實驗室病原微生物危害評估報告

實驗室病原微生物第1版邵武市第二醫(yī)院檢驗科實驗室病原微生物危害評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG版本/修訂號：1/0生效日期：20100403序號頁碼3第一章檢驗科實驗室活動生物危害評估報告第二章人類免疫缺陷病毒HIV的危害評估第三章結(jié)核分枝桿菌的生物危害評估報告第四章霍亂弧菌的生物危害評估報告第五章流感病毒的生物危害評估報告第六章梅毒螺旋體的生物危害評估報告第七章SARS冠狀病毒的生物危害評估報告第八章腦炎病毒的生物危害評估報告第九章淋病奈瑟氏菌的生物危害評估報告第十章鼠疫耶爾森菌的生物危害評估報告第十一章傷寒桿菌的生物危害評估報告第十二章肝炎病毒的生物危害評估報告第十三章禽流感病毒的生物危害評估報告第十四章腸道病毒71型的生物危害評估報告第十五章漢坦病毒的生物危害評估報告第十六章炭疽芽胞桿菌的生物危害評估報告邵武市第二醫(yī)院檢驗科實驗室病原微生物危害評估報告版本/修訂號：1/0批準令生效日期：20100403經(jīng)實驗室生物安全管理委員會審核、研究，批準本《實驗室病原微生物危害評估報告》,并即時生效，請相關(guān)部門遵照執(zhí)行!邵武市第二醫(yī)院實驗室生物安全管理委員會2011年12月3日5版本/修訂號：1/0生效日期：20100403為保證實驗室工作人員在工作中不被危害性生物及物品所侵害，保證危害性物品不外泄，對實驗室工作環(huán)境進行評估，以鑒定生物安全防護等級，保證生物安全。一、危害程度分類及生物安全防護水平評估本檢驗科是為醫(yī)院診斷、預防、治療人體疾病或評估人體健康提供信息為目的，對來自人體的材料進行臨床生物化學、臨床微生物、臨床免疫學、臨床血液、細胞遺傳學等檢驗的實驗室。生物源危害主要是由各種檢驗標本中的微生物，尤其是病原微生物引起的，包括細菌、病毒、寄生蟲等，具有潛在危險性，可能引起實驗室感染；檢驗科微生物室還進行一定數(shù)量的各種條件致病性細菌及真菌的分離培養(yǎng)工作，工作過程存在病原微生物對實驗人員、環(huán)境污染的風險；除之以外實驗室還存在觸電、火災、化學品腐蝕、偷盜等危險。根據(jù)《實驗室生物安全通用要求》,本檢驗科不涉及《人間傳染的病原微生物名錄》中高致病性微生物的分離培養(yǎng)及高致病性微生物的菌、毒種的保藏，實驗室采用一定防護措施就能控制感染或防范災害，或者對相應病原體存在有效的免疫方法。評估我檢驗科生物安全防護水平按二級實驗室(BSL-2)生物安全要求。二、實驗人員和實驗室安全防護的一般要求(1)實驗室工作區(qū)內(nèi)絕對禁止吸煙；(2)點燃的香煙是易燃液體的潛在火種；(3)香煙、雪茄或煙斗都是傳染細菌和接觸毒物的途徑。2.實驗區(qū)內(nèi)食用食物、飲料及其它危害評估及防護(1)實驗工作區(qū)內(nèi)不得有食物、飲料及存在“手一口”接觸可能的其它物質(zhì)(2)實驗室工作區(qū)內(nèi)的冰箱禁止存放食物。專用存放食物的冰箱應放置在允許進食、喝水的休息區(qū)內(nèi)。3.使用化妝品危害評估及防護實驗工作區(qū)內(nèi)禁止使用化妝品進行化妝，但允許并建議經(jīng)常洗手的實驗人員使用護手霜。4.實驗中眼睛和面部的風險評估及防護(1)處理腐蝕性或毒性物質(zhì)時，須使用安全鏡、面罩或其它保護眼睛和面部的防護用品。(2)工作人員在實驗室的危險區(qū)內(nèi)不要佩戴隱形眼鏡，除非同時使用護目鏡或面罩。(3)使用、處理能夠通過粘膜和皮膚感染的試劑，或有可能發(fā)生試劑濺溢的情況時，必須佩帶護目鏡、面罩或面具式呼吸器。5.實驗中服裝和個人防護裝備的一般要求(1)應穿著符合實驗室工作需要的服裝，工作服應干凈、整潔。當工作中有危險物噴濺到身上的可能時，應使用一次性塑料圍裙或防滲外罩。有時還需要佩戴其它防護裝備如：手套、護目鏡、披肩或面罩等。(2)采血員和其他需要接觸病員的工作人員，在接觸病員時需穿實驗服或工作服。(3)個人防護服裝應定期更換以保持清潔，遇被危險物品嚴重污染，則應立即更換6版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(4)不得在實驗室內(nèi)設(shè)值班床，嚴禁在實驗室內(nèi)住宿。6.實驗中足部防護的一般要求位，可加套一次性防滲漏鞋套。帆布鞋可吸收化學物品和有傳染7.實驗中頭發(fā)和飾物的風險評估及防護作區(qū)。頭發(fā)不得垂肩，應與離心機、切片機等正8.實驗中胡須的風險評估及防護蓄有胡須的男性工作人員必須遵守上項(7)的規(guī)定。復使用或用手重裝在針管上。一次性注射器上的針在專用銳器盒內(nèi)，在完全裝滿之前或48小時之內(nèi)更換。(1)“清潔”區(qū)和“非清潔”區(qū)施，防止電話、視頻顯示器終端、鍵盤、門柄及其它經(jīng)常被手或手污染，要求工作人員在觸摸設(shè)備(如計算機鍵盤及電話的保護罩等)前取下手套，制定儀被指定為“非清潔”的區(qū)域，允許戴手套接觸所有物品(如電話它物品),所有這些物品的表面都認為是不清潔的。未戴手套的人員如果使用該區(qū)域內(nèi)的電(2)冰箱、冷凍柜、水浴和離心機應該定期清洗和消毒(時間由實驗室主任來決定),在發(fā)生嚴重污染后應立即進行清洗和消毒。進行清洗、消(3)外衣：外衣(實驗服、工作服、和圍裙)應懸掛在遠離散熱器、蒸汽管道、供暖裝7版本/修訂號：1/0生效日期：20100403置、以及有明火的地方，不要掛在壓縮氣瓶或滅火器上，也不要掛在門的玻璃隔板上，妨礙視線?！扒鍧崱钡暮汀胺乔鍧崱钡膫€人防護服要分開存放。(4)垃圾處理：每天至少清理垃圾一次。(5)裝飾：不得在電燈、燈座或儀器上進行裝飾，更不要使用電子裝飾物、蠟燭、圣誕樹等有引起火災危險的裝飾品。(6)為便于清潔消毒，實驗室內(nèi)不應有織物裝飾的用具或椅子。(7)個人物品：實驗工作區(qū)不得存放個人物品，如錢包、外套、皮靴、咖啡杯、運動服、預包裝的食品和藥品等。(8)實驗室內(nèi)應配備應急設(shè)備，如應急洗眼裝置，酒精等消毒用品。(9)實驗室應安裝非手觸式洗手裝置。(10)實驗室內(nèi)應安裝防蚊蠅裝置，應定期投撒滅蟑螂、老鼠的藥物。(11)用后的廢棄物品：實驗工作區(qū)內(nèi)的用后廢棄物品存量不要太大。具危險性的液體如酸或堿性液體應放在視平線以下。較大的廢棄物容器應靠近地面存放。(12)出口通路：實驗室的出口和通道必須保持暢通無阻，不準堆放物品、垃圾、裝置、或設(shè)備。安全門必須保持暢通，不得堵塞。注意：無論任何時間、何種原因都不得阻塞通往滅火器、火警箱、防火毯、安全淋浴或出14.使用玻璃器具的危害評估及防護操作玻璃器具時應遵循下述安全規(guī)則：(1)不使用破裂或有缺口的玻璃器具。(2)不要用猛力取下玻璃試管上的塞子，粘緊的試管可用刀切開分離。(3)接觸過傳染性物的玻璃器具，清洗之前，應先行消毒。(4)破裂的玻璃器具和玻璃碎片應丟棄在有專門標記的、單獨的、不易刺破的容器里。(5)高熱操作玻璃器具時應戴隔熱手套。(6)在不影響實驗質(zhì)量的前提下，應盡量減少使用玻璃器具。極少粘膜(眼結(jié)膜)可能可能極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)極少介)極少(1)氣溶膠：離心過程中應控制氣溶膠的產(chǎn)生在最低水平。(2)操作：離心機只有在蓋好蓋板后，才能啟動。(3)傳染性物品：所有能夠產(chǎn)生氣溶膠進行播散的生物制品或標本，都應使用密封的離心管，并在蓋緊的離心頭或轉(zhuǎn)頭中進行。(4)為防止氣溶膠飛溢，應在離心停止30分鐘后打開離心物。(5)清洗：按照消毒隔離制度要求清洗離心機。(6)平衡：離心時應保持合適的平衡，以保證離心的順利進行。8版本/修訂號：1/0生效日期：20100403極少粘膜(眼結(jié)膜)極少可能極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)可能介)極少盜竊可能極少無(1)每天早晨用500mg/L的”84”消毒液擦拭抽血臺面及其它物表，并開紫外燈消毒至少30分鐘，并做好記錄。(2)工人每天早晨更換消毒液，包括浸泡銳器、止血帶的消毒液和手消毒液。(3)工作人員必須穿工作服，戴好口罩、帽子、和手套。(4)使用合格的一次性用品。嚴禁使用包裝破損，超過有效期的一次性用品。(5)嚴格執(zhí)行無菌技術(shù)操作規(guī)程、靜脈采血必須一人一針一管一巾一帶。微量采血應做到一人一針一管一片，對每位病人操作前洗手或手消毒。(6)無菌物品如棉球需每天更換，開啟后使用不得超過24小時。(7)工作人員需對銳器如采血針采取高度預防措施，用過的采血針需浸泡在含有消毒液的厚壁容器中。極少粘膜(眼結(jié)膜)可能可能極少經(jīng)血(針刺傷、切割傷)極少介)極少盜竊可能無無(1)為了避免液滴和氣溶膠和擴散，實驗室儀器加樣、加液，清洗等過程應在封閉罩內(nèi)進行的。