考點(diǎn)57植物細(xì)胞工程-2022年高考生物一輪復(fù)習(xí)

考點(diǎn)57植物細(xì)胞工程【命題趨勢(shì)】高考主要考察植物組織培養(yǎng)。試題通常以獲得細(xì)胞工程產(chǎn)品的操作過(guò)程為背景，借助具體的技術(shù)流程，對(duì)操作過(guò)程中的特定要求、產(chǎn)品特點(diǎn)等進(jìn)行綜合考查。題型為非選擇題，難度適中。預(yù)計(jì)2022年仍可能依托某種新型產(chǎn)品的培育為線索，繼續(xù)對(duì)細(xì)胞工程的核心知識(shí)進(jìn)行考查?！局匾枷颉恐参锝M織培養(yǎng)過(guò)程分析植物體細(xì)胞雜交過(guò)程分析考向一植物組織培養(yǎng)過(guò)程分析考向一1．細(xì)胞工程（1）操作水平：細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平。（2）目的：按照人的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)物。2．植物細(xì)胞的全能性（1）概念：具有某種生物全部遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞，都具有發(fā)育成完整生物體的潛能。（2）原理：細(xì)胞內(nèi)含有本物種的全部遺傳信息。（3）全能性表達(dá)條件：具有完整的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，處于離體狀態(tài)，提供一定的營(yíng)養(yǎng)、激素和其他適宜外界條件。3．植物組織培養(yǎng)技術(shù)（1）原理：植物細(xì)胞具有全能性。（2）過(guò)程植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交的比較名稱(chēng)植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性過(guò)程選材選取根尖、莖尖、形成層部位最容易誘導(dǎo)脫分化不同的植物細(xì)胞技術(shù)操作脫分化、再分化等除脫分化、再分化外，還要用酶解法去除細(xì)胞壁，用一定的方法誘導(dǎo)細(xì)胞融合關(guān)系植物組織培養(yǎng)是植物體細(xì)胞雜交的基礎(chǔ)，植物體細(xì)胞雜交所用的技術(shù)更復(fù)雜【典例】1．植物組織培養(yǎng)中的“脫分化”過(guò)程是指（）A．已休眠的種子經(jīng)過(guò)處理使種子盡快萌發(fā)的過(guò)程B．植物根尖、莖尖等處分生組織細(xì)胞有絲分裂產(chǎn)生新細(xì)胞后分化為各種組織C．愈傷組織細(xì)胞分化為根與莖的過(guò)程D．離體的植物器官、組織、細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程【答案】D【分析】脫分化是指讓已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過(guò)程?！驹斀狻緼、已休眠的種子經(jīng)過(guò)處理使種子盡快萌發(fā)的過(guò)程，體現(xiàn)了細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化的過(guò)程，A錯(cuò)誤；B、植物根尖、莖尖等處分生組織細(xì)胞有絲分裂產(chǎn)生新細(xì)胞后分化為各種組織體現(xiàn)了細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化，B錯(cuò)誤；C、愈傷組織細(xì)胞分化為根與莖的過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化，C錯(cuò)誤；D、植物組織培養(yǎng)中的“脫分化”過(guò)程是指離體的植物器官、組織、細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織的過(guò)程，愈傷組織是指從外植體的內(nèi)部或切口表面形成的一團(tuán)沒(méi)有分化的組織，這種組織具有再分化的能力，D正確。故選D。2．下表為有關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)的比較，其中錯(cuò)誤的是（）選項(xiàng)比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)A原理動(dòng)物細(xì)胞核的全能性植物細(xì)胞的全能性B培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基C主要過(guò)程原代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)脫分化、再分化，形成植株D主要用途獲得大量細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物植物快速繁殖、獲得脫毒苗等A．A B．B C．C D．D【答案】A【分析】植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較：比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基性質(zhì)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（蔗糖）、植物激素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（葡萄糖）、動(dòng)物血清等培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目的快速繁殖、培育無(wú)毒苗等獲得細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物【詳解】A、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)使用液體培養(yǎng)基，制成細(xì)胞懸液；植物組織培養(yǎng)一般使用固體培養(yǎng)基，B正確；C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的主要過(guò)程是原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)的主要過(guò)程是脫分化、再分化、形成完整植株，C正確；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的目的是獲得大量細(xì)胞或細(xì)胞產(chǎn)物，植物組織培養(yǎng)主要用于植物快速繁殖、獲得脫毒苗、制備人工種子等，D正確。故選A。3．將離體的胡蘿卜形成層脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中，下列哪項(xiàng)條件是不需要的（）A．消毒滅菌 B．適宜的溫度C．充足的光照 D．適宜的養(yǎng)料和激素【答案】C【分析】①由離體的植物器官、組織或細(xì)胞形成愈傷組織的過(guò)程是植物組織培養(yǎng)過(guò)程中的一個(gè)階段．該階段要進(jìn)行細(xì)胞的增殖和細(xì)胞的脫分化，這就必須要有適宜的養(yǎng)料和激素，必須要有適宜的溫度，這樣，才能保證細(xì)胞進(jìn)行正常的新陳代謝。②由離體的植物器官、組織形成愈傷組織必須是在無(wú)菌條件下，只有在這樣的條件下，才能保證培養(yǎng)產(chǎn)生出的細(xì)胞是正常細(xì)胞，否則培養(yǎng)基內(nèi)將長(zhǎng)出許多霉菌，與離體細(xì)胞爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)與生存空間，形成不愈傷組織。③由于此階段形成的是愈傷組織，并沒(méi)有形成具有根、莖、葉的植物體，因此不需要光照。【詳解】A、根據(jù)以上分析可知，植物組織培養(yǎng)過(guò)程中需要無(wú)菌的條件下進(jìn)行，A不符合題意；BD、該階段要進(jìn)行細(xì)胞的增殖和細(xì)胞的脫分化，這就必須要有適宜的養(yǎng)料和激素，必須要有適宜的溫度，這樣，才能保證細(xì)胞進(jìn)行正常的新陳代謝，BD不符合題意；C、當(dāng)植物還在脫分化形成愈傷組織的時(shí)候不能進(jìn)行光合作用，所以自然也就不需要光照，如果有光就不形成愈傷組織，而是形成維管組織，C符合題意。故選C。4．甜葉菊植株中所含甜菊糖的甜度是蔗糖的300倍左右，而它的熱量卻很低，是一種非常理想的蔗糖替代甜味劑。甜葉菊的種子小，發(fā)芽率低，種子繁殖的遺傳性狀不穩(wěn)定，可利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)提高甜葉菊繁殖效率。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)，依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性B．植物組織培養(yǎng)的基本步驟是“取材—消毒—愈傷組織培養(yǎng)—生根—出芽—移栽”C．愈傷組織再分化為根和芽，本質(zhì)上是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果D．培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素含量的比值顯著高于1時(shí)，可促進(jìn)愈傷組織分化出根【答案】B【分析】植物組織培養(yǎng)技術(shù)：1、過(guò)程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。2、原理：植物細(xì)胞的全能性。3、條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。4、植物細(xì)胞工程技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（包括微型繁殖，作物脫毒、人工種子等）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斀狻緼、植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)，依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性，A正確；B、植物組織培養(yǎng)的基本步驟是“取材—消毒—愈傷組織培養(yǎng)—出芽—生根—移栽”，B錯(cuò)誤；C、愈傷組織的再分化屬于細(xì)胞分化，本質(zhì)上是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，C正確；D、培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素含量的比值顯著高于1時(shí)，可誘導(dǎo)生根，D正確。故選B。5．下圖是利用三倍體香蕉的莖尖培養(yǎng)脫毒香蕉植株的過(guò)程示意圖，下列敘述正確的是A．①—③過(guò)程中發(fā)生了有絲分裂和減數(shù)分裂B．對(duì)香蕉進(jìn)行花藥離體培養(yǎng)可獲得單倍體C．②階段為脫分化過(guò)程D．X代表愈傷組織【答案】D【詳解】A、①～③過(guò)程中發(fā)生了有絲分裂，但沒(méi)有發(fā)生減數(shù)分裂，故A錯(cuò)誤；B、三倍體香蕉高度不育，不能產(chǎn)生配子，故B錯(cuò)誤；C、②階段表示再分化過(guò)程，故C錯(cuò)誤；D、X是經(jīng)過(guò)①脫分化過(guò)程形成的愈傷組織，故D正確．故選D考向二植物體細(xì)胞雜交過(guò)程分析考向二植物細(xì)胞工程的應(yīng)用（1）微型繁殖：優(yōu)點(diǎn)是能夠保持親本的優(yōu)良性狀。（2）作物脫毒：利用莖尖、根尖等無(wú)毒組織進(jìn)行微型繁殖。（3）培育人工種子：可以解決某些植物結(jié)實(shí)率低、繁殖困難的問(wèn)題。（4）作物新品種的培育：?jiǎn)伪扼w育種和突變體的利用。（5）細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)：即利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類(lèi)、藥物、香料和生物堿等。