糞便檢驗(yàn)（臨床檢驗(yàn)技術(shù)課件）

糞便標(biāo)本的采集與處理概述糞便的形成概述糞便（feces）是食物在體內(nèi)經(jīng)消化的最終產(chǎn)物。糞便檢測(cè)對(duì)了解消化道及通向腸道的肝、膽、脾、胰腺等器官有無病變，對(duì)間接地判斷胃腸、胰腺、肝膽系統(tǒng)的功能狀況有重要價(jià)值。01糞便的組成糞便水分3/4固體成分1/4未消化的食物殘?jiān)婪置谖锖陀行纬煞质澄锓纸猱a(chǎn)物細(xì)菌占干重1/3腸道細(xì)菌：主要為大腸桿菌、厭氧菌、腸球菌；消化道分泌物（膽色素、黏液）和有形成分（腸壁脫落的上皮細(xì)胞）02糞便檢驗(yàn)的目的1.了解消化道有無炎癥、出血、寄生蟲感染、惡性腫瘤等。2.判斷胃腸、肝膽、胰腺等的功能狀況。3.分析有無致病菌及腸道正常菌群有無失調(diào)等。4.糞便隱血試驗(yàn)作為消化道惡性腫瘤的過篩試驗(yàn)。03標(biāo)本的采集與運(yùn)送1.采集新鮮糞便，盛于潔凈、干燥、無吸水性的有蓋容器中。一般采集3g～5g糞便送檢。標(biāo)本采集后應(yīng)于1h內(nèi)檢查完畢。2.采集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)用干凈竹簽挑取含有血、粘液、膿等病理成分的糞便，外觀無異常的糞便須從表面、深部多出取材。標(biāo)本的采集003標(biāo)本的采集與運(yùn)送3.檢查溶組織內(nèi)阿米巴原蟲滋養(yǎng)體時(shí)應(yīng)于排便后立即檢查，寒冬季節(jié)標(biāo)本運(yùn)送及時(shí)檢查均需保溫；檢查日本血吸蟲時(shí)應(yīng)取膿血、粘液部分，孵化毛蚴時(shí)至少留取30g糞便，且須盡快處理；檢查蟯蟲卵需用透明薄膜試紙或棉拭子于晚12時(shí)或清晨排便前自肛門周圍皺襞處拭取并立即鏡檢。4.化學(xué)隱血試驗(yàn)：試驗(yàn)前3d禁食肉類、動(dòng)物血、肝臟和某些蔬菜等，并禁服鐵劑及維生素C等藥品。5.其他：無糞便而又必須檢查時(shí)，可經(jīng)直腸指診或采便管采集標(biāo)本。標(biāo)本的采集004標(biāo)本的接收與拒收1.標(biāo)本要求-根據(jù)檢測(cè)目的，選擇最有價(jià)值標(biāo)本。2.送檢時(shí)間-1小時(shí)內(nèi)送檢-寄生蟲與蟲卵不宜超過24小時(shí)。3.患者準(zhǔn)備-根據(jù)醫(yī)護(hù)人員或檢驗(yàn)人員的指導(dǎo)，按照注意事項(xiàng)自行留取糞便標(biāo)本。注:接受標(biāo)本嚴(yán)格實(shí)行核對(duì)制度，所送標(biāo)本必須與檢驗(yàn)?zāi)康南喾缓细竦臉?biāo)本拒收。005標(biāo)本檢驗(yàn)后處理1.標(biāo)本容器為紙類或塑料等材料置于焚化爐內(nèi)進(jìn)行焚化處理。2.標(biāo)本容器為玻璃、瓷器等材料浸入5%甲酚皂溶液24h，或0.1%過氧乙酸12h，處理后的糞便倒入廁所。用過的載玻片浸入0.5%過氧乙酸消毒過夜或煮沸消毒，清洗干凈備用。