(2)實驗中使后的比色盤，反應杯等廢棄物應當收集在封閉的容器內(nèi)，集中處置。(3)在每一步完成后應根據(jù)操作指南對對儀器進行消毒。血液、體液污染物表時，應立即消毒。(4)工作人員要戴手套進行操作。粘膜(眼結(jié)膜)9版本/修訂號：1/0生效日期：20100403經(jīng)血(針刺傷、切割傷)介)極少盜竊可能可能無(1)每天早晨做好實驗室的清潔消毒工作。(2)工作人員要戴口罩、手套進行操作。(3)實驗中使用的竹簽用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。(4)廢棄的標本連同試管、蓋帽要用1000mg/L“84”消毒液浸泡，由工人統(tǒng)一清潔后進行無害化處理。(5)實驗中使用的吸頭、一次性塑料杯用后要用1000mg/L“84”消毒液浸泡。(6)標本污染物表時，應立即消毒。(7)離心時，發(fā)生試管破裂或標本濺出，由操作者負責用有效消毒劑對離心機內(nèi)部進行及時消毒處置?？赡苷衬?眼結(jié)膜)可能可能可能經(jīng)血(針刺傷、切割傷)可能介)可能盜竊可能極少無(1)每天早晨開紫外燈消毒空氣至少30分鐘，同時做好各物表、儀器的清潔消毒工作。(2)實驗人員要戴手套、帽子進行操作。當估計會出現(xiàn)微生物和危險物濺出時要戴好眼(3)操作中使用的接種環(huán)、鑷子等金屬物品要在酒精燈火焰上燒灼滅菌。(4)可能產(chǎn)生致病性微生物氣溶膠或出現(xiàn)濺出的操作如涂片、接種時，應在生物安全柜內(nèi)操作，并使用個體防護設(shè)備。(5)實驗室內(nèi)的各種標本、菌種、培養(yǎng)基和其它廢棄物在運出實驗室前必須滅活(高壓、浸泡),需運出實驗室滅活的物品必須放在專用的密閉容器中。(6)操作過程中發(fā)生菌種污染物表時，應馬上采取措施進行物表消毒。(7)當發(fā)生致病性微生物氣溶膠污染時，應馬上進行人員疏散，通知負責人到現(xiàn)場進行指導消毒。(8)對菌種的保存應嚴格遵守菌種保存制度，嚴禁擅自保存各種國家法定傳染病菌株或毒株。(9)實驗人員離開實驗室前要去除手套，確認無污染或污染已排除，后方可洗手離去。(10)微生物、PCR實驗室要設(shè)置紗窗、擋鼠板。三、特定實驗活動危害評估(見以下章節(jié)之各種病原體的危害評估)版本/修訂號：1/0生效日期：20100403本實驗室共有技術(shù)人員6名，其中申請進入BSL-2實驗室6名。學士學位15名，2名全手冊并通過定期培訓及考核成績合格，經(jīng)體檢無現(xiàn)患3名無其他患傳染性疾病的技術(shù)人員，健康狀態(tài)良好。本次評估本實驗室共19項可能潛在危險的實驗活動，在實驗操作實驗施過程中在無控制措施情況下可能產(chǎn)生的高危害度5項，中度14項，低度0項；對危害發(fā)生的可能性分析，實驗危害較大可能發(fā)生的有0項，可能發(fā)生5項，較少可能發(fā)生14項；這些危害造成高度嚴重后果的5項，后果嚴重性中度的14項，后果嚴重性低度的0項。根據(jù)擬采取的預防控制措施后依然存在的殘留風險為高度0項，中度0項，低度危害19項。評估：邵武市第二醫(yī)院檢驗科2010年4月3日邵武市第二醫(yī)院檢驗科邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-02版本/修訂號：1/0生效日期：20100403第二章人類免疫缺陷病毒HIV的生物危害人類免疫缺陷病毒(HIV)病毒特異性地侵犯CD4*T淋巴細胞，造成機體為AIDS,病死率極高。到目前為止，還沒有找到一種治愈該病的方法。胞性又有嗜神經(jīng)性，主要感染CD4+T淋巴細胞，也能1.2HIV的抵抗力：HIV對外界抵抗力較弱，對熱敏感，56℃30分鐘能滅活。25%以上濃度的酒精即能滅活病毒，70%的效果最好；0.2%次氯酸鈉、5%～8%甲醛及有機氯溶液等均能滅活病毒。但對0.1%甲醛溶液、紫外線和x射線不敏天，在干燥的玻璃上可維持幾天。美國CDC證明干燥環(huán)境中的HIV濃度在幾小時內(nèi)降低90%～99%。2.1傳染源：病人和無癥狀病毒攜帶者是主要的傳染源，前者的傳染性最強，2.2傳播途徑：世界公認的傳播途徑有三種，即性傳播、血液傳播及母嬰傳播。2.3人群易感性：各個年齡均可感染，但同性戀和性亂交者，靜脈毒癮者，血友病患者，接受血、血制品或器官移植者，父母是HIV感染者的兒童，受感染邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-02版本/修訂號：1/0生效日期：20100403的危險性比較大，屬高危人群，發(fā)病年齡主要為40歲以下的青狀年。3.臨床表現(xiàn)本病潛伏期較長，HIV-1侵入機體后2～10年左右可以發(fā)展為AIDS,HIV-24.實驗模式及危害因素分析因此對于未知樣品的檢測具有潛在危險性；而對于直接接觸HIV感染者或艾滋4.2HIV核酸檢測：樣品有全血、血漿、組織和其他分泌物，有時還包括生物制品，此類標本具有潛在危險性，對于HIV感染者或艾滋病病人的樣品，實驗4.3HIV病毒培養(yǎng)：培養(yǎng)物中含大量的HIV,對于實驗人員具有相當高的傳染危險性。應該在P3實驗室內(nèi)進行操作，同時嚴格做好個人5.安全保障措施5.1個人防護5.1.1高標準的個人保健對于減少感染的危險性很重要。皮膚受損、生病都會5.1.2進實驗室前要摘除首飾，修剪長的帶刺的指甲，以免刺破手套。5.1.3進入實驗室應穿隔離衣，戴手套。如果接觸物傳染危險性大，則應戴雙邵武市第二醫(yī)院檢驗科邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-02版本/修訂號：1/0生效日期：201004035.1.4離開實驗室前必須脫去隔離衣并洗手。5.1.5嚴禁在艾滋病檢測實驗室內(nèi)進食、飲水、吸煙和化妝。5.1.6減少實驗室內(nèi)利器的使用。5.2帶入和帶出實驗室的物品5.2.1對所有帶入實驗室的物品都應進行檢查。含有測試樣品的包裹應在安全5.2.3污染或可能造成污染的材料在帶出實驗室前應進行消毒。5.3消毒方法5.3.1廢棄物缸：10%(V/V)次氯酸鈉(含10,000ppm有效氯)。5.3.2生物安全柜工作臺面和儀器表面：70%乙醇。5.3.3溢出物：10%次氯酸鈉(V/V)。5.3.4污染的臺面和器具：40%甲醛水溶液，也可以用過氧化氫或過氧乙酸邵武市第二醫(yī)院檢驗科邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-03版本/修訂號：1/0生效日期：20100403結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌(偶爾可由牛型或非洲型分枝桿菌)引起的一種細呼吸道感染(respiratortractinfection)是肺結(jié)核的主要傳染途徑(routesof肺結(jié)核患者(尤其是痰涂片陽性未經(jīng)治療者)。飛沬核(dropletnuclei)<10μ危害等級。結(jié)核分枝桿菌屬于3級危險。3級危險(對個體具有極大危害，對群體具有較大的危害性):指有特殊危(一)技術(shù)操作可能導致的感染及其預防措施。1.接種：應使用無彈力的鉑絲接種環(huán)，結(jié)核菌接種后接種環(huán)火焰滅菌易崩2.混勻：吸管吸吹菌液時不要產(chǎn)生氣泡，應沿容器壁排出。3.研磨：最好使用組織研磨器，乳缽易產(chǎn)生氣溶膠。4.移液：吸管上端的棉花松緊要適度，吸液時要從管底吸取，吹出時要輕5.開封：要避免壓力和氣流的急劇變化。6.離心：離心管套底墊要完好，使用匹配的管、套、離心頭，加蓋。7.注射：做好個人防護，正確使用注射器。8.搬運：室內(nèi)移動要避免滑落，移出室外要有堅實密閉的外包裝。(二)技術(shù)保障1.雙人原則，不允許單人操作1、2類病原。2.入口處應有危險警示標識，并標明所操作的微生物的種類。4.完備的管理措施，技術(shù)操作規(guī)范。版本/修訂號：1/0生效日期：20100403結(jié)核病實驗室工作人員，在分枝桿菌檢驗過程中，會接觸到各種潛在感染源標本和各種危險物，特別是許多操作易產(chǎn)生分枝桿菌氣溶膠。含有結(jié)核分枝桿菌的微滴核(1-5微米)通過呼吸進入人體肺泡，可以黏附在肺泡內(nèi)生長繁殖。因此，首先要對實驗室中生物危險物產(chǎn)生的途徑和存在的地點有充分的認識，以便明確生物安全防護的環(huán)節(jié)。(一)分枝桿菌存在的地點1、各種臨床標本，通常是痰，胃或支氣管灌洗液、腦脊液、尿液等。2、被污染的操作臺、器械、儀器、試劑等。3、收集的結(jié)核分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌菌株等。4、細菌學實驗室的部分區(qū)域。