植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中雜種細(xì)胞類(lèi)型及檢測(cè)方法（1）誘導(dǎo)產(chǎn)物(假設(shè)用于雜交的兩種植物細(xì)胞分別為A、B)：①未融合的細(xì)胞：A和B。②兩兩融合的細(xì)胞：AA、BB和AB。③多細(xì)胞融合體。（2）檢測(cè)方法：對(duì)誘導(dǎo)產(chǎn)物中的細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，然后根據(jù)得到的植物的性狀進(jìn)行判斷。①若只表現(xiàn)出一種植物的性狀，說(shuō)明是未融合細(xì)胞。②若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說(shuō)明是雜種植株。③若得到的是具有兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加強(qiáng)，則是多細(xì)胞融合體。④若只表現(xiàn)出一種植物的性狀且效果得到加強(qiáng)，則是同種細(xì)胞融合的結(jié)果。【典例】6．下列敘述中，與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)不相關(guān)的是（）A．利用離心、振動(dòng)、電激等方法誘導(dǎo) B．利用聚乙二醇（PEG）等試劑誘導(dǎo)C．克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 D．快速繁殖、培育無(wú)病毒植物【答案】D【分析】植物體細(xì)胞雜交就是將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)?！驹斀狻緼B、植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中，利用離心、振動(dòng)、電激等物理方法或聚乙二醇（PEG）等試劑誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，AB不符合題意；C、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)克服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，使新的植物體兼具了雙親的優(yōu)良性狀，C不符合題意；D、快速繁殖、培育無(wú)病毒植物是植物組織培養(yǎng)的的應(yīng)用實(shí)例，不屬于植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的應(yīng)用，D符合題意。故選D。7．兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過(guò)程如圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．紫外線照射可誘導(dǎo)中間偃麥草的染色體發(fā)生斷裂B．過(guò)程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段D．該育種技術(shù)打破了不同物種間的生殖隔離，克服了遠(yuǎn)緣雜交障礙【答案】B【分析】分析題圖：①表示去壁過(guò)程，常用酶解法；②表示用紫外線照射使中間偃麥草的染色體斷裂；③表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合形成雜種細(xì)胞。【詳解】A、若在細(xì)胞融合前染色體發(fā)生斷裂，形成的染色體片段可能不會(huì)被全部排出，而是整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上留存在雜種細(xì)胞中。所以過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂，并進(jìn)一步整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上留存在雜種細(xì)胞中，A正確；B、過(guò)程③為誘導(dǎo)融合，植物細(xì)胞一般不用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，常采用化學(xué)法（聚乙二醇）或物理法（振動(dòng)、離心、電刺激）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，B錯(cuò)誤；C、由題可知，經(jīng)過(guò)體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，說(shuō)明中間偃麥草的染色體被紫外線照射后發(fā)生了斷裂，且其片段已經(jīng)整合到了耐鹽小麥的染色體上，C正確。D、該育種技術(shù)為植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，該技術(shù)獲得耐鹽小麥的理論意義在于突破了物種間的生殖隔離，大大擴(kuò)展了可用于雜交的親本組合的范圍，D正確。故選B。8．如圖為利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育“番茄—馬鈴薯”的流程圖，圖中①~④表示操作過(guò)程，下列分析錯(cuò)誤的是（）A．①過(guò)程用纖維素酶和果膠酶處理番茄細(xì)胞利用了酶的專(zhuān)一性B．熒光標(biāo)記的目的是便于檢查篩選融合原生質(zhì)體C．②過(guò)程需要用PEG、滅活病毒等誘導(dǎo)D．③④過(guò)程中用的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例不同【答案】C【分析】分析題圖可知，①是表示用酶解法去除細(xì)胞壁；②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合；③是雜種細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；④是再分化形成雜種植株?！驹斀狻緼、細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，①過(guò)程用纖維素酶和果膠酶處理番茄細(xì)胞利用了酶的專(zhuān)一性，A正確；B、熒光標(biāo)記的目的是便于檢查篩選融合原生質(zhì)體，B正確；C、②過(guò)程常用的方法有電刺激、PEG誘導(dǎo)，但不采用滅活的病毒，C錯(cuò)誤；D、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的濃度和比例可以調(diào)控③④過(guò)程中細(xì)胞的脫分化和再分化，D正確。故選C。9．某二倍體藥用植物甲（染色體組成為MM）含有有效成分A，二倍體藥用植物乙（染色體組成為NN）含有有效成分B?？蒲行〗M擬培育同時(shí)含有A和B的新型藥用植物，設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)流程。據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是（）A．過(guò)程①通常用纖維素酶和果膠酶處理B．過(guò)程②常使用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑C．融合細(xì)胞c的染色體組成都是MMNND．過(guò)程④⑤分別涉及細(xì)胞的脫分化和再分化【答案】C【分析】分析題干可知，該新型藥用植物可通過(guò)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得。首先用纖維素酶和果膠酶去掉植物的細(xì)胞壁，獲得有活力的原生質(zhì)體，再用PEG化學(xué)誘導(dǎo)劑（物理方法：離心、振動(dòng)等）誘導(dǎo)二者的原生質(zhì)體整合，然后采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得雜種植株。植物組織培養(yǎng)的過(guò)程是，先脫分化形成愈傷組織，然后再分化形成植物體。其原理是植物細(xì)胞的全能性。植物體細(xì)胞雜交技術(shù)育種的優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙?！驹斀狻緼、①是去除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過(guò)程，由于植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專(zhuān)一性，該過(guò)程需要纖維素酶和果膠酶，A正確；B、植物原生質(zhì)體的融合通常使用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑，B正確；C、在進(jìn)行原生質(zhì)體融合時(shí)，會(huì)出現(xiàn)多種融合細(xì)胞，如染色體組成為MMMM、NNNN和MMNN的細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、過(guò)程④⑤分別通過(guò)脫分化和再分化過(guò)程，進(jìn)而形成試管苗，D正確。故選C。10．通過(guò)植物細(xì)胞工程技術(shù)，可利用甲高產(chǎn)不耐鹽、乙低產(chǎn)耐鹽的兩種二倍體植物培育高產(chǎn)耐鹽的雜種植株，實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。下列敘述正確的是（）

A．①通常將植物細(xì)胞置于含纖維素酶和果膠酶的低滲溶液中處理B．②到③的過(guò)程中，雜種細(xì)胞內(nèi)高爾基體和線粒體活動(dòng)明顯增強(qiáng)C．由④到目的植株需進(jìn)一步篩選的原因是④中含有高產(chǎn)不耐鹽品種D．目的植株相對(duì)于甲、乙而言發(fā)生了染色體數(shù)目變異導(dǎo)致植株不可育【答案】B【分析】由圖分析可知，①是酶解法去除細(xì)胞壁，②是誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，③是雜種細(xì)胞，④是篩選獲得的具有耐鹽特性的胚狀體?！驹斀狻緼、①是利用纖維素酶和果膠酶獲取原生質(zhì)體的過(guò)程，該過(guò)程需要在等滲透液中進(jìn)行，以維持原生質(zhì)體的形態(tài)和功能，A錯(cuò)誤；B、②到③的過(guò)程是融合細(xì)胞再生細(xì)胞壁的過(guò)程，而高爾基體與植物細(xì)胞壁的形成有關(guān)，線粒體可為該過(guò)程提供能量，故雜種細(xì)胞內(nèi)高爾基體和線粒體活動(dòng)明顯增強(qiáng)，B正確；C、④是篩選獲得的具有耐鹽特性的胚狀體，但不能確定其是高產(chǎn)還是低產(chǎn)，故需要進(jìn)一步篩選，C錯(cuò)誤；D、甲、乙是二倍體植株，通過(guò)體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得的目的植株是四倍體，是可育的，D錯(cuò)誤。故選B。1．下面為番茄組織培養(yǎng)過(guò)程的流程圖解，以下相關(guān)敘述不正確的是（）A．脫分化發(fā)生在b步驟，形成愈傷組織，在此過(guò)程中植物激素發(fā)揮了重要作用B．人工種子可以完全保持優(yōu)良品種的遺傳性狀C．從葉組織塊到種苗形成的過(guò)程說(shuō)明番茄葉片細(xì)胞具有全能性D．人工種子的缺點(diǎn)是易受季節(jié)、氣候和地域的限制2．胚狀體是在植物組織培養(yǎng)的哪一階段上獲得的（）A．愈傷組織的形成中 B．再分化C．形成完整植株 D．脫分化3．下列關(guān)于人工種子的敘述中，不正確的是（）A．可以克服季節(jié)、氣候、地域的限制 B．可以節(jié)約時(shí)間C．可防止性狀分離 D．由人工種子得到的植株為純合子4．下圖為煙草植物組織培養(yǎng)過(guò)程的流程圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．對(duì)過(guò)程①獲取的根組織塊應(yīng)做較徹底的滅菌處理B．過(guò)程②應(yīng)根據(jù)要求使用適宜的培養(yǎng)基，在避光的環(huán)境中進(jìn)行C．過(guò)程③發(fā)生脫分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)D．用X細(xì)胞包裹人工種皮可獲得煙草人工種子5．植物原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)是以細(xì)胞全能性為理論基礎(chǔ)建立的一種離體培養(yǎng)技術(shù)，首先用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，然后向原生質(zhì)體中導(dǎo)入抗病基因或含有抗病基因的DNA片段，再將其轉(zhuǎn)移至合適的環(huán)境中，再生細(xì)胞壁、形成愈傷組織、得到胚狀體，最終發(fā)育成完整的植株，下列說(shuō)法正確的是（）A．該培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞壁的再生需要經(jīng)過(guò)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的作用B．誘導(dǎo)形成愈傷組織的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素所占比值一定高于細(xì)胞分裂素C．將導(dǎo)入外源基因的原生質(zhì)體培養(yǎng)至愈傷組織，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性D．從原生質(zhì)體到愈傷組織的過(guò)程中，基因進(jìn)行了選擇性表達(dá)6．如圖表示某植物的培育過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖判斷下列說(shuō)法中錯(cuò)誤的是（）

