DB22T 2623.2-2017 黑木耳菌種區(qū)別性及真實(shí)性鑒定 第2部分：酯酶同工酶法　　_第1頁(yè)
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備案號(hào)：56323-2017DB22DB22/T2623.2—2017黑木耳菌種區(qū)別性及真實(shí)性鑒定第2部分：酯酶同工酶法VerificationofdistinctnessandgenuinenessforBlackwoodearspawnPart2:Esteraseisozyme2017-06-12發(fā)布2017-08-12實(shí)施吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I——DB22/T2623.1黑木耳菌種區(qū)別性及真實(shí)性鑒定第1部分對(duì)峙培——DB22/T2623.2黑木耳菌種區(qū)別性及真實(shí)性鑒定第2部分酯酶——DB22/T2623.3黑木耳菌種區(qū)別性及真實(shí)性鑒定第3部分SRA1NY/T1097食用菌菌種真實(shí)性鑒定酯酶同工酶NY/T1097界定的以及下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復(fù)列出了NY/T10975.3樣品提取液（pH7.5見(jiàn)附錄B.1。2將研磨后的樣品在4℃下12000rpm，離心10min，取其上清液，將上清液和上樣緩沖液按10:1比例混分離膠濃度9%，按照分離膠緩沖液（附錄B.3）:分離膠母液（附錄B.5）:雙蒸水:過(guò)硫酸銨錄B.2）=2:5:1:8的比例配制，再加入膠溶液體積0.1%的TEMED，充分混勻。將分離膠灌入膠室至距短濃縮膠濃度3%，按照濃縮膠緩沖液（附錄B.4）:濃縮膠母液（附錄B.6）:雙蒸水:過(guò)硫酸銨（附3將電泳槽放入冰箱內(nèi)進(jìn)行低溫電泳，采用穩(wěn)壓電泳，電壓為130V，待指示劑進(jìn)入分離膠后，電壓4培養(yǎng)基制備5試劑的制備稱(chēng)取5.98g三羥甲基氨基甲烷（C4H11NO3，Tris用48mL1mol/LHCL溶解，TEMED稱(chēng)取28.0g丙烯酰胺（C3H5NO，Arc）、0.735g甲叉雙丙烯酰胺（C7H10N2O2，Bis），溶于水中，定稱(chēng)取10.0g丙烯酰

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