(二)產(chǎn)生分枝桿菌氣溶膠1、實驗室內(nèi)可疑肺結(jié)核患者痰標本的采集。2、樣本的制備和涂片的火焰固定。3、分離培養(yǎng)或接種培養(yǎng)物。4、用火焰燒灼接種環(huán)。5、使用移液器混合培養(yǎng)物。6、培養(yǎng)管或培養(yǎng)瓶中含有培養(yǎng)物的滴落物。7、溢出的分枝桿菌懸浮液。8、高速混合含有分枝桿菌的液體。9、轉(zhuǎn)移液態(tài)培養(yǎng)物和上清液，或培養(yǎng)液、上清液的傾倒。10、離心過程中離心管的破碎。11、用做原代培養(yǎng)所需的組織勻漿。安全防護(一)嚴格遵守實驗室安全操作規(guī)程，任何時侯都要警惕分枝桿菌氣溶膠的產(chǎn)生。實驗室的技術(shù)人員必須經(jīng)過生物安全培訓后方可上崗。(二)實驗室應嚴格限制非實驗人員進入，減少實驗室內(nèi)外交叉生物污染。完成實驗工作離開實驗室，要關(guān)好門窗。(三)進入實驗室應避免攜帶非必需物品。(四)進入實驗室，工作人員應穿著工作服，操作時應穿戴防護隔離衣、口罩、帽子和手套，長發(fā)者應將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。(五)實驗過程中絕對禁止吸煙、飲食等，不要以手撫頭面部等。(六)試驗前須開啟紫外線燈對實驗室和操作區(qū)域進行照射消毒1小時以上；試驗結(jié)束后，立即開啟紫外燈進行照射消毒2小時以上。(七)任何試驗的開始和結(jié)束后，操作人員要用70%酒精浸泡雙手或仔細擦后，用清潔劑或清水洗凈。(八)每次試驗結(jié)束后，必須清理好實驗臺，并用70%酒精液或3-5%石炭酸擦洗實驗臺面。(九)實驗室中的生物危險品要根據(jù)檢查項目和性質(zhì)不同，局限在相應的試驗區(qū)間，不得隨意將其帶到其它的實驗室。版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(十)實驗室內(nèi)任何微生物的樣本，廢棄物都必須經(jīng)高溫高壓滅菌后，方可按一般垃圾處理。安全保障(一)首先各級實驗室應按等級要求完善實驗設(shè)施，如簡易安全柜內(nèi)的抽氣排風功能、紫外燈消毒功能，生物安全柜維護與除菌濾膜定期更換等。(二)實驗室采集病人痰標本時應在戶外進行，避免因病人咳漱造成室內(nèi)氣(三)普通實驗室應注意氣流方向，實驗過程中盡量避免強氣流變化而產(chǎn)生氣溶膠(如：涂片、染色過程中)。(四)細菌的分離培養(yǎng)、菌種開封、轉(zhuǎn)種、研磨、稀釋等操作，各級實驗室均應在簡易安全柜或生物安全柜中進行。(五)使用接種環(huán)進行操作時，接種環(huán)應在工作燈的內(nèi)焰中燃燒，以避免菌液或菌塊飛濺。(六)稀釋菌液時，吸管、針管要緩慢插入試管或燒瓶底部，小心操作避免產(chǎn)生氣泡或氣溶膠。(七)使用注射器加樣時，用過的針頭切勿再重新入套或拔開注射器與針頭，應直接放入銳器收集器，以免劃破皮膚造成接種感染。(八)菌株庫要設(shè)專人管理，并按照國家微生物菌毒種管理辦法執(zhí)行。(九)進行毒菌操作過程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護性手套觸摸門柄、儀器或毒菌區(qū)以外區(qū)域，避免由于粗心擴大污染范圍。(十)試驗結(jié)束后，操作過程中所有可能與生物危險物接觸或被污染的試驗器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進行高壓消毒的設(shè)備、儀器，應使用有效的消毒劑擦洗后再以紫外燈近距離長時間消毒。(十一)實驗中發(fā)生意外污染情況，應立即通知主管人員并做好處理污染物和相應區(qū)域的準備，不得擅自采用其它禁止的方法進行消毒處理。(十二)實驗室主任應制定規(guī)章和程序，只有告知潛在風險并符合進入實驗室特殊要求(如，經(jīng)過免疫接種)的人，才能進入實驗室。(十三)操作致病性微生物時，實驗室入口處應貼有生物危險標志，并顯示以下信息：有關(guān)病原、生物安全級別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話號碼、在實驗室中必須佩帶的個人防護設(shè)施、出實驗室所要求的程序。(十四)實驗室主任為實驗室人員特別制定的標準操作程序或生物安全手冊中，應包括生物安全程序。對于有特殊風險的人員，要求閱讀并在工作及程序上遵照執(zhí)行。(十五)實驗室主任保證實驗及其輔助人員接受適當?shù)呐嘤?，包括和工作有關(guān)的可能存在的風險、防止暴露的必要措施和暴露評估程序。(十六)實驗室所用任何個人防護裝備應符合國家有關(guān)標準的要求。實驗室應確保具備足夠的有適當防護水平的清潔防護服供使用。還應穿戴其它的個人防護裝備，如手套、防護鏡、面具、頭部面部保護罩等。(十七)處理樣本的過程中易產(chǎn)生高危害氣溶膠時，要求同時使用適當?shù)膫€人邵武市第二醫(yī)院檢驗科邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-03版本/修訂號：1/0生效日期：20100403防護裝備、生物安全柜和/或其它物理防護設(shè)備。如可產(chǎn)生含生物因子的氣溶膠，應在適當?shù)纳锇踩裰胁僮鳌?十八)實驗用鞋應舒適，鞋底防滑。應用皮制或合成材料的不滲液體的鞋類。在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時可穿一次性防水鞋套。在實驗室的特殊區(qū)域(例如有防靜電要求的區(qū)域)或BSL-3和BSL-4實驗室要求使用專用鞋(例如一次性或橡膠靴子)。結(jié)核病實驗室廢物處理一、實驗室廢棄物處理的目的：(一)將操作、收集、運輸、處理及處置廢棄物的危險減至最?。?二)將實驗室廢棄物對環(huán)境的有害作用減至最小。二、實驗室污物處理及消毒(一)實驗室含有生物危險物的臨床標本及被污染的一次性用品，試驗完成后，應在操作臺或?qū)嶒瀰^(qū)域內(nèi)以紫外燈近距離照射消毒2小時以上，再經(jīng)高壓消毒后方可丟棄或焚燒。(二)可重復使用的實驗用品及器材，完成實驗后，應在操作臺或?qū)嶒瀰^(qū)域內(nèi)經(jīng)紫外燈近距離照射消毒2小時以上后，再交有關(guān)人員進行高壓消毒和煮沸洗(三)實驗用的試管、吸管、注射器，須裝在加蓋不漏的容器內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后取出。(四)培養(yǎng)物或?qū)嶒炇依趤G棄前必須經(jīng)高壓消毒和紫外燈近距離長時間照射處理。不允許積存垃圾和實驗室廢棄物。已裝滿的容器應定期運走。在去污染或最終處置之前，應存放在指定的安全地方，通常在實驗室區(qū)內(nèi)。(五)實驗室廢棄物應置于適當?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\出實驗室。有害氣體、氣溶膠、污水、廢液應經(jīng)適當?shù)臒o害化處理后排放，應符合國家相關(guān)的要(六)實驗過程中，如標本或含標本的前消化處理液被打翻污染了操作臺或地面，應以吸滿70%酒精的衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū)，15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去。(七)實驗室內(nèi)未經(jīng)消毒的污水，禁止直接排入公共排水系統(tǒng)，更不允許混入居民生活垃圾。意外事故的處理(一)如果發(fā)生意外，必須立即通知實驗室主管人員，并在有關(guān)人員的指導監(jiān)督下對出事現(xiàn)場進行處理，絕對禁止未經(jīng)報告而私自對出事現(xiàn)場給予非規(guī)范的(二)實驗過程中，如污染物濺落到身體表面，或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生，應立即停止實驗工作進行緊急處理，更換被污染的實驗服，皮膚表面用消毒液清洗，傷口以碘酒或酒精消毒，眼睛用無菌生理鹽水沖洗。(三)如果發(fā)生菌液溢出，含菌種的培養(yǎng)管破碎等，造成中、小面積污染，可用比污染面積大25%以上的紗布覆蓋污染區(qū)域，邊緣用脫脂棉圍住，向紗布傾倒5%苯酚溶液或70%的酒精，浸泡2小時以上(其間適量加溶液防止干燥),再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))照射2小時以上；被污染的器械、容器等立即浸泡邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-03版本/修訂號：1/0生效日期：20100403于70%酒精中2小時以上，實驗完成后再進行高壓消毒處理。