口服益生菌產(chǎn)品功效評價規(guī)范

ICS67.040

CCSX80

團體標準

T/XXXXXXX—XXXX

口服益生菌產(chǎn)品功效評價規(guī)范

Specificationforefficacyevaluationoforalprobioticproducts

XXXX-XX-XX發(fā)布XXXX-XX-XX實施

中國國際經(jīng)濟技術(shù)合作促進會發(fā)布

T/XXXXXXX—XXXX

口服益生菌產(chǎn)品功效評價規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了口服益生菌產(chǎn)品的術(shù)語和定義、原輔料要求、技術(shù)要求以及功效評價。

本文件適用于口服益生菌產(chǎn)品調(diào)節(jié)腸道菌群功效評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4789.34食品安全國家標準食品微生物學檢驗雙歧桿菌檢驗

GB4789.35食品安全國家標準食品微生物學檢驗乳酸菌檢驗

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

口服益生菌產(chǎn)品oralbeautyproducts

添加了益生菌，且在保質(zhì)期內(nèi)益生菌數(shù)量符合一定要求的食品。

4原輔料要求

使用的益生菌菌株應(yīng)滿足以下條件：

a)應(yīng)明確菌株號和分離來源；

b)需由第三方機構(gòu)進行鑒定、保藏和安全性評價；

c)需經(jīng)過全基因組測序且有相關(guān)科學文獻支持；

d)有進行人體或臨床試驗研究的科學文獻支持其正面評價。

使用的益生菌菌種應(yīng)符合國家衛(wèi)生行政部門頒布的《可用于食品的菌種名單》、《可用于保健食

品的益生菌菌種名單》及有關(guān)公告的規(guī)定。名單及公告如規(guī)定了菌株的也應(yīng)當符合其規(guī)定。

使用的其他食品配料、食品添加劑和食品營養(yǎng)強化劑應(yīng)符合相應(yīng)的要求。

5技術(shù)要求

口服益生菌產(chǎn)品在保質(zhì)期內(nèi)的活菌數(shù)量應(yīng)符合表1的規(guī)定。

表1活菌數(shù)量

項目指標檢驗方法

保質(zhì)期內(nèi)益生菌活菌總數(shù)/(CFU/g)GB4789.35或GB4789.34或采用國內(nèi)

1×107

或(CFU/mL)≥外認可的符合該菌種的相應(yīng)檢測方法

口服益生菌產(chǎn)品其他技術(shù)指標應(yīng)符合相應(yīng)類別食品安全標準的規(guī)定。

6功效評價

試驗原則

6.1.1動物實驗和人體試食試驗所列指標均為必做項目。

6.1.2正常動物或腸道菌群紊亂模型動物任選其一。

1

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6.1.3受試樣品中含雙歧桿菌、乳桿菌以外的其它益生菌時，應(yīng)在動物和人體試驗中加測該益生菌。

6.1.4在進行人體試食試驗時，應(yīng)對受試樣品的食用安全性作進一步的觀察。

動物實驗

6.2.1實驗動物

推薦用近交系小鼠，18g～22g，單一性別，每組10～15只。

6.2.2劑量分組及受試樣品給予時間

實驗設(shè)三個劑量組和一個陰性對照組，以人體推薦量的10倍為其中的一個劑量組，另設(shè)二個劑量組，

必要時設(shè)陽性對照組。受試樣品給予時間14天，必要時可以延長至30天。

6.2.3實驗步驟

在給予受試樣品之前，無菌采取小鼠肛門內(nèi)糞便0.1g，10倍系列稀釋，選擇合適的稀釋度分別接種

在各培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后，以菌落形態(tài)、革蘭氏染色鏡檢、生化反應(yīng)等鑒定計數(shù)菌落，計算出每克濕便中

的菌數(shù)，取對數(shù)后進行統(tǒng)計處理。最后一次給予受試樣品之后24h，與實驗前同樣方式取直腸糞便，檢

測腸道菌群，方法同上。

6.2.4觀察指標

體重、雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。

6.2.5數(shù)據(jù)處理

資料可用方差分析，但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F(xiàn)值＜F0.05，

結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較

方法進行統(tǒng)計；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換

后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。

6.2.6結(jié)果判定

比較實驗前后自身及組間雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的變化情況，實驗組

實驗前后自身比較差異有顯著性，或?qū)嶒灪髮嶒灲M與對照組組間比較差異有顯著性、且實驗組實驗前后

自身比較差異有顯著性，符合以下任一項，可以判定該受試樣品動物實驗結(jié)果陽性。

a)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌無明顯

變化；

b)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌明顯

增加，但增加的幅度低于雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。

人體試食試驗

6.3.1受試者要求

6.3.1.1納入標準：

a)一個月內(nèi)未患過胃腸疾病者；

b)一個月內(nèi)未服用過抗生素者。

6.3.1.2受試者排除標準：

a)年齡在65歲以上者，妊娠或哺乳期婦女，過敏體質(zhì)及對本保健食品過敏者；

b)合并有心血管、腦血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重疾病及內(nèi)分泌疾病，精神病患者；

