麻疹病毒實驗活動風險評估報告

第四章呼吸道病原微生物實驗活動風險評估報告實例第四章呼吸道病原微生物實驗活動風險評估報告實例病原微生物實驗活動風險評估報告實例麻疹病毒實驗活動風險評估報告一、生物學特性〈一)種類和病毒分型麻疹病毒(Measlesvirus)是麻疹的病原體，分類上屬于副粘病毒科麻疹病毒屬。電鏡下麻疹病毒呈球狀或絲狀，直徑約120~250nm，有包膜9核衣殼呈螺旋時稱，核心為單負鏈RNA，不分節(jié)段9基因組全長約16kb，包括N、P、M、F、H、L6個基因，分別編碼6個結(jié)構(gòu)和功能蛋白。麻疹病毒的抗原性較穩(wěn)定只有一個血清型但近年來的研究證明，麻疹病毒抗原也有小的變異。根據(jù)麻疹病毒核蛋白基因C末端高變區(qū)或全長血凝素基因特點，可以將野生型麻疹病毒分為A~H8個基因群，包括23個基因型。(二)來源早在東漢時期我國張仲景在《金匱要略》中就有關(guān)于麻疹的描述，并認為麻疹是一種傳染性很強的疾病。國外在公元10世紀波斯醫(yī)生拉茲才開始描述該病直到1675年才認為麻疹是一種獨立的疾病。1864年貝納肯定了麻疹是通過呼吸道播散的是由人傳給人的疾病，潛伏期為14d，可獲終生免疫。1911年哥特貝格等用急性期患者的血液及咽拭子感染了猴子證實了麻疹病原是一種濾過性病毒。1930年，勃來茲應(yīng)用雞胚培養(yǎng)麻疹病毒獲得成功。1954年，恩多等用人胚腎及人羊膜細胞培養(yǎng)病毒取得成功，為深入研究麻疹奠定了實驗室基礎(chǔ)。1963年，美國成功地應(yīng)用了經(jīng)雞胚羊膜腔適應(yīng)和雞胚單層細胞傳代的減毒株制備了疫苗。我國也于1965年自行研制了減毒活疫苗并開始普種，從此麻疹的發(fā)病率和死亡率大幅度降低。(三)傳染源人是麻疹病毒的唯一宿主因此病人是唯一的傳染源。急性期患者為最重要的傳染源無癥狀帶病毒者和隱性感染者較少，傳染性也較低。在患者出疹前6d至出疹后3d內(nèi)均具有傳染性，前驅(qū)期傳染性最強，出疹后逐漸減低，疹消退時已無傳染性。傳染期患者口、鼻、咽、眼結(jié)合膜分泌物均含有病毒，恢復(fù)期不帶病毒。（四）傳播途徑主要經(jīng)呼吸道

飛沫傳播。病人咳嗽、打噴嚏時，病毒隨排出的飛沫經(jīng)口、咽、鼻部或眼結(jié)合膜侵入易感者。密切接觸者亦可經(jīng)污染病毒的手傳播，通過第二者或衣物間接傳播較為少見。{五〉易感性人群普遍易感，易感者接觸患者后90%以上會發(fā)病，病后可獲持久免疫力。6個月內(nèi)的嬰兒因從母體獲得抗體號因此9很少患病，該病主要在6個月至5歲小間流行。目前?成人麻疹病例的報道越來越多，甚至在局部地區(qū)有小的流行。其主要原因為幼時接種過麻疹疫苗以后未再復(fù)種導(dǎo)致體內(nèi)抗體的水平降低而使其成為易感者。〈六〉潛伏黯潛伏期為6~21d，平均為10d左右接種過麻摩疫苗者可延長至3~4周。(七〕劑量一效應(yīng)關(guān)系目前，尚未見有麻疹病毒對人準確感染劑量的報道，麻膀病毒的感染主要與暴露途徑和感染方式相關(guān)。(八)致病性因為CD46是麻疹病毒受體，所以，具有CD46的大多數(shù)組織細胞均可為麻疹病毒感的靶細跑。經(jīng)呼吸道進入的病毒首先與呼吸道上皮細胞受體結(jié)合并在其中增強，再侵入淋巴結(jié)增殖，然后入血（在白細胞內(nèi)增殖良好)，形成第一次病毒血癥。病毒到達全身淋巴組織后進行大量增殖，再次人血，形成第二次病毒血癥。此時，開始發(fā)熱，以及由于病毒在結(jié)膜、鼻口因素占膜和呼吸道站膜等處增殖而出現(xiàn)的上呼吸道卡他癥狀。病毒還可在真皮內(nèi)增殖口腔兩頰內(nèi)側(cè)勃膜出現(xiàn)中心灰白、周圍紅色的Koplik斑。發(fā)病3d后，患者可出現(xiàn)米糠樣皮疹，皮疹形成的原因主要是局部產(chǎn)生超敏反應(yīng)。一般患兒皮疹出現(xiàn)24h后，體溫開始下降，呼吸道癥狀一周左右消退步，皮疹變暗，有色素沉著。有些年幼體弱的患兒，易并發(fā)細菌性感染，如繼發(fā)性支氣管炎、中耳炎，尤其是易患細菌性肺炎，這是麻疹患兒死亡的主要原因。麻疹病毒感染后，大約有0.1%的患者會發(fā)生腦脊髓炎9它是一種遲發(fā)型超敏反應(yīng)疾病，常于病愈1周后發(fā)生，呈典型的脫髓鞘病理學改變及明顯的淋巴細胞浸潤常留有永久性后遺癥，病死率為15%。免疫缺陷兒童感染麻疹病毒，常無皮疹，但可發(fā)生嚴重致死性麻疹巨細胞肺炎。另外，約百萬分之一的麻疹兒童患者在其恢復(fù)后若干年，多在學齡期前出現(xiàn)亞急性硬化性全腦炎(Subacutesclerosingpanencephalitis，SSPE)。SSPE屬急性感染的遲發(fā)并發(fā)癥，表現(xiàn)為漸進性大腦衰退，一般1~2年內(nèi)死亡。