(四)如果發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染，應立即停止實驗并關(guān)閉實驗室，對污染區(qū)域進行紫外燈照射消毒過夜；第二天對污染區(qū)進行24小時封閉空氣熏蒸消毒(乙醛消毒法：5ml乙醛+2g高錳酸鉀/m3空間)。(五)絕對禁止使用的事故處理方法：1.任何有可能造成污染面積擴大的去污方法，如使用70%乙醇或甲酚皂液3.使用消毒效果未經(jīng)證實的消毒劑進行消毒。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告版本/修訂號：1/0生效日期：20100403【流行病學】病人與帶菌者是霍亂的傳染源。典型病人的吐瀉物含菌量甚多，每ml糞便可含107～109弧菌，這對疾病傳播起重要作用。輕型病人易被忽略，健康帶菌者不易檢出，兩者皆為危險傳染源。潛伏期帶菌者尚無吐瀉，恢復期帶菌者排菌時間一般不長，兩者作為傳染源的意義居次要地位。本病主要借水傳播，污染的食品和手以及蒼蠅等，對傳播疾病也起一定作用。男女老幼均對本病易感。在新感染區(qū)，成人比兒童易受感染；在地方流行區(qū)，兒童發(fā)病率較成人為高，后者對感染的抵抗力隨著對霍亂弧菌抗體滴度的升高而增加。病后丙次發(fā)生嚴重感染者少見。實驗感染霍亂弧菌的志愿者，對第二次感染的具高度抵抗力，其時間至少可維持3年。古典霍亂弧菌初次感染的免疫力能(100%保護力)較埃爾托弧菌者(90%保護力)為強?；魜y患者雖然對新感染的保護免疫可達數(shù)年，但對霍亂毒素和細菌的腸抗體僅維持一致數(shù)月?！疚：Τ潭确旨墶课⑸锇雌涫欠裰虏?、致病力強弱、危害人體的嚴重性、傳染性的大小、臨邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告版本/修訂號：1/0生效日期：20100403近人群的抵抗力、有無免疫制劑和特效治療藥物等綜合評價，可分為四個不同的危害等級?；魜y弧菌屬于3級危險。3級危險(對個體具有極大危害，對群體具有較大的危害性):指有特殊危險的致病菌。感染后癥狀較重，并可能危及生命，或者缺乏有效的預防方法、發(fā)病后不易治療的微生物。【實驗室感染的原因及預防】(一)技術(shù)操作可能導致的感染及其預防措施。1.接種：應使用無彈力的鉑絲接種環(huán)，結(jié)核菌接種后接種環(huán)火焰滅菌易崩散，酒精燈燒灼時要特別注意。2.混勻：吸管吸吹菌液時不要產(chǎn)生氣泡，應沿容器壁排出。3.研磨：最好使用組織研磨器，乳缽易產(chǎn)生氣溶膠。4.移液：吸管上端的棉花松緊要適度，吸液時要從管底吸取，吹出時要輕緩，不要全部吹凈，以免產(chǎn)生氣泡，形成氣溶膠。5.開封：要避免壓力和氣流的急劇變化。6.離心：離心管套底墊要完好，使用匹配的管、套、離心頭，加蓋。7.注射：做好個人防護，正確使用注射器。8.搬運：室內(nèi)移動要避免滑落，移出室外要有堅實密閉的外包裝。(二)技術(shù)保障1.雙人原則，不允許單人操作1、2類病原。2.入口處應有危險警示標識，并標明所操作的微生物的種類。3.培訓考核上崗，掌握相關(guān)技術(shù)操作要領(lǐng)，熟悉規(guī)章制度，適應工作環(huán)境。4.完備的管理措施，技術(shù)操作規(guī)范。5.良好的工作行為可降低生物危害風險?！景踩雷o】(一)嚴格遵守實驗室安全操作規(guī)程，實驗室的技術(shù)人員必須經(jīng)過生物安全培訓后方可上崗。(二)實驗室應嚴格限制非實驗人員進入，減少實驗室內(nèi)外交叉生物污染。完成實驗工作離開實驗室，要關(guān)好門窗。(三)進入實驗室應避免攜帶非必需物品。(四)進入實驗室，工作人員應穿著工作服，操作時應穿戴防護隔離衣、口罩、帽子和手套，長發(fā)者應將頭發(fā)裝束在帽子內(nèi)。(五)實驗過程中絕對禁止吸煙、飲食等，不要以手撫頭面部等。(六)試驗前須開啟紫外線燈對實驗室和操作區(qū)域進行照射消毒1小時以上；試驗結(jié)束后，立即開啟紫外燈進行照射消毒2小時以上。(七)任何試驗的開始和結(jié)束后，操作人員要用70%酒精浸泡雙手或仔細擦后，用清潔劑或清水洗凈。(八)每次試驗結(jié)束后，必須清理好實驗臺，并用70%酒精液或3-5%石炭酸擦洗實驗臺面。(九)實驗室中的生物危險品要根據(jù)檢查項目和性質(zhì)不同，局限在相應的試驗區(qū)間，不得隨意將其帶到其它的實驗室。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-04版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(十)實驗室內(nèi)任何微生物的樣本，廢棄物都必須經(jīng)高溫高壓滅菌后，方可按一般垃圾處理?！景踩Ｕ稀?一)首先各級實驗室應按等級要求完善實驗設(shè)施，如簡易安全柜內(nèi)的抽氣排風功能、紫外燈消毒功能，生物安全柜維護與除菌濾膜定期更換等。(二)實驗室采集病人標本時要格外注意。(三)普通實驗室應注意氣流方向，實驗過程中盡量避免強氣流變化而產(chǎn)生氣溶膠(如：涂片、染色過程中)。(四)細菌的分離培養(yǎng)、菌種開封、轉(zhuǎn)種、研磨、稀釋等操作，各級實驗室均應在簡易安全柜或生物安全柜中進行。(五)使用接種環(huán)進行操作時，接種環(huán)應在工作燈的內(nèi)焰中燃燒，以避免菌液或菌塊飛濺。(六)稀釋菌液時，吸管、針管要緩慢插入試管或燒瓶底部，小心操作避免產(chǎn)生氣泡或氣溶膠。(七)使用注射器加樣時，用過的針頭切勿再重新入套或拔開注射器與針頭，應直接放入銳器收集器，以免劃破皮膚造成接種感染。(八)菌株庫要設(shè)專人管理，并按照國家微生物菌毒種管理辦法執(zhí)行。(九)進行毒菌操作過程中，不要穿戴巳經(jīng)污染的防護性手套觸摸門柄、儀器或毒菌區(qū)以外區(qū)域，避免由于粗心擴大污染范圍。(十)試驗結(jié)束后，操作過程中所有可能與生物危險物接觸或被污染的試驗器械和物品，能夠高壓消毒的必須高壓消毒，不能進行高壓消毒的設(shè)備、儀器，應使用有效的消毒劑擦洗后再以紫外燈近距離長時間消毒。(十一)實驗中發(fā)生意外污染情況，應立即通知主管人員并做好處理污染物和相應區(qū)域的準備，不得擅自采用其它禁止的方法進行消毒處理。(十二)實驗室主任應制定規(guī)章和程序，只有告知潛在風險并符合進入實驗室特殊要求(如，經(jīng)過免疫接種)的人，才能進入實驗室。(十三)操作致病性微生物時，實驗室入口處應貼有生物危險標志，并顯示以下信息：有關(guān)病原、生物安全級別、免疫接種要求、研究人員姓名、電話號碼、在實驗室中必須佩帶的個人防護設(shè)施、出實驗室所要求的程序。(十四)實驗室主任為實驗室人員特別制定的標準操作程序或生物安全手冊中，應包括生物安全程序。對于有特殊風險的人員，要求閱讀并在工作及程序上遵照執(zhí)行。(十五)實驗室主任保證實驗及其輔助人員接受適當?shù)呐嘤?，包括和工作有關(guān)的可能存在的風險、防止暴露的必要措施和暴露評估程序。(十六)實驗室所用任何個人防護裝備應符合國家有關(guān)標準的要求。實驗室應確保具備足夠的有適當防護水平的清潔防護服供使用。還應穿戴其它的個人防護裝備，如手套、防護鏡、面具、頭部面部保護罩等。(十七)處理樣本的過程中易產(chǎn)生高危害氣溶膠時，要求同時使用適當?shù)膫€人防護裝備、生物安全柜和/或其它物理防護設(shè)備。如可產(chǎn)生含生物因子的氣溶膠，邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-04版本/修訂號：1/0生效日期：20100403應在適當?shù)纳锇踩裰胁僮鳌?十八)實驗用鞋應舒適，鞋底防滑。應用皮制或合成材料的不滲液體的鞋類。在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時可穿一次性防水鞋套。在實驗室的特殊區(qū)域(例如有防靜電要求的區(qū)域)或BSL-3和BSL-4實驗室要求使用專用鞋(例如一次性或橡膠靴子)?！緦嶒炇覐U物處理】一、實驗室廢棄物處理的目的：(一)將操作、收集、運輸、處理及處置廢棄物的危險減至最小；(二)將實驗室廢棄物對環(huán)境的有害作用減至最小。二、實驗室污物處理及消毒(一)實驗室含有生物危險物的臨床標本及被污染的一次性用品，試驗完成后，應在操作臺或?qū)嶒瀰^(qū)域內(nèi)以紫外燈近距離照射消毒2小時以上，再經(jīng)高壓消毒后方可丟棄或焚燒。(二)可重復使用的實驗用品及器材，完成實驗后，應在操作臺或?qū)嶒瀰^(qū)域內(nèi)經(jīng)紫外燈近距離照射消毒2小時以上后，再交有關(guān)人員進行高壓消毒和煮沸洗(三)實驗用的試管、吸管、注射器，須裝在加蓋不漏的容器內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后取出。