A．C中是高度液泡化的薄壁細(xì)胞B．A→F不能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性C．植株A和F中的染色體組數(shù)不同D．植株F一般不能直接應(yīng)用于生產(chǎn)7．科研人員研究了馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響，結(jié)果如圖。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．培育脫毒苗所依據(jù)的原理有基因突變和細(xì)胞全能性B．培育脫毒苗的過(guò)程中涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段C．實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莖尖越小脫毒率越高，成苗率越低D．根據(jù)本實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)脫毒苗時(shí)莖尖的適宜大小為0．27mm8．如圖表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過(guò)程，據(jù)圖分析錯(cuò)誤的是（）A．①過(guò)程需用纖維素酶和果膠酶的混合物處理B．②過(guò)程能定向誘導(dǎo)原生質(zhì)體產(chǎn)生優(yōu)良性狀的突變C．③過(guò)程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能D．④過(guò)程需用適宜配比的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素處理9．馬鈴薯四倍體栽培種沒(méi)有青枯病的抗性基因，少數(shù)馬鈴薯野生種存在青枯病的抗性基因。由于核型等差異，野生種難以與四倍體馬鈴薯栽培種直接雜交繁育，為獲得具有抗青枯病的馬鈴薯栽培種，研究人員進(jìn)行了植物體細(xì)胞雜交的實(shí)驗(yàn)研究（已知雜種細(xì)胞會(huì)發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象），過(guò)程如下圖所示。下列分析正確的是（）A．在低滲溶液中，用酶解法或聚乙二醇處理A和B可以獲得兩種原生質(zhì)體B．過(guò)程①體現(xiàn)了生物膜的流動(dòng)性，可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細(xì)胞CC．過(guò)程②所配制的培養(yǎng)基中添加了等量的生長(zhǎng)素類(lèi)和赤霉素類(lèi)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑D．過(guò)程③為脫分化、再分化過(guò)程，可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株的抗病性狀10．下列對(duì)植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較，描述正確的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同，誘導(dǎo)融合的方法也完全相同B．只有植物體細(xì)胞雜交可跨越種屬間的生殖隔離，突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能C．利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)而發(fā)展起來(lái)的雜交瘤技術(shù)，為生產(chǎn)單克隆抗體開(kāi)辟了新途徑D．目前科學(xué)家終于實(shí)現(xiàn)了兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交，得到了同時(shí)具有兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)的超級(jí)植物，并使它們的性狀全部得以體現(xiàn)1．（2020·北京高考真題）為培育具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的無(wú)籽柑橘，研究者設(shè)計(jì)如下流程。相關(guān)敘述不正確的是（）A．過(guò)程①需使用胰蛋白酶處理B．實(shí)現(xiàn)過(guò)程②依賴(lài)膜的流動(dòng)性C．過(guò)程③需應(yīng)用植物組培技術(shù)D．三倍體植株可產(chǎn)生無(wú)籽柑橘2．（2020·山東高考真題）兩種遠(yuǎn)緣植物的細(xì)胞融合后會(huì)導(dǎo)致一方的染色體被排出。若其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前由于某種原因斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中。依據(jù)該原理，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，過(guò)程如下圖所示。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A．過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理細(xì)胞B．過(guò)程②的目的是使中間偃麥草的染色體斷裂C．過(guò)程③中常用滅活的病毒誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合D．耐鹽小麥的染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段二、綜合題3．（2021·浙江高考真題）回答下列（一）、（二）小題：（一）某環(huán)保公司從淤泥中分離到一種高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備了固定化菌株。（1）從淤泥中分離細(xì)菌時(shí)常用劃線分離法或________法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成________。對(duì)分離的菌株進(jìn)行誘變、________和鑒定，從而獲得能高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的菌株。該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖。（2）固定化菌株的制備流程如下；①將菌株與該公司研制的特定介質(zhì)結(jié)合；②用蒸餾水去除________；③檢驗(yàn)固定化菌株的________。菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法，可以采用的2種方法是________。（3）對(duì)外，只提供固定化菌株有利于保護(hù)該公司的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，推測(cè)其原因是________。（二）三葉青為蔓生的藤本植物，以根入藥。由于野生三葉青對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境要求非常苛刻，以及生態(tài)環(huán)境的破壞和過(guò)度的采挖，目前我國(guó)野生三葉青已十分珍稀。（1）為保護(hù)三葉青的________多樣性和保證藥材的品質(zhì)，科技工作者依據(jù)生態(tài)工程原理，利用________技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了三葉青的林下種植。（2）依據(jù)基因工程原理，利用發(fā)根農(nóng)桿菌侵染三葉青帶傷口的葉片，葉片產(chǎn)生酚類(lèi)化合物，誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)形成________和限制性核酸內(nèi)切酶等，進(jìn)而從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（TDNA）。TDNA進(jìn)入葉片細(xì)胞并整合到染色體上，TDNA上rol系列基因表達(dá)，產(chǎn)生相應(yīng)的植物激素，促使葉片細(xì)胞持續(xù)不斷地分裂形成________，再分化形成毛狀根。（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類(lèi)抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次________培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是________。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過(guò)控制搖床的________和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的________，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。4．（2020·北京高考真題）研究者以擬南芥根段作為組織培養(yǎng)材料，探討了激素誘導(dǎo)愈傷組織分化生芽的機(jī)制。（1）離體的擬南芥根段在適宜條件下可以培育出完整的植株，說(shuō)明植物細(xì)胞具有__________。在組織培養(yǎng)過(guò)程中，根段細(xì)胞經(jīng)過(guò)__________形成愈傷組織，此后調(diào)整培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素（CK）與生長(zhǎng)素的比例可誘導(dǎo)愈傷組織分化。（2）在愈傷組織生芽過(guò)程中，CK通過(guò)ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。為探討A基因與W基因的關(guān)系，將A基因功能缺失突變體（突變體a）和野生型的愈傷組織分別置于CK與生長(zhǎng)素比例高的（高CK）培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生芽，在此過(guò)程中測(cè)定W基因的表達(dá)量。圖1中，野生型的W基因表達(dá)量與高CK誘導(dǎo)時(shí)間的關(guān)系是____________________。分析圖1結(jié)果可得出的結(jié)論是：在高CK誘導(dǎo)下A基因促進(jìn)W基因表達(dá)。得出結(jié)論的依據(jù)為：與野生型相比，________________________________________________。