紫外分光光度法_第1頁
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紫外分光光度法原理：可見光、紫外線照射某些物質(zhì)，主要是由于物質(zhì)分子中價電子能級躍遷對輻射的吸收，而產(chǎn)生化合物的可見紫外吸收光譜?；谖镔|(zhì)對光的選擇性吸收的特性而建立分光光度法或稱吸收光譜法的分析方法。它是以朗伯──比耳定律為基礎(chǔ)。1朗伯—比耳定律A=lg—-=ECLT式中A為吸收度；T為透光率；E為吸收系數(shù)，采用的表示方法是（E１％１ｃｍ），其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1%（g/ml），液層厚度為1cm時的吸收度數(shù)值；C為100ml溶液中所含被測物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計算），g；L為液層厚度，cm。儀器：可見-紫外分光光度計。其應(yīng)用波長范圍為200～400nm的紫外光區(qū)、400～850nm的可見光區(qū)。主要由輻射源（光源）、色散系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)、吸收池、數(shù)據(jù)處理機、自動記錄器及顯示器等部件組成。本儀器是根據(jù)相對測量的原理工作的，即先選定某一溶劑（或空氣、試樣）作為標(biāo)準(zhǔn)（空白或稱參比）溶液，并認(rèn)為它的透光率為100％（或吸收度為0），而被測的試樣透光率（或吸收度）是相對于標(biāo)準(zhǔn)溶液而言，實際上就是由出射狹縫射出的單色光，分別通過被測試樣和標(biāo)準(zhǔn)溶液，這兩個光能量之比值，就是在一定波長下對于被測試樣的透光率（或吸收度）。本儀器可精密測定具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機化合物、有色物質(zhì)或在適當(dāng)條件下能與某些試劑作用生成有色物的物質(zhì)。使

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