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，獲得單菌落后再接著篩選。（4）若在稀釋倍數(shù)為105的三個(gè)培育基中，菌落數(shù)分別是156、174、183，平板上菌落數(shù)的平均值為（156＋174＋183）÷3＝171，則每克內(nèi)容物中尿素分解菌的數(shù)目為171÷0.1×105＝1.71×108。（5）依據(jù)生物試驗(yàn)應(yīng)遵循比照原則、等量原則、單一變量原則和限制無關(guān)變量原則，A同學(xué)的試驗(yàn)結(jié)果比其他同學(xué)多，可能是培育基污染造成的，還可能是A同學(xué)試驗(yàn)操作過程中污染造成的，也可能是與其他同學(xué)所取土壤樣品不同造成的：①土樣不同可能導(dǎo)致計(jì)數(shù)偏差，①正確；②培育基污染會(huì)導(dǎo)致菌落數(shù)增加，②正確；③操作失誤可能增加微生物的數(shù)量和種類，菌落會(huì)增多，③正確