（3）用轉(zhuǎn)基因方法在上述突變體a中過(guò)量表達(dá)W基因，獲得材料甲。將材料甲、突變體a和野生型三組愈傷組織在高CK培養(yǎng)基中培養(yǎng)，三組愈傷組織分化生芽的比例如圖2，由此能得出的結(jié)論包括__________。A．A基因在愈傷組織分化生芽的過(guò)程中起作用B．w基因的表達(dá)產(chǎn)物調(diào)控A基因的表達(dá)C．缺失A基因時(shí)W基因表達(dá)不能促進(jìn)生芽D．過(guò)量表達(dá)W基因可使生芽時(shí)間提前5．（2020·天津高考真題）某植物有A、B兩品種?？蒲腥藛T在設(shè)計(jì)品種A組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種B的最佳激素配比（見(jiàn)下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。品種B組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素濃度（μmol/L）生長(zhǎng)素濃度（μmol/L）Ⅰ誘導(dǎo)形成愈傷組織m1n1Ⅱ誘導(dǎo)形成幼芽m2n2Ⅲ誘導(dǎo)生根m3n3據(jù)表回答：（1）Ⅰ階段時(shí)通常選擇莖尖、幼葉等作為外植體，原因是________________。（2）在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是________________階段。（3）為確定品種A的Ⅰ階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照品種B的激素配比（m1>2．0），以0．5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞分裂素最高濃度應(yīng)設(shè)為_(kāi)_______μmol/L。（4）Ⅲ階段時(shí)，科研人員分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長(zhǎng)素處理品種A幼芽都能達(dá)到最佳生根效果，原因是處理幼芽時(shí)，選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為_(kāi)_______，選用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為_(kāi)_______。（5）在________階段用秋水仙素對(duì)材料進(jìn)行處理，最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體1．下列有關(guān)菊花組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．外植體接種前常進(jìn)行流水沖洗、酒精處理、消毒液處理等消毒措施B．外植體一般選自于未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的嫩枝C．培養(yǎng)形成的愈傷組織可繼續(xù)在原培養(yǎng)基中分化形成植株D．為充分利用培養(yǎng)條件，每個(gè)錐形瓶可接種6～8個(gè)外植體2．草莓通過(guò)匍匐莖繁殖出新的植株如圖，其繁殖方式屬于（）A．出芽生殖 B．營(yíng)養(yǎng)繁殖C．孢子生殖 D．分裂生殖3．為拯救珍惜植物紅豆杉，并同時(shí)獲得高抗癌活性物質(zhì)——紫杉醇，科研小組設(shè)計(jì)了如圖所示的實(shí)驗(yàn)流程。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．誘導(dǎo)紅豆杉莖尖經(jīng)過(guò)再分化過(guò)程形成愈傷組織B．整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例固定不變C．用液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)愈傷組織生產(chǎn)紫杉醇時(shí)，通常要通人無(wú)菌空氣D．同一株植物不同部位的組織細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的植株基因型一定相同4．下列關(guān)于消毒和滅菌的理解正確的是（）A．無(wú)菌技術(shù)中，若處理對(duì)象為液體，則只能消毒，不能滅菌B．培養(yǎng)皿、MS培養(yǎng)基可用干熱滅菌法滅菌C．高壓蒸汽滅菌完成后，待壓力表降至零時(shí)，再打開(kāi)排氣閥排氣D．外植體消毒時(shí)常用硝酸銀溶液處理12min二、綜合題5．中國(guó)科學(xué)家屠呦呦從植物黃花蒿中發(fā)現(xiàn)并提取青蒿素挽救了數(shù)百萬(wàn)人的生命。研究表明，青蒿素易溶于丙酮、乙酸乙酯、氯仿、苯、乙醚及石油醚。幾乎不溶于水。（1）植物芳香油的提取方法有_______________、___________和萃取等，應(yīng)采用___________法從黃花蒿中提取青蒿素。（2）可以用青蒿芽通過(guò)_____________技術(shù)獲得大量的用于提取青蒿素的幼苗，該過(guò)程的原理是__________________________，該過(guò)程所需的是MS培養(yǎng)基，在MS培養(yǎng)基中添加有機(jī)物時(shí)，用____________作碳源，如果用葡萄糖作碳源會(huì)導(dǎo)致植物細(xì)胞________而影響生長(zhǎng)。6．回答下列（一）、（二）小題：（一）回答果酒與果醋制作有關(guān)的問(wèn)題：（1）用干酵母作為發(fā)酵菌釀制果酒時(shí)，需先將適量干酵母放在小燒杯中，加入少量溫水（<40℃）和一小撮蔗糖制成________，待其出現(xiàn)________，表明干酵母已活化。（2）酵母菌在生長(zhǎng)繁殖和進(jìn)行發(fā)酵時(shí)，會(huì)產(chǎn)生少量尿素，尿素會(huì)與酒精反應(yīng)生成有害物質(zhì)，可用脲酶處理予以分解，但在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中不宜直接將脲酶加入酒體中，原因有________（答出1點(diǎn)），可將脲酶和海藻酸鈉混合，用注射器滴入凝結(jié)液中形成珠粒，這種固定化酶的方法稱(chēng)為_(kāi)_______。（3）用果酒釀制果醋時(shí)，發(fā)酵瓶中先裝八分滿的經(jīng)________處理的鋸末，然后加入含有醋桿菌的________使醋桿菌附著在鋸末上，成為固定化醋桿菌。采用固定化醋桿菌而不是固定化酶進(jìn)行醋酸發(fā)酵的主要原因是________。（4）為進(jìn)一步測(cè)定果醋中還原糖的含量，可以在發(fā)酵產(chǎn)物中加入還原糖顯色劑，用光電比色法測(cè)定顯色產(chǎn)物的光密度值，并將測(cè)定值與________比對(duì)，計(jì)算其含量。（二）回答與轉(zhuǎn)基因植物的培育和植物克隆有關(guān)的問(wèn)題：木瓜環(huán)斑病毒（PRV）是一種對(duì)木瓜危害極大的病毒，科學(xué)家通過(guò)基因工程技術(shù)將抗環(huán)斑病毒基因（PRSV）導(dǎo)入木瓜中表達(dá)出抗環(huán)斑病蛋白，從而獲得抗環(huán)斑病的木瓜。（1）構(gòu)建重組DNA分子時(shí)，使用兩種限制性核酸內(nèi)切酶處理，優(yōu)點(diǎn)是可防止目的基因和切割后的載體DNA自身環(huán)化及________。為使PRSV高效表達(dá)，需要對(duì)重組載體上目的基因相關(guān)的________序列進(jìn)行修飾。（2）獲取活性強(qiáng)的農(nóng)桿菌菌液，通過(guò)冰浴、離心、去上清液等相應(yīng)處理，加入適量預(yù)冷的含15%甘油的________溶液，制成感受態(tài)農(nóng)桿菌細(xì)胞。轉(zhuǎn)化后的農(nóng)桿菌要正常培養(yǎng)一段時(shí)間，才能置于含特定抗生素的培養(yǎng)基上篩選，正常培養(yǎng)一段時(shí)間的目的是________。優(yōu)先選用木瓜________（受傷的/完好的）葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化，促使其不斷分裂形成愈傷組織。（3）試管苗需鍛煉后才可移栽至大田，移栽時(shí)需先洗去________以免栽后發(fā)霉。（4）為了快速獲得穩(wěn)定遺傳的抗環(huán)斑病木瓜，可選擇________培養(yǎng)獲得的細(xì)胞系作為受體細(xì)胞。7．CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)榮獲2020年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)，CRISPR/Cas9系統(tǒng)由Cas9蛋白和一條向?qū)NA構(gòu)成。向?qū)NA中含20個(gè)堿基的識(shí)別序列，可以和目標(biāo)DNA的靶位點(diǎn)結(jié)合，在向?qū)NA引導(dǎo)下，Cas9將DNA雙鏈切斷（如圖1所示）。水稻是世界上最重要的糧食作物之一，供養(yǎng)了世界將近50%的人口。由子囊菌引起的稻瘟病，是水稻生產(chǎn)上最嚴(yán)重的病害之一，常常導(dǎo)致水稻產(chǎn)量嚴(yán)重?fù)p失。為研究水稻OsERF922基因與稻瘟病抗性的關(guān)系，我國(guó)科研工作者利用CRISPR/Cas9技術(shù)獲得了水稻OsERF922基因敲除植株。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）向?qū)NA和Cas9蛋白形成的復(fù)合物，在功能上接近于限制酶，但是它比限制酶更具備的優(yōu)勢(shì)是___________________________。（2）利用CRISPR/Cas9技術(shù)獲得了水稻OsERF922基因敲除植株實(shí)驗(yàn)步驟如下：根據(jù)OsERF922基因序列，選擇合適的___________________，設(shè)計(jì)向?qū)NA，然后利用PCR反應(yīng)得到向?qū)NA對(duì)應(yīng)的DNA片段，將該片段連接到CRISPR/Cas9載體上，得到CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體；CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體應(yīng)該具備的能力是：__________________________________________________。將CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體導(dǎo)入____________________，并用它侵染水稻細(xì)胞；再將被侵染成功的水稻細(xì)胞通過(guò)__________________技術(shù)，最終獲得OsERF922基因敲除水稻植株。（3）前人研究表明，下調(diào)OsERF922基因的表達(dá)能提高植物與防御相關(guān)的一些基因（如植物抗毒素生物合成酶）的表達(dá)量，據(jù)此推測(cè)OsERF922基因敲除水稻植株對(duì)稻瘟病的抵抗力會(huì)_________________（“增強(qiáng)”或者“減弱”）。要證明此推測(cè)，請(qǐng)簡(jiǎn)要寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路：________________。8．回答下列（一）、（二）小題：（一）某環(huán)保公司從污泥中分離到一種高效降解含氮污水的反硝化細(xì)菌菌株，能將硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氮?dú)猓?NO3+10e+12H+→N2+6H2O），菌株的篩選和固定化過(guò)程如下。（1）目的菌的篩選：將1g活性污泥梯度稀釋?zhuān)魅?．1ml稀釋液____________到選擇培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基的唯一N源是_________。為了鑒別是否為反硝化細(xì)菌，在此培養(yǎng)基中應(yīng)該加入________，適宜條件下培養(yǎng)獲得單菌落，再進(jìn)行選擇純化。