糞便一般性狀檢驗(yàn)01一般性狀檢查-量健康成人每日糞便量100～300g，其量的多少與進(jìn)食食量、事物的種類及消化器官的功能狀態(tài)有直接的關(guān)系。進(jìn)食粗糙糧食及含纖維較多的食物，糞便量相對(duì)較多。進(jìn)食細(xì)糧或以肉食為主時(shí)，糞便量相對(duì)較少病理情況下，糞便的量、性狀等多方面都可發(fā)生改變。02一般性狀檢查-顏色正常成人糞便：黃色或棕黃色，質(zhì)軟，成形便（因含糞膽素而呈黃褐色）嬰兒糞便：黃色或金黃色糊狀便（因含膽綠素未轉(zhuǎn)變成膽紅素而呈黃綠色或金黃色糊狀）成人：黃褐色柱狀軟便嬰兒：黃色糊狀病理情況時(shí)，糞便可呈現(xiàn)特征性的顏色變化02一般性狀檢查-顏色顏色非病理性病理性鮮紅色食用番茄、西瓜等腸道下段出血（如痔瘡、肛裂、直腸癌等）暗紅色食用大量咖啡、可可、巧克力等阿米巴痢疾、腸套疊等黑色食用鐵劑、動(dòng)物血、肝臟、藥用炭及某些中藥上消化道大量出血灰白色服用硫酸鋇，進(jìn)食過量脂肪等膽道阻塞、阻塞性黃疸、胰腺疾病綠色食用大量綠色蔬菜或甘汞嬰兒腸炎（膽綠素未轉(zhuǎn)變?yōu)榧S膽素）黃色新生兒糞便，服用大黃等中藥膽紅素未氧化及脂肪不消化02一般性狀檢查-性狀健康成人糞便為成形軟便，嬰幼兒糞便為稀糊狀，其性狀、硬度與進(jìn)食的食物種類，消化道的功能狀態(tài)有關(guān)。病理情況下，常呈現(xiàn)以下特征性變化：02一般性狀檢查-性狀糞便特點(diǎn)臨床意義粘液便小腸病變時(shí)粘液混于糞便中，大腸病變時(shí)粘液附著在糞便上腸道炎癥或受刺激、腫瘤或便秘、某些細(xì)菌性痢疾膿血便膿樣、膿血樣、粘液血樣、粘液膿血樣細(xì)菌性痢疾（以粘液或膿細(xì)胞為主）、阿米巴痢疾（以紅細(xì)胞為主）、結(jié)腸癌、腸結(jié)核、潰瘍性結(jié)腸炎鮮血便鮮紅色，滴落于排便之后會(huì)附在糞便表面直腸癌、直腸息肉、肛裂或痔瘡膿狀便排出黏胨狀、膜狀或紐帶狀物腸易激綜合征患者常見于腹部絞痛后，某些慢性痢疾患者也可排出類似的糞便02一般性狀檢查-性狀糞便特點(diǎn)臨床意義柏油樣便褐色或黑色、質(zhì)軟、富有光澤，隱血試驗(yàn)陽(yáng)性上消化道出血服用炭、鉍劑之后也可排黑色便，但無光澤，且隱血試驗(yàn)為陰性稀汁便膿樣，含有膜狀物洗肉水樣紅豆湯樣稀糊或稀汁樣偽膜性腸炎、隱孢子蟲感染副溶血性弧菌食物中毒出血性小腸炎急性（胃）腸炎米泔樣便白色淘米水樣，含有粘液片塊，量多，膿細(xì)胞少見霍亂、副霍亂02一般性狀檢查-性狀糞便特點(diǎn)臨床意義白陶土樣便由于膽道阻塞，進(jìn)入腸道的膽汁減少或缺如，糞膽素生成減少甚至無糞膽素生成，使糞便呈灰白色主要見于阻塞性黃疸，鋇餐造影術(shù)后或過量的脂肪亦可使糞便呈灰白色或白色，但鋇餐引起的白色有明顯的階段性乳凝便黃白色乳凝塊或蛋花樣脂肪或酪蛋白消化不全，嬰兒消化不良，嬰兒腹瀉變形便球形硬便細(xì)條、扁片狀細(xì)鉛筆狀習(xí)慣性便秘、老年排便無力腸痙攣、直腸或肛門狹窄03一般性狀檢查-氣味食物在腸道中經(jīng)細(xì)菌作用后，產(chǎn)生吲哚（靛基質(zhì)）、硫醇、糞臭素、硫化氫等很多有臭味的物質(zhì)，故健康人糞便有一定的臭味。一般情況下：肉食者臭味較重；素食為主者臭味相對(duì)較淡。慢性腸炎、胰腺疾病、消化道大出血、結(jié)腸或直腸潰爛時(shí)多因?yàn)橄牡鞍踪|(zhì)發(fā)生腐敗而致糞便有惡臭。脂肪及糖類消化不良或吸收不良時(shí)，由于脂肪酸分解及糖的發(fā)酵，而致使糞便有酸臭味。阿米巴痢疾炎時(shí)糞便有魚腥臭味。04一般性狀檢查-寄生蟲1、肉眼分辨的較大蟲體：蛔蟲、蟯蟲、豬肉絳蟲、牛肉絳蟲、闊頭裂節(jié)絳蟲等

