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PAGE8-專練100生物技術(shù)實(shí)踐綜合練1.[2024·全國卷Ⅰ]已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培育基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號(hào)培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。Ⅱ號(hào)培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(15g/L)。Ⅲ號(hào)培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機(jī)鹽(適量),X(45g/L)?;卮鹣铝袉栴}。(1)在Ⅰ號(hào)培育基中,為微生物供應(yīng)氮源的是__________。Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基中為微生物供應(yīng)碳源的有機(jī)物是____________。(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號(hào)液體培育基中,培育一段時(shí)間后,不能降解X的細(xì)菌比例會(huì)____________,其緣由是____________。(3)Ⅱ號(hào)培育基加入瓊脂后可以制成固體培育基,若要以該固體培育基培育目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),接種時(shí),應(yīng)采納的方法是________________。(4)假設(shè)從Ⅲ號(hào)培育基中得到了能高效降解X的細(xì)菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長供應(yīng)____________和____________。2.[2024·全國卷Ⅱ]物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物,會(huì)污染土壤。W在培育基中達(dá)到肯定量時(shí)培育基表現(xiàn)為不透亮。某探討小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌(目標(biāo)菌)?;卮鹣铝袉栴}。(1)要從土壤中分別目標(biāo)菌,所用選擇培育基中的氮源應(yīng)當(dāng)是____________。(2)在從土壤中分別目標(biāo)菌的過程中,發(fā)覺培育基上甲、乙兩種細(xì)菌都能生長并形成菌落(如圖所示)。假如要得到目標(biāo)菌,應(yīng)當(dāng)選擇____________菌落進(jìn)一步純化,選擇的依據(jù)是____________。(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?。若要設(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)一步確定甲、乙菌能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,?qǐng)簡要寫出試驗(yàn)思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即____________。(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比較酶E與自然酶降解W實(shí)力的差異,該小組擬進(jìn)行如下試驗(yàn),請(qǐng)完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有肯定濃度W的固體培育基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有相同濃度自然酶的緩沖液,C處滴加____________,三處滴加量相同。②一段時(shí)間后,測量透亮圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透亮圈,說明________________;若A、B處形成的透亮圈直徑大小相近,說明________________。3.[2024·江蘇啟東中學(xué)月考]請(qǐng)回答下列與試驗(yàn)室提取芳香油有關(guān)問題:(1)植物芳香油的提取可采納的方法有壓榨法、________和________。(2)芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于____________,易溶于____________,因此可用________________作為提取劑來提取芳香油。(3)橘子果實(shí)含有芳香油,通??捎胈_________作為材料提取芳香油,而且提取時(shí)往往選用簇新的材料,理由是____________________________。(4)對(duì)材料壓榨后可得到糊狀液體,為除去其中的固體物獲得乳狀液可采納的方法是________________。(5)得到的乳狀液加入氯化鈉并放置一段時(shí)間后,芳香油將分布于液體的________層,緣由是________________________,加入氯化鈉的作用是________________________________________________________________________。(6)從乳狀液中分別得到的芳香油中要加入無水硫酸鈉,此劑的作用是________________________。4.[2024·全國卷Ⅰ][生物——選修1:生物技術(shù)實(shí)踐]某種物質(zhì)S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)難以降解,會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染,只有某些細(xì)菌能降解S。探討人員依據(jù)下圖所示流程從淤泥中分別得到能高效降解S的細(xì)菌菌株。試驗(yàn)過程中須要甲、乙兩種培育基,甲的組分為無機(jī)鹽、水和S,乙的組分為無機(jī)鹽、水、S和Y?;卮鹣铝袉栴}:(1)試驗(yàn)時(shí),盛有水或培育基的搖瓶通常采納________的方法進(jìn)行滅菌。乙培育基中的Y物質(zhì)是________。甲、乙培育基均屬于________培育基。