（2）目的菌的固定：配制海藻酸鈉等溶液并用________法滅菌。然后采用_______________法固定，獲得固定化小球，用_______________沖洗并保存。制作的凝膠球不宜過(guò)大，否則會(huì)使小球的_______________減小，影響小球內(nèi)外物質(zhì)交換，進(jìn)而影響反硝化效率。（3）目的菌的反硝化效率測(cè)定：配制不同C/N的培養(yǎng)液，分別加入100粒固定化小球，振蕩培養(yǎng)48h后，測(cè)定培養(yǎng)液中NO3的去除率，結(jié)果如圖。用反硝化細(xì)菌進(jìn)行污水處理過(guò)程中，有時(shí)需要向污水中加入少量淀粉。結(jié)合實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，添加淀粉的主要目的是______________________________。（二）如圖為某一科研機(jī)構(gòu)培育純合的轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米的過(guò)程圖，據(jù)此回答：（1）培育該轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米的核心環(huán)節(jié)是______________________________。如果抗除草劑基因的堿基對(duì)序列未知，可以從_______________中獲得目的基因。（2）采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入抗除草劑基因時(shí)，將農(nóng)桿菌與單細(xì)胞混合培養(yǎng)一段時(shí)間后，在培養(yǎng)基中應(yīng)加入_______________，以便在培養(yǎng)植物細(xì)胞的同時(shí)去除農(nóng)桿菌。（3）在將單細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗前，要配制有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的含_______________瓊脂的培養(yǎng)基，倒在滅菌試管中凝固成_______________（A．固體B液體C．半固體）。（4）欲在組培階段篩選出抗除草劑的植物細(xì)胞，最簡(jiǎn)便的方法是______________________________。（5）經(jīng)過(guò)組織培養(yǎng)得到的幼苗常移至草炭土中，再逐漸降低環(huán)境中的__________進(jìn)行鍛煉，最后移至土中定植。（6）為了提高育種的成功率，應(yīng)該盡量選擇性狀優(yōu)良、_______________的玉米品種。9．下圖為細(xì)胞融合的簡(jiǎn)略過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖完成問(wèn)題：（1）若A、B是植物細(xì)胞，在細(xì)胞融合之前已用_______酶處理去掉了細(xì)胞壁，由此生成的A和B稱(chēng)為_(kāi)_________；A、B到細(xì)胞C的過(guò)程中，常用的物理方法有_____________（舉出2例）。（2）若A、B是動(dòng)物細(xì)胞，一般取自_______（填“幼齡”或“老齡”）健康動(dòng)物的組織，因?yàn)樵摻M織______________。對(duì)取出的組織先______________，然后用_____________處理使其分散開(kāi)來(lái)。A、B到C的過(guò)程中，常用的不用于植物細(xì)胞工程的方法是用_______誘導(dǎo)細(xì)胞融合。對(duì)融合得到的D進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)需要提供的氣體環(huán)境為_(kāi)___________加上5%的CO2，其中CO2的作用是________________。（3）若A為骨髓瘤細(xì)胞，B為經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞，那么D稱(chēng)為_(kāi)_____________，這種細(xì)胞既能__________，又能產(chǎn)生________________________。（4）若上述過(guò)程用于單克隆抗體的制備，為了大規(guī)模的生產(chǎn)單克隆抗體，還需對(duì)D進(jìn)行第二次篩選，第二次篩選的目的是篩選出____________________________的D細(xì)胞。10．研究人員將抗鹽基因轉(zhuǎn)入普通煙草培育出抗鹽煙草，該過(guò)程所用的質(zhì)粒與含抗鹽基因的DNA上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示。限制性核酸內(nèi)切酶BamHI、BclⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ，它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、T↓GATCA、↓GATC、A↓AGCTT。圖3表示該過(guò)程中利用含目的基因的農(nóng)桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化作用的示意圖。（1）圖1質(zhì)粒中沒(méi)有標(biāo)注出來(lái)的基本結(jié)構(gòu)是______________，該結(jié)構(gòu)中的堿基對(duì)AT的比例______________，利于DNA分子的解螺旋。（2）用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，可以用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒，用限制酶Sau3AⅠ切割含目的基因的DNA片段，可以這樣做的原因是____________________________。限制酶切斷的是DNA分子中特定部位的兩個(gè)脫氧核苷酸之間的______________，該過(guò)程還需要______________參與。（3）將上述切開(kāi)的質(zhì)粒與目的基因混合，加入DNA連接酶連接后，導(dǎo)入受體細(xì)胞（不考慮基因突變），受體細(xì)胞的類(lèi)型包含______________A．抗X、抗YB．抗X、不抗YC．不抗X、抗YD．不抗X、不抗Y（4）圖3過(guò)程______________（填序號(hào)）中發(fā)生了基因重組，過(guò)程②、③所用的培養(yǎng)基中，通常要調(diào)控好______________和______________兩類(lèi)激素的比例。（5）鑒定抗鹽轉(zhuǎn)基因煙草是否抗鹽的方法是____________________________。參考答案跟蹤訓(xùn)練1．D【分析】分析題圖：圖示為植物組織培養(yǎng)過(guò)程圖解，其中a表示獲取葉片組織塊，b表示脫分化過(guò)程，c表示再分化過(guò)程，d表示胚狀體包裹人工種皮形成人工種子的過(guò)程；e表示個(gè)體發(fā)育過(guò)程?！驹斀狻緼、圖中脫分化過(guò)程發(fā)生在b步驟，在此過(guò)程中植物激素發(fā)揮重要作用，脫分化形成了愈傷組織，A正確；B、人工種子不會(huì)造成遺傳性狀的改變，可以完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性，B正確；C、由體細(xì)胞形成完整的植株，體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，因?yàn)槠渚哂斜疚锓N全部的遺傳信息，C正確；D、人工種子的優(yōu)點(diǎn)之一是不受季節(jié)、氣候和地域的限制，D錯(cuò)誤。

故選D。2．B【分析】植物組織培養(yǎng)過(guò)程的順序是離體植物器官、組織或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，再分化形成根、芽等器官進(jìn)而形成新的植物體?！驹斀狻恐参矬w的根、莖、葉細(xì)胞一般都具有全能性，在一定的營(yíng)養(yǎng)和激素條件下，可以脫分化形成愈傷組織。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不同激素成分的培養(yǎng)基上，就可以誘導(dǎo)其再分化生成胚狀體，所以胚狀體是在植物組織培養(yǎng)的再分化階段形成的，B正確，ACD錯(cuò)誤。故選B。3．D【分析】制備人工種子（1）概念：人工種子是指以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。（2）人工種子的結(jié)構(gòu)：由胚狀體、作為保護(hù)外殼的人工種皮和提供發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)的人工胚乳三部分構(gòu)成。（3）與天然種子相比較，其優(yōu)越性有：可使在自然條件下不結(jié)實(shí)或種子昂貴的植物得以繁殖；固定雜種優(yōu)勢(shì)；是一種快捷高效的繁殖方式；可人為控制植物的生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆性等。（4）成功應(yīng)用舉例：芹菜、花椰菜、桉樹(shù)和水稻的胚狀體制備的人工種子?！驹斀狻緼、人工種子可以克服季節(jié)、氣候、地域的限制，A正確；B、人工種子的繁殖速度快，可在短時(shí)間內(nèi)提供大量幼苗，B正確；C、人工種子是人工無(wú)性繁殖產(chǎn)生的，不會(huì)發(fā)生性狀分離，C正確；D、由人工種子得到的植株不一定為純合子，這取決于親本的基因型，D錯(cuò)誤。故選D。4．B【分析】題圖分析：圖示為煙草植物組織培養(yǎng)過(guò)程的流程圖，其中①表示獲得外植體的過(guò)程，②為脫分化過(guò)程，③為再分化過(guò)程，④是獲取愈傷組織細(xì)胞，⑤為個(gè)體發(fā)育過(guò)程?！驹斀狻緼、對(duì)過(guò)程①獲取的根組織塊應(yīng)做消毒處理，而不能進(jìn)行滅菌處理，A錯(cuò)誤；B、②是脫分化過(guò)程，該過(guò)程使用的培養(yǎng)基中應(yīng)加入有機(jī)碳源和激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素），并在避光的環(huán)境中進(jìn)行，B正確；C、過(guò)程③發(fā)生細(xì)胞再分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，C錯(cuò)誤；D、植物組織培養(yǎng)獲得的胚狀體包裹人工種皮可獲得人工種子，D錯(cuò)誤。故選B。5．D【分析】1、愈傷組織的形成（1）在離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過(guò)程中，需要的條件：①消毒滅菌；②一定濃度的植物激素；③適宜的溫度；④充足的養(yǎng)料。（2）植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：植物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素。同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂也分化。（3）消毒和滅菌：外植體可以用酒精消毒；操作前手需用酒精消毒；培養(yǎng)基需用高壓蒸汽滅菌?！驹斀狻緼、細(xì)胞壁的形成需要高爾基體的參與，不需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的參與，A錯(cuò)誤；B、誘導(dǎo)愈傷組織形成的培養(yǎng)基中含有等量的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，B錯(cuò)誤；C、將導(dǎo)入外源基因的原生質(zhì)體培養(yǎng)至愈傷組織，不能體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，C錯(cuò)誤；D、從原生質(zhì)體到愈傷組織，細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、功能發(fā)生了改變，該過(guò)程中發(fā)生了基因的選擇性表達(dá)，D正確。