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PAGE6-微生物的培育技術(shù)及應用一、選擇題:每小題給出的四個選項中只有一個符合題目要求。1.無菌技術(shù)包括以下幾個方面的敘述,其中錯誤的是()A.對試驗操作的空間、操作者的衣著和手進行滅菌B.將用于微生物培育的培育皿、接種用具和培育基等進行滅菌C.為避開四周環(huán)境中微生物的污染,試驗操作應在酒精燈火焰旁邊進行D.試驗操作時應避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周物品相接觸A解析:對試驗操作的空間、操作者的衣著和手進行清潔消毒,A錯誤;為保證不被雜菌污染,應將培育皿、接種用具和培育基等進行滅菌,B正確;酒精燈火焰旁邊可以形成一個無菌區(qū),為避開四周環(huán)境中微生物的污染,試驗操作應在酒精燈火焰旁邊進行,C正確;四周物品可能會含有雜菌,為防止污染,試驗操作時應避開已經(jīng)滅菌處理的材料用具與四周物品相接觸,D正確。2.(2024·上海模擬)下圖表示培育和純化X細菌的部分操作步驟,下列相關(guān)敘述正確的是()A.步驟①倒平板操作時,倒好后應馬上將其倒過來放置B.步驟②將接種環(huán)在火焰上灼燒后快速蘸取菌液后進行平板劃線C.步驟③應多個方向劃線,使接種物漸漸稀釋,培育后出現(xiàn)單個菌落D.步驟④培育箱培育后可用來對X細菌進行計數(shù)C解析:在倒好平板后,不能馬上將其倒置,否則會使液體流出,應待液體凝固后倒置,故A項錯誤;接種環(huán)在火焰上灼燒后,應待其略微冷卻后再蘸取菌液,否則溫度過高,會使細菌死亡,故B項錯誤;在平板劃線時,要從多個方向劃線,可以使菌液漸漸稀釋,培育后出現(xiàn)單菌落,從而對菌種進行分別,故C項正確;步驟④通過平板劃線可得到單個的細菌,能對細菌進行分別,若要對細菌進行計數(shù),需采納稀釋涂布平板法,故D項錯誤。3.下圖為“土壤中分解尿素的細菌的分別與計數(shù)”試驗中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是()A.3號試管的稀釋倍數(shù)為1×103倍B.4號試管中稀釋液進行平板培育得到的菌落平均數(shù)恰為5號試管的10倍C.5號試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個D.該試驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目要低D解析:3號試管的稀釋倍數(shù)為1×104倍,A錯誤;4號試管中稀釋液進行平板培育,稀釋倍數(shù)比5號試管的低10倍,假如稀釋倍數(shù)適當,得到的菌落平均數(shù)可能是5號試管的10倍,B錯誤;5號試管進行稀釋涂布平板法計數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為(168+175+167)÷3÷0.1×105×100÷10=1.7×109個,C錯誤;稀釋涂布平板法培育得到的菌落可能存在兩個或多個細菌細胞長成一個菌落,使該試驗方法統(tǒng)計得到的結(jié)果往往會比實際活菌數(shù)目低,D正確。4.(2024·山東泰安模擬)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料,但若不經(jīng)細菌的分解,就不能更好地被植物利用。下列有關(guān)土壤中尿素分解菌的分別和培育的敘述,正確的是()A.培育基中加入尿素作為唯一碳源,該培育基是鑒別培育基B.測定土壤中分解尿素的細菌數(shù)量和測定土壤中其他細菌的數(shù)量可采納相同的稀釋度C.細菌合成的脲酶能將尿素分解成氨,氨會使培育基的堿性增加,pH上升D.利用稀釋涂布平板法可以干脆完成土壤中分解尿素的細菌的分別計數(shù)和純化鑒定C解析:培育基中加入尿素作為唯一氮源,該培育基是選擇培育基,A錯誤;因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同,故為獲得不同類型的微生物,要按不同的稀釋倍數(shù)進行分別,B錯誤;細菌合成的脲酶能將尿素分解成氨,氨會使培育基的堿性增加,pH上升,C正確;利用稀釋涂布平板法可完成土壤中分解尿素的細菌的分別和計數(shù),鑒定分解尿素的細菌可采納加酚紅指示劑的鑒別培育基,D錯誤。5.(2024·廣東東莞模擬)三個培育皿中分別加入10mL不同的培育基,然后接種相同的大腸桿菌樣液。培育36h后,計算菌落數(shù),結(jié)果如下表。下列選項正確的是()培育皿培育基成分菌落數(shù)Ⅰ瓊脂、葡萄糖35Ⅱ瓊脂、葡萄糖、生長因子250Ⅲ瓊脂、生長因子0A.該試驗采納的是液體培育基B.該試驗采納平板劃線法接種C.Ⅰ和Ⅲ比照,說明大腸桿菌的生長不須要生長因子D.Ⅱ和Ⅲ比照,說明大腸桿菌的生長須要糖類D解析:依據(jù)題表分析可知,培育基中都加入了瓊脂,說明該試驗采納的是固體培育基,A錯誤;微生物接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,二者均可以分別菌種,但是平板劃線法無法計數(shù),本題須要計算菌落數(shù),因此接種方法為稀釋涂布平板法,B錯誤;Ⅰ和Ⅲ有兩個自變量,沒有遵循單一變量原則,不能形成比照試驗,不能說明大腸桿菌的生長不須要生長因子,而Ⅰ與Ⅱ比照可說明大腸桿菌的生長須要生長因子,C錯誤;Ⅱ和Ⅲ比照,說明大腸桿菌的生長須要葡萄糖,D正確。6.(2024·江蘇卷)某高校采納下圖所示的發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程的探討,下列敘述錯誤的是()A.