尿液檢驗(yàn)-尿液干化學(xué)分析儀應(yīng)用（臨床檢驗(yàn)技術(shù)）

尿液干化學(xué)分析儀應(yīng)用學(xué)習(xí)目標(biāo)了解尿液干化學(xué)分析儀發(fā)展史、結(jié)構(gòu)及檢測(cè)原理0102握尿液干化學(xué)檢驗(yàn)中各項(xiàng)目的原理、方法03掌重點(diǎn)掌握尿液干化學(xué)檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng)及臨床意義04掌握干化學(xué)檢查過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題現(xiàn)代尿液分析儀類型干化學(xué)分析儀檢驗(yàn)全自動(dòng)尿沉渣分析儀流式細(xì)胞術(shù)分析儀影像式尿沉渣尿干化學(xué)試帶測(cè)試原理、臨床應(yīng)用級(jí)及質(zhì)量控制1全自動(dòng)尿沉渣分析儀2CONTENTS

尿干化學(xué)試帶測(cè)試原理、臨床應(yīng)用級(jí)及質(zhì)量控制主要內(nèi)容干化學(xué)尿液分析儀試劑帶檢測(cè)原理干化學(xué)尿液分析儀檢驗(yàn)的干擾因素及質(zhì)量控制干化學(xué)尿液分析儀檢驗(yàn)的臨床應(yīng)用歷史回顧16世紀(jì)：英國(guó)物理學(xué)家RobertBoyle發(fā)明石蕊試紙，用于測(cè)定溶液pH1937年：費(fèi)格爾利用“蛋白質(zhì)誤差（proteinerror）原理，首次發(fā)明了測(cè)定尿蛋白的一種單顏色反應(yīng)，此發(fā)明奠定了以后發(fā)展浸入即讀（Dip-and-Read）干化學(xué)試帶的基礎(chǔ)1956年：聯(lián)合尿糖、蛋白、pH等的多聯(lián)試紙問(wèn)世，從3-4個(gè)項(xiàng)目組合到九十年代的尿液10項(xiàng)干化學(xué)試帶，已經(jīng)達(dá)到比較理想的境地1970年起，用于判讀尿試帶顏色變化的半自動(dòng)化儀器問(wèn)世1980年:具有自動(dòng)進(jìn)樣，點(diǎn)滴，試帶傳輸和打印功能的全自動(dòng)尿干化學(xué)分析儀問(wèn)世歷史回顧歷史回顧---中國(guó)1966年：北京協(xié)和醫(yī)院檢驗(yàn)科生產(chǎn)出12種用于測(cè)定尿液中化學(xué)成分的試紙，包括尿蛋白、尿糖、酮體、膽紅素、pH、潛血等項(xiàng)目1980年，北京協(xié)和醫(yī)院與美國(guó)Ames公司簽訂雙方協(xié)作計(jì)劃，首次從美國(guó)引進(jìn)一批自動(dòng)化和半自動(dòng)化檢驗(yàn)設(shè)備中級(jí)醫(yī)刊，1966年特刊

8項(xiàng)目半自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀

近代尿液分析儀1985年，國(guó)內(nèi)不少?gòu)S家如桂林醫(yī)療電子儀器廠等引進(jìn)日本京都第一化學(xué)或日本榮研化學(xué)的技術(shù)，生產(chǎn)8項(xiàng)的干化學(xué)試帶生產(chǎn)線然后還引進(jìn)了MA-4210等型號(hào)的尿液分析儀進(jìn)入上世紀(jì)90年代以后，尿液干化學(xué)分析儀器和試帶已經(jīng)擴(kuò)展為10項(xiàng)至11項(xiàng)MA-4210尿液化學(xué)分析儀近代尿液分析儀Clinitek500型半自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀

