TCSTC-西番蓮 組培苗

Q/LB.□XXXXX-XXXX前言本文件按照?GB/T1.1—2020?《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由中國(guó)熱帶作物學(xué)會(huì)提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所，廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，廊坊市維金農(nóng)業(yè)科技有限公司，海南催化農(nóng)業(yè)發(fā)展科技有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：邢文婷、楊柳、宋順、黃永才、黃東梅、蔣萍、許奕、陳格、吳斌、桂杰、馬伏寧、邱文武、高維金、林鋒。西番蓮組培苗范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了西番蓮組培苗的術(shù)語(yǔ)和定義、莖段選擇、外植體處理、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、組培苗移栽、出圃、育苗檔案技術(shù)要求。本文件適用于西番蓮屬種質(zhì)的組織培養(yǎng)育苗。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NYT?2517-2013?植物新品種特異性、一致性和穩(wěn)定性測(cè)試指南西番蓮術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

西番蓮組培苗passifloraLinnaeusplantletsinviro

批batch來(lái)源于同一個(gè)外植體的再生芽，擴(kuò)繁、生根得到質(zhì)量一致的組培苗的總和為一批。

質(zhì)量要求種源來(lái)源清晰，品種純正、遺傳穩(wěn)定可靠。無(wú)病害、生長(zhǎng)健壯，植株形態(tài)正常的組培苗，組培苗質(zhì)量符合表1的要求。西番蓮組培苗質(zhì)量分級(jí)項(xiàng)目級(jí)別一級(jí)二級(jí)莖粗（mm）≥?2.51.0~2.49株高（㎝）≥?5.03.0~4.9展開葉片數(shù)（片）4~54~5白根數(shù)（條）≥?3≥?3植株顏色綠色→深綠色淺綠色→綠色組培苗培育外植體外植體的采集選擇品種性狀優(yōu)良、生長(zhǎng)健壯、無(wú)病蟲害癥狀的母株為組培苗培育材料，剪取植株的新梢嫩枝10?cm~15cm?經(jīng)保濕處理后裝入塑料袋內(nèi)密封。外植體的處理方法剪取長(zhǎng)度為2?cm?~?3?cm的嫩枝頂芽，剪去嫩葉，保留葉柄，在中性洗滌劑溶液中浸泡10min?~?15?min，流水沖洗至無(wú)泡沫；取出瀝干（若田間外植體則出用棉花絮輕擦拭頂芽莖干），移到無(wú)菌超凈臺(tái)中用75?%?乙醇溶液消毒30?s，無(wú)菌水漂洗2次，再用0.1?%~0.15?%?HgCl?溶液消毒5?min~8?min，無(wú)菌水漂洗5次，吸干水分。接種外植體前將解剖刀和鑷子在酒精燈或恒溫滅菌器300?℃?滅菌30?min，冷卻后使用。培養(yǎng)條件晝夜溫度（25?±?0.5）?℃/（27?±?0.5）?℃，濕度50?%?~?60?%，光照強(qiáng)度2500?Lux?~?4?500?Lux，光照時(shí)間16?h/d。培養(yǎng)過(guò)程腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)切取長(zhǎng)度?5?mm?~?10?mm?的普通莖尖或莖段，切去外植體嫩葉、葉柄和卷須，接種至腋芽啟動(dòng)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)瓶上標(biāo)注培養(yǎng)基編號(hào)、品種代號(hào)和接種日期，培養(yǎng)30?d。叢生芽的培養(yǎng)將已萌發(fā)的腋芽切離外植體，接種在叢生芽培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，更換一次培養(yǎng)基，獲得叢生芽。繼代培養(yǎng)從獲得叢生芽上切取帶?1?個(gè)?~?2?個(gè)芽的莖段轉(zhuǎn)接到繼代培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每?30?d?~?45?d?更換一次培養(yǎng)基。生根培養(yǎng)從叢生芽中切取嫩莖長(zhǎng)度達(dá)1.5㎝?或以上的單芽，接種至生根培養(yǎng)基誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)?25?d?~?28?d后，對(duì)同一個(gè)外植體培育的再生植株進(jìn)行編號(hào)、品種、日期標(biāo)記，并記錄為同一批。繼代次數(shù)培養(yǎng)材料的繼代次數(shù)控制在?10?代之內(nèi)。組培苗移栽移栽要求毎株根系數(shù)達(dá)?3?條以上、白色的粗壯不定根，展開葉?4?片?~?5?片，脫毒苗長(zhǎng)至?4?㎝~5?㎝?時(shí)進(jìn)行移栽。煉苗移栽前，將試管苗放置在自然光散射、溫度為?28?~?30?℃?的溫室中進(jìn)行?14?d?煉苗，加入少量的清水在組培瓶?jī)?nèi)并將瓶蓋半開煉苗?3?d，移栽時(shí)流水沖洗掉組培苗基部培養(yǎng)基，放陰涼處，備用。移栽馴化基質(zhì)用自來(lái)水浸泡濕潤(rùn)，裝進(jìn)干凈的育苗杯中，用稀釋?1?500?倍~2?000?倍的?50?%?多菌靈澆透基質(zhì)，移栽的組培苗放置在苗床上，用薄膜小拱棚保濕，相對(duì)濕度控制在?75?%~85?%，光照強(qiáng)度?4?500?Lux?左右，高溫時(shí)打開拱棚兩端進(jìn)行通風(fēng)降溫，25?d?后逐漸移開薄膜進(jìn)行幼苗常規(guī)管理，每一棵移栽苗均做好品種代號(hào)、種植日期的標(biāo)注。移栽所用基質(zhì)含珍珠巖、草碳、蛭石等成分，移栽前用。田間性狀鑒定隨機(jī)抽取?15?株優(yōu)異品種的組培扦插苗種植在田間無(wú)病害的地塊上進(jìn)行田間性狀觀察，包括植物學(xué)特征、花期、盛果期、果實(shí)性狀和產(chǎn)量。觀察與統(tǒng)計(jì)按照?NY/T?2517?規(guī)定進(jìn)行。出圃出圃要求組培苗高度為?30?cm?~?50?cm?才達(dá)到出圃要求，同時(shí)苗木健康、生長(zhǎng)勢(shì)旺盛，葉片顏色深綠，葉片?5?片?~?10?片，無(wú)病害。運(yùn)輸要求運(yùn)輸組培苗木時(shí)，應(yīng)用塑料筐或泡沫箱，避免擠壓。育苗檔案應(yīng)建立完整的育苗檔案，包括組培苗育苗圃、成苗率、不同生長(zhǎng)階段管理措施、出圃數(shù)量、出苗日期、銷售對(duì)象、自然災(zāi)害、病蟲害發(fā)生情況、階段總結(jié)等記錄過(guò)程。

