生物中圖版學(xué)案：第一單元第二章第一節(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精第一節(jié)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)1．簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程.2．描述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程.1．細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件（1）無毒、無菌的環(huán)境.(2）基本的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子：如葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、核苷酸等。（3)人體細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溫度：（36.5±0.5）℃；大多數(shù)細(xì)胞的適宜pH：7。2～7.4。（4）氣體環(huán)境:95%氧氣，5％二氧化碳。思考動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中為什么要加入5%二氧化碳？提示:維持培養(yǎng)液的pH。2．細(xì)胞培養(yǎng)的過程（1)基本過程：健康動(dòng)物的組織↓剪碎,用胰蛋白酶處理單個(gè)細(xì)胞（分離細(xì)胞）↓加培養(yǎng)液制成細(xì)胞懸浮液培養(yǎng)↓傳代培養(yǎng)細(xì)胞株傳代培養(yǎng)↓遺傳物質(zhì)改變細(xì)胞系①原代培養(yǎng)：將組織從健康動(dòng)物體內(nèi)取出，用濃度與活性適中的胰蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞，然后用培養(yǎng)基配成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的過程。②傳代培養(yǎng)：把原代培養(yǎng)的細(xì)胞定期用胰蛋白酶將它們從瓶壁上脫離下來,重新分散成細(xì)胞懸浮液，分裝到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)的過程。③細(xì)胞株：傳代培養(yǎng)的細(xì)胞能傳到10～50代，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞株。④細(xì)胞系：細(xì)胞株傳至50代后有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變，并且有癌變的特點(diǎn)，有可能在培養(yǎng)條件下無限地傳下去，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞系。（2)特點(diǎn)：貼壁生長(zhǎng)，接觸抑制.（3）凍存及復(fù)蘇。①凍存：長(zhǎng)期保存細(xì)胞一般采用超低溫凍存法。將細(xì)胞和保護(hù)劑放入－196℃的液氮中進(jìn)行保存。②復(fù)蘇：將凍存的細(xì)胞放在37℃溫水中解凍，細(xì)胞逐漸“蘇醒",再經(jīng)過培養(yǎng)，細(xì)胞就能繼續(xù)生長(zhǎng)。思考動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要將組織分散成單細(xì)胞,所用的酶是什么？提示：胰蛋白酶。3．細(xì)胞培養(yǎng)的意義（1）生產(chǎn)酶、生長(zhǎng)因子、疫苗、單克隆抗體等生物制品。（2)為皮膚大面積燒傷或燙傷病人培養(yǎng)出人工皮膚，供受傷者移植使用.(3）進(jìn)行有毒物質(zhì)和藥物的檢測(cè).（4）在揭示細(xì)胞的全能性、細(xì)胞周期及調(diào)控，癌變機(jī)理與細(xì)胞衰老機(jī)理等基礎(chǔ)研究中發(fā)揮了重大作用。1．為什么對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)通常要添加血清？血清中含有蛋白質(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中蛋白質(zhì)主要為白蛋白和球蛋白.氨基酸有多種,是細(xì)胞合成蛋白質(zhì)的基本成分,其中有些氨基酸動(dòng)物細(xì)胞本身不能合成（稱為必需氨基酸），必須由培養(yǎng)液提供。血清中含有胰島素、生長(zhǎng)激素等激素及多種生長(zhǎng)因子（如表皮生長(zhǎng)因子、成纖維生長(zhǎng)因子、類胰島素生長(zhǎng)因子等）；血清還含有多種未知的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子及其他活性物質(zhì)，能促進(jìn)細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖和貼附。因此,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞能夠順利生長(zhǎng)和增殖，一般需添加10％～20%的血清.2．將健康動(dòng)物的組織塊剪碎后用胰蛋白酶處理的目的是什么?不定期用胰蛋白酶把培養(yǎng)細(xì)胞從瓶壁上脫離的目的是什么？（1）胰蛋白酶可以分解組織細(xì)胞間質(zhì)中的膠原蛋白,從而使組織分散成單個(gè)細(xì)胞。（2）細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng)，隨著細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖,培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞越來越多，當(dāng)貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，就會(huì)停止分裂增殖，逐漸走向衰亡，這種現(xiàn)象叫做接觸抑制。需要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來,傳代培養(yǎng)。胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白質(zhì)外，長(zhǎng)時(shí)間的作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白，對(duì)細(xì)胞有損傷作用，因此必須控制好胰蛋白酶的消化時(shí)間.3．幼齡與老齡動(dòng)物的組織細(xì)胞比較，分化程度低的與分化程度高的組織細(xì)胞比較，哪一種更易于培養(yǎng)？