DB22T 394.3-2017 保健用品微生物檢驗方法 第3部分：銅綠假單胞菌測定　　

備案號：58311-2018DB22DB22/T394.3—2017保健用品微生物檢驗方法第3部分：銅綠假單胞菌測定MicrobiologicalexaminemethodforhealthcarematerialPart3:DeterminationofPseudomonasaeruginosa吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I本部分代替DB22/T394-2004《1警示——使用本標(biāo)準(zhǔn)的人員應(yīng)有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本標(biāo)準(zhǔn)并未指出所有可能的安全問銅綠假單胞菌Pseudomonasaer4.1滅菌生理鹽水:詳見附錄A.1。4.3滅菌吐溫-80:詳見附錄A.3。25.6無菌錐形瓶：100mL、25.14冰箱：2℃~5℃。驗時，應(yīng)從不少于2個包裝單位的取樣中共取10g(5.1)或10mL(5.2)。包裝量小于20g的樣品，采樣6.2.1供檢驗樣品，應(yīng)嚴(yán)格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應(yīng)有破裂，在檢驗前不得6.2.2接到樣品后，應(yīng)立即登記，編寫檢驗序號，并按檢驗要求盡快檢驗。如不能6.2.3若只有一個樣品而同時需做多種分析，如微生物、毒理、化學(xué)等，則宜先取6.2.4在檢驗過程中，從打開包裝到全部檢驗操作結(jié)束，均須防止微生物的再污染水溶性液體樣品，用滅菌吸管吸取10mL加到90mL（5.440℃~44℃水浴中（5.5）振蕩混合在40℃~44℃水浴中乳化，制成1:10的懸液。3親水性的樣品，稱取10g，加到裝有玻璃疏水性樣品，稱取10g，放到滅菌的研缽（5.7）中，加10mL滅菌液體石蠟，研磨成粘稠狀再加入10mL滅菌吐溫-80，研磨待溶解后，加70mL滅菌生理鹽水，在40℃~44℃水浴中充分混合，制成稱取10g，加到90mL滅菌生理鹽水中，充分振蕩（5.8）混勻，使其分散混懸，靜置后，取上清上，置36℃±1℃培養(yǎng)（5.9）18h～24h。凡4加入氯仿3mL～5mL（5.2充分振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于氯仿液內(nèi)，待氯仿提取液呈藍(lán)色時，用吸管將氯仿移到另一試管中并加入1mol±2h，觀察結(jié)果。凡在硝酸鹽胨水培養(yǎng)基內(nèi)的小倒管（5.12）中有氣體者，即為陽取出放置于4℃±2℃冰箱（5.14）10min報告被檢樣品中檢出銅綠假單胞菌；如綠膿菌素試驗陰性而液化明膠、硝酸鹽還原產(chǎn)氣和42℃生長試5試劑或材料A.1.1成分A.1.2制法A.4.1成分A.4.2制法6A.5.1成分A.5.2制法A.6.1成分無水磷酸二氫鉀硫酸鎂（MgSO4﹒7H2O）0.5gA.6.2制法除瓊脂和酚紅外，將其它成分加到蒸餾水中，加熱溶解，調(diào)pH為7.2，加A.7.1.2革蘭氏碘液碘7將碘與碘化鉀先進(jìn)行混合，加入蒸餾水少許，充分A.7.1.3脫色液A.7.1.4復(fù)染液A.7.1.4.1沙黃復(fù)染液A.7.2.1將涂片在火焰上固定，滴加結(jié)晶紫染色液，染1min，A.7.2.2滴加革蘭氏碘液，作用1min，A.8.1成分A.8.2制法將蛋白胨、氯化鎂和硫酸鉀加到蒸餾水中，加溫使其溶解，調(diào)pH至7.4，加入瓊脂和甘油，加熱溶A.9.1成分