（資料性）

西番蓮簡(jiǎn)介與培養(yǎng)基配方西番蓮西番蓮屬（Passifloraedulis）是西番蓮科的多年生常綠草質(zhì)藤本植物，該屬約有520種，大多數(shù)以觀花及庭院栽培，僅有60多種可以供鮮食，世界上用于水果商業(yè)栽培的百香果主要有6種：紫色百香果（PassifloraedulisSims）、黃色百香果（Passifloraedulisf.flavicarpa）、甜西番蓮（Passifloraligularis）、樟葉西番蓮（Passifloralaurifolia）大西番蓮（Passifloraquadrangularis）及香蕉西番蓮（Passifloramollissima）；目前我國(guó)商業(yè)化西番蓮主要是黃色西番蓮（Passifloraedulisf.flavicarpa）(2n=2x=18)和紫色西番蓮（PassifloraedulisSims）(2n=2x=18)兩個(gè)主要栽培種群，果實(shí)為漿果，因其含有上百種芳香物質(zhì)，且香氣濃郁，因而得名“百香果”。不同階段培養(yǎng)基配方腋芽啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+ZT0.02mg/L；紫果叢生芽培養(yǎng)基：1/2MS+6-BA0.3mg/L+ZT0.05mg/L+IBA0.01mg/L+NAA0.01mg/L，黃果叢生芽培養(yǎng)基：1/2MS+6-BA0.3mg/L+ZT0.05mg/L+IBA0.01mg/L+NAA0.01mg/L；生根培養(yǎng)基：MS+IBA3.5mg/L，1/2MS+NAA0.7mg/L。（資料性）苗期病蟲害藥劑防治西番蓮組培苗苗期常見