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，患者血清及腦脊液中雖有高效價的IgG或IgM抗麻疹病毒抗體但是用這些抗體很難分離出麻疹病毒?，F(xiàn)認為，腦組織中的病毒為麻疹缺陷病毒，由于在腦細胞內(nèi)病毒M基因變異而缺乏合成麻疹病毒M蛋白的能力9從而影響病毒的裝配、出芽及釋放。因此，將SSPE腦組織細胞與對麻疹病毒敏感細胞(如HeLa，Vero等)共同培養(yǎng)，可分離出麻疹病毒。（九）變異性長期以來，麻疹病毒一直被認為是穩(wěn)定遺傳的病毒，只有一個血清型。但近年來的研究表明，麻疹病毒抗原也存在小幅度的變異。20世紀80年代以來，中國流行的麻疹野病毒與20世紀50~60年代的分離株以及目前廣泛使用的疫苗株之間存在不同特性，如無血凝活性、只能被多克隆抗體中和、不能在Vero細胞上復(fù)制等。1998年，許文波等人在我國首次發(fā)現(xiàn)一個新的基因型別—Hl基因型，也是近年來中國優(yōu)勢流行株，還未見其他國家有H1基因型流行的報道。〈十)環(huán)境中的穩(wěn)定性麻疹病毒在外界環(huán)境中穩(wěn)定性較差，對熱、紫外線及一般消毒劑敏感，但對寒冷及干燥環(huán)境有較強的抵抗力。(十一〉藥韌敏感性目前，對麻疹病毒尚無特效抗病毒藥物。(十二)消毒劑敏感性麻疹病毒對一般消毒劑都沒有抵抗力對過氧乙酸、75%乙醇、含氯消毒劑等均敏感。(十三〉物理災(zāi)活高溫、干燥、日曬均很容易將麻摩病毒滅活，置于56℃或空氣流通環(huán)境中半小時，麻疹病毒就會失去活力。（十四）在宿主體外存活麻疹病毒在體外抵抗力較弱室溫下可存活數(shù)天，-70oC時可存活數(shù)年。（十五）與且他生物和環(huán)境的交互作用高溫環(huán)境及紫外線照射下，麻疹病毒均不易存活，而在寒冷及干燥的環(huán)境中抵抗力較強。（十六）預(yù)防和治療方案1.預(yù)防措施 關(guān)鍵是對易感者接種麻疹疫苗，提高其免疫力。(1)管理傳染源 對麻疹患者應(yīng)做到早診斯、早報告、早隔離、早治療，患者隔離至出疹后5d時，伴呼吸道并發(fā)癥者應(yīng)延長到出痊后10d。易感的接觸者檢疫3周并使用被動免疫制劑。流行期間，兒童機構(gòu)應(yīng)加強檢查，及時發(fā)現(xiàn)患者。(2)切斷傳播途徑 流行期間應(yīng)避免去公共場所或人多擁擠處，出入應(yīng)戴口罩;無并發(fā)癥的患兒在家中隔離，以降低傳播和繼發(fā)醫(yī)院感染的風險。(3)保護易感人群 關(guān)鍵是主動免疫主要對象為嬰幼兒，但未患過麻疹的兒童和成人均可接種麻疹減毒活疫苗。其次是被動免疫，體弱、妊娠婦女及年幼的易感者接觸麻疹病人后應(yīng)立即采用被動免疫。在接觸病人5d內(nèi)注射人血丙種球蛋白3mL可預(yù)防發(fā)病。若5d后注射，則只能減輕癥狀免疫有效期為3～8周。2.治療措施 對麻疹病毒尚無特效抗病毒藥物，目前的主要治療措施為對癥治療、加強護理、預(yù)防和治療并發(fā)癥。二、實驗室相關(guān)活動風險評估與控制（一）實驗室感染性因子的種類、來源的危害1.感染性圈子的種類 本實驗室可能的感染因子為麻疹病毒本身。2.感染因子的來源(1)用于麻疹病毒抗體檢測的血液樣本。(2)樣本采集與檢測過程涉及的所有實驗場所。(3)實驗室操作中可能產(chǎn)生的含病毒的氣搭腔。，40?3.感染性因子可能造成的危害(1)被污染的實驗器材、器皿等對實驗室環(huán)境造成污染。(2)實驗室廢棄物對環(huán)境造成污染。(3)實驗人員暴露后感染。(4)實驗室含病毒的氣榕膠對實驗室環(huán)境造成污染。(二)實驗室常規(guī)活動過程中的風險評估與控制1.實驗方法(1)風險點識別若采用國家標準、行業(yè)標準之外的其他未經(jīng)確認的實驗方法，或在使用國家標準、行業(yè)標準之前未進行技術(shù)確認，操作時可能存在安全風險。(2)風險控制措施 盡量采用國家標準、行業(yè)標準或經(jīng)過充分驗證的實驗方法;在使用新的或變更過的國家標準、行業(yè)標準之前，必須經(jīng)過嚴格的技術(shù)確認。2.樣本采集(1)所用器材 一次性采血針、真空采血管、消毒棉簽及一次性利器盒。(2)風險點識別①采血過程中，工作人員與患者近距離接觸，患者咳嗽、打噴嗖時，病毒隨飛沫排出，很容易通過口、咽、鼻部及眼結(jié)合膜入侵工作人員，此時，風險最大。②若操作不規(guī)范，則會發(fā)生樣本滴灑或濺出的情況，產(chǎn)生的氣榕膠存在感染操作者的風險。③若被麻疹患者的血液污染了破損皮膚、黏膜，或被含有麻疹病毒的血液污染了的針頭刺破皮膚，這種情況也不能完全排除被感染的可能。④血液標本濺灑出來，對環(huán)境造成污染。(3)風險控制措施采血前做好個人防護，穿戴防護服、手套、口罩、護目鏡和帽子，最好讓患者本人也戴上口罩;用過的針頭直接放入利器盒內(nèi)，禁止用于直接接觸使用后的針頭或?qū)⑹褂煤蟮尼橆^重新套上針頭套;采血管用真空抗凝管，采好血后直立于試管架中，防止倒翻；消毒棉簽等污染物放入醫(yī)療廢棄物專用袋中，統(tǒng)一消毒處理。