故選D。6．B【分析】分析題圖：圖示表示應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育優(yōu)質(zhì)植物的過(guò)程，其中B→C表示脫分化過(guò)程，該過(guò)程中細(xì)胞通過(guò)有絲分裂方式不斷增殖，但細(xì)胞不會(huì)分化；C→D表示再分化過(guò)程，該過(guò)程中細(xì)胞也通過(guò)有絲分裂方式增殖，同時(shí)也在不斷分化。F為花粉離體培養(yǎng)獲得的單倍體植株?！驹斀狻緼、C試管中形成的是愈傷組織，愈傷組織細(xì)胞是具有分生能力的薄壁細(xì)胞，A正確；B、A→F為花藥離體培養(yǎng)過(guò)程，能體現(xiàn)細(xì)胞的全能性，B錯(cuò)誤；C、A是正常的二倍體植株，而F是花粉離體培養(yǎng)獲得的單倍體植株，兩者的染色體組數(shù)不同，C正確；D、F為單倍體植株，高度不育，因此一般不能直接應(yīng)用于生產(chǎn)，D正確。故選B。7．A【分析】分析題圖：圖示表示莖尖外植體大小對(duì)苗的脫毒率和成活率的影響。莖尖越小，脫毒率越高，成苗率越低。在莖尖外植體大小為0.27mm時(shí)，脫毒率和成苗率均較高，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm。【詳解】A、馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無(wú)病毒，因此可利用馬鈴薯莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)形成脫毒苗，所依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性，A錯(cuò)誤；B、培育脫毒苗的過(guò)程中利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段，B正確；C、據(jù)圖可知，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莖尖越小，脫毒率越高，成苗率越低，C正確；D、莖尖外植體大小為0.27mm時(shí)，脫毒率和成苗率均較高，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm，D正確。故選A。8．B【分析】題圖分析：圖示表示利用棉花葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行遺傳改良的過(guò)程，其中①表示采用酶解法去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體的過(guò)程；②表示人工誘變過(guò)程；③表示脫分化形成愈傷組織的過(guò)程；④表示再分化過(guò)程；③④表示植物組織培養(yǎng)過(guò)程，其原理是植物細(xì)胞的全能性?！驹斀狻緼、①表示去壁過(guò)程，因?yàn)橹参锛?xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，因此，需在適宜條件下用纖維素酶和果膠酶的混合物處理，A正確；B、②表示人工誘變過(guò)程，但基因突變是不定向的，B錯(cuò)誤；C、③是脫分化形成愈傷組織的過(guò)程，該過(guò)程中葉肉細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能，變成了可以發(fā)生連續(xù)分裂的細(xì)胞，C正確；D、④表示再分化過(guò)程，決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類(lèi)和比例，生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例影響了愈傷組織分化的方向，因此這兩種激素的比例非常重要，D正確。故選B。9．B【分析】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：1、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)。2、過(guò)程：（1）誘導(dǎo)融合的方法：物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等?；瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導(dǎo)劑。（2）細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是新的細(xì)胞壁的生成。（3）植物體細(xì)胞雜交的終點(diǎn)是培育成雜種植株，而不是形成雜種細(xì)胞就結(jié)束。（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)。3、意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。【詳解】A、酶解法可用于去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，但不能在低滲溶液中進(jìn)行，否則原生質(zhì)體會(huì)吸水漲破，獲得原生質(zhì)體不能采用聚乙二醇，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程①代表原生質(zhì)體的融合，利用了生物膜的流動(dòng)性，由于一種細(xì)胞選用具有葉綠體的葉肉細(xì)胞，一種選用不含葉綠體的胚軸細(xì)胞，所以可用顯微鏡觀察并篩選出雜種細(xì)胞C，B正確；C、過(guò)程②為脫分化，培養(yǎng)愈傷組織需要在培養(yǎng)基中添加等量的生長(zhǎng)素類(lèi)和細(xì)胞分裂素類(lèi)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，C錯(cuò)誤；D、過(guò)程③表示再分化，由于雜種細(xì)胞發(fā)生部分染色體缺失現(xiàn)象，可能含抗性基因的染色體缺失，所以可采用DNA分子雜交技術(shù)鑒定植株是否含有抗性基因，D錯(cuò)誤。故選B。10．C【分析】植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合的比較：項(xiàng)目細(xì)胞融合原理細(xì)胞融合方法誘導(dǎo)手段用途植物體細(xì)胞雜交細(xì)胞膜的流動(dòng)性，（細(xì)胞的全能性）去除細(xì)胞壁后誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合離心、電刺激、聚乙二醇等試劑誘導(dǎo)克服遠(yuǎn)緣雜交不親和，獲得雜交植株動(dòng)物細(xì)胞融合細(xì)胞膜的流動(dòng)性使細(xì)胞分散后，誘導(dǎo)細(xì)胞融合離心、電刺激、聚乙二醇、滅活病毒等試劑誘導(dǎo)制備單克隆抗體的技術(shù)之一【詳解】A、動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的誘導(dǎo)融合的方法不完全相同，動(dòng)物細(xì)胞融合還可以滅毒的生物病毒來(lái)誘導(dǎo)，A錯(cuò)誤；B、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的意義使遠(yuǎn)緣雜交成為可能，打破了生殖隔離，但方法不唯一，B錯(cuò)誤；C、利用動(dòng)物細(xì)胞融合而實(shí)現(xiàn)了雜交瘤技術(shù)，為大量生產(chǎn)單克隆抗體提供了條件，C正確；D、目前科學(xué)家使兩個(gè)植物物種間的體細(xì)胞雜交，成為了可能，但還不成熟，并且兩個(gè)物種遺傳物質(zhì)并不能使它們的性狀全部得以體現(xiàn)，D錯(cuò)誤。故選C。真題再現(xiàn)1．A【分析】分析圖示可知，①過(guò)程為原生質(zhì)體的制備過(guò)程，需要纖維素酶和果膠酶，②過(guò)程為原生質(zhì)體的融合過(guò)程，需要誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)融合，③過(guò)程為植物組織培養(yǎng)的過(guò)程?！驹斀狻緼、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以過(guò)程①需使用纖維素酶和果膠酶處理，A錯(cuò)誤；B、②過(guò)程為細(xì)胞融合過(guò)程，該過(guò)程依賴(lài)膜的流動(dòng)性，B正確；C、過(guò)程③需應(yīng)用植物組培技術(shù)將雜種細(xì)胞培養(yǎng)形成個(gè)體，C正確；D、三倍體植株含有三個(gè)染色體組，減數(shù)分裂時(shí)聯(lián)會(huì)紊亂，可產(chǎn)生無(wú)籽柑橘，D正確。故選A。2．C【分析】從圖中看出①是去掉植物細(xì)胞壁，②是用紫外線誘導(dǎo)染色體變異，③融合形成雜種細(xì)胞?！驹斀狻緼、過(guò)程1是獲得植物細(xì)胞的原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶將細(xì)胞壁分解，A正確；B、根據(jù)題干信息“將其中一個(gè)細(xì)胞的染色體在融合前斷裂，形成的染色體片段在細(xì)胞融合后可能不會(huì)被全部排出，未排出的染色體片段可以整合到另一個(gè)細(xì)胞的染色體上而留存在雜種細(xì)胞中，將普通小麥與耐鹽性強(qiáng)的中間偃麥草進(jìn)行體細(xì)胞雜交獲得了耐鹽小麥新品種，”故過(guò)程②通過(guò)紫外線照射是使中間偃麥草的染色體斷裂，B正確；C、滅活的病毒誘導(dǎo)是動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法，誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合常用物理法、化學(xué)法，C錯(cuò)誤；D、實(shí)驗(yàn)最終將不抗鹽的普通小麥和抗鹽的偃麥草整合形成耐鹽小麥，說(shuō)明耐鹽小麥染色體上整合了中間偃麥草的染色體片段，D正確。故選C。3．涂布分離單菌落篩選未固定的細(xì)菌降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的能力包埋法和吸附法特定介質(zhì)能為菌株繁殖提供X遺傳間種DNA聚合酶愈傷組織繼代殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)速營(yíng)養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和濃度【分析】1、分離純化細(xì)菌最常用的方法是劃線分離法（平板劃線法）和涂布分離法（稀釋涂布平板法）。接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體菌落。劃線分離法，方法簡(jiǎn)單；涂布分離法，單菌落更易分開(kāi)，但操作復(fù)雜些。2、固定化酶(insolubleenzyme)就是將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。固定化的方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。3、植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，其具體過(guò)程：外植體→愈傷組織→胚狀體→新植體，其中脫分化過(guò)程要避光，而再分化過(guò)程需光。4、在植物組織培養(yǎng)時(shí)，通過(guò)調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比值能影響愈傷組織分化出根或芽?！驹斀狻浚ㄒ唬┓治鲱}意可知，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菑挠倌嘀蟹蛛x到一種高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的細(xì)菌菌株，制備固定化菌株。（1）分離純化細(xì)菌最常用的方法是劃線分離法或涂布分離法，兩種方法均能在固體培養(yǎng)基上形成單菌落。為了獲得能高效降解富營(yíng)養(yǎng)化污水污染物的菌株，還需對(duì)分離的菌株進(jìn)行誘變處理，再經(jīng)篩選和鑒定。（2）固定化的方法有吸附法、共價(jià)偶聯(lián)法、交聯(lián)法和包埋法等。