(四)培養(yǎng)物或?qū)嶒炇依?，在丟棄前必須經(jīng)高壓消毒和紫外燈近距離長時間照射處理。不允許積存垃圾和實驗室廢棄物。已裝滿的容器應定期運走。在去污染或最終處置之前，應存放在指定的安全地方，通常在實驗室區(qū)內(nèi)。(五)實驗室廢棄物應置于適當?shù)拿芊馇曳缆┤萜髦邪踩\出實驗室。有害氣體、氣溶膠、污水、廢液應經(jīng)適當?shù)臒o害化處理后排放，應符合國家相關(guān)的要(六)實驗過程中，如標本或含標本的前消化處理液被打翻污染了操作臺或地面，應以吸滿70%酒精的衛(wèi)生紙覆蓋污染區(qū)，15分鐘以后衛(wèi)生紙方可移去。(七)實驗室內(nèi)未經(jīng)消毒的污水，禁止直接排入公共排水系統(tǒng)，更不允許混入居民生活垃圾?！疽馔馐鹿实奶幚怼?一)如果發(fā)生意外，必須立即通知實驗室主管人員，并在有關(guān)人員的指導監(jiān)督下對出事現(xiàn)場進行處理，絕對禁止未經(jīng)報告而私自對出事現(xiàn)場給予非規(guī)范的(二)實驗過程中，如污染物濺落到身體表面，或有割傷、刺傷、燒傷、燙傷等情況發(fā)生，應立即停止實驗工作進行緊急處理，更換被污染的實驗服，皮膚表面用消毒液清洗，傷口以碘酒或酒精消毒，眼睛用無菌生理鹽水沖洗。(三)如果發(fā)生菌液溢出，含菌種的培養(yǎng)管破碎等，造成中、小面積污染，可用比污染面積大25%以上的紗布覆蓋污染區(qū)域，邊緣用脫脂棉圍住，向紗布傾倒5%苯酚溶液或70%的酒精，浸泡2小時以上(其間適量加溶液防止干燥),再經(jīng)紫外燈近距離(1米內(nèi))照射2小時以上；被污染的器械、容器等立即浸泡于70%酒精中2小時以上，實驗完成后再進行高壓消毒處理。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(四)如果發(fā)生氣溶膠污染或大面積污染，應立即停止實驗并關(guān)閉實驗室，對污染區(qū)域進行紫外燈照射消毒過夜；第二天對污染區(qū)進行24小時封閉空氣熏蒸消毒(乙醛消毒法：5ml乙醛+2g高錳酸鉀/m3空間)。(五)絕對禁止使用的事故處理方法：1.任何有可能造成污染面積擴大的去污方法，如使用70%乙醇或甲酚皂液3.使用消毒效果未經(jīng)證實的消毒劑進行消毒。4.使用低濃度的消毒劑和紫外燈進行短時間、長距離的照射。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-05版本/修訂號：1/0生效日期：20100403不強，來源常不明。20世紀曾有4次流感大流行。流感流行時造成的經(jīng)濟損失流感病毒在外界的抵抗力弱，在56℃30分鐘條件下易被滅活，在室溫下傳染性很快喪失，100℃1分鐘即被滅活，但在0~4℃能存活數(shù)周，在-20℃真空1.實驗模式1.1流感病毒的分離培養(yǎng)1.2流感病毒血清學診斷血凝抑制試驗(HI法)或微量中和法。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-05版本/修訂號：1/0生效日期：20100403必須采集雙份血清，疾病發(fā)作時頭3天立即采集(急性期血清),發(fā)病后2-3周采集(恢復期血清),在同一條件下進行HI測定，在恢復期血清HI抗體滴度比急性期的高4倍或以上，就可加以確診。1.3流感病毒抗體檢測1.4流感病毒核酸檢測2.實驗中危害因素分析蚊蟲傳播等多種途徑。操作具有高致病性的甲性H5和H7兩亞型毒株必須在P3實驗室內(nèi)進行操作。特別是一些甲性流感毒株(H5N1,H9N2)通過何種途徑傳染3.安全措施3.1嚴格按實驗室使用和安全操作技術(shù)規(guī)程及各個實驗項目的操作技術(shù)規(guī)程操3.2加強個人防護。采用符合國家標準的口罩、防護服等個人防護用品，3.3強化離心、移液等環(huán)節(jié)的標準操作。3.4抗體檢測用血清標本可先以56℃30分鐘處理。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-06版本/修訂號：1/0生效日期：20100403梅毒螺旋體學名為蒼白密螺旋體(Treponemapallidum)是梅毒病的病梅毒螺旋體(Tre-ponemapalidum)1905年由法國科學家Schaudinn與Hoffmanu發(fā)現(xiàn)并報告的。梅毒螺旋體(如圖)是小而纖細的螺旋狀微生物，長度為5-20nm,平均約8-10um,直徑小于0.2nm,有6—12個螺旋；肉眼在其前端有4-6根鞭毛樣細纖維束，其末端呈卷曲狀。在未受外界因素的影響時，螺旋是規(guī)則的。因其透明不易著色，又稱之為蒼白螺旋體。梅毒螺旋體是厭氧菌，在體內(nèi)可長期生存繁殖，只要條件適宜，便以橫斷裂方式一分蘇水、酒精、1:1000的高錳酸鉀液等)很容易將它殺死，陽光照射和干燥環(huán)境都能很快使它死亡。梅毒螺旋體在人體外生存一般超不過1～2個小時。在缺氧的環(huán)境下它能生存數(shù)天，在潮濕的衣服上也能存活數(shù)小時，在血庫中一般能存活24小時。梅毒螺旋體不耐高溫，40℃~60℃時2～3分鐘就能死亡，100℃時則即刻死亡。可以針對其弱點將梅毒螺旋體消滅。如將衣物放都能殺滅梅毒螺旋體，阻止它的傳播。梅毒由梅毒螺旋體(蒼白螺旋體)生多種多樣的癥狀和體征，病變幾乎能累及全身各個臟器。梅毒通過性行為可以在人群中相互傳播，并可以由母親傳染給者通過接吻、哺乳、接有傳染性損害病人的日常用品而傳染。在性傳播疾病(一)檢查螺旋體采取初期及二期梅毒硬性下疳、梅毒疹的滲出物等，用暗視野或墨汁顯(二)血清學檢查1.非螺旋體抗原試驗：是用正常牛心肌的心類脂(Cardiolipin)作為抗原，檢測病人血清中的反應素。國際上常用性病研究實驗室(UDRL)的玻片試驗法；該法是一種簡單的玻片沉淀試驗，試劑及對照已標準化。另外，還可用不加熱血清反應素試驗(USR),其抗原是UDRL抗原的改良，敏感性和特異性與UDRL相似。反應素在第一期梅毒病變出現(xiàn)后1～2周就可測出，第二期陽性率幾乎達100,第三期陽性率較低。本試驗所用抗原是非特異的，檢測的抗體時應排除假陽性反應，結(jié)合病史，臨床表現(xiàn)及多次的試驗版本/修訂號：1/0生效日期：201004032.螺旋體抗原試驗：抗原為梅毒旋體，以檢測血清中的特異性抗體，該試驗特異性高，目前常用下述兩種方法。(1)熒光密螺旋體抗體吸收試驗(FTA～ABS):為間接熒光抗體法，其敏感性及特異性均高，常用于梅毒的早期診斷。(2)梅毒螺旋體制運試驗(TPI):用來檢測血清中是否存在抑制螺旋體活動的特異性抗體。用活梅毒螺旋體(Nichol株)加病人新鮮血清，35℃培養(yǎng)16小時，同法作正常血清對照，然后用暗視野顯微鏡觀察活動的螺旋體數(shù)目，如試驗標本活動的螺旋體數(shù)目小于或等于對照血清標本內(nèi)的40%,即為陽(1)高標準的個人保健對于減少感染的危險性很重要。皮膚受損、串病都會增加(7)離心：離心管套底墊要完好，使用匹配的管、套、離心頭，加蓋，離心時要版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(1)廢棄物缸：10%(V/V)次氯酸鈉(含10,000ppm有效氯)。(3)溢出物：10%次氯酸鈉(V/V)。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-07版本/修訂號：1/0生效日期：20100403膜表面有三種糖蛋白：刺突糖蛋白(S,SpikeProtein,是受體結(jié)合位點、溶細胞作用和主要抗原位點);小包膜糖蛋白(E,EnvelopeProtein,較小，與包膜結(jié)合的蛋白);膜糖蛋白(M,MembraneProtein,負責營養(yǎng)物質(zhì)的跨膜運輸、新生病毒出芽釋放與病毒外包膜的形成)。少數(shù)種類還有血節(jié)段單鏈(+)RNA,長27-31kd,是RNA病毒中最長的RNA核酸鏈，具有正鏈RNA特有的重要結(jié)構(gòu)特征：即RNA鏈5’端有甲基化“帽子”,3’端有P身可以發(fā)揮翻譯模板作用的重要結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，而省去了RNA-DNA-RNA變了，氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)隨之發(fā)生變化，使其抗原性發(fā)生了變化。而抗原1RNApolymerase),它進入宿主細胞后，直接以病毒基因組RNA為翻譯模板，表達出病毒RNA聚合酶。