3.樣本的包裝和運輸(1)所用器材 真空采血管、95千帕樣品運輸罐、B類標本運輸箱(UN3373冷藏箱)，及運送車輛。(2)風險點識別 若使用不合格包裝進行運輸，容器密封不嚴，將不能安全有效地防止運輸過程中包裝容器意外破損，從而產(chǎn)生污染擴散的可能。(3)風險控制措施嚴格按照生物安全的要求，采用三層容器包裝:第一層采用真空采血管裝樣本，應(yīng)密閉防滲漏;第二層采用95千帕樣品運輸罐，可容納并保護第一層容器，密封不易破碎、耐壓力、防滲漏且易消毒;第三層采用B類標本運輸箱，要容納并保護、固定第二層容器，且易于消毒。樣本應(yīng)由中心專車運回實驗室。4.樣本接收(1)風險點識別若運輸途中有樣本管破裂、血液溢漏的情況，則可能對樣本接收入員造成污染。(2)風險控制措施 樣本直接送至實驗室，由專業(yè)檢驗人員接收，接收樣本前做好個?41人防護，穿戴好防護服、手套、口罩和帽子。若有樣本管破裂，應(yīng)立即在生物安全柜內(nèi)將尚存留的樣本移出，廢棄物放入帶蓋的防刺破的塑料罐中，被污染的容器用0.5%過氧乙酸等消毒液浸泡后再清洗。5.樣品檢測(1)所用器材離心機、生物安全柜、移液器、洗板機及酶標儀等設(shè)備。(2)風險點識別①離心過程中離心管破裂產(chǎn)生大量氣溶膠，并造成離心機污染。②實驗操作過程中血液樣本濺灑產(chǎn)生氣溶膠，并造成人員污染或臺面、地面等環(huán)境污染。③洗板、讀板時液體濺出污染設(shè)備表面或工作臺面。(3)風險控制措施 所有檢測操作均在BSL-2實驗室中進行，檢測人員在進行實驗前按照二級生物安全防護要求做好個人防護;加樣移液操作在生物安全柜內(nèi)進行，動作輕緩；判讀結(jié)果時，酶標板應(yīng)輕拿輕放，避免液體濺出;待實驗完畢，先消毒手部，再脫去手套并立即洗手;若有意外情況發(fā)生，應(yīng)及時采取有效措施。6.陽性樣本的保存(1)所用器材 生物安全柜、移液器、帶螺跪蓋的塑料管及可密封的塑料凍存盒。(2)風險點識別 麻疹陽性樣本若保存不當，易造成人員或環(huán)境污染。(3)風險控制措施按照二級生物安全防護要求做好個人防護;樣本的保留在生物安全柜內(nèi)進行，動作要輕緩;所有樣本的血清或血漿都保留在帶螺旋蓋的塑料管內(nèi)，再裝入可密封的塑料庫存盒中，置于-20℃以下冰箱內(nèi)保存，實行雙人雙鎖管理。7.陽性復(fù)核樣本的上送(1)所用器材 帶螺旋蓋的塑料管、95千帕樣品運輸罐、B類標本運輸箱(UN3373冷藏箱)和運送車輛。(2)風險點識別 若包裝不符合相應(yīng)生物安全等級的要求，或運輸工具無安全保障，則易造成污染擴散，甚至樣本丟失。(3)風險控制措施陽性樣本上送應(yīng)嚴格執(zhí)行規(guī)范"UN33733層包裝"(同樣品采集)，攜帶"可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸許可證"，并由專車運送，專業(yè)人員全程護送。8.實驗室的清潔和消毒(1)風險點識別 工作完畢后，若不及時對工作臺面、生物安全柜等進行消毒，有可能會造成實驗室環(huán)境污染或人員感染。(2)風險控制措施 工作完畢后，及時對檢測所涉及的工作臺面、地面和生物安全柜進行消毒，使用100倍稀釋的施康清洗消毒液Ⅰ擦拭，用消毒液清潔后要干燥20min以上。生物安全柜用70%~75%的酒精擦拭消毒。待實驗和消毒完畢，先脫去手套，再脫去防護服，并正確使用肥皂和流水洗手。9.廢棄物處置(1)所用器材 醫(yī)療廢棄物專用袋、硬質(zhì)耐高壓且防滲漏的垃圾桶、高壓滅菌器。(2)風險點識別 剩余的陽性樣本管是很大的污染源，采過血的針頭若處理不當，則易造成人員刺傷。(3)風險控制措施 實驗過程中產(chǎn)生的所有廢棄物，包括不再需要的樣本、酶標反應(yīng)板，及其他物品，用醫(yī)療廢棄物專用袋裝好后，置于密封防滲漏容器中，經(jīng)121℃高壓滅菌15～20min后再運出實驗室,集中存放，交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理單位上門收集，并集中處置。裝滿針頭的一次性利器盒嚴禁再次打開，須密封好后，同上述垃圾一起處理。在處理廢棄物的同時，做好交接記錄，所有相關(guān)記錄定期整理歸檔。（三）實驗室常規(guī)活動中其他風險評估與預(yù)防控制措施1.電力(1)風險點識別 若實驗室沒有布置雙路供電或電力供應(yīng)不穩(wěn)定則有可能使實驗活動突然中斷、實驗設(shè)備停止工作等，從而帶來相關(guān)安全風險。(2)預(yù)防控制措施 實驗室盡量要布置雙路供電，沒有布置雙路供電的應(yīng)配置備用電源以確保高滅菌器、生物安全柜等重要設(shè)備的安全運行。2.