(2)試驗(yàn)中初步估測搖瓶M中細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL,若要在每個(gè)平板上涂布100μL稀釋后的菌液,且保證每個(gè)平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè),則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋________倍。(3)在步驟⑤的篩選過程中,發(fā)覺當(dāng)培育基中的S超過某一濃度時(shí),某菌株對(duì)S的降解量反而下降,其緣由可能是________________________(答出1點(diǎn)即可)。(4)若要測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù),請(qǐng)寫出主要試驗(yàn)步驟:____________________________________。(5)上述試驗(yàn)中,甲、乙兩種培育基所含有的組分雖然不同,但都能為細(xì)菌的生長供應(yīng)4類養(yǎng)分物質(zhì),即______________________________________。5.檸檬油是植物芳香油中的一種,它是一種廣譜性的殺蟲劑,可殺死蚊子、蒼蠅、蟑螂和臭蟲等傳染疾病的害蟲,以及危害糧食、蔬菜的常見害蟲,包括幼蟲、蛹等,被稱為一種綠色殺蟲劑?;卮鹣铝袉栴}:(1)檸檬油的揮發(fā)性__________,易溶于__________,比重較__________。(2)提取檸檬油常見的原料是檸檬花與檸檬果皮,嫩的花朵在蒸餾過程中,精油易被水蒸氣分子破壞,所以可采納______________法。檸檬果皮精油的提取相宜采納______________法,此種方法是通過______________將檸檬油從混合物中分別出來,必經(jīng)步驟為(如圖):據(jù)試驗(yàn)流程圖回答下列問題:①A是________,目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②B過程一般加入相當(dāng)于檸檬果皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉,其目的是________________________________________________________________________。③C過程為________,目的是________________________________________________________________________。④試驗(yàn)過程中浸泡檸檬果皮后,需用清水洗滌,其目的是________________________________________________________________________。(3)采納檸檬油作為殺蟲劑,可以解決其他殺蟲劑給人類帶來的隱患,其突出的優(yōu)點(diǎn)是________________________________________________________________________。(4)從生產(chǎn)綠色食品的要求動(dòng)身,寫出防治害蟲的三種方法:________________________________________________________________________。6.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸肯定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入肯定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培育基。回答下列問題:(1)M培育基若用于真菌的篩選,則培育基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制________的生長,加入了鏈霉素的培育基屬于________________培育基。(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應(yīng)了多種養(yǎng)分物質(zhì),養(yǎng)分物質(zhì)類型除氮源外還有________________________(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參加合成的生物大分子有________________________(答出兩點(diǎn)即可)。(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培育,平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是________________________________________________________________________,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是______________________。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其緣由是________________。7.[2024·廣東廣州調(diào)研]如圖表示某種細(xì)菌的試驗(yàn)室培育過程,其中Ⅳ中出現(xiàn)了6個(gè)菌落。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題:(1)Ⅳ是固體培育基,與Ⅱ(Ⅲ)中的液體培育基所含的基本成分相同,都含有__________________,不同的是制作Ⅳ時(shí)加入了__________從而使培育基呈固態(tài)。(2)鑒定前進(jìn)行細(xì)菌培育,目的是________________;兩次接種均應(yīng)在________條件下操作,以防止雜菌污染。(3)Ⅳ中出現(xiàn)的志向菌落應(yīng)分別由________形成。若菌落連成片,則應(yīng)對(duì)Ⅲ中的培育液進(jìn)行________處理后再接種;通過視察菌落的________能初步鑒定可疑細(xì)菌。(4)為進(jìn)一步了解這種細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感性,現(xiàn)用青霉素、羅紅霉素進(jìn)行試驗(yàn),請(qǐng)簡述試驗(yàn)思路:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。