聚乳酸及其制品中辛酸亞錫的測(cè)定 高效液相色譜法（征求意見稿）

1聚乳酸及其制品中辛酸亞錫的測(cè)定高效液相色譜法本文件規(guī)定了聚乳酸及其制品中辛酸亞錫含量測(cè)定的高效液相色譜法。本文件適用于聚乳酸及其制品中辛酸亞錫含量的測(cè)定。本文件檢測(cè)限為300mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T16631高效液相色譜法通則3原理試料中的辛酸亞錫在堿性條件下水解生成辛酸鈉，水解液中辛酸鈉在18-冠-6醚的催化下與ω-溴苯乙酮進(jìn)行衍生反應(yīng)，N2吹干、流動(dòng)相復(fù)溶后，注入高效液相色譜儀，262nm波長(zhǎng)處測(cè)定，內(nèi)標(biāo)法定量。4試劑和材料除非另有說明，本方法所用試劑均為優(yōu)級(jí)純。水應(yīng)符合GB/T6682中一級(jí)水的要求，且使用前煮沸30min后蓋塞冷卻。注:實(shí)驗(yàn)所涉及的玻璃器皿均需120℃加熱處理，塑料管先用乙醇沖洗、50℃加熱處理后使用。4.1乙腈(CH3CN)：色譜純。4.2甲醇(CH3OH)：色譜純。4.3二氯甲烷(CH2Cl2)：色譜純。24.4氫氧化鈉(NaOH)。4.5正己烷(C6H14)。4.6辛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL)：CAS號(hào)：124-07-2，冷藏避光條件下保存。4.7庚酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL)：CAS號(hào)：111-14-8，冷藏避光條件下保存。4.8ω-溴苯乙酮：純度≥95.0%4.918-冠-6醚：純度≥95.0%。4.10氫氧化鈉(NaOH)溶液(1.0mol/L)：稱取40.0g氫氧化鈉，用水溶解并定容至1000mL。4.11ω-溴苯乙酮衍生試劑溶液(0.025mol/L)：準(zhǔn)確稱取25.3mgω-溴苯乙酮于5mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，密封保存。4.1218-冠-6醚衍生試劑溶液(0.005mol/L)：準(zhǔn)確稱取65.0mg18-冠-6醚于50mL容量瓶中，用水溶解并定容，密封保存。4.13辛酸標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確移取適量辛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(4.6)，用水稀釋成一系列辛酸標(biāo)準(zhǔn)工作液，當(dāng)天配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。4.14庚酸內(nèi)標(biāo)工作液：準(zhǔn)確移取適量庚酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(4.7)1mL，用水稀釋至10mL，當(dāng)天配制，現(xiàn)用現(xiàn)配。s儀器和設(shè)備5.1高效液相色譜儀：配紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。5.2分析天平：感量0.1mg和0.01g。5.3超聲波清洗器。5.4離心機(jī)：轉(zhuǎn)速不低于8000r/min。5.5帶磁力攪拌的冷凝加熱回流裝置：攪拌速度可調(diào)，加熱溫度80℃~100℃。5.6渦旋振蕩器。5.7恒溫培養(yǎng)箱：(50±2)℃。5.8氮吹儀：可控溫。5.9微孔濾膜：孔徑0.22μm，有機(jī)相。6試樣制備3聚乳酸樣品采用對(duì)角線分割法，取對(duì)角部分，如樣品較大可將其切碎，充分混勻，用四分法取樣或經(jīng)冷凍研磨粉碎。取200g混勻放入聚乙烯瓶中于-20℃~-16℃條件下保存。稱取試樣時(shí)，應(yīng)攪拌均勻。7分析步驟7.1水解稱取5g試樣(精確至0.01g)于250mL球形燒瓶中，加入50mL二氯甲烷(4.3)，超聲10min使樣品溶解，加入50mL氫氧化鈉(NaOH)溶液(4.9)，加入一顆磁力攪拌子，于冷凝加熱回流裝置上反應(yīng)1h，溫度設(shè)置為80℃。反應(yīng)完畢冷卻后取上層水解溶液10mL于8000r/min離心5min，取上層溶液5mL用1.0mol/L鹽酸溶液調(diào)pH至7.0±0.1，備用。7.2衍生準(zhǔn)確量取100μL上述上層溶液，加100μL內(nèi)標(biāo)溶液，加0.5mL1.50mol/LHClO4，渦旋混合2min，加1mL正己烷，渦旋混合2min，3000r/min離心20min。準(zhǔn)確量取上層正己烷溶液0.5mL，加20μL0.05mol/LKOH-甲醇溶液，混合，氮?dú)獯蹈?，加衍生試劑溶?4.10)100μL、衍生試劑溶液(4.11)50μL，渦旋混合、密封，于恒溫干燥箱中50℃反應(yīng)0.5h。反應(yīng)液50℃下氮?dú)獯蹈?，加?.5mL流動(dòng)相復(fù)溶，過微孔濾膜，用于測(cè)定。7.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液分別注入反向液相色譜儀中，內(nèi)標(biāo)法標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液中辛酸與其對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)庚酸的濃度比為橫坐標(biāo)，以辛酸的峰面積與其對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)庚酸的峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。辛酸與其對(duì)應(yīng)內(nèi)標(biāo)庚酸衍生物的色譜圖見附錄A中圖1。8測(cè)定8.1色譜參考條件a)色譜柱：C18色譜柱（250mm×4.6mm，5μm），或相當(dāng)者；b)流動(dòng)相：甲醇-水（75+25，V/V）；c)流速：1.0mL/min；d)檢測(cè)波長(zhǎng)：262nm；e）進(jìn)樣量：20μL；4f）柱溫：35℃。8.2定性分析將試樣溶液注入液相色譜儀中進(jìn)行測(cè)定，同樣測(cè)試條件下，試樣溶液中辛酸和庚酸的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中相應(yīng)的保留時(shí)間相比，偏差應(yīng)在±2.5%以內(nèi)。8.3定量分析將試樣溶液注入液相色譜儀中，得到辛酸的峰面積，根據(jù)相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線得到試樣溶液中辛酸的濃度。試樣溶液中的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，超過線性范圍，可適當(dāng)減少取樣量重新測(cè)定。8.4空白試驗(yàn)不稱取試樣，按試樣的水解、衍生和濃縮分析步驟操作。應(yīng)不含有干擾待測(cè)組分的物質(zhì)。內(nèi)標(biāo)法需要做不加內(nèi)標(biāo)的樣品試驗(yàn)，確認(rèn)加入內(nèi)標(biāo)的可行性。9結(jié)果計(jì)算試樣中辛酸亞錫的含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，單位以毫克每千克(mg/kg)表示，按式(1)計(jì)算。X×f×n(1)式中：X-----樣品中辛酸亞錫含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；C-----根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線算出的樣液中辛酸的含量，單位為微克每毫升(μg/mL)；V-----試樣加水提取后的定容體積，單位為毫升(mL)；m-----試樣的質(zhì)量，單位為克(g)；n-----樣液的稀釋倍數(shù)；f-----由辛酸換算為辛酸亞錫的換算系數(shù)。注:計(jì)算結(jié)果需扣除空白值,測(cè)定結(jié)果取兩次測(cè)定的算術(shù)平均值,計(jì)算結(jié)果保留至三位有效數(shù)字。10.