2、將糞便過篩沖洗后：可發(fā)現(xiàn)鉤蟲、鞭蟲等細(xì)小蟲體

3、服驅(qū)蟲劑后：查有無蟲體

4、驅(qū)絳蟲后：尋找頭節(jié)蛔蟲-成蟲04一般性狀檢查-寄生蟲鉤蟲鞭蟲04一般性狀檢查-結(jié)石最重要且最多見的是膽石，另外還有胰石、腸石和糞石。

體積較大者肉眼可見，較小者需用銅篩淘洗糞便后仔細(xì)查找才能檢出。顯微鏡檢驗(yàn)?zāi)夸汣ONTENTⅠ糞便生理鹽水直接涂片法Ⅱ糞便飽和鹽水浮聚法糞便有形成分及臨床意義Ⅲ血栓與止血一般檢查Ⅵ血小板檢驗(yàn)Ⅴ糞便生理鹽水直接涂片法01生理鹽水涂片法生理鹽水直接涂片法，用生理鹽水直接涂片法是最常用的糞便檢查方法，適用于檢查蠕蟲卵、原蟲的包囊和滋養(yǎng)體，方法雖然簡(jiǎn)便，但由于操作取材較少，故檢出率較低，若連續(xù)涂片3張，可提高檢出率。02生理鹽水涂片法-實(shí)驗(yàn)原理糞便用生理鹽水稀釋后，和糞便粘在一起的病原體，成為單一個(gè)體，分散在涂片中，在等滲環(huán)境下，保持原有的形態(tài)和活力，便于鏡下識(shí)別03生理鹽水涂片法-操作步驟1.取一張潔凈載玻片。03生理鹽水涂片法-操作步驟2.在清潔的載玻片中央滴加生理鹽水一滴。03生理鹽水涂片法-操作步驟3.用竹簽或牙簽，挑取米粒大小的糞便。03生理鹽水涂片法-操作步驟4.置于生理鹽水中均勻涂抹。03生理鹽水涂片法-操作步驟5.糞膜厚度以載玻片置于報(bào)紙上，能透過糞膜隱約辨識(shí)玻片下的字跡為宜04生理鹽水涂片法-注意事項(xiàng)一般在低倍鏡下檢查，如發(fā)現(xiàn)可疑，蟲卵，轉(zhuǎn)用高倍鏡檢查，鏡檢時(shí)光線要適當(dāng)，過強(qiáng)的光線會(huì)影響檢查效果，應(yīng)注意蟲卵與糞便中的異物區(qū)別。為提高檢出率，一般涂片三張，其檢出率可達(dá)90%-95%。糞便飽和鹽水浮聚法01飽和鹽水浮聚法

飽和鹽水浮聚法，適用檢查各種線蟲卵，用于檢查鉤蟲卵的效果最好，也可檢查帶絳蟲卵和微小膜殼絳蟲卵，但不適宜檢查吸蟲卵和原蟲包囊。02飽和鹽水浮聚法-實(shí)驗(yàn)原理