電氣操作(1)風險點識別實驗室活動涉及的電氣操作.包括實驗室工作區(qū)內(nèi)電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉、安裝和維修;設(shè)備層內(nèi)UPS、空調(diào)機組等電氣設(shè)備的啟動、關(guān)閉和維修等。這些電氣操作的過程可能存在觸電、電擊、電氣故障等風險。(2)預(yù)防控制措施①電氣設(shè)備的設(shè)計及制造應(yīng)符合相關(guān)安全標準的要求。實驗室工作區(qū)內(nèi)若有380V的電源插座，則需明確標識并由有資質(zhì)的專業(yè)人員進行操作。②新的、改裝過的或修理過的電氣設(shè)備在未經(jīng)專業(yè)人員(如有資質(zhì)的電工)完成電氣安全測試和設(shè)備符合安全使用要求之前，不允許使用。③電氣設(shè)備使用人員應(yīng)接受正確操作的培訓(xùn)操作方式不降低電氣的安全性。電氣設(shè)備使用人員要定期檢查設(shè)備中可能引起電氣故障的破損。只有專業(yè)人員才可從事電氣設(shè)備和電路工作。禁止未經(jīng)授權(quán)的工作。④采取措施對設(shè)備進行去污染處理，以降低維護人員感染的風險。3.實驗室給排水設(shè)施設(shè)備(1)風險點識別 實驗室含有給排水的設(shè)施設(shè)備包括位于工作區(qū)和洗消區(qū)的菌器和洗滌池。管道意外破裂、排水管道阻塞可能導(dǎo)致感染性材料溢出，有污染實驗人員和環(huán)境的風險。(2)預(yù)防控制措施實驗室產(chǎn)生的所有染菌物及器具必須先經(jīng)高壓滅菌或含氯消毒濟浸泡消毒后洗滌，產(chǎn)生的污水集中排入中心污水池進行消毒處理，嚴禁直接排放。至少每月監(jiān)測糞大腸菌群，定期檢查實驗室給排水管道各接口的密封性，及時發(fā)現(xiàn)安全隱患。4. 實驗室設(shè)施設(shè)備管道(1)風險點識別 實驗室設(shè)施設(shè)備管道穿越維護結(jié)構(gòu)的部位可能存在密封不嚴的情況。當感染性材料溢出時，有污染環(huán)境的風險。(2)預(yù)防控制措施 所有管道穿越維護結(jié)構(gòu)的部位應(yīng)嚴格密封，定期進行檢查號，避免感染性材料外溢從而污染環(huán)境。病原微生物實驗潔動風險坪枯報告實例5.主要檢測器設(shè)備(1)離心機①風險點識別 在分離血清的過程中，若沒有做好平衡，可能存在離心管破裂、離心管蓋脫落、離心轉(zhuǎn)子和離心腔被污染的風險。①預(yù)防控制措施 離心時配備耐離心壓力的且?guī)У苌w的離心管，離心前做好平衡，選擇正確的離心速度和離心力;規(guī)范正確操作，定期維護，確保離心機性能正常;每次使用后做好清潔消毒和使用記錄并定期進行功能檢查。(2)酶標儀和洗板機①風險點識別 在使用酶標儀和洗板機的過程中可能存在陽性對照或在測樣品污染設(shè)備表面和工作臺面的風險。②預(yù)防控制措施酶標儀每年強檢一次，中途再做一次期間核查；洗板機每年進行一次功能檢查;在洗板、讀極時要，做到動作輕緩9小心操作;倘若有液體濺出，應(yīng)馬上進行消毒處理。6．生物安全設(shè)施設(shè)備(1)生物安全柜①風險點識別 若不按照安全柜操作規(guī)程進行操作、維護與檢測，其防護屏障效果會明顯降低或消失，從而失去安全防護效果;若長時間使用或未及時更換HEPA過濾膜，會使其功能喪失造成工作窗口氣流速度降低或流向紊亂;使用后若不進行徹底消毒處理，對于清潔、維護人員將會產(chǎn)生污染。②預(yù)防控制措施 正確選配生物安全柜，操作人員應(yīng)接受相關(guān)的操作和維護培訓(xùn)日常操作和維護都應(yīng)該嚴格按照設(shè)備操作規(guī)程或使用說明書進行;每年請有檢測資質(zhì)的服務(wù)機構(gòu)對生物安全柜進行風速、氣流、塵埃粒子、紫外線強度等關(guān)鍵要素的檢測確保其性能正常;一旦造成污染，應(yīng)及時進行消毒處理。(2)高壓滅菌器①風險點識別 若不按照高壓滅菌器操作規(guī)程進行操作、維護，其效果會明顯降低，甚至失效，從而失去去污染與無害化的作用;若長時間使用又不定期檢測滅菌效果，對其滅菌效果無從考證，可能會產(chǎn)生功能缺損，存在滅菌不徹底從而會引起污染的隱患;在長期關(guān)停期間，若內(nèi)部水分不及時排干將會使內(nèi)部器件老化從而失去正常功能。②預(yù)防控制措施 采用下排式高壓滅菌器防止氣溶膠污染;規(guī)范操作定期維護，確保高壓滅菌器性能正常;定期檢定、核查做好使用記錄，持證上崗;日常進行滅菌效果監(jiān)測9以保證滅菌質(zhì)量。(3)個人防護用品①風險點識別 個人防護用品若穿戴不規(guī)范、大小不合適或使用過期的防護用品等，則將會導(dǎo)致防護效果降低甚至失效。