c)停服受試樣品或中途加服其它藥物，無法判斷功效或資料不全者。

d)短期內(nèi)服用與受試功能有關(guān)的物品，影響到對結(jié)果的判斷者。

6.3.2試驗設(shè)計及分組要求

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采用自身和組間兩種對照設(shè)計。按受試者的菌群狀況隨機分為試食和對照組，盡可能考慮影響結(jié)果

的主要因素如年齡、性別、飲食因素等，進行均衡性檢驗，以保證組間的可比性。每組受試者不少于50

例。

6.3.3受試樣品的劑量和使用方法

試食組按推薦服用方法、服用量服用受試產(chǎn)品，對照組可服用安慰劑或采用空白對照。受試樣品給

予時間14天，必要時可以延長至30天。試驗期間不改變原來的飲食習慣，正常飲食。

6.3.4觀察指標

6.3.4.1安全性指標：

a)一般狀況包括精神、睡眠、飲食、大小便、血壓等；

b)血、尿、便常規(guī)檢查；

c)肝、腎功能檢查（僅在試驗開始前檢查一次）；

d)胸片、心電圖、腹部B超檢查（僅在試驗開始前檢查一次）；

6.3.4.2功效性指標：雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。

6.3.5試驗步驟

在給予受試樣品之前，無菌采取受試者糞便1.0g，10倍系列稀釋，選擇合適的稀釋度分別接種在各

培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后，以菌落形態(tài)、革蘭氏染色鏡檢、生化反應(yīng)等鑒定計數(shù)菌落，計算出每克濕便中的菌

數(shù)，取對數(shù)后進行統(tǒng)計處理。最后一次給予受試樣品之后24h，再次檢測，方法同上。

6.3.6數(shù)據(jù)處理

試驗數(shù)據(jù)為計量資料，可用t檢驗進行分析。凡自身對照資料可以采用配對t檢驗，兩組均數(shù)比較采

用成組t檢驗，后者需進行方差齊性檢驗，對非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿

足正態(tài)方差齊后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進行t檢驗；若轉(zhuǎn)換數(shù)據(jù)仍不能滿足正態(tài)方差齊要求，改用t’檢驗或秩

和檢驗；但變異系數(shù)太大（如CV＞50%）的資料應(yīng)用秩和檢驗。

6.3.7結(jié)果判定

符合以下任一項，且試驗組試食前后自身比較及試食后試食組與對照組比較，差異均有顯著性，可

以判定該受試樣品具有有助于調(diào)節(jié)腸道菌群的作用。

a)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌、擬桿

菌無明顯變化；

b)糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產(chǎn)氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌、擬

桿菌明顯增加，但增加的幅度低于雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。

3

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目次

前言.................................................................................II

1范圍...............................................................................1

2規(guī)范性引用文件.....................................................................1

3術(shù)語和定義.........................................................................1

4原輔料要求.........................................................................1

5技術(shù)要求...........................................................................1

6功效評價...........................................................................1

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口服益生菌產(chǎn)品功效評價規(guī)范

1范圍

本文件規(guī)定了口服益生菌產(chǎn)品的術(shù)語和定義、原輔料要求、技術(shù)要求以及功效評價。

本文件適用于口服益生菌產(chǎn)品調(diào)節(jié)腸道菌群功效評價。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4789.34食品安全國家標準食品微生物學檢驗雙歧桿菌檢驗

GB4789.35食品安全國家標準食品微生物學檢驗乳酸菌檢驗

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

口服益生菌產(chǎn)品oralbeautyproducts

添加了益生菌，且在保質(zhì)期內(nèi)益生菌數(shù)量符合一定要求的食品。

4原輔料要求

使用的益生菌菌株應(yīng)滿足以下條件：

a)應(yīng)明確菌株號和分離來源；

b)需由第三方機構(gòu)進行鑒定、保藏和安全性評價；

c)需經(jīng)過全基因組測序且有相關(guān)科學文獻支持；

d)有進行人體或臨床試驗研究的科學文獻支持其正面評價。

使用的益生菌菌種應(yīng)符合國家衛(wèi)生行政部門頒布的