Roche2400全自動(dòng)尿液干化學(xué)分析系統(tǒng)近代尿液分析儀ClinitekAtlas全自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀迪瑞H800全自動(dòng)尿液干化學(xué)分析儀愛科來(lái)AUTIONMAXAX-4280全自動(dòng)尿干化學(xué)分析儀和iQ-200尿液有形成分分析儀連接運(yùn)行

尿干化學(xué)試帶結(jié)構(gòu)及組成試帶構(gòu)成第一層尼龍膜起保護(hù)作用，防止大分子物質(zhì)的污染第二層絨制層，包括碘酸鹽層和試劑層，碘酸鹽層可破壞Vitc等干擾物質(zhì)，試劑層與尿液所測(cè)定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)第三層是固有試劑的吸水層，可使尿液均勻，快速地浸入，并能抑制尿液流到相鄰反應(yīng)區(qū)第四層選取尿液不浸潤(rùn)的塑料片為支持體干化學(xué)檢測(cè)原理不同型號(hào)尿干化學(xué)分析儀使用配套的專用試帶各試劑模塊與尿中被測(cè)成分的反應(yīng)呈現(xiàn)不同的顏色變化，顏色的深淺與尿中相應(yīng)物質(zhì)呈正比空白塊，固定塊作用檢測(cè)參數(shù)8項(xiàng):PH、PRO、GLU、KET、BIL、URO、ERY、NIT9項(xiàng)：增加WBC10項(xiàng)：SG11項(xiàng)：VitC腎病四聯(lián)試帶：PH、PRO、ERY、SG糖尿病五聯(lián)試帶：PH、PRO、GLU、KET、SG肝病二聯(lián)試帶：BIL、URO尿白細(xì)胞測(cè)定原理模塊成分吲哚酚酯重氮鹽粒細(xì)胞胞含有酯酶，先與試紙帶吲哚酚酯反應(yīng)作用生成吲哚酚，再與重氮鹽氧化縮合生成紫色縮合物其顏色深淺與細(xì)胞多少呈比例關(guān)系注意事項(xiàng)本法主要檢測(cè)粒細(xì)胞酯酶，不與淋巴細(xì)胞反應(yīng)尿中含福爾馬林、呋喃坦啶、大量膽紅素可致假陽(yáng)性高比重尿、高蛋白（5g/L)、VC、尿中含頭孢霉素、慶大霉素、四環(huán)素以及硼酸、草酸可致假陰性注意事項(xiàng)尿液標(biāo)本應(yīng)新鮮，尿液在膀胱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，或標(biāo)本存儲(chǔ)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，引起白細(xì)胞破壞，導(dǎo)致干化學(xué)陽(yáng)性，鏡檢陰性的假陽(yáng)性出現(xiàn)綜合酯酶、亞硝酸鹽、鏡檢、結(jié)合臨床分析結(jié)果白細(xì)胞和紅細(xì)胞≤10/μl、亞硝酸鹽和蛋白陰性，可以使用干化學(xué)過(guò)篩而不進(jìn)行鏡檢鏡檢標(biāo)準(zhǔn)腎科及泌尿系病人以鏡檢作為診斷或療效依據(jù)的，如結(jié)石、結(jié)晶、腫瘤尿液外觀異常時(shí)依據(jù)醫(yī)師指定要求做沉渣鏡檢的標(biāo)本。

注意事項(xiàng)只要完全符合以下條件的可不進(jìn)行顯微鏡檢查。白細(xì)胞結(jié)果為陰性亞硝酸鹽為陰性尿蛋白為陰性尿紅細(xì)胞檢查≤10/μl排除藥物及其它因素的干擾尿中白細(xì)胞試帶法與鏡檢結(jié)果比較