利用某些蠕蟲卵的密度小于飽和鹽水的密度，蟲卵可浮于液體表面，從而達(dá)到濃集蟲卵的目的。03飽和鹽水浮聚法-操作步驟

1.取潔凈浮聚瓶一只（可用青霉素瓶替代）。03飽和鹽水浮聚法-操作步驟

2、加入少量飽和鹽水。03飽和鹽水浮聚法-操作步驟

3.用竹簽挑取黃豆大小的糞便，置于盛有少量飽和鹽水的浮聚瓶中。03飽和鹽水浮聚法-操作步驟

4.將糞便充分搗碎，并與飽和鹽水充分混勻。03飽和鹽水浮聚法-操作步驟5.除去糞便中的粗渣，再緩慢加入飽和鹽水，最后改用滴管，滴加飽和生理鹽水至液面稍高于瓶口而不溢出為止。03飽和鹽水浮聚法-操作步驟6、在瓶口輕輕覆蓋一張載玻片，注意不要產(chǎn)生氣泡，如有較大氣泡，應(yīng)揭開載玻片，重新加滿飽和鹽水后再覆蓋?！獭?3飽和鹽水浮聚法-操作步驟7.靜置15分鐘，15分鐘后將載玻片提起，并迅速翻轉(zhuǎn)，置顯微鏡下觀察。03飽和鹽水浮聚法為保證飽和鹽水浮聚法的結(jié)果需注意以下幾點(diǎn)：鹽水的配制一定要飽和，將食鹽徐徐加入盛有沸水的容器內(nèi)，不斷攪拌，直至食鹽不再溶解為止（100ml水中加入食鹽35～40克），冷卻后用兩層紗布濾去雜質(zhì)，測(cè)量密度應(yīng)達(dá)到1.20；糞便太多太少都影響濃集效果，取量適當(dāng)；玻片要潔凈無油，防止玻片與液面之間有氣泡或漂浮的糞便；漂浮時(shí)間須按規(guī)定；翻轉(zhuǎn)玻片時(shí)要輕巧、適速。糞便有形成分及臨床意義概述細(xì)胞結(jié)晶病原微生物食物殘?jiān)S便檢查-有形成分01有形成分-細(xì)胞

正常糞便偶見：主要是中性分葉核粒細(xì)胞。腸道炎癥：增多，＜15個(gè)/HP，分散存在，數(shù)量與炎癥輕重程度及部位相關(guān)。小腸炎癥：白細(xì)胞均勻混合于糞便中，細(xì)胞形態(tài)難以辯認(rèn)。細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾和潰瘍性結(jié)腸炎：大量成堆出現(xiàn)，伴膿細(xì)胞。過敏性腸炎和腸道寄生蟲感染：較多的嗜酸性粒細(xì)胞，伴有夏科-萊登結(jié)晶。1、白細(xì)胞01有形成分-細(xì)胞

正常糞便中無紅細(xì)胞紅細(xì)胞增加：下消化道炎癥或出血潰瘍性結(jié)腸炎、急性血吸蟲病、結(jié)腸癌、直腸癌、直腸息肉、細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、痔瘡出血及其它出血性疾病等2、紅細(xì)胞01有形成分-細(xì)胞

細(xì)菌性痢疾：以白細(xì)胞為主，紅細(xì)胞形態(tài)正常，常散在分布阿米巴痢疾：紅細(xì)胞多于白細(xì)胞，且成堆出現(xiàn)伴形態(tài)破碎炎癥：紅細(xì)胞常伴白細(xì)胞出現(xiàn)上消化道出血：紅細(xì)胞常被胃腸道中的消化液消化破壞，顯微鏡檢查常陰性，可通過隱血試驗(yàn)證實(shí)2、紅細(xì)胞01有形成分-細(xì)胞

吞噬細(xì)胞常伴大量膿細(xì)胞出現(xiàn)在細(xì)菌性痢疾糞便中細(xì)菌性痢疾：常見較多的巨噬細(xì)胞；吞噬細(xì)胞可輔助診斷急性細(xì)菌性痢疾急性出血性腸炎：可見吞噬細(xì)胞潰瘍性結(jié)腸炎：偶見吞噬細(xì)胞3、吞噬細(xì)胞01有形成分-細(xì)胞