再利用這個酶完成負鏈亞基因組RNA(sub-ge切過程，而是直接通過RNA聚合酶和一些轉(zhuǎn)錄因子，以一種“不連續(xù)轉(zhuǎn)錄” (discontinuoustranscription)的機制，通過識別特定的轉(zhuǎn)錄調(diào)控序列 (transcriptionregulatingsequences,TSR),有選擇性的從負義鏈RN組RNA復制完成后，將在宿主細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)處裝配(assembly)生成新的冠狀病毒顆粒，并通過高爾基體分泌至細胞外，完成到目前為止，大約有15種不同冠狀病毒株被發(fā)現(xiàn)，能夠感染多種哺乳冠狀病毒引起的人類疾病主要是呼吸系統(tǒng)感染(包括嚴重急性呼吸綜合征，SARS)。該病毒對溫度很敏感，在33℃時生長良好，但3到抑制。由于這個特性，冬季和早春是該病毒疾病的流行季節(jié)。冠狀病毒是成人普通感冒的主要病原之一，兒童感染率較高，主要是上呼吸道感染，一邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-07版本/修訂號：1/0生效日期：20100403般很少波及下呼吸道。另外，還可引起嬰兒和新生兒急性腸胃炎，主要癥狀是水樣大便、發(fā)熱、嘔吐，每天可拉10余次，嚴重者甚至出現(xiàn)血水樣便，極少數(shù)情況下也引起神經(jīng)系統(tǒng)綜合征。病毒的生長多位于上皮細胞內(nèi)，也可以感染肝臟、腎、心臟和眼睛，在另外的一些細胞類型(例如巨噬細胞)中也能生長。目前人類冠狀病毒還沒有合適的可作研究用的動物模型(人類疾病的動物模型(animalmodelofhumandisease)是指各種醫(yī)學科學研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動物。動物疾病模型主要用于實驗生理學、實驗病理學和實驗治療學(包括新藥篩選)研究),因此對冠狀病毒的分離工作難度很大，需用人肝臟細胞、氣管及鼻黏膜細胞，經(jīng)器官培養(yǎng)才能分離得到。增殖病毒也要用上述材料，亦很困難。冠狀病毒的血清型和抗原變異性還不明確。冠狀病毒可以發(fā)生重復感染，表明其存在有多種血清型(至少有4種已知)并有抗原的變異，其免疫較困難，目前尚無特異的預防和治療藥物。3、傳播途徑冠狀病毒通過呼吸道分泌物排出體外，經(jīng)口液、噴嚏、接觸傳染，并通過空氣飛沫傳播，感染高峰在秋冬和早春。病毒對熱敏感，紫外線、來蘇水、0.1%過氧乙酸及1%克遼林等都可在短時間內(nèi)將病毒殺死。4、預防及安全措施對其預防有特異性預防，即針對性預防措施(疫苗，疫苗的研制是有可能的，但需要時間較長，解決病毒繁殖問題是其難題)和非特異性預防措施 (即預防春季呼吸道傳染疾病的措施，如保暖、洗手、通風、勿過度疲勞及勿接觸病人，少去人多的公共場所等)。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號：1/0生效日期：20100403第一節(jié)流行性乙型腦炎病毒簡稱乙腦病毒。流行性乙型腦炎的病原體。呈球狀，核疆、西藏、青海外，全國各地均有病例發(fā)生，年發(fā)病人數(shù)2.5萬，病死率10%,大約15%的患者留有不同程度的后遺癥。乙腦病毒為球形，直徑40nm,內(nèi)有衣殼蛋白(C)與核酸構(gòu)成的核心，外披以含脂質(zhì)的囊膜，表面有囊膜糖蛋白(E)刺端依次編碼結(jié)構(gòu)蛋白C、M、E以及非結(jié)構(gòu)蛋白NS1—NS5,病毒RNA在細胞漿內(nèi)直接起mRNA作用，翻譯出結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白，在胞漿粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)裝配邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號：1/0生效日期：20100403乙腦病毒囊膜糖白具有血凝特性，能凝集鵝、鴿、雛雞紅細胞，在pH6.2~6.4條件下凝集滴度高。病毒血凝素與紅細胞結(jié)合若將感染病毒的腦組織加入50%甘油緩沖鹽水中貯存在4℃,其病毒活力可維持數(shù)月。乙醚、1:1000去氧膽酸鈉以及常用消毒劑均可滅活病毒。在酸性條件下蝙蝠，受染蝙蝠在10℃,不產(chǎn)生病毒血癥，可持續(xù)存在達3個月之外，當蝙蝠返回室溫環(huán)境3天后，出現(xiàn)病毒血癥，構(gòu)成蚊一蝙蝠明顯癥狀或只發(fā)生輕微的前驅(qū)癥狀。約經(jīng)4～7日潛伏期后，在體內(nèi)增殖的大量邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(0.01%),這與病毒的毒力，侵入機體內(nèi)數(shù)量及感染者的免疫力有關(guān)。流行區(qū)成人大多數(shù)都有一定免疫力，多為隱性感染，10歲以下兒童及非流行區(qū)成人缺乏本病病后4～5天可出現(xiàn)血凝抑制抗體，2～4周達高峰，可維持一年左右。補體給合抗體在發(fā)病2～3周后方可檢出，約存在半年。中和抗體約在病后1周出現(xiàn)，于5年內(nèi)維持高水平，甚至維持終生。流行區(qū)人群每年不斷受到帶蚊叮咬，逐漸增強免疫力，抗體陽性率常隨年齡而增高，例如北京市20歲以上成年人90%血清中含有中和抗體。因此本病多見于10歲以下的兒童，但近些年—PCR檢測標本中的病毒核酸片段，一般6個小時內(nèi)可初步報告結(jié)果。常規(guī)血滴度比急性期≥4倍時，有輔助診斷意義，可用于臨床回顧性診斷。由于乙腦乙腦病毒感染發(fā)病早期即產(chǎn)生特異性lgM,病后2～3周達到高峰，故單份血清可做出早期診斷?？墒褂茫孩賚gM捕捉ELISA法(見23章);②2ME—NI法，血凝抑制抗體存在于lgM及l(fā)gG中，將早期單份血清分成二份，一份用2巰基乙醇(2ME)處理，以破壞lgM,另一份不處理，然后同時做HI試驗，若處理血清抗體滴度比未處理的下降≥4倍，則為lgM陽性；③微量間接免疫熒光法，用熒光素標記的抗u鏈血清，檢測已與細胞抗原片結(jié)合的lgM,根據(jù)特異性熒光顆粒，判斷血清標本中的lgM存在。1.血凝抑制試驗對乙腦診斷而言，本法特異性較低，但敏感性高，簡便易行。常用于病毒的初步鑒定，確定有無乙腦病毒存在。檢測血清標本中的HI抗體，多采用2ME—HI法。2.補體結(jié)合試驗補體結(jié)合抗體僅存在于lgG中，病后出現(xiàn)遲，消失快，適3.中和試驗抗體存在于1gG、lgM中，出現(xiàn)早，維持久。中和試驗特異性取病尸腦組織研磨成10%懸液，接種1-3日齡乳鼠腦內(nèi)，待發(fā)病頻死時，取邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號：1/0生效日期：20100403現(xiàn)用的乙腦滅活疫苗是用地鼠腎細胞培養(yǎng)增殖，甲醛滅活制成，初次免疫時，皮下注射2～3次，間隔7-10天，以后每年加強注射一次，免疫力維持半年左右，保護率達66-90%。我國已篩選出乙腦病毒減毒株，用地鼠腎細胞培養(yǎng)制成減毒活疫苗，只需皮下注射一次，安全有效，目前正作現(xiàn)場觀察。疫苗接種對象是10歲以下兒童和來自非疫區(qū)的軍民。流行區(qū)當年飼養(yǎng)的仔豬接種乙腦疫苗，以杜絕傳染來源，也可使豬健康成長。防蚊滅蚊是預防本病的有效措施。目前乙腦治療仍采用對癥處理及支持療法，有報道用病毒唑、干擾素、恢復期血清等治療，可能減輕病勢，但已出現(xiàn)腦炎癥狀者，則無治療效果。我國采用淋巴細胞雜交瘤技術(shù)，制備出高中和活性乙腦單克隆抗體，經(jīng)系統(tǒng)動物實驗治療證明安全有效，95年經(jīng)衛(wèi)生部批準進入I、Ⅱ期臨床試驗，是一種特異免疫治療制劑。第二節(jié)森林腦炎病毒森林腦炎病毒(簡稱森腦病毒)由蜱傳播，在春夏季節(jié)流行于俄羅斯及我國東北森林地帶，故稱蘇聯(lián)春夏腦炎病毒(Russianspring-summerencephalitisvirus)。本病主要侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)，臨床上以發(fā)熱，神經(jīng)癥狀為特征，有時出現(xiàn)癱瘓后遺癥。森林腦炎病毒呈球形，直徑為30~40nm,衣殼二十面體對稱外有包膜，含血凝素糖蛋白，核酸為單正鏈RNA.抗原結(jié)構(gòu)與中歐蜱傳腦炎病毒相似，可能為同一病毒的兩個亞型。森腦病毒形態(tài)結(jié)構(gòu)、培養(yǎng)特性及抵抗力似乙腦病毒，但嗜神經(jīng)性較強，接種成年小白鼠腹腔、地鼠或豚鼠腦內(nèi)，易發(fā)生腦炎致死。