夏季生產(chǎn)果酒時,常需對罐體進行降溫處理B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣的進氣量不宜太大C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來確定何時終止發(fā)酵B解析:葡萄酒發(fā)酵的原理是酵母菌的無氧呼吸,即葡萄糖在無氧條件下分解產(chǎn)生二氧化碳和酒精并釋放少量的能量,發(fā)酵的溫度在18~30℃。依據(jù)以上分析可知,果酒發(fā)酵的相宜溫度為18~30℃,因此夏季生產(chǎn)果酒時,常需對罐體進行降溫處理,A正確;乙醇是酵母菌無氧呼吸的產(chǎn)物,因此分解過程中不須要通入空氣,B錯誤;無氧呼吸產(chǎn)生了二氧化碳,但是沒有消耗氣體,因此發(fā)酵罐中的氣壓不會低于大氣壓,C正確;葡萄酒發(fā)酵的原料是糖類,因此可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來確定何時終止發(fā)酵,D正確。7.下列有關(guān)發(fā)酵工程應用的敘述,不合理的是()A.生產(chǎn)醬油、檸檬酸、味精等食品添加劑和各種酶制劑B.某些疫苗、動物激素是利用基因改造或轉(zhuǎn)基因的酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)的C.利用微生物在發(fā)酵過程中的代謝產(chǎn)物生產(chǎn)微生物菌肥、農(nóng)藥、飼料等D.嗜熱菌可以用來生產(chǎn)洗滌劑、嗜低溫菌有助于提高熱敏性產(chǎn)品的產(chǎn)量C解析:利用微生物在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的有機酸、生物活性物質(zhì)生產(chǎn)微生物菌肥,利用微生物或其代謝產(chǎn)物生產(chǎn)微生物農(nóng)藥,利用發(fā)酵過程中獲得的大量微生物菌體生產(chǎn)微生物飼料,故C項錯誤。二、選擇題:每小題給出的四個選項中有一個或多個符合題目要求。8.下列關(guān)于倒平板及對菌種純化的說法,正確的是()A.平板劃線法接種時,接種環(huán)要灼燒6次,每次目的相同B.運用已滅菌的接種環(huán),培育基不須要再滅菌C.平板冷凝后要將平板倒置,接種后也需將平板倒置D.平板劃線操作中,在其次次以及其后的劃線操作時,總是從上一次劃線的末端起先劃線CD解析:取菌種前灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上原有的微生物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線菌種干脆來自上次劃線的末端,使每次劃線菌種數(shù)目削減,達到分別菌株的目的;接種結(jié)束后灼燒接種環(huán)是為了殺死接種環(huán)上殘存的菌種,避開菌種污染環(huán)境和感染操作者,A錯誤。運用已滅菌的接種環(huán),培育基也須要滅菌,B錯誤。平板冷凝后要將平板倒置,接種后也需將平板倒置,目的都是防止凝聚在皿蓋上的水蒸氣流到培育基表面導致污染,C正確。為了保證接種環(huán)上的細菌來自上一次劃線的末端,通過劃線次數(shù)的增加使每次劃線時的細菌數(shù)目漸漸削減,最終得到由單個細胞繁殖而來的菌落,故平板劃線操作中,在其次次以及其后的劃線操作時,總是從上一次劃線的末端起先劃線,D正確。9.(2024·山東模擬)生長圖形法是一種測定微生物養(yǎng)分需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類,探討小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需養(yǎng)分物質(zhì)的培育基混合后倒成平板,然后在平板上劃分數(shù)區(qū),將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域,培育結(jié)果如圖所示,下列說法正確的是()A.倒成平板后干脆培育可推斷有無污染B.倒成平板后須要進行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌須要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選AD解析:平板上不含任何生長因子,若倒成平板后干脆培育,出現(xiàn)菌落說明平板已被雜菌污染,因為該嗜熱菌不能在缺乏生長因子的培育基中生長,A正確;制備平板時,先滅菌再倒平板,B錯誤;題圖中菌落生活在乙、丙區(qū)域之間,說明同時須要生長因子乙和丙,C錯誤;不同菌種所需生長因子不同,可利用生長圖形法篩選菌種,D正確。10.(2024·河北邯鄲模擬)精氨酸依靠養(yǎng)分缺陷型谷氨酸棒狀桿菌缺乏將鳥氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的酶,不能在缺少精氨酸的培育基上生長,但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。下圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依靠養(yǎng)分缺陷型谷氨酸棒狀桿菌并進行篩選的過程示意圖,過程②將紫外線照耀處理的菌液接種在某培育基上,培育至菌落不再增加時,平板上的菌落如圖甲所示。過程③向培育基中添加某種物質(zhì),接著培育,得到如圖乙所示平板。下列相關(guān)敘述正確的是()A.紫外線照耀可導致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生染色體變異B.圖乙中菌落B為精氨酸依靠養(yǎng)分缺陷型谷氨酸棒狀桿菌C.過程③向培育基中添加的某種物質(zhì)是鳥氨酸D.