4、上皮細(xì)胞正常糞便中少見，炎癥時(shí)可大量出現(xiàn)，并可見細(xì)胞退行性變正常糞便：很難發(fā)現(xiàn)結(jié)腸炎癥：上皮細(xì)胞數(shù)量增多壞死性腸炎、霍亂、副霍亂、偽膜性腸炎等01有形成分-細(xì)胞

5、腫瘤細(xì)胞02有形成分-食物殘?jiān)?/p>

正常情況：僅見到無定形的細(xì)小顆粒殘?jiān)?，偶見少量脂肪小滴和淀粉顆粒。食物消化不完全時(shí)：不同類型的食物殘?jiān)?/p>

1、淀粉顆粒2、脂肪3、肌肉纖維4、結(jié)締組織5、植物纖維及細(xì)胞02

1、淀粉顆粒有形成分-食物殘?jiān)＜S便中較少見。碳水化合物消化不良及腹瀉：可大量出現(xiàn)，常伴較多的淀粉顆粒和肌肉纖維

淀粉顆粒02

2、脂肪有形成分-食物殘?jiān)N形式：中性脂肪、游離脂肪酸、結(jié)合脂肪酸正常情況：糞便中很少見到。脂肪排泄增多：脂肪小滴＞6個(gè)/HP，常見腹瀉；脂肪小滴大量存在：提示胰腺功能障礙：游離脂肪酸增多：提示脂肪吸收障礙：脂肪顆粒02

3、肌肉纖維有形成分-食物殘?jiān)罅渴橙夂蟮募S便：少量肌肉纖維，≤10個(gè)/標(biāo)準(zhǔn)蓋片。肌肉纖維增多：常見于腹瀉、腸蠕動(dòng)亢進(jìn)或蛋白質(zhì)消化不良。02

5、植物纖維及細(xì)胞有形成分-食物殘?jiān)参锢w維和細(xì)胞正常糞便中可少量出現(xiàn)03

有形成分-結(jié)晶正常糞便：可見到少量磷酸鹽結(jié)晶、草酸鈣結(jié)晶和碳酸鈣結(jié)晶，一般沒有臨床意義。病理性結(jié)晶有①夏科-雷登結(jié)晶阿米巴痢疾、鉤蟲病及過敏性腸炎的糞便。②血晶胃腸道出血后的糞便。③脂肪酸結(jié)晶阻塞性黃疸的糞便。夏科-雷登結(jié)晶04

有形成分-病原微生物細(xì)菌

病原微生物寄生蟲卵

真菌

原蟲滋養(yǎng)體和包囊

02

1、細(xì)菌04有形成分-病原微生物細(xì)菌約占糞便干重1/3,多屬于正常菌群成人糞便：主要菌群：大腸埃希氏菌、腸球菌和厭氧菌，約占80%少量菌群：產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、芽胞菌及酵母菌等；少部分：致病細(xì)菌。02