接種猴腦內(nèi)，可致四肢麻痹。也能凝集鵝和雛雞的紅細胞。本病毒儲存宿主蝙蝠，及哺乳動物(刺猬、松鼠、野兔等),這些野生動物受染后為輕癥感染或隱性感染，但病毒血癥期限有長有短，如刺猬約23天。蜱是森腦病毒傳播媒介，又是長期宿主，其中森林硬蜱的帶病毒率最高，成為主要的媒介。當蜱叮咬感染的野生動物，吸血后病毒侵入蜱體內(nèi)增殖，在其生活周期的各階段，包括幼蟲、稚蟲、成蟲及卵都能攜帶本病毒，并可經(jīng)卵傳代。牛、馬、狗、羊等家畜在自然疫源地受蜱叮咬而傳染，并可把蜱帶到居民點，成為人的傳本病毒的致病性與乙腦病毒相同，非疫區(qū)易感人被帶有病毒的蜱叮咬后，易感染發(fā)病，另外因喝生羊奶(羊感染時奶中有病毒或被蜱類污染)而被傳染，約經(jīng)8～14天潛伏期后發(fā)生腦炎，出現(xiàn)肌肉麻痹、萎縮、昏迷致死，少數(shù)痊愈者也常遺留肌肉麻痹。居住在森林疫區(qū)的發(fā)生腦炎，出現(xiàn)肌肉麻痹、萎縮、昏迷致死，少數(shù)痊愈者也常遺留肌肉麻痹。居住在森林疫區(qū)的人，因受少量病毒的隱性感染，血中有中和抗體，對病毒有免疫力。病愈后皆產(chǎn)生持久的牢固免疫力。分離病毒及血清學檢驗方法與乙腦相同。在疫區(qū)內(nèi)調(diào)查森腦病毒時，可將小白鼠、小雞、地鼠或猴關(guān)在籠內(nèi)，置于森林中地上，引誘蜱來叮咬而傳染，動物邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-08版本/修訂號：1/0生效日期：20100403感染后雖可能不發(fā)病，但可根據(jù)測定血中有無產(chǎn)生特異性抗體而加以驗證。預防此病，可給去森林疫區(qū)的人接種滅活疫苗，效果良好。在感染早期注射大量丙種球蛋白或免疫血清可能防止發(fā)病或減輕癥狀。此外，應穿著防護衣襪，皮膚涂擦鄰苯二甲酸酯(Orthophenyldimethylphthalate),以防被蜱叮咬。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-09版本/修訂號：1/0生效日期：20100403淋病的病原體即奈瑟菌，是1879年由Neisseria首次分離出的淋病雙球菌呈腎形，兩個凹面相對，大小一致，長約0.7微米，寬0.5微米。它是嗜二氧化碳的需氧菌，革蘭染色陰性，最適宜在潮濕，溫度為35℃,含2.5-5%二氧化碳的環(huán)境中生長。常存在多核白細胞內(nèi)，橢圓或球形，常成雙排列，無鞭毛、無莢膜、不形成芽孢，對外界理化條件的抵抗力差，最怕干燥，在干燥環(huán)境中1--2小時即可死亡。在高溫或低溫條件下都易致死。對各種化一、分類1、男性淋病急性前尿道炎的最早癥狀為尿道繼有稀薄粘液流出，引起排尿不適。24小時以后癥狀加劇，紅腫發(fā)展到整個尿困難、行動不便，入晚YJ常有痛性勃起。少數(shù)病例有微熱及疲乏癥狀。兩側(cè)腹股溝淋巴結(jié)亦可受到感染而引起紅腫疼痛，甚至化膿。2、女性淋病女性淋病包括尿道淋病及生殖道淋病兩個方面，女性患者由于尿道短，故泌尿道癥狀往往不明顯，而常以白帶增多，下腹痛等生殖道癥狀為主。最常見的感染部位為宮頸、尿道、尿道旁腺、子宮內(nèi)膜及輸卵管。因此臨床診斷時除尿道分泌物涂片外，更主要的應做陰道子宮頸涂片，否則容易漏診。10-20%婦女伴有盆腔炎、繼發(fā)不育或?qū)m外孕等婦科疾病。3、附性腺炎男性淋病患者的炎癥擴散到后尿道時，可出現(xiàn)急性前列腺4、婦女陰道炎由于小孩陰道是由柱狀上皮所包圍，極易被淋病雙球菌感染，會陰部紅腫，陰道及尿道有綠色分泌物，排尿疼痛，有時累及肛門。5、新生兒眼炎(淋病性結(jié)膜炎，gonococcalophthalmia)新生兒自孕旦延誤治療，則角膜呈蒸汽狀，可能穿透角膜，導臻失明。因此淋病孕婦的1、通過性接觸傳染：主要是通過性交或其他性行為傳染。男性淋病少部分是由性交接觸引起的，女性淋病也可由感染。淋病患者是傳染源，性接觸是淋病主要傳播方式，傳播速度快，而且感染率很高，感染后3-5天即可發(fā)病。也可通過被患者分泌物污染的衣服、被褥、便盆、醫(yī)療器械而間接傳染，特別是幼女常通過間接途徑而被感染；新生兒可通過患淋病孕婦的產(chǎn)道而被感染，引起淋菌性結(jié)膜炎。非淋是指除版本/修訂號：1/0生效日期：201004032.非性接觸傳染(間接傳染):此種情況也較多，主要是接觸病人含淋病雙球菌的分泌物或被污染的用具，如沾有被，甚至于廁所的馬桶圈等均可傳染，特別是女性(包括幼女),因其尿道和生殖道短，很易感染。新生兒經(jīng)過患淋病母親成人特別是男性淋病20%-30%屬于性交傳染。目前，我國以暗娼為主要傳染源。調(diào)查資料表明，在淋病患者中男女一次性交感染率為22%-35%;為50%-90%,女性傳染給男性的為25%-50%,感染率與性交次數(shù)成正比。男性與女性病人性交感染率平均為19%-25%,2次為35%,3次為49%,4次為57%。人類是淋球菌的唯一天然宿主，主要侵犯粘膜上皮所形成的粘膜有親和力。感染后淋菌侵入等處，由于其表面的菌毛含有粘附因子，因而聚集和吞噬引起局部急性炎癥，出現(xiàn)充血、水腫、化膿和疼痛。當細菌進入尿道腺體和隱窩后，腺管開口及隱窩被阻塞，潛藏的(一)涂片檢查：取患者尿道分泌物或?qū)m頸分泌物，作革蘭氏染色，在多形核白細胞內(nèi)找到革蘭氏陰性雙球菌。涂片對有大量膿性分泌物的單純淋菌性前尿道炎患者，此法陽性率在90%左右，可以初步診斷。女性宮頸分泌物中雜菌多，敏感性和特異性較差，陽性率僅為50-60%,且有假陽性，因此世界衛(wèi)生組織推薦用培養(yǎng)法檢查女病人。慢性淋病由于分泌物中淋球菌較少，陽性率低，咽部涂片發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性雙球菌不能診斷淋病，因為其他奈瑟菌屬在咽部是正常的菌群。另外對癥狀不典型的涂片陽性應作進一步檢查。(二)培養(yǎng)檢查：淋球菌培養(yǎng)是診斷的重要佐證，培養(yǎng)法對癥狀很輕或無癥狀的男性、女性病人都是較敏感的方法，只要培養(yǎng)陽性就可確診，在基因診斷問世以前，培養(yǎng)是世界衛(wèi)生組織推薦的篩選淋病的唯一方法有改良的Thayer-Martin(TM)培養(yǎng)基和NewYorkCity(NYC)培養(yǎng)基。國內(nèi)采用巧克力瓊脂或血瓊脂培養(yǎng)基，均含有抗生素，可選擇地抑制許多其他細菌生長。在36℃,70%濕度，含5%-10%CO2(燭缸)環(huán)境中培養(yǎng)，24-48小時觀察結(jié)果。培養(yǎng)后還需進行菌落形態(tài)，革蘭氏染色，氧化酶試驗和糖發(fā)酵試驗等鑒定。培養(yǎng)陽性率男性80%-95%,女性80-90%。版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(三)抗原檢測1.固相酶免疫試驗(EIA):可用來檢測臨床標本中的淋球菌抗原，在流行率很高的地區(qū)而又不能作培養(yǎng)或標本需長時間遠送時使用，可以在婦女2.直接免疫熒光試驗：通過檢測淋球菌外膜蛋白I的單克隆抗體作直接免疫熒光試驗。但目前在男女二性標本的敏感不高，特異性差，加之實驗人(四)基因診斷1.淋球菌的基因探針診斷淋球菌的基因探針診斷，所用的探針有：質(zhì)粒DNA探針，染色體基因探針和rRNA基因探針。2.淋球菌的基因擴增檢測上面講述的探針技術(shù)檢測淋球菌的方法，雖然比培養(yǎng)方法在靈敏度，特異性和方便性上有了很大的提高，但其仍有一定反應的出現(xiàn)進一步提高了檢測淋球菌的靈敏性，它具有快速、簡便的優(yōu)點，可以直接檢測臨床標本中極微3.臨床基因診斷淋球菌的注意事項目前臨床檢測淋球菌的基因診斷方法主要采用PCR方法。PCR方法與LCP方法比傳統(tǒng)的培養(yǎng)法在靈敏性和特異性上有了很大的提高，時間也大大縮短。隨著基因診斷技術(shù)PCR方法與LCP方法在淋球菌的檢測將會成為常規(guī)的檢測方法。(五)藥敏試驗：在培養(yǎng)陽性后進一步作藥敏試驗。用紙片擴散法做敏感試驗，或用瓊脂平皿稀釋法測定最小抑菌濃度(MIC),用以指導選用抗(六)PPNG檢測：β-內(nèi)酰胺酶，用紙片酸度操作。邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-10版本/修訂號：1/0生效日期：20100403病。臨床主要表現(xiàn)為高熱、淋巴結(jié)腫痛、出血傾向、肺部特殊炎癥等。本病遠在2000年前即有記載。世界上曾發(fā)生三次大流行，第一次發(fā)生在公元6世紀，從地中海地區(qū)傳入歐洲，死亡近1億人；第二次發(fā)生在14世紀，波及歐、亞、非；第三次是18世紀，傳播32個國家。14世紀大流行時波及體內(nèi)和早期培養(yǎng)中有莢膜?？