8.回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:(1)分別培育酵母菌通常運(yùn)用________________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培育基,該培育基應(yīng)采納________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培育一段時(shí)間后可視察到菌落,菌落的含義是________________。(2)酵母菌液體培育時(shí),若通入氧氣,可促進(jìn)________________(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進(jìn)行厭氧培育,可促進(jìn)______________(填“菌體快速增殖”、“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時(shí),為使面包松軟通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的緣由是____________________。9.(節(jié)選)酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培育,這樣既可削減污染又可降低生產(chǎn)成本。探討人員擬從土壤樣品中分別該類酵母,并進(jìn)行大量培育。下圖所示為操作流程,請(qǐng)回答下列問題:(1)配制培育基時(shí),依據(jù)培育基配方精確稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)整培育基的__________________,剛好對(duì)培育基進(jìn)行分裝,并進(jìn)行____________滅菌。(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無菌培育皿中,在步驟③中將溫度約__________________(在25℃、50℃或80℃中選擇)的培育基倒入培育皿混勻,冷凝后倒置培育。(3)挑取分別平板中長出的單菌落,按步驟④所示進(jìn)行劃線。下列敘述合理的有________________________________________________________________________。a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)運(yùn)用前都必需滅菌b.劃線時(shí)應(yīng)避開劃破培育基表面,以免不能形成正常菌落c.挑取菌落時(shí),應(yīng)挑取多個(gè)菌落,分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量d.可以通過逐步提高培育基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株專練100生物技術(shù)實(shí)踐綜合練1.(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料解析:本題借助微生物培育與篩選的相關(guān)學(xué)問,考查對(duì)相關(guān)操作技能的駕馭以及將試驗(yàn)方法和技能進(jìn)行敏捷運(yùn)用的實(shí)力;試題通過對(duì)高效降解X細(xì)菌的篩選,體現(xiàn)了科學(xué)探究中的結(jié)果分析要素。(1)在I號(hào)培育基中,牛肉膏、蛋白胨可以為微生物供應(yīng)氮源,Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基中為微生物供應(yīng)碳源的是有機(jī)物X。(2)Ⅱ號(hào)培育基中,碳源只有X,不能降解X的細(xì)菌會(huì)因缺乏碳源而不能增殖,使該類細(xì)菌比例降低。(3)利用固體培育基對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí),需采納稀釋涂布平板法進(jìn)行接種。(4)在有氧條件下,丙酮酸可被分解為CO2和H2O且釋放能量,為該菌的生長供應(yīng)能量和合成其他物質(zhì)的原料。2.(1)W(2)乙乙菌落四周出現(xiàn)透亮圈,說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在無氮源培育基上,若細(xì)菌能生長,則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?4)①緩沖液②緩沖液不能降解W酶E與自然酶降解W的實(shí)力相近解析:本題借助微生物的篩選及酶活力對(duì)比試驗(yàn)的相關(guān)學(xué)問,考查考生對(duì)試驗(yàn)?zāi)康?、原理的理解和?duì)試驗(yàn)現(xiàn)象、結(jié)果的分析、說明實(shí)力。通過對(duì)不同種類微生物的篩選、純化及酶活力試驗(yàn)分析,體現(xiàn)了對(duì)科學(xué)探究素養(yǎng)中方案探討、結(jié)果分析要素的考查。(1)要從土壤中分別能降解W的細(xì)菌,培育基中應(yīng)以W為唯一氮源。(2)乙菌落四周出現(xiàn)透亮圈,說明乙菌能降解W。(3)要推斷甲、乙能否利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,?yīng)將甲、乙菌分別接種在無氮源的培育基上,視察細(xì)菌能否生長,若細(xì)菌能生長,則說明該細(xì)菌能利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?,否則不能。(4)①試驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循單一變量原則,C處應(yīng)滴加等量不含酶的緩沖液。②C處只滴加等量緩沖液,若C處沒有出現(xiàn)透亮圈,說明緩沖液不能降解W,若A、B處形成的透亮圈直徑大小相近,說明酶E與自然酶降解W的實(shí)力相近。3.(1)蒸餾法萃取法(2)水有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑(3)橘子皮芳香油含量較高(4)過濾(5)上油層的密度比水層小增加水層密度,使油和水分層(6)汲取芳香油中殘留的水分解析:(1)植物芳香油的提取可采納的方法有壓榨法、蒸餾法和萃取法等。