1、細(xì)菌04有形成分-病原微生物

正常情況下，糞便中細(xì)菌處于動(dòng)態(tài)平衡：球菌（G＋）：桿菌（G－）≈1：10。

長(zhǎng)期使用廣譜抗生素、免疫抑制劑及慢性消耗性疾病患者：腸道菌群比例失調(diào)，糞便中球菌/桿菌比值變大。

糞便涂片染色行油鏡觀察可初步判斷，細(xì)菌的培養(yǎng)與鑒定則是其確證實(shí)驗(yàn)。022、寄生蟲04有形成分-病原微生物正常人糞便沒有蟲卵，糞便檢查是識(shí)別寄生蟲（卵）最直接最可靠的方法腸道寄生蟲感染：涂片中可出現(xiàn)相應(yīng)的蟲卵,糞便中常見的寄生蟲卵：蛔蟲卵、鞭蟲卵、鉤蟲卵、蟯蟲卵、血吸蟲卵、肺吸蟲卵、華枝睪吸蟲卵、姜片蟲卵、絳蟲卵等,最少觀察10個(gè)低倍視野，以低倍鏡所見蟲卵的最低和最高數(shù)值報(bào)告。常用方法：飽和鹽水漂浮法、離心沉淀法、靜置沉淀集卵法023、原蟲滋養(yǎng)體與包囊04有形成分-病原微生物（1）溶組織阿米巴：新鮮糞便的膿血黏液部分→直接涂片檢查滋養(yǎng)體，碘液染色檢查包囊阿米巴滋養(yǎng)體阿米巴包囊023、原蟲滋養(yǎng)體與包囊04有形成分-病原微生物（2）藍(lán)氏賈第鞭毛蟲：寄生于小腸，旅游者、男性同性戀者、胃切除者、胃酸缺乏者和免疫功能低下者易感，可引起慢性腹瀉。藍(lán)氏賈第鞭毛蟲藍(lán)氏賈第鞭毛蟲包囊023、原蟲滋養(yǎng)體與包囊04有形成分-病原微生物（3）隱孢子蟲：條件感染性原蟲；引起嚴(yán)重腹瀉兒童和免疫功能缺陷患者，尤其是艾滋病患者列為艾滋病患者的重要檢查項(xiàng)目之一糞便常規(guī)直接涂片金胺-酚-改良抗酸染色法隱孢子蟲0205有形成分-真菌

正常糞便中少見，應(yīng)排除容器污染或糞便在室溫下顯露過久污染所致。常見應(yīng)用大量抗菌素所致的腸道菌群失調(diào)，引起霉菌性二重感染。霉菌0205有形成分-真菌酵母菌糞便中常可見到酵母菌，呈卵圓形，其排列因芽生增殖呈出芽或短鏈狀。酵母菌酵母菌模式圖糞便檢驗(yàn)-隱血試驗(yàn)（OBT）隱血：上消化道出血量小于5ml，糞便中無可見的血液，且因紅細(xì)胞被破壞，顯微鏡檢查也觀察不到紅細(xì)胞，這種肉眼及顯微鏡均不能證明的出血稱為隱血。隱血試驗(yàn)：通過化學(xué)法或免疫法等方法來證實(shí)隱血是否存在。檢測(cè)方法：化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法干化學(xué)試帶法單克隆膠體金試帶法概述01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法

血紅蛋白含有類似過氧化物酶的作用，催化供氫體，將供氫體中的氫轉(zhuǎn)移給過氧化氫生成水，供氫體脫氫（氧化）后形成發(fā)色基團(tuán)而呈色。呈色的深淺可反映血紅蛋白量（出血量）的多少。檢測(cè)原理檢測(cè)方法用竹簽挑取少許糞便于濾紙片上，滴加鄰聯(lián)甲苯胺冰乙酸液2～3滴，再加H2O2（1mol/L）2～3滴，于標(biāo)本上立即觀察結(jié)果，報(bào)告。01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法

根據(jù)出現(xiàn)顏色的時(shí)間及顏色的深淺來判讀結(jié)果：（---）2分鐘后仍不顯色（+）10秒后由淺藍(lán)漸變深藍(lán)（++）初顯淺藍(lán)褐色漸變成明顯藍(lán)褐色（+++）立即呈現(xiàn)藍(lán)褐色（++++）立即呈現(xiàn)黑藍(lán)色結(jié)果示意圖01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法

除鄰聯(lián)甲苯胺法外還有以下化學(xué)方法：鄰甲苯胺法、還原酚酞法、聯(lián)苯胺法、愈創(chuàng)木酯法、匹拉米洞法、無色孔雀綠法等。01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法影響因素此操作簡(jiǎn)便易行，但缺乏特異性和準(zhǔn)確性，常見的影響因素有1、動(dòng)物性食品因含有血紅蛋白和肌紅蛋白或其他酶，可使隱血試驗(yàn)出現(xiàn)假陽(yáng)性。2、大量生食蔬菜中含有植物光氧化物酶也可使結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。3、如服用大量維生素C或其他具有還原作用的藥物，則可使過氧化物酶被還原，不能再氧化色原物，故可出現(xiàn)假陰性。4、血液在腸道中停留過久，血紅蛋白被細(xì)菌降解也會(huì)導(dǎo)致假陰性等。01化學(xué)法-鄰聯(lián)甲苯胺法質(zhì)