試帶法白細(xì)胞（-）試帶法白細(xì)胞（+）鏡檢白細(xì)胞（-）正常標(biāo)本白細(xì)胞破壞、標(biāo)本久置、低滲尿、高pH尿、漏檢白細(xì)胞鏡檢白細(xì)胞（+）試帶失效、高滲尿、抗生素、錯(cuò)誤識(shí)別：滴蟲、鱗狀上皮裸核型，排斥等（+）臨床意義白細(xì)胞增多主要見于泌尿系炎癥腎盂腎炎、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎，腎小球腎炎中性粒細(xì)胞見于急性炎癥淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞見于腎移植、慢性炎癥、新月形腎小球腎炎、抗癌藥物引起的間質(zhì)性腎炎嗜酸性細(xì)胞見于過(guò)敏性炎癥、變態(tài)反應(yīng)引起的泌尿系炎癥急性腎小管壞死，可見單核細(xì)胞減少或消失女性生殖系統(tǒng)炎癥分泌物污染VitC概

述人、靈長(zhǎng)類和豚鼠不能合成VC的閾值14mg/L通過(guò)消化道需能吸收通過(guò)尿液排出，其重吸收機(jī)制和葡萄糖基本一致攝入45mg/L,血液中6mg/L左旋抗壞血酸左旋脫氫抗壞血酸測(cè)定方法同時(shí)測(cè)定：二硝基苯肼比色法和高效液相色譜法測(cè)定左旋抗壞血酸：干化學(xué)法和二氯靛酚藍(lán)檢測(cè)原理模塊組成：2,6-二氯靛酚鈉、中性紅、亞甲基綠磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉VC含有1，2-烯二醇，在酸性條件使氧化態(tài)粉紅色2,6-二氯靛酚還原為無(wú)色的2，6-二氯二對(duì)酚胺注意事項(xiàng)在堿性環(huán)境中不穩(wěn)定，標(biāo)本要新鮮，及時(shí)測(cè)定，防止被細(xì)菌破壞只對(duì)左旋抗壞血酸反應(yīng)PH>4.0時(shí)，內(nèi)源性酚和巰基化合物如半胱氨酸、硫代硫酸鈉使結(jié)果偏高著重反映飲食VC含量，反映體內(nèi)VC營(yíng)養(yǎng)狀況，VC低見于攝入不足或抗壞血酸病，長(zhǎng)期增高與結(jié)石形成有關(guān)維生素C含量的高低對(duì)血紅蛋白、葡萄糖、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽及白細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)干擾尤其注意酮體陽(yáng)性，葡萄糖陰性或葡萄糖干化學(xué)和班氏結(jié)果不一致時(shí)半胱氨酸比色法測(cè)定VC使用活性碳將抗壞血酸氧化成氧化型，與2，4-二硝基苯肼結(jié)合成紅色脎，脎溶解于硫酸，比色尿干化學(xué)檢測(cè)的原理方法比較---尿干化學(xué)法優(yōu)點(diǎn)：①標(biāo)本用量少；②速度快；③項(xiàng)目多；④重復(fù)性好;⑤準(zhǔn)確性高；⑥適用大批量標(biāo)本篩查缺點(diǎn):①顯微鏡檢查，對(duì)白細(xì)胞、管型和結(jié)晶的檢查屬于間接檢查;②很難判斷紅細(xì)胞形態(tài)特征;③測(cè)定蛋白以白蛋白為主，故不適于腎病患者;④易受藥物、外源性物質(zhì)或人為因素影響，出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性;⑤亞硝酸鹽只能檢查出有硝酸鹽還原酶的細(xì)菌;⑥多聯(lián)試帶保存和使用要求高檢出異常標(biāo)本和排除健康標(biāo)本，特別是避免假陰性。對(duì)假陽(yáng)性可通過(guò)鏡檢進(jìn)一步排除篩查的目的質(zhì)量控制標(biāo)本必須新鮮，最好2小時(shí)內(nèi)完成，過(guò)久影響結(jié)果避免混入陰道分泌物混入尿標(biāo)本，否則，引起白細(xì)胞假陽(yáng)性了解病人飲食及用藥情況試劑帶要求一定要在失效期內(nèi)避光、防潮、干燥保存使用時(shí)一次只取出所需要的試劑帶，并立即蓋緊，多余試劑帶不可放回容器內(nèi)打開蓋子后不能再放冰箱不可合并各瓶中的試劑帶。不可觸摸試劑帶上各反應(yīng)檢測(cè)塊。質(zhì)量控制操作嚴(yán)格、規(guī)范、正確2種濃度質(zhì)控液臨床應(yīng)用尿液蛋白質(zhì)檢查種類流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀原理和電阻抗相結(jié)合影像式尿沉渣分析系統(tǒng)流式細(xì)胞分析技術(shù)和粒子成像分析技術(shù)影像式尿沉渣分析儀流式細(xì)胞術(shù)尿沉渣分析儀光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)液壓系統(tǒng)電阻抗檢測(cè)系統(tǒng)電子系統(tǒng)參