(2)芳香油溶解性的特點(diǎn)是不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,因此可用有機(jī)溶劑作為提取劑來提取芳香油。(3)一般采納簇新的橘皮來提取橘皮精油,因?yàn)榇匦碌拈倨ぶ蟹枷阌秃枯^高。(4)除去液體中的固體常用方法是過濾。(5)芳香油密度比水小,且不溶于水,會(huì)浮在液體的表面。加入氯化鈉會(huì)增加水層密度,使油和水分層。(6)無水硫酸鈉的作用是汲取芳香油中殘留的水分。4.(1)高壓蒸汽滅菌瓊脂選擇(2)104(3)S的濃度超過某一值時(shí)會(huì)抑制菌株的生長(4)取淤泥加入無菌水中,涂布(或稀釋涂布)到乙培育基上,培育后計(jì)數(shù)(5)水、碳源、氮源和無機(jī)鹽解析:(1)試驗(yàn)時(shí),盛有水或培育基的搖瓶常采納高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。題圖中搖瓶M內(nèi)裝有液體培育基甲,培育皿中的培育基乙為固體培育基,相比甲需添加凝固劑Y瓊脂。依據(jù)題干信息,甲、乙培育基均為以S(一種含有C、H、N的有機(jī)物)為唯一氮源和碳源的培育基,可抑制或阻擋其他微生物繁殖,僅使能夠降解和利用S的菌株生長和繁殖,故屬于選擇培育基。(2)若使平板上長出的菌落數(shù)不超過200個(gè),則接種液中的菌體濃度至多為200個(gè)/0.1mL=2×103個(gè)/mL,已知搖瓶M中的細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL,則至少應(yīng)將搖瓶M中的菌液稀釋104倍。(3)S作為一種養(yǎng)分物質(zhì),在培育基中濃度過高,可導(dǎo)致培育液滲透壓上升,細(xì)菌細(xì)胞滲透失水,使其代謝速率下降;另一方面S作為污染物,其濃度過高可能抑制菌體生長、代謝和繁殖。(4)若要測定淤泥中能降解S的細(xì)菌細(xì)胞數(shù),需進(jìn)行的試驗(yàn)步驟如下:稱取肯定質(zhì)量(10g)的淤泥溶于肯定體積的(90mL)無菌水中,制備土壤浸出液,經(jīng)梯度稀釋(對(duì)于細(xì)菌,一般選用104、105、106倍的稀釋液)后,采納稀釋涂布平板法接種于以S為唯一碳源和氮源的固體培育基(即乙培育基)中,每個(gè)稀釋倍數(shù)下設(shè)置三組重復(fù)試驗(yàn);在相宜條件下培育,待長出菌落且菌落數(shù)目達(dá)到穩(wěn)定后,選取菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),統(tǒng)計(jì)并計(jì)算平均值。(5)在甲、乙兩種培育基中,S既作為碳源,又作為氮源,同時(shí)培育基中還含有水、無機(jī)鹽等養(yǎng)分物質(zhì)。5.(1)強(qiáng)有機(jī)溶劑輕(2)萃取壓榨機(jī)械壓力①石灰水破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止壓榨時(shí)果皮滑脫,提高出油率②使精油易與水分別③過濾除去固體物和殘?jiān)艹ナ宜?3)對(duì)人、動(dòng)物、植物均無毒性,削減對(duì)環(huán)境的污染(4)利用天敵進(jìn)行生物防治、運(yùn)用生物工程培育抗蟲品種作物、利用激素影響昆蟲的發(fā)育解析:(1)檸檬油的揮發(fā)性強(qiáng),易溶于有機(jī)溶劑,比重較輕。(2)水中蒸餾可能發(fā)生原料的焦糊問題,而且可能使某些有效成分高溫水解,凡存在上述問題的應(yīng)考慮萃取法或壓榨法。用壓榨法從檸檬果皮中提取檸檬油時(shí),應(yīng)用石灰水充分處理,以提高出油率,防止壓榨時(shí)滑脫等。為了使油與水易分別,還應(yīng)加入小蘇打和硫酸鈉。(3)檸檬油作為一種自然的殺蟲劑有其優(yōu)點(diǎn):對(duì)人、畜無毒,對(duì)植物無毒性,不污染環(huán)境。(4)防治害蟲的方法可結(jié)合其他生物學(xué)學(xué)問來解答,其方法較多,如利用生物天敵防治,利用性外激素干擾其交尾或誘捕,運(yùn)用生物工程如基因工程或誘變育種培育抗蟲作物品種等。6.(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈(4)乙同學(xué)的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差解析:(1)M培育基若用于真菌的篩選,要求M培育基能滿意真菌的生長,且能抑制其它微生物的生長,則培育基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制細(xì)菌的生長,加入了鏈霉素的培育基屬于選擇培育基。(2)微生物生長須要多種養(yǎng)分物質(zhì)除氮源外,還須要碳源、無機(jī)鹽、水以及特別養(yǎng)分物質(zhì)等。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參加合成的生物大分子有蛋白質(zhì)和核酸。(3)淀粉與碘液會(huì)變成藍(lán)色,篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物,依據(jù)淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈,再依據(jù)透亮圈,來篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物。(4)乙同學(xué)結(jié)果不合理,因?yàn)?個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差,不能簡潔的用其平均數(shù)作為最終結(jié)果。7.(1)水、碳源、氮源、無機(jī)鹽瓊脂(2)讓細(xì)菌繁殖,獲得足夠數(shù)量的細(xì)菌用于試驗(yàn)(合理即可)無菌(3)單個(gè)活細(xì)菌稀釋特征(4)分別配制濃度相宜且相同的青霉素、羅紅霉素溶液(無菌),打算多個(gè)與Ⅳ相同的(無菌)培育基,平均分成三組,用青霉素、羅紅霉素溶液分別處理兩組,另一組不處理作為比照,然后同時(shí)對(duì)三組進(jìn)行接種,在相宜條件下培育,視察菌落的生長狀況(合理即可)解析:(1)雖然各種培育基的詳細(xì)配方不同,但一般都含有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽。制作Ⅳ(固體培育基)時(shí)須要加入瓊脂作凝固劑。(2)鑒定前

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