②預(yù)防控制措施 進行與麻事病毒自清學相關(guān)的操作時要按二級生物安全防護水平進行個人防護，必須選擇大小合適、有效的防護用品穿戴時相互檢查確認避免使用有破損、缺陷和過期的防護用品。病原微生物實驗活動風險評估報告實例病原微生物實驗活動風險評估報告實例第四章 第四章 呼吸道病原微生物實驗活動風險評估報告實例(4)應(yīng)急救治設(shè)施和用品①風險點識別 實驗室若沒有配備洗眼器、應(yīng)急藥箱等必要的應(yīng)急設(shè)施和物品，或配備的急救用品種類不全、不合適或過期，則會導(dǎo)致急用時無法發(fā)揮作用。②預(yù)防控制措施 在實驗室內(nèi)正確配備洗眼器，確保其功能正常。配備的75%乙醇、碘伏或其他消毒劑、創(chuàng)可貼等急救物品與實驗活動相適應(yīng)，并在有效期內(nèi)使用9專人負責管理，定期維護、清理和更新。(5)消毒滅菌劑①風險點識別消毒產(chǎn)品無生產(chǎn)許可證、過期、配制方法或濃度不正確、種類選擇不合理，都將會導(dǎo)致捎毒效果降低、生物滅活能力降低、或?qū)ξ锲犯g性增加、對皮膚造成剌激等問題。②預(yù)防控制措施 選擇符合國家標準的正規(guī)廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品，選擇合適的消毒劑，按照規(guī)定的消毒方法、消毒時間、消毒法度(劑量)進行消毒，避免使用過期產(chǎn)品;消毒過程中，消毒人員應(yīng)做好必要的個人防護，防止發(fā)生意外。麻痊病毒抵抗力弱，對一般消毒劑均敏感。本實驗室選用消康消毒劑I(主要成分為次氯酸納)、碘伏、75%酒精、漂白粉等作為常用消毒劑。7.管理體系的風險(1)風險點識別管理體系(包括應(yīng)急預(yù)案)、程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和操作規(guī)程都是確保生物安全的主要因素。如果組織結(jié)構(gòu)不健全、設(shè)置不合理，體系文件與實際工作不匹配，以及部門職責不清或銜接不當?shù)?，就都可能帶來安全風險。(2)預(yù)防控制措施 定期開展對管理體系的評審，發(fā)現(xiàn)問題及時修訂、完善，以確保物安全管理體系持續(xù)有效地運行。(四)工作人員的風險評估與預(yù)防控制措施1．風險點識到(1)人員數(shù)量 人員過少會因缺少相互提示或因工作量增大而導(dǎo)致操作過程中工作增失誤加風險增加。(2)人員結(jié)構(gòu)及資質(zhì) 新進人員若沒有高資歷人員帶教操作就不能很好地處理意外事件風險增加的概率就會大大上升。實驗人員不熟悉實驗檢測方法及操作規(guī)范，在進行實驗前未進行相關(guān)的專業(yè)知識培訓(xùn)，就無法保證工作質(zhì)量和安全。(3)職業(yè)操守 責任心不強的人員參與該項工作，則產(chǎn)生生物危害而危及人員安全、環(huán)境安全與社會安定的可能性就會大大增加。(4)健康管理 健康狀況主要包括生理、心理素質(zhì)與免疫狀態(tài)。當身體的呼吸道癥狀或其他不適合工作的情況出現(xiàn)時，職業(yè)暴露風險就會增加。(5)生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件處理能力 工作人員上崗前沒有接受嚴格的生物安全和相關(guān)生物安全設(shè)備操作的技術(shù)培訓(xùn)，易造成生物安全事故的發(fā)生。上崗后，沒有接受實驗室突發(fā)事件處理的培訓(xùn)，一旦發(fā)生意外事件，就不能在第一時間有效地處理和控制生物安全事件。2.預(yù)防控制措施

(1)人員數(shù)量盡量有2名工作人員同時進行采樣、檢測。

(2)人員結(jié)構(gòu)及資質(zhì)實驗室檢測人員的年齡和資歷結(jié)構(gòu)應(yīng)配備合理，新進人員應(yīng)由高資歷人員帶教或監(jiān)督操作。檢測技術(shù)人員需經(jīng)過上崗培訓(xùn)，掌握相關(guān)專業(yè)知識和技能，能獨立熟練地操作，并經(jīng)考核合格，持證上崗。(3)職業(yè)操守 加強職業(yè)道德教育，培養(yǎng)工作責任心。(4)健康管理建立健康申報制度，遇有手部皮膚有開放性傷口及其他不適合工作的情況，應(yīng)及時向科室負責人報告并暫停工作;裸露皮膚的微小傷口、擦傷、皸裂等應(yīng)用防水材料嚴密覆蓋。(5)生物安全培訓(xùn)及應(yīng)急事件處理能力 檢測人員必須接受上崗前培訓(xùn)和復(fù)訓(xùn)，每年參加本中心組織的生物安全知識或生物安全操作技術(shù)培訓(xùn)、考核。實驗室工作人員必須嚴格按照《實驗室意外事故和職業(yè)性疾病報告制度》和《病原微生物生物安全應(yīng)急處置技術(shù)方案》中規(guī)定的要求進行應(yīng)急事件的處置，強化職業(yè)暴露的應(yīng)急處理能力，規(guī)范工作中職業(yè)暴露后現(xiàn)場急救處理辦法。