數(shù)熒光強(qiáng)度（FI):反映細(xì)胞染色質(zhì)強(qiáng)度前向熒光脈沖寬度（FLW）：主要反映染色質(zhì)長(zhǎng)度前向散射光強(qiáng)度（Fsc）：成比例反映細(xì)胞大小前向散射光脈沖寬度（Fscw):反映細(xì)胞長(zhǎng)度定量參數(shù)WBC/μl、RBC/μl、EC/μl、CAST/μl、BACT/μl、conductivity標(biāo)記參數(shù)PathCAST、SRC、YLC、X′TAL、SPERM等紅細(xì)胞、白細(xì)胞isomorphicRBC、dysmorphicRBC、Non-LysedRBC#,%、RBC-MFI、RBC-MFsc、RBC-FI-DWSD、WBC-MFsc)FI-Fsc、Fscw-Flw散點(diǎn)圖紅細(xì)胞：FI極低,Fsc大小不均白細(xì)胞：FI大,Fsc較紅細(xì)胞大細(xì)菌：FSC比白細(xì)胞和紅細(xì)胞小,FI比紅細(xì)胞大,比白細(xì)胞小上皮細(xì)胞：均有細(xì)胞核,主要分布在Fscw-Flw散點(diǎn)圖左上角管型：透明管型有極高的Fscw和低的FLW;病理性管型含有其他內(nèi)容物，有較高的Fscw和較高的FLWFSCWFSC酵母細(xì)胞和精子：較高的FI，F(xiàn)sc在紅細(xì)胞和白細(xì)胞之間;酵母的FSCW較精子的小,將其區(qū)分開來(lái)結(jié)晶出現(xiàn)在紅細(xì)胞區(qū)域,草酸鹽更靠近FSC,尿酸鹽和紅細(xì)胞分不清FSCWFSC80%的紅細(xì)胞Fsc≦84ch,稱為非均一性血尿80%的紅細(xì)胞Fsc≥126ch,稱為均一性血尿介于兩者之間，混合性血尿結(jié)晶、真菌、結(jié)晶增多影響結(jié)果血尿伴菌尿，尿滲量≤700mOsm/L,PH≧7.0或放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，導(dǎo)致改變紅細(xì)胞存活的白細(xì)胞，F(xiàn)sc較強(qiáng)而FI弱死亡白細(xì)胞，F(xiàn)sc較弱而FI強(qiáng)白細(xì)胞前向散射光（FSC)強(qiáng),前向熒光（FI）弱，急性感染；否則FSC弱，F(xiàn)I強(qiáng)慢性感染。利用WBC-MFsc來(lái)判別白細(xì)胞狀態(tài)，結(jié)合白細(xì)胞定量判斷急性還是慢性感染:當(dāng)其WBC-MFsc≥73.3時(shí),可初步診斷為急性尿路感染;當(dāng)其WBC-MFsc≤38.1時(shí),可初步診斷為慢性尿路感染,并可指導(dǎo)臨床用藥影響：上皮細(xì)胞、真菌、滴蟲、脂肪滴等，使白細(xì)胞增加