由于菌株與特定介質(zhì)的結(jié)合不宜直接采用交聯(lián)法和共價(jià)偶聯(lián)法，故可以采用的2種方法是包埋法和吸附法。（3）由于該菌株只能在添加了特定成分X的培養(yǎng)基上繁殖，可推測(cè)特定介質(zhì)能為菌株繁殖提供X，故該公司對(duì)外只提供固定化菌株，有利于保護(hù)該公司的知識(shí)產(chǎn)權(quán)。（二）（1）生物多樣性包括遺傳多樣性、物種多樣性和生態(tài)系統(tǒng)多樣性，為保護(hù)三葉青的遺傳多樣性和保證藥材的品質(zhì)；三葉青的林下種植，是利用間種技術(shù)。（2）分析題意可知，從質(zhì)粒上復(fù)制并切割出一段可轉(zhuǎn)移的DNA片段（TDNA），DNA復(fù)制需要DNA聚合酶，故可知，酚類(lèi)化合物誘導(dǎo)發(fā)根農(nóng)桿菌質(zhì)粒上vir系列基因表達(dá)，形成DNA聚合酶和限制性核酸內(nèi)切酶等。根據(jù)植物組織培養(yǎng)技術(shù)過(guò)程可知，相應(yīng)植物激素可以促使葉片細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，再分化形成毛狀根。（3）剪取毛狀根，轉(zhuǎn)入含頭孢類(lèi)抗生素的固體培養(yǎng)基上進(jìn)行多次繼代培養(yǎng)，培養(yǎng)基中添加抗生素的主要目的是殺滅發(fā)根農(nóng)桿菌。最后取毛狀根轉(zhuǎn)入液體培養(yǎng)基、置于搖床上進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，通過(guò)控制搖床的轉(zhuǎn)速和溫度，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基成分中的營(yíng)養(yǎng)元素以及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類(lèi)和濃度，獲得大量毛狀根，用于提取藥用成分。4．全能性脫分化隨著高CK誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)，野生型的W基因表達(dá)量顯著升高隨著高CK誘導(dǎo)時(shí)間的延長(zhǎng)，突變體的W基因表達(dá)量低于野生型ACD【分析】植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理為植物體細(xì)胞的全能性，即已經(jīng)分化的細(xì)胞仍然具有發(fā)育成完整植株的潛能；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素能促進(jìn)細(xì)胞分裂分化，在培養(yǎng)的不同時(shí)期對(duì)兩者的比例會(huì)有不同要求，在再分化過(guò)程中，生長(zhǎng)素高，促進(jìn)根的分化，細(xì)胞分裂素比例高，促進(jìn)芽的分化。植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時(shí)的光照、pH和無(wú)菌環(huán)境等）；②一定的營(yíng)養(yǎng)（無(wú)機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素）。【詳解】（1）離體的植物組織培養(yǎng)成完整植株的過(guò)程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性。已分化的細(xì)胞形成愈傷組織的過(guò)程稱(chēng)之為脫分化。（2）由圖可知，野生型的W基因表達(dá)量與高CK誘導(dǎo)時(shí)間的關(guān)系是隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，W基因的表達(dá)量顯著升高，突變體的W基因的表達(dá)量明顯少于對(duì)照組，說(shuō)明在高CK誘導(dǎo)下A基因促進(jìn)W基因表達(dá)。（3）由題可知，材料甲體內(nèi)的W基因過(guò)量表達(dá)，突變體a的A基因不能表達(dá)，野生型是正常的，分析圖2可知，由野生型曲線和突變體a曲線對(duì)比可知，A基因在愈傷組織分化生芽的過(guò)程中起作用，缺失A基因時(shí)W基因表達(dá)不能促進(jìn)生芽；由材料甲曲線和野生型曲線比較可知，過(guò)量表達(dá)W基因可使生芽時(shí)間提前，故選ACD。5．細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織Ⅰ、Ⅱ、Ⅲm1+1.0浸泡法（長(zhǎng)時(shí)間處理）沾蘸法（短時(shí)間處理）Ⅰ【分析】愈傷組織是由一團(tuán)未分化的細(xì)胞組成的，在組織培養(yǎng)中，條件適宜就會(huì)分化成各種組織。如果培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例合適，會(huì)促進(jìn)愈傷組織的生長(zhǎng)，分化出根和莖葉；細(xì)胞分裂素太多時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成；生長(zhǎng)素用量太多時(shí)，有利于根的分化、抑制芽的形成；而當(dāng)生長(zhǎng)素少，細(xì)胞分裂素也不多時(shí)，則愈傷組織繼續(xù)生長(zhǎng)，不發(fā)生分化?；虻倪x擇性表達(dá)是指基因在特定的時(shí)間和空間條件下有選擇表達(dá)的現(xiàn)象，據(jù)此分析?！驹斀狻浚?）在誘導(dǎo)愈傷組織形成時(shí)，通常采用莖尖、幼葉做外植體，因?yàn)檫@些部位的細(xì)胞分裂能力強(qiáng)、分化程度低，全能性容易表達(dá)，容易誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織。（2）Ⅰ過(guò)程愈傷組織形成是離體的植物細(xì)胞脫分化的結(jié)果，脫分化過(guò)程中細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生的明顯改變，成為未分化狀態(tài)；Ⅱ、Ⅲ過(guò)程形成幼芽、根的過(guò)程存在細(xì)胞的分化，分化和脫分化都存在基因的選擇性表達(dá)，故Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ階段都存在基因的選擇性表達(dá)。（3）根據(jù)題意，表中數(shù)據(jù)為品種B的最佳激素配比，若要確定品種A的Ⅰ階段最佳細(xì)胞分裂素濃度，以0.5μmol/L為梯度，可參考m1為中間值，故實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞分裂素最高濃度可設(shè)為m1+1.0μmol/L。（4）實(shí)驗(yàn)中用生長(zhǎng)素處理插條的方法可選用浸泡法或沾蘸法，浸泡法時(shí)間長(zhǎng)、所需濃度低，而沾蘸法處理時(shí)間短、所需濃度高；因此Ⅲ過(guò)程中分別選用濃度低于或高于n3μmol/L的生長(zhǎng)素處理品種A的幼苗芽，選用低濃度生長(zhǎng)素時(shí)的處理方法為浸泡法，時(shí)間長(zhǎng)，而選用高濃度生長(zhǎng)素時(shí)處理方法為沾蘸法，時(shí)間短，都能達(dá)到比較適宜的濃度，達(dá)到最佳生根效果。（5）秋水仙素可抑制紡錘體形成，導(dǎo)致染色體加倍形成多倍體，愈傷組織分裂旺盛，故在Ⅰ階段用秋水仙素處理，最易獲得由單個(gè)細(xì)胞形成的多倍體。模擬檢測(cè)1．C【分析】在植物組織培養(yǎng)時(shí)，需要添加植物激素，其中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。植物激素的濃度、使用的先后順序及用量的比例等，都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的用量比值高時(shí)，有利于根的分化，抑制芽的形成；比值低時(shí)，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值適中時(shí)，促進(jìn)愈傷組織的形成。植物組織培養(yǎng)的流程為：制備MS培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培?！驹斀狻緼、外植體接種前常進(jìn)行流水沖洗、酒精處理、消毒液處理等消毒措施，最后為了避免消毒液的危害，需要用無(wú)菌水清洗三次，A正確；B、在以快速繁殖為主要目的時(shí)，菊花未開(kāi)花植株的莖上部新萌生的嫩枝是最為常用的外植體，因?yàn)樵撎幖?xì)胞分裂能力強(qiáng)、分化程度低，全能性容易表達(dá)，B正確；C、培養(yǎng)形成的愈傷組織需要轉(zhuǎn)移到分化培養(yǎng)基中才能再分化形成植株，C錯(cuò)誤；D、為充分利用培養(yǎng)條件，每個(gè)錐形瓶可接種6～8個(gè)外植體，接種后，將封口膜重新扎好，D正確。故選C。2．B【分析】1、無(wú)性生殖指的是不經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞結(jié)合，由母體直接產(chǎn)生新個(gè)體的生殖方式。2、由親本產(chǎn)生的有性生殖細(xì)胞，經(jīng)過(guò)兩性生殖細(xì)胞（例如精子和卵細(xì)胞）的結(jié)合，成為受精卵，再由受精卵發(fā)育成為新的個(gè)體的生殖方式，叫做有性生殖?！驹斀狻繜o(wú)性生殖是不經(jīng)生殖細(xì)胞的兩兩結(jié)合，由母體直接產(chǎn)生新個(gè)體的方式。從本質(zhì)上講，由體細(xì)胞進(jìn)行的繁殖就是無(wú)性生殖。主要種類(lèi)包括：分裂生殖、孢子生殖、出芽生殖、營(yíng)養(yǎng)生殖（嫁接、壓條、扦插等）、組織培養(yǎng)和克隆等。因此，草莓借助匍匐莖繁殖后代的過(guò)程中，沒(méi)有兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合，由母體直接產(chǎn)生新個(gè)體，屬于營(yíng)養(yǎng)繁殖，B正確。故選B。3．C【分析】據(jù)圖分析，紅豆杉莖尖分生組織通過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，一方面愈傷組織通過(guò)再分化形成胚狀體，進(jìn)而培養(yǎng)成紅豆杉植株；另一方面，愈傷組織培養(yǎng)增殖產(chǎn)生更多的愈傷組織細(xì)胞，從愈傷組織細(xì)胞中提取紫杉醇?！驹斀狻緼、誘導(dǎo)紅豆杉莖尖經(jīng)過(guò)脫分化過(guò)程形成愈傷組織，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的用量比會(huì)影響細(xì)胞分化的方向，整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不是固定不變的，B錯(cuò)誤；C、用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)固定在一定空間內(nèi)的愈傷組織生產(chǎn)紫杉醇時(shí)，需要通入無(wú)菌空氣，利于細(xì)胞進(jìn)行有氧呼吸，C正確；D、同一植株不同部位的組織細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得的植株基因型不一定相同，如花粉粒培養(yǎng)獲得的愈傷組織細(xì)胞內(nèi)染色體數(shù)目是正常體細(xì)胞的一半，D錯(cuò)誤。故選C。4．C【分析】消毒和滅菌的比較：