稍谧兺ㄅ囵B(yǎng)基上生長。在陳舊培養(yǎng)基及化膿病本菌的抗原成份：①莢膜FI(fractionI)抗原，分為兩種，一種是多糖蛋白質(zhì)(F--1),另一種為蛋白質(zhì)(F--IB)?？乖暂^強，特異性較高，有白細胞吞噬作用，可用凝集、補體結(jié)合或間接血凝檢測；②毒力V/W抗原，并有在細胞內(nèi)保護細菌生長繁殖的能力，故與細菌的侵襲力有關(guān)。鼠疫桿菌產(chǎn)生二種毒素，一為鼠毒素或外毒素(毒性蛋白質(zhì)),對小鼠和大鼠有很強毒性，另一為內(nèi)毒素(脂多糖),較其它革蘭氏陰性菌內(nèi)毒素鼠疫桿菌在低溫及有機體生存時間較長，在膿痰中存活10~20天，尸體內(nèi)可活數(shù)周至數(shù)月，蚤糞中能存活1個月以上；對光、熱、干燥及一般消毒劑均甚敏感。日光直射4～5小時即死，加熱55℃15分鐘或100℃1分鐘、5%石炭酸、5%來蘇，0.1升汞、5～10%氯胺均可將病菌殺死。在鼠間流行。鼠間鼠疫傳染源(儲存宿主)有野鼠、地鼠、狐、狼、貓、豹等，其中黃鼠屬和旱獺屬最重要。家鼠中的黃胸鼠、褐家鼠和黑家鼠是人間鼠疫重要傳染源。當每公頃地區(qū)發(fā)現(xiàn)1至1.5只以上的鼠疫死鼠，該地區(qū)又有居民點的話，此地爆發(fā)人間鼠疫的危險極高。各型患者均可成為傳染源，因肺鼠疫可通過飛沫傳播，故鼠疫傳染源以肺型鼠疫最為重要。敗血性鼠疫版本/修訂號：1/0生效日期：20100403(二)傳播途徑：動物和人間鼠疫的傳播主要以鼠蚤為媒介。當鼠蚤吸取含病菌的鼠血后，細菌在蚤胃大量繁殖，形成菌栓堵塞前胃，當蚤再吸入血時，病菌隨吸進之血反吐，注入動物或人體數(shù)可因直播接觸病人的痰液、膿液或病獸的皮、血、肉經(jīng)破損皮膚或粘膜受(三)人群易感性人群對鼠疫普遍易感，無性別年齡差別。病后可獲持(四)流行特征1.鼠疫自然疫源性世界各地存在許多自然疫源在。人間鼠疫多由野鼠傳至家鼠，由家鼠傳染于人引起。偶因狩獵(捕捉旱獺)、考查、施工、軍事活動進入疫區(qū)而被感染。2.流行性本病多由疫區(qū)籍交通工具向外傳播，形成外源性鼠疫，引起流對第一例病人及時發(fā)現(xiàn)與確診，對本病的控制與預防極為重要。流行病學資料當?shù)卦惺箝g鼠疫流行或有赴疫區(qū)史；有接觸可疑動物或類似患者。臨床資料根據(jù)各型臨床特點。實驗室診斷是確定本病最重要依據(jù)。對一切可疑病人均需作細菌學檢查，對疑似鼠疫尸體，應爭取病解或穿刺取材進行細菌學檢查。血清學應以雙份血清升高4倍以上作為診斷依據(jù)。1.常規(guī)檢查胞增高，以后中性粒細胞顯著增高，紅細胞、血紅蛋白與血小板減少。2.細菌學檢查采淋巴結(jié)穿刺液、膿、痰、血、腦脊液進行檢查。(1)涂片檢查用上述材料作涂片或印片，革蘭氏染色，可找到G一兩端濃染的短桿菌。約50～80%陽性。(2)細菌培養(yǎng)檢材接種于普通瓊脂或肉湯培養(yǎng)基。血培養(yǎng)在腺鼠疫早期陽性率為70%,晚期可達90%左右。敗血癥時可達100%陽性。(3)動物接種將標本制成生理鹽水乳劑，注射于豚鼠或小白鼠皮下或腹腔內(nèi)，動物于24～72小時死亡，取其內(nèi)臟作細菌檢查。(4)噬菌體裂解試驗用鼠疫噬菌體加入已檢出的可疑細菌中，可看到3.血清學檢查(1)間接血凝用F1抗原檢測患者或動物血清中F1抗體。F1抗體持續(xù)1～4年，故常用于流行病學調(diào)查及回顧性診斷。(2)熒光抗體染色檢查用熒光標記的特異性抗血清檢測可疑標本。特版本/修訂號：1/0生效日期：201004031.管理患者發(fā)現(xiàn)疑似或確診患者，應立即按緊急疫情上報，同時將患者嚴密隔離，禁止探視及病人互相往來。病人排泄物應徹底消毒，病人死亡應火葬或深埋。接觸者應檢疫9天，對曾接受預防接種者，檢疫期應延至12.消滅動物傳染源：對自然疫源地進行疫情監(jiān)測，控制鼠間鼠疫。廣泛開展滅鼠愛國衛(wèi)生運動。旱獺在某些地區(qū)是重要傳染源，也應大力捕殺。3.切斷傳播途徑：滅蚤必須徹底，對貓、狗，家畜等也要噴藥；加強交通及國鏡檢疫對來自疫源地的外國船只、車輛、飛機等均應進行嚴格的國境衛(wèi)生檢疫，實施滅鼠、滅蚤消毒，對乘客進行隔離留檢。1.預防接種自鼠間開始流行時，對疫區(qū)及其周圍的居民、進入疫區(qū)的工作人員，均應進行預防接種。常用為EV無毒株干燥活菌苗，皮膚劃痕法接種，即2滴菌液，相距3-4cm。2周后可獲免疫。一般每年接種一次，必要時6個月后再接種一次。我國新研制的06173菌苗免疫動物后產(chǎn)生F1抗體較EV株效果高1倍。2.個人防護進入疫區(qū)的醫(yī)務人員，必須接種菌苗，兩周后方能進入疫區(qū)。工作時必須著防護服，戴口罩、帽子、手套、眼鏡、穿膠鞋及隔離衣。接觸患者后可服下列一種藥物預防，四環(huán)素每日2g,分4次服；磺胺嘧啶每日2g,分4次服；或鏈霉素每日1g,分1～2次服用。邵武市第二醫(yī)院檢驗科邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-11版本/修訂號：1/0生效日期：20100403第十一章傷寒桿菌的生物危害評估報告?zhèn)?typhoidfever)是由傷寒桿菌引起的急性傳染病，以持續(xù)菌血癥，網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)受累，回腸遠端微小膿腫及潰瘍形成為基本病理特征。典型的臨床表現(xiàn)包括持續(xù)高熱，腹部不適，肝脾腫大，白細胞低下，部分病人有玫瑰疹和相對緩脈。本病又稱為腸熱病(entericfever)。但本病的臨床表現(xiàn)主要系病原經(jīng)血播散至全身全器官，而并非腸道局部病變所引起?！静≡瓕W】傷寒沙門菌，又稱傷寒桿菌，屬沙門菌屬D組。革蘭染色陰性，呈短桿狀，周有鞭毛，能活動，不產(chǎn)生芽孢，無莢膜。在普通培養(yǎng)基上能生長，在含有膽汁的培養(yǎng)基中生長更好。傷寒桿菌在自然界中的生活力較強，在水中可存活2—3周，在糞便中能維持1—2個月，在牛奶中不僅能生存，且可繁殖。耐低溫，在冰凍環(huán)境中可存活數(shù)月，但對光、熱、干燥及消毒劑的抵抗能力較弱，日光直射數(shù)小時即死，加熱至60~C后30分鐘或煮沸后立即死亡，消毒飲水余氯可迅速致死。傷寒桿菌只感染人類，在自然條件下不感染動物。傷寒桿菌具有菌體("O")抗原、鞭毛("H")抗原和表面("i")抗原，均能產(chǎn)生相應的抗體，但這些并非保護性抗體。由于“O”和“H”抗原性較強，故常用于血清凝集試驗(肥達反應)以輔助臨床診斷，亦可用以制備傷寒菌苗供預防接種?！癷”抗原見于新分離(特別是從病人血液分離)的菌株，能干擾血清中的殺菌效能和吞噬功能，是傷寒桿菌的重要毒力因子，但其抗原性不強，所產(chǎn)生的"i"抗體的凝集效價一般較低且為時甚短。當病原菌從人體中清除后，“i"抗體滴度迅速下降，故“i”抗體的檢出雖對本病的診斷無多大幫助，但有助于發(fā)現(xiàn)帶菌者。傷寒桿菌在菌體裂解時可釋放強烈的內(nèi)毒素，對本病的發(fā)生和發(fā)展起著較重要的作用?！玖餍胁W】(一)傳染源：為病人及帶菌者。病人從潛伏期開始即可從糞便排菌，從病程第1周末開始經(jīng)尿排菌，故整個病程中均有傳染性，尤以病程的2—4周內(nèi)傳染性最大。慢性帶菌者是本病不斷傳播或流行的主要傳染源。原有慢性肝膽管疾病(如膽囊炎、膽石癥等)的傷寒病人易成為慢性帶菌者，約1%—4%患者在腸道和膽囊中隱藏傷寒桿菌達數(shù)月或數(shù)年之久。(二)傳播途徑傷寒桿菌隨病人或帶菌者的糞、尿排出后，通過污染的水或食物、日常生活接觸、蒼蠅和蟑螂等傳播。其中，水源污染是本病傳播的重要途徑，亦是暴發(fā)流行的主要原因。食物污染也可引起本病的流行，而散發(fā)病例一般以日常生活接觸傳播為多。(三)人群易感性人對傷寒普遍易感。病后可獲得持久性免疫，再次患病者極少。(四)流行特征世界各地均有本病發(fā)生，以熱帶、亞熱帶地區(qū)多見，可散發(fā)、地方性流行或暴發(fā)流行。在發(fā)展中國家主要因為水源污染而暴發(fā)流行，邵武市第二醫(yī)院檢驗科病原微生物風險評估報告文件編號：SWSE-JYK-3-PG-11版本/修訂號：1/0生效日期：20100403發(fā)達國家則以國際旅游感染為主。本病終年可見，但以夏秋季最多。其中以兒童和青壯年居多。局部地區(qū)流行的傷寒耐藥菌株有所增加，耐藥譜也在逐漸擴大。除耐氯霉素、復方磺胺甲嗯唑、氨芐【實驗室檢查】(一)常規(guī)檢查血白細胞大多為3×109/L～4×109/L,伴中性粒細胞減少和嗜酸粒細胞消失，后者隨病情的好轉(zhuǎn)逐漸回升。極期嗜酸粒細胞>2%,(二)細菌學檢查①血培養(yǎng)是確診的論據(jù)，病程早期即可陽性，第7~10病日陽性率可達90%,第三周降為30%～40%,第四周時常陰性；