白細(xì)胞臨床應(yīng)用方法學(xué)評(píng)價(jià)不需離心尿樣，自動(dòng)進(jìn)樣所需標(biāo)本量少工作效率高，50~100/h，并報(bào)告多個(gè)參數(shù)，且可定量采集信息量大，標(biāo)本9μl,相當(dāng)于50個(gè)高倍鏡視野，粒子總數(shù)0~4000，明顯高于手工鏡檢有形成分不能確認(rèn)，需離心顯微鏡區(qū)分應(yīng)用時(shí)間短，經(jīng)驗(yàn)不足，未建立公認(rèn)的參考值不能替代傳統(tǒng)尿沉渣操作程序統(tǒng)一，易于標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量控制影像式尿沉渣分析儀結(jié)合了流式細(xì)胞分析技術(shù)和粒子成像分析技術(shù)捕獲所有顆粒的影像并數(shù)字化分析系統(tǒng)分類12種有形成分可以和全自動(dòng)尿液分析儀或其他設(shè)備組合使用組成顯微鏡高速攝像數(shù)字相機(jī)圖像采集電腦軟件參數(shù)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、白細(xì)胞簇、透明管型、非分類的管型、鱗狀上皮細(xì)胞、非鱗狀上皮細(xì)胞、細(xì)菌、酵母樣菌、結(jié)晶體、粘液絲、精子尿干化學(xué)分析儀應(yīng)用反映腎臟調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)環(huán)境體液、酸堿平衡能力的重要指標(biāo)之一，通常簡(jiǎn)稱為尿液酸度。尿液pH值決定因素主要由腎臟腎小管泌H+、泌NH3、銨鹽的形成、HCO3-的重吸收有關(guān)尿液酸堿度檢查檢測(cè)方法方法學(xué)評(píng)價(jià)質(zhì)量控制臨床意義目

錄CONTENTS檢測(cè)方法01采用雙指示劑法，模塊中含有溴麝香草酚藍(lán)（PH6.0~7.6)和甲基紅（PH4.6~6.2),變色范圍5.0(黃色)—7.0(綠色)—9.0(藍(lán)色)0203溴麝香草酚藍(lán)干化學(xué)法pH試紙法指示劑法04可滴定酸度

05滴定法電極法方法學(xué)評(píng)價(jià)注意試帶保存條件.質(zhì)量控制（1）分析前標(biāo)本必須新鮮分析中試紙、試帶法試帶應(yīng)能滿足的生理和病理尿pH變化范圍定期弱酸、弱堿檢查試帶靈敏度未被酸、堿污染，未吸潮變質(zhì)在有效期內(nèi)使用浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，PH有降低趨勢(shì)不能浸入過(guò)多尿液，防止試帶間溢出現(xiàn)象，影響PH測(cè)定質(zhì)量控制（2）---PH計(jì)法經(jīng)常校準(zhǔn)PH計(jì)對(duì)溫度有嚴(yán)格要求，故首先調(diào)整所需試驗(yàn)溫度，新型PH計(jì)可自動(dòng)對(duì)溫度進(jìn)行補(bǔ)償質(zhì)量控制（3）分析后生理?xiàng)l件下，少見PH小于4.5或大于8.0。尿液PH大于8.0見于標(biāo)本防腐或保存不當(dāng)，細(xì)菌大量繁殖并分解尿素并產(chǎn)生氨患者服用大量堿性制劑建立完善的報(bào)告審核制度參考值在正常飲食條件下，晨尿多偏弱酸性，多數(shù)尿標(biāo)本pH5.5-6.5，平均pH6.0隨機(jī)尿pH4.5-8.0。臨床意義續(xù)表有形成分臨川意義混合管型活動(dòng)性腎小球腎炎顆粒管型腎實(shí)質(zhì)病變后期、藥物中毒性腎小管損傷脂肪管型慢性腎炎腎病型、類脂性腎病、腎病綜合征