過程②所用培育基是一種選擇培育基BD解析:谷氨酸棒狀桿菌是原核生物,沒有染色體,紫外線照耀只能導致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變,A錯誤;與圖甲平板相比,圖乙平板上菌落數(shù)多,說明過程③往培育基中添加的某種物質(zhì)是精氨酸,新出現(xiàn)的菌落為精氨酸依靠養(yǎng)分缺陷型菌株,B正確,C錯誤;圖甲平板上只有野生型菌株,因此該培育基是一種選擇培育基,D正確。三、非選擇題11.(2024·江蘇卷)產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,科研人員開展了相關(guān)探討。請回答下列問題:(1)常規(guī)微生物試驗中,下列物品及其滅菌方法錯誤的是________(填編號)。編號①②③④物品培育基接種環(huán)培育皿涂布器滅菌方法高壓蒸汽火焰灼燒干熱臭氧(2)稱取1.0g某土壤樣品,轉(zhuǎn)入99mL無菌水中,制備成菌懸液,經(jīng)______________后,獲得細胞密度不同的菌懸液。分別取0.1mL菌懸液涂布在固體培育基上,其中10倍稀釋的菌懸液培育后平均長出了46個酵母菌落,則該樣本中每克土壤約含酵母菌________個。(3)為了進一步提高酵母菌產(chǎn)酶實力,對分別所得的菌株,采納射線輻照進行________育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以________為唯一碳源的固體培育基上,培育一段時間后,依據(jù)菌落直徑大小進行初篩,選擇直徑________的菌落,純化后獲得A、B兩突變菌株。(4)在處理含油廢水的同時,可獲得單細胞蛋白,實現(xiàn)污染物資源化。為評價A、B兩菌株的相關(guān)性能,進行了培育探討,結(jié)果如下圖。據(jù)圖分析,應選擇菌株________進行后續(xù)相關(guān)探討,理由是_________________。解析:(1)涂布器應當用酒精引燃滅菌。(2)將制備的菌懸液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌懸液分別涂布到固體培育基的表面,進行培育,在稀釋度足夠高的菌懸液里,聚集在一起的酵母菌將被分散成單個細胞,從而能在培育基表面形成單個菌落。該樣本中每克土壤約含酵母菌數(shù)量為46÷0.1×103=4.6×105(個)。(3)射線輻照可導致菌株發(fā)生基因突變,屬于誘變育種。因要篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株,故培育基要以脂肪為唯一碳源。培育基上形成的菌落直徑越大,說明產(chǎn)脂肪酶越多,酵母菌產(chǎn)酶實力越強。(4)由題圖可知,菌株B增殖速度快,單細胞蛋白產(chǎn)量高,降解脂肪實力強,凈化效果好,所以應選擇菌株B進行后續(xù)相關(guān)探討。答案:(1)④(2)梯度稀釋4.6×105(或460000)(3)誘變脂肪較大(4)B該菌株增殖速度快,單細胞蛋白產(chǎn)量高,降解脂肪實力強,凈化效果好12.常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖來進行酒精發(fā)酵,自然界中某些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精,科學家欲從果園的葡萄上或土壤中分別這種酵母菌。操作如下:(1)制備酵母菌培育基要進行倒平板操作,待平板冷凝后,要將平板倒置,其主要緣由是____________________________。(2)純化菌株時,通常運用的劃線工具是____________。在其次次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端起先劃線,這樣做的目的是______________________________。劃線的某個平板經(jīng)培育后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落,其次劃線區(qū)域的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤是_____________。(3)將自然界中采集到的葡萄帶回試驗室,用無菌水將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中,然后將瓶中的液體用涂布器涂布接種于以木糖為唯一________的固體培育基上,在相宜的條件下培育一段時間,獲得能利用木糖的多個酵母菌________。試驗中所用培育基按功能屬于________培育基。(4)探討者可以通過視察培育形成的菌落的______________、顏色等特征,來推斷培育基上是否感染了其他細菌。在試驗中,探討者每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,并選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止____________________。解析:(1)將平板倒置的緣由是可以防止培育皿蓋上的冷凝水落入培育基造成污染。(2)利用平板劃線法純化菌株時,通常運用的劃線工具是接種環(huán)。在其次次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端起先劃線,這樣做的目的是將聚集的菌落逐步分散以獲得單個菌落。造成劃線上無菌落的操作可能有兩種:①接種環(huán)灼燒后未冷卻導致菌種死亡;②劃線時未從第一區(qū)域末端起先。(3)木糖屬于糖類,含有C、H、O元素,可以作為微生物培育中的

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