(五)實驗室非常規(guī)活動中的風險評估與預(yù)防控制措施1.實驗室主要的非常規(guī)活動(1)檢測外專業(yè)人員對實驗室設(shè)施設(shè)備的維護、維修、檢測驗證(如主要設(shè)施設(shè)備的檢測驗證)和更換(如高效過濾器等的更換)。(2)實驗室后勤保障人員對實驗室及公共環(huán)境的保潔、實驗器材的洗刷消毒。、(3)外部人員來實驗室參觀及上級部門對實驗室的檢查。(4)任何其他人員需要進入實驗室從事實驗活動以外的行為。2.風險點識別(1)進入實驗室可能會引起實驗室感染的風險，特別是在不慎打翻、打破試管或損壞儀器部件的情況下。(2)實驗室運行中某些人員需要進入實驗室參觀，存在影響實驗室正常運行的風險。3.預(yù)防控制措施(1)實行人員準入、登記制度。外部人員來進行參觀或檢查前，應(yīng)對實驗室作徹底消毒;任何外來人員進入實驗室時應(yīng)有實驗室人員全程陪同。(2)進入人員絕對不能私自動用實驗室內(nèi)有標志的危險品(除非經(jīng)過授權(quán))，絕不能將未經(jīng)消毒處理的物品拿出實驗區(qū)。(3)在實驗室進行設(shè)施、設(shè)備維護維修過程中，若發(fā)生意外事件，應(yīng)立即報告實驗室負責人，進行風險評估，并采取應(yīng)對措施。(4)對實驗室的設(shè)施、設(shè)備進行維護維修工作時應(yīng)動作輕柔，避免產(chǎn)生氣溶膠。檢測維修后、離開實驗室前，必須洗手。(六)被誤用和惡意使用的風險與預(yù)防控制措施1.鳳險點識別若陽性標本未明確標識或未實施雙人雙鎖管理，實驗活動結(jié)束后不及時對操作場所進行消毒，其他工作人員在不知情的情況下可能誤用標本、實驗材料和設(shè)施設(shè)備等，從而導(dǎo)致人員感染和實驗室環(huán)境污染等。第四章 呼破道病原微生物實驗活動風險評估報告實例2.預(yù)防控制措拖(1)實行嚴格的人員準入和持證上崗制度。(2)所有獲得批準進入實驗室工作的人員，必須嚴格按規(guī)程操作實驗材料和設(shè)施設(shè)備。(3)發(fā)生事故時必須及時報告并作必要的處理和記錄(4)實驗所用材料和試劑等必須有明確的標識。(5)陽性標本嚴格實施雙人鎖管理。（七）相關(guān)實驗室已發(fā)生的事故分析和從中得到的啟示目前，因麻疹病毒采樣、檢測明確引起實驗室人員感染的相關(guān)報道很少，但任何一種病原做生物都有可能存在實驗室感染的風險。因此，工作人員應(yīng)嚴格遵守實驗室相關(guān)規(guī)定，做好個人防護和規(guī)范操作防止職業(yè)暴露。三、實驗室理化因素風險評估及安全防護措施（一)紫外線1．風險點識到 二級生物安全實驗室及生物安全柜均使用紫外線燈進行物體表面消毒。紫外線波長為250~280nm，主要影響眼睛和皮膚，可引起急性角膜炎、結(jié)膜炎和慢性白內(nèi)障等眼部疾病，還可誘發(fā)皮膚癌。紫外線燈開啟時，人員在不知情的情況下進入可受到傷害。2.安全防護措施 在實驗室工作應(yīng)避免紫外線直接照射人體，特別是眼部。生物安全柜表面應(yīng)貼有紫外線危害的標識。在進行紫外線消毒時實驗人員應(yīng)盡量遠離消毒區(qū)域，基本可以規(guī)避紫外線對人體的危害。{二)輻射1.風險點識別實驗室籌建選址時若未對周圍輻射源進行排查，對使用的含輻射的儀器未進行嚴格管理，就會存在輻射源或造成輻射事故，間接導(dǎo)致病原微生物屏障系統(tǒng)破壞的隱患。2.預(yù)防控制措施 實驗室籌建選址時，需嚴格排查周邊建筑群的輻射源〈三〉施康清洗消毒劑IL風險點識期 施康清洗消毒劑I屬于含氯消毒劑，有效氯的含量為4.55%~5.55%。次氯酸鈉為主要殺菌因子。含氯的消毒液會殘留在空氣中難以揮發(fā)9長期使用會使人感到頭疼、惡心。對于有過敏體質(zhì)的人號還容易引發(fā)過敏、哮喘等疾病。高法度的含氯消毒劑對人的呼吸道黏膜和皮膚有明顯的剌激作用可使人流淚、咳嗽，并剌激皮膚和黏膜，嚴重者可發(fā)生氯氣中毒。急性中毒者會出現(xiàn)躁動、惡心、嘔吐、呼吸困難等癥狀，甚至因窒息而死。2.安全防護措施 按照使用說明，根據(jù)不同消毒對象而配制不同的改度避免使用不必要的高濃度的消毒液稀釋和使用時均戴好手套，消毒后及時開窗通風基本可規(guī)避消毒液對人體的危害。(四)其他1.風險點識別實驗室內(nèi)的照明和聲音（生物安全柜等）有可能因強光和噪聲而對人員造成損害。病原微生物實驗活動風險評估報告實例病原微生物實驗活動風險評估報告實例病原微生物實驗活動風險評估報告實例病原微生物實驗活動風險評估報告實例2.安全防護措對實驗室的照明和聲音等參數(shù)進行檢測，確保合格，避免強光和i噪聲對人員造成損害。四、實驗室火災(zāi)風險評估與預(yù)防控制措施1.風險點識別(1)超負荷用電，電線過長。