【詳解】A、無(wú)菌技術(shù)中，若處理對(duì)象為液體，可以用高壓蒸汽滅菌法滅菌，A錯(cuò)誤；B、培養(yǎng)皿可用干熱滅菌法滅菌，培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，B錯(cuò)誤；C、高壓蒸汽滅菌時(shí)間達(dá)到后待壓力降至零時(shí)，再打開(kāi)排氣閥排氣，C正確；D、外植體消毒一般采用70%的酒精和0.1%的氯化汞溶液處理，D錯(cuò)誤。故選C。5．（1）蒸餾壓榨萃取（2）植物組織培養(yǎng)（植物）細(xì)胞的全能性蔗糖失水【分析】1、植物芳香油的提取方法：蒸餾法、壓榨法和萃取等。（1）蒸餾法：芳香油具有揮發(fā)性，把含有芳香油的花、葉等放入水中加熱，水蒸氣能將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)，形成油水混合物；冷卻后，油水混合物又會(huì)重新分成油層和水層，除去水層便得到芳香油，這種提取方法叫蒸餾法。根據(jù)蒸餾過(guò)程中原料放置的位置的標(biāo)準(zhǔn)，將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、水上蒸餾和水氣蒸餾。（2）萃取法：這種方法需要將新鮮的香花等植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑中，是芳香油充分溶解，然后蒸去低沸點(diǎn)的溶劑，剩下的就是芳香油。（3）壓榨法：在橘子、檸檬、甜橙等植物的果皮中，芳香油的含量較多，可以用機(jī)械壓力直接榨出，這種提取方法叫壓榨法。2、MS培養(yǎng)基含大量元素、微量元素、有機(jī)物等，特別包括植物生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。（1）植物芳香油的提取方法有蒸餾、壓榨和萃取等方法，而青蒿素幾乎不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，所以應(yīng)采用萃取法。（2）要用青蒿芽通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以大量獲得青蒿素的幼苗，植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，已經(jīng)分化的細(xì)胞依然具有發(fā)育成完整個(gè)體的全套遺傳信息。MS固體培養(yǎng)基中應(yīng)用蔗糖作為碳源，既可以提供能量還可以維持細(xì)胞滲透壓。如果用葡萄糖作碳源會(huì)導(dǎo)致植物細(xì)胞失水而影響生長(zhǎng)，葡萄糖可以做為微生物培養(yǎng)基的碳源。6．酵母懸液氣泡酒中的酶難以回收，不能再次利用；酶混合在酒體中，影響產(chǎn)品質(zhì)量包埋法滅菌酒—水混合物（液）固定化醋桿菌含多種酶，能實(shí)現(xiàn)連續(xù)發(fā)酵、連續(xù)生產(chǎn)的目的一系列不同濃度還原糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線反向拼接啟動(dòng)部位（或啟動(dòng)子）CaCl2讓農(nóng)桿菌恢復(fù)正常的生理狀態(tài)，表達(dá)抗生素抗性基因受傷的沾在根上的瓊脂培養(yǎng)基花藥離體【分析】基因工程技術(shù)的基本步驟：1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成.2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。4、目的基因的檢測(cè)與鑒定：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交技術(shù)；（2）個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚ㄒ唬?）用干酵母作為發(fā)酵菌釀制果酒時(shí)，需先將適量干酵母放在小燒杯中，加入少量溫水（＜40℃）和一小撮蔗糖制成酵母懸液，待其出現(xiàn)氣泡，表明干酵母已活化。（2）酵母菌在生長(zhǎng)繁殖和進(jìn)行發(fā)酵時(shí)，會(huì)產(chǎn)生少量尿素，尿素會(huì)與酒精反應(yīng)生成有害物質(zhì)，可用脲酶處理予以分解，由于酒中的酶難以回收，不能再次利用；酶混合在酒體中，影響產(chǎn)品質(zhì)量，故在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中不宜直接將脲酶加入酒體中。海藻酸鈉起載體作用，是包埋法常用的載體。實(shí)際操作中將脲酶和海藻酸鈉混合，用注射器滴入凝結(jié)液中形成珠粒，這種固定化酶的方法稱(chēng)為包埋法。（3）用果酒釀制果醋時(shí)，發(fā)酵瓶中先裝八分滿的經(jīng)滅菌處理的鋸末，然后加入含有醋桿菌的酒水混合物使醋桿菌附著在鋸末上，成為固定化醋桿菌；由于醋酸發(fā)酵需要多種酶參與，固定化醋杵菌含多種酶，能實(shí)現(xiàn)連續(xù)發(fā)酵、連續(xù)生產(chǎn)的目的，因此醋酸發(fā)酵時(shí)采用的是固定化醋桿菌而不是固定化酶。（4）為進(jìn)一步測(cè)定果醋中還原糖的含量，可以在發(fā)酵產(chǎn)物中加入還原糖顯色劑，用光電比色法測(cè)定顯色產(chǎn)物的光密度值，并將測(cè)定值與一系列不同濃度還原糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線比對(duì)，計(jì)算其含量。（二）（1）在重組DNA分子步驟中，采用不同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和載體DNA，可以防止目的基因和切割后的載體DNA自身環(huán)化及反向拼接；影響拼接效率的主要因素有反應(yīng)溶液的鹽離子濃度、溫度、滲透壓、目的基因的濃度、載體DNA的濃度、反應(yīng)時(shí)間、酶的用量等。為使PRSV高效表達(dá)，需要對(duì)重組載體上目的基因相關(guān)的啟動(dòng)子序列進(jìn)行修飾。（2）農(nóng)桿菌介導(dǎo)法是目前植物轉(zhuǎn)基因技術(shù)的常用方法。使用該方法需先獲取活性強(qiáng)的農(nóng)桿菌菌液，再通過(guò)冰浴、離心、去上清液等相應(yīng)的溶液處理，最后加入適量預(yù)冷的含15%甘油的CaCl2溶液，制成感受態(tài)農(nóng)桿菌細(xì)胞。轉(zhuǎn)化后的農(nóng)桿菌要正常培養(yǎng)一段時(shí)間，才能置于含特定抗生素的培養(yǎng)基上篩選，正常培養(yǎng)一段時(shí)間的目的是讓農(nóng)桿菌恢復(fù)正常的生理狀態(tài)，表達(dá)抗生素抗性基因，便于目的記憶的篩選。用農(nóng)桿菌感染時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選用木瓜受傷的葉片與含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌共同培養(yǎng)，選用這種葉片的理由是：葉片傷口處的細(xì)胞釋放出大量酚類(lèi)物質(zhì)，可吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞。（3）試管苗需鍛煉后才可移栽至大田，將試管苗從培養(yǎng)基中移出時(shí)要用鑷子小心取出，需徹底洗干凈根部，尤其是洗去沾在根上的瓊脂培養(yǎng)基以免栽后發(fā)霉。（4）為了快速獲得穩(wěn)定遺傳的抗環(huán)斑病木瓜需要采用單倍體育種的方法，可選擇花藥（離體）培養(yǎng)獲得的細(xì)胞系作為受體細(xì)胞，然后經(jīng)過(guò)秋水仙素處理染色體數(shù)目加倍后獲得純種。7．（1）識(shí)別的特異性更高（2）靶位點(diǎn)能表達(dá)Cas9蛋白和特異的向?qū)NA農(nóng)桿菌植物組織培養(yǎng)（3）增強(qiáng)將正常水稻和OsERF922基因敲除水稻分別接種子囊菌，觀察對(duì)比兩者稻瘟病的發(fā)病狀況【分析】1、基因編輯又稱(chēng)基因組編輯或基因組工程，是一種新興的比較精確的能對(duì)生物體基因組特定目標(biāo)基因進(jìn)行修飾的一種基因工程技術(shù)或過(guò)程。2、基因編輯依賴(lài)于經(jīng)過(guò)基因工程改造的核酸酶，也稱(chēng)“分子剪刀”，基因編輯以其能夠高效率地進(jìn)行定點(diǎn)基因組編輯，在基因研究、基因治療和遺傳改良等方面展示出了巨大的潛力。（1）依圖示信息可知，Cas9蛋白對(duì)目標(biāo)DNA分子進(jìn)行精準(zhǔn)定位，對(duì)目標(biāo)位點(diǎn)進(jìn)行準(zhǔn)確切割，依賴(lài)于核酸內(nèi)切酶Cas9具有專(zhuān)一性，可以剪切特定的堿基序，故向?qū)NA和Cas9蛋白形成的復(fù)合物，在功能上接近于限制酶，但是它比限制酶更具備的優(yōu)勢(shì)是識(shí)別的特異性更高。（2）結(jié)合基因工程的基本步驟可知，利用CRISPR/Cas9技術(shù)獲得了水稻OsERF922基因敲除植株的步驟為：根據(jù)OsERF922基因序列，選擇合適的靶位點(diǎn)，設(shè)計(jì)向?qū)NA，然后利用PCR反應(yīng)得到向?qū)NA對(duì)應(yīng)的DNA片段，將該片段連接到CRISPR/Cas9載體上，得到CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體；CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體應(yīng)該具備的能力是能表達(dá)Cas9蛋白和特異的向?qū)NA，以實(shí)現(xiàn)定向改造的目的；將目的基因?qū)胨炯?xì)胞常用方法為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，故可將CRISPR/Cas9基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌，并用它侵染水稻細(xì)胞；將水稻細(xì)胞培養(yǎng)為水稻植株的方法為植物組織培養(yǎng)技術(shù)。（3）結(jié)合題意“下調(diào)OsERF922基因的表達(dá)能提高植物與防御相關(guān)的一些基因的表達(dá)量”，據(jù)此可推測(cè)OsERF922基因敲除水稻植株（OsERF922基因少）對(duì)稻瘟病的抵抗力會(huì)增強(qiáng)；為證明上述結(jié)論，則實(shí)驗(yàn)的自變量為OsERF922基因的有無(wú)，因變量為水稻稻瘟病的發(fā)病狀況，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將正常水稻和OsERF922基因敲除水稻分別接種子囊菌，觀察對(duì)比兩者稻瘟病的發(fā)病狀況。8．涂布（接種）硝態(tài)氮（或NO3）酸堿指示劑高壓蒸汽滅菌包埋無(wú)菌水表面積與體積比（或相對(duì)表面積）提高污水中的C/N，以提高細(xì)菌對(duì)污水中NO3的去除率。構(gòu)建重組DNA分子基因文庫(kù)抗生素0.71%C培養(yǎng)基中加入除草劑濕度全能性表達(dá)充分【分析】1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、分析柱形圖：對(duì)比游離菌株和固定化菌株可知，固定化會(huì)使細(xì)菌的反硝化效率略有下降；在一定范圍內(nèi)，隨著C/N升高，NO3的去除率升高?！驹斀狻浚ㄒ唬?）根據(jù)題意可得，篩選目的菌采用的是稀釋涂布平板法，因此將1g活性污泥梯度稀釋?zhuān)魅?．1ml稀釋液涂布到選擇培養(yǎng)基上。由于反硝化細(xì)菌是以硝態(tài)氮作為氮源的一類(lèi)微生物，故初篩培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)是硝態(tài)氮：反硝化細(xì)菌可將硝態(tài)氮轉(zhuǎn)化為氮?dú)猓磻?yīng)過(guò)程中有2NO3+10e+12H+→N2+6H2O，消耗培養(yǎng)基中的H+，所以培養(yǎng)基中可以加入酸堿指示劑，用于鑒別是否為反硝化細(xì)菌。（2）溶液的滅菌方法通常采用高壓蒸汽滅菌法；采用包埋法固定，獲得固定化小球，用無(wú)菌水沖洗并保存。包埋法制作的凝膠球如果過(guò)大會(huì)使得小球的相對(duì)表面積（即表面積與體積之比）減小，影響物質(zhì)交換，進(jìn)而影響反硝化效率。（3）加入淀粉作為碳源，能夠提高污水中的C/N值，結(jié)合題表中數(shù)據(jù)可分析得，提高污水中的C/N值，能夠提高細(xì)菌對(duì)污水中NO3的去除率。（二）（1）在基因工程的操作程序中，核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，因此題中培育該轉(zhuǎn)基因抗除草劑玉米的核心環(huán)節(jié)是構(gòu)建重組DNA分子，如果抗除草劑基因的堿基對(duì)序列未知，可以從基因文庫(kù)中獲得目的基因。（2）采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入抗