細(xì)胞的衰老與動(dòng)物機(jī)體的衰老有著密切的關(guān)系，細(xì)胞的增殖能力與供體的年齡有關(guān)，幼齡動(dòng)物細(xì)胞增殖能力強(qiáng),有絲分裂旺盛,老齡動(dòng)物則相反。所以，一般來說幼齡動(dòng)物的組織細(xì)胞比老年動(dòng)物的組織細(xì)胞易于培養(yǎng)。同樣，組織細(xì)胞的分化程度越低，則增殖能力越強(qiáng)，所以更容易培養(yǎng)。題型一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)【例1】（2010·浙江高考理綜改編）下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是()A．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞B．原代培養(yǎng)的細(xì)胞傳至10代左右時(shí)，極少數(shù)細(xì)胞衰老死亡C．二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的D．惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)解析：保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上形成單層細(xì)胞。原代培養(yǎng)的細(xì)胞傳至10代左右時(shí)，細(xì)胞的生長(zhǎng)就會(huì)出現(xiàn)停滯，大部分細(xì)胞衰老死亡，極少數(shù)細(xì)胞能存活下來并繼續(xù)傳下去。二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是有限的。惡性細(xì)胞系的細(xì)胞帶有癌變的特點(diǎn)，有可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳下去，所以可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。答案：D反思領(lǐng)悟：細(xì)胞株和細(xì)胞系都屬于傳代細(xì)胞。能傳至10～50代的傳代細(xì)胞為細(xì)胞株；當(dāng)細(xì)胞株傳至50代以后，不能再傳代，只有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,從而可能繼續(xù)傳下去，這種傳代細(xì)胞叫做細(xì)胞系。題型二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本條件【例2】一般來說，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下條件（）①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血清④溫度與動(dòng)物體溫相近⑤需要O2，不需要CO2⑥CO2能維持培養(yǎng)液的pHA．①②③④⑤⑥B．①②③④C．①③④⑤⑥D(zhuǎn)．①②③④⑥解析：動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)要求環(huán)境無菌、無毒，培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,合成培養(yǎng)基中需加血清等天然成分，適宜溫度、pH分別為（36。5±0。5)℃、7.2～7.4。O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2可維持培養(yǎng)液的pH。答案：D反思領(lǐng)悟：CO2溶于水生成碳酸，解離為H＋和HCOeq\o\al（－，3），從而能夠維持溶液的pH。1為了便于將培養(yǎng)的動(dòng)物組織細(xì)胞分散開來，配制成一定濃度的細(xì)胞懸浮液，選取的動(dòng)物組織應(yīng)先用下列哪種物質(zhì)處理（)A．胃蛋白酶B．鹽酸C．胰淀粉酶D．胰蛋白酶答案：D2關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的錯(cuò)誤敘述是（)A．用于人工培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動(dòng)物B．將所取的組織先用胰蛋白酶等進(jìn)行處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞C．在培養(yǎng)瓶中要定期用胰蛋白酶使細(xì)胞從瓶壁上脫離,制成懸浮液D．人工培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞只能傳50代左右，之后所培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)衰老死亡答案：D3下列有關(guān)生物工程技術(shù)的說法,肯定正確的是（）A．用于人工培養(yǎng)的細(xì)胞大多數(shù)取自胚胎或幼齡動(dòng)物，其原因是這些細(xì)胞比成年動(dòng)物的體細(xì)胞具有更強(qiáng)的全能性B．離體的動(dòng)物和植物細(xì)胞在適當(dāng)條件下都能發(fā)育成完整的個(gè)體，所以可以利用動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)的方法進(jìn)行動(dòng)植物的人工無性生殖C．在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞進(jìn)行的分裂方式是有絲分裂，形成的子細(xì)胞的染色體數(shù)與體細(xì)胞相同D．基因工程成功的標(biāo)志是目的基因可以隨受體細(xì)胞的繁殖而復(fù)制解析：在培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí)多選取胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官，原因是這些細(xì)胞的分裂能力強(qiáng);離體的動(dòng)物細(xì)胞不能發(fā)育成完整的個(gè)體；基因工程成功的標(biāo)志是目的基因產(chǎn)生相應(yīng)的產(chǎn)物；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞進(jìn)行的分裂方式是有絲分裂，子細(xì)胞的染色體數(shù)與體細(xì)胞相同。答案：C4下列屬于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用的是（）A．生產(chǎn)生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等B．用于檢測(cè)物質(zhì)的毒性C．用于生理、病理、藥理等方面的研究，為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù)D．以上三項(xiàng)全是解析：考