(2)電器和電源老化、電器保養(yǎng)不良，如電纜的絕緣層破舊或損壞。(3)用火不當?shù)纫l(fā)火災(zāi)。(4)儀器設(shè)備在不使用時未關(guān)閉電源。(5)使用的儀器設(shè)備不是專為實驗室環(huán)境設(shè)計。(6)易燃、易爆品處理、保存不當。(7)不相容化學品沒有正確隔離。(8)在易燃物品和蒸汽附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備。(9)通風系統(tǒng)不當或不充分。2．預(yù)防控制措施(1)定期檢查電器插座、電線絕緣層是否完好，保證用電負荷，對易燃、易爆等危險品進行有效區(qū)域隔離。(2)實驗室配備滅火器。放置在易取的地點，擺放部位應(yīng)張貼滅火器標識。該滅火器用于撲滅可控制的火災(zāi)9幫助人員撤離火場;對滅火器進行定期檢查和維護9確保其有效使用。(3)實驗室需裝設(shè)應(yīng)急燈，所有出口都有黑暗中可見的"緊急出口"標識;當出現(xiàn)緊狀況時，實驗室所有出口的鎖必須處于開啟狀態(tài)，出口設(shè)計保證不經(jīng)過高危險區(qū)域就能逃脫所有出口都能通向一個開放空間。(4)走廊、流通區(qū)域不得放置障礙物9確保人員流動和滅火設(shè)備移動不受影響。(5)在實驗室工作區(qū)顯著位置張貼火警電話標識。實驗室每年對工作人員進行消防知識培訓(xùn)，包括消防器材的使用、火災(zāi)發(fā)生時的應(yīng)急行動等。五、自然災(zāi)害風險評估與安全防護措施自然災(zāi)害可能導(dǎo)致的實驗室緊急狀況主要包括水災(zāi)和地震等。水災(zāi)1．風險點識別水災(zāi)可能導(dǎo)致實驗室維護結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，實驗室內(nèi)感染性材料隨水外溢。2.安全防護措施

(1)在安全手冊中制訂《實驗室緊急事件應(yīng)急預(yù)案》，并對所有實驗室人員進行培訓(xùn)。(2)實驗室一旦發(fā)生水災(zāi)報警時，應(yīng)立刻停止工作9首先考慮實驗室內(nèi)感染性物質(zhì)和人員的轉(zhuǎn)移。實驗室負責人、中心主任根據(jù)條件及時采取對策，第一時間聯(lián)系相關(guān)消防人員。消防人員應(yīng)有防護措施，并在受過訓(xùn)練的實驗室工作人員陪同下9進入實驗室完成感染性物質(zhì)和人員的安全轉(zhuǎn)移。（二）地震1．風險點識別地震等自然災(zāi)會造成實驗室維護結(jié)構(gòu)和設(shè)施損壞，導(dǎo)致人員傷

第四章 呼吸道病原微生物實驗活動風險評估報告實例害，存在實驗室感染性材料外溢的風險。2.風險控制措施 實驗室應(yīng)采取措施降低自然災(zāi)害帶來的風險9保證災(zāi)害發(fā)生后工作人員能夠安全撤離實驗室，減少對人員和環(huán)境的影響。發(fā)生地震后，首先設(shè)立距實驗室維護結(jié)構(gòu)20m范圍內(nèi)的封鎖區(qū)。其次對封鎖區(qū)進行消毒，然后由專業(yè)人員在做好個人防護的前提下對實驗內(nèi)部環(huán)境邊消毒邊清理。如果保藏樣品的容器沒有被破壞9可把它安全轉(zhuǎn)移到其他安全的實驗室;如果保藏樣品的容器已被破壞、發(fā)生外溢應(yīng)立即用可靠方法進行徹底消毒滅菌。六、生物安全及其他緊急事件{事故)處理預(yù)案{一)實驗室寶物安全事件(事故)處理措施(1)當生物安全柜出現(xiàn)持續(xù)正壓時，應(yīng)立即停止操作，通知運行保障人員采取措施恢復(fù)負壓。如果不能及時恢復(fù)和保持負壓9應(yīng)停止實驗。發(fā)生此類事故或發(fā)生意外停電，造成具傳染性物質(zhì)暴露潛在危險的事故和污染時，工作人員除了采取緊急措施外，還應(yīng)立即報告實驗室安全負責人，組織對實驗室進行終末消毒。(2)在離心過程中離心管破裂時，應(yīng)馬上關(guān)閉電源，讓離心機停止工作，并靜止30min。然后緩慢打開離心機蓋，將離心杯平穩(wěn)地拿到生物安全柜中。如果發(fā)生泄漏，則用1%的次氯酸鈉消毒液灌入離心杯腔體中消毒30min，然后棄去消毒液和離心管碎片，將離心杯清洗后擦干。(3)發(fā)生污染物潑濺或溢出時，立即用清潔布或吸水紙覆蓋污染處，并倒上1O~25倍稀釋的施康消毒液，作用至少30min，方可清理全部污染物，用消毒劑擦拭污染區(qū)域。所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。若發(fā)生大范圍污染物擴散事故時9應(yīng)立即通知實驗室主管領(lǐng)導(dǎo)和安全負責人。待其到達事故現(xiàn)場，查清情況，確定消毒方案，組織對實驗室進行終末消毒。(4)發(fā)生空氣污染時，可采用低溫蒸汽甲醛氣體進行消毒。甲醛有致癌作用故不宜用于生物安全柜和實驗室的常規(guī)空氣消耳。(5)若發(fā)生針頭刺傷或血液標本濺灑污染人員、器具或環(huán)境及其他意外時應(yīng)及時采取有效的消毒處理措施。①被采血針頭刺傷 應(yīng)立即用肥皂和大量流水沖洗，盡可能擠出損傷處的血液，并用碘伏等有效消毒劑對傷口進行消毒處理。②皮膚或黏膜污染 皮膚受污染部位可用肥皂和大量流水沖洗9并用75%酒精或碘附等有效消毒劑進行消毒處理;對于黏膜受污染則用大量流水或生理鹽水沖洗污染部位。③物品或環(huán)境污染耐煮沸的物品煮沸20min后清洗9對不能煮沸的物品可用1%漂白粉或0.5%過氧乙酸等消毒劑浸泡出后再用清水洗滌;對于地面、墻面等環(huán)境污染可用3%漂白粉、2%過氧乙酸等消毒液噴霧進行消毒或擦洗2次。④患者猛烈咳嗽、打噴嚏或樣本濺灑產(chǎn)生大量氣溶膠 工作人員在采樣結(jié)束時應(yīng)盡可能對手套、口罩、護目鏡等個人防護用品進行噴灑消毒后再摘除，然后對手部及面部進行徹底清洗。（二）其他緊急事件（事故）處理措施在制訂的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他緊急救助人員。應(yīng)事先告知他們哪些實病原微生物實驗活動風險評估報告實例驗室有潛在的感染性物質(zhì)，讓他們熟悉實驗室的布局和設(shè)備。在實驗室發(fā)生不可控制的火災(zāi)、水災(zāi)、爆炸或其他危險情況時9為確保工作人員的安全，要進行緊急撤離。所有實驗室人員須了解緊急撤離的行動計劃、撤離路線和集合地點。每年至少參加一次緊急撤離演習9包括急救設(shè)備的使用和采取相應(yīng)急救措施。（三)生物安全及其他緊急事件〈事故)報告和記錄(1)發(fā)生生物安全及其他緊急事件時，在緊急處理的同時必須向中心主管領(lǐng)導(dǎo)和生物安全委員會報告。(2)對于生物安全事件必須進行登記，記錄發(fā)生的時間、地點及詳細經(jīng)過、處理方法等。七、生物安全和生物安全保障風險管理風險評估所依據(jù)的數(shù)據(jù)及擬采取的風險控制措施、安全操作規(guī)程等均應(yīng)以國家衛(wèi)生和計劃生育委員會、世界衛(wèi)生組織、國際標準化組織等機構(gòu)或行業(yè)權(quán)威機構(gòu)發(fā)布的指南、標準等為依據(jù)。{二)危險發(fā)生的概率評估(見表4-2)表4-2麻疹病毒危險發(fā)生的概率評估序號潛在危險因素危害程度發(fā)生概率固有風險措施合理性殘留風險風險可控程度1采知過程中患者咳嗽或打噴嚏導(dǎo)致其飛沫入侵采血人員口、鼻或眼結(jié)合膜高度可能高度合理低風險可控2樣本運輸過程中容器意外側(cè)翻、破裂導(dǎo)致樣本泄漏中度可能中度合理低風險可控3樣本接收、開啟及加樣等常規(guī)實驗活動中產(chǎn)生氣溶膠中度較大可能中度合理低風險可控4離心過程中樣本管破裂產(chǎn)生大量氣溶膠中度可能中度合理低風險可控5檢測未經(jīng)滅活的樣本對儀器與環(huán)境造成污染中度較大可能中度合理低風險可控6樣本、實驗材料及設(shè)施設(shè)備等被誤用中度較小可能中度合理低風險可控7陽性樣本被惡意使用中度較小可能中度合理低風險可控8廢棄物處理不當造成病原微生物擴散中度可能中度合理低風險可控9檢測人員及工勤人員破損的皮膚、黏膜接觸到血液樣本或被銳器刺傷等造成職業(yè)暴露中度可能中度合理低風險可控10檢測人員個人防護不當造成病原微生物擴散中度可能中度合理低風險可控11非檢測人員、進修實習等外來人員進入實驗室的不當操作造成病原微生物擴散中度可能中度合理低風險可控12水、電、火災(zāi)或自然災(zāi)害造成病原微生物擴散中度較小可能中度合理低風險不可控

第四章 呼吸道病原做生物實驗活動風險評估報告實樹（三）風險評估人員由中心主任組織檢驗科、質(zhì)量管理科及其他熟悉麻疹病毒檢驗相關(guān)風險的專業(yè)人員進行風險評估并形成風險評估報告。形成的風險評估報告經(jīng)中心生物安全委員會審核，請省市熟悉相關(guān)病原微生物特征、實驗設(shè)施設(shè)備、操作規(guī)程及個體防護設(shè)備的不同領(lǐng)域的專家進行評估和討論不斷修訂完善。（四)風險評估報告風險評估報告應(yīng)是實驗室采取風險控制措施、建立安全管理體系和制訂安全操作規(guī)程的依據(jù)。在記錄風險評估的過程中，風險評估報告應(yīng)注明評估時間、編審人員和所依據(jù)的法規(guī)、標準、研究報告、權(quán)威資料、數(shù)據(jù)等。（五)需重新進行風險評估的情況(1)生物安全實驗室改造前(或新建造前)和正式啟用前。(2)當收集到的資料表明嗜肺軍團菌的致病性、毒力或傳染方式發(fā)生變化時，應(yīng)對其背景資料進行及時變更并對其實驗操作的安全性進行重新評估。(