三七圓斑病診斷與防控

1DB53/TXXXXX—XXXX三七圓斑病診斷與防控本文件規(guī)定了三七圓斑病的癥狀，病原，發(fā)生，診斷，防控等。本文件適用于三七圓斑病的診斷及防控。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T8321.10農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則DB53/T三七農(nóng)藥使用準(zhǔn)則DB53/T三七種子DB53/T三七育苗技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義GB/T20000.1界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1圓斑病三七栽培過程中，由槭菌刺孢菌Mycocentrosporaacerina(Hartig)Deighton侵染葉，同時(shí)也可侵染根、莖、花、果等引起的毀滅性病害。3.2中心病株田間零星出現(xiàn)的具有極強(qiáng)傳染性的病株。3.3科赫氏法則確定侵染性病害病原物的規(guī)范性操作程序，參見附錄A。4診斷4.1田間診斷2DB53/TXXXXX—XXXX4.1.1監(jiān)測時(shí)間一年生苗期或二年生以上三七展葉期開展圓斑病監(jiān)測直至植株落棵。每年4月中下旬，氣溫16℃~22℃,相對濕度80%以上，連續(xù)2d～3d降雨，或日平均降雨量達(dá)15mm以上時(shí)，至10月中旬結(jié)束。4.1.2發(fā)病中心帶菌種苗或帶菌土壤作為初侵染源，遇適宜的環(huán)境條件，所發(fā)生的中心病株或病窩點(diǎn)。4.1.3癥狀、發(fā)生特點(diǎn)病害癥狀與發(fā)生特點(diǎn)見附錄B。4.1.4病樣采集對取樣現(xiàn)場和病害癥狀拍照后采樣。采集典型的新鮮單病斑病樣，用吸水紙包裹，標(biāo)識采集人，時(shí)間，地點(diǎn)，采集部位等。4.2室內(nèi)診斷4.2.1病原分離、純化按以下要求分離、純化病原：a)選取具有明顯癥狀的新鮮單病斑，自來水沖洗，滅菌吸水紙吸去多余的水分；b)剪取病健交界處2mm×3mm小塊，于75%的酒精中表面消毒1min，再放入0.1%升汞中消毒30S，之后用滅菌水清洗3次；c)接種于PDA培養(yǎng)基中，置于20℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2d～3d；d)選取邊緣菌絲反復(fù)純化3次以上，用無菌打孔器(Φ=5mm）打取菌餅，反接種于PDA培養(yǎng)基中，全光照，18℃恒溫培養(yǎng)15d；e)產(chǎn)生大量的分生孢子和厚垣孢子后，參照附錄B.2進(jìn)行驗(yàn)證，并按4.2.2的方法進(jìn)行病原菌的致病性測定。4.2.2病原物致病性測定采用柯赫氏法則測定病原物致病性，參見附錄A.1。4.2.3確診根據(jù)病原菌形態(tài)學(xué)、致病性測定，確診三七圓斑病。5.1防控原則遵循以下防控原則：a)預(yù)防為主，綜合防治；b)結(jié)合氣象條件進(jìn)行病情監(jiān)測；c)一旦出現(xiàn)發(fā)病中心，立即采用治療性藥劑予以控制。5.2病情調(diào)查3DB53/TXXXXX—XXXX病情調(diào)查方法參見附錄C，調(diào)查記錄表參見用附錄A.2。5.3防控措施5.3.1農(nóng)業(yè)措施5.3.1.1選地與整地選擇PH值為5.6～7，質(zhì)地疏松的土壤或沙壤土。深翻犁，曬垡，挖溝起壟，采用符合DB53/T三七農(nóng)藥使用準(zhǔn)則要求的生石灰或藥劑進(jìn)行土壤處理。5.3.1.2種子與育苗種子應(yīng)符合DB53/T三七種子要求。按DB53/T三七育苗技術(shù)規(guī)程要求育苗。5.3.1.3輪作與林下栽培選擇前作為玉米、陸稻、蕎麥等的地塊種植三七，輪作年限為8年以上，經(jīng)物理、化學(xué)消毒劑處理的土壤可減少輪作年限。在未種植過三七的冬瓜樹林、櫟樹林等闊葉林或混交林下栽培。5.3.1.4水肥土壤含水量保持在25%～30%左右，七園濕度以80%左右為宜。施肥應(yīng)以有機(jī)肥為主，少施氮肥，磷鉀比例適中，多施底肥，適時(shí)追肥。5.3.1.5海拔宜選擇海拔1400m～1600m，年平均氣溫15℃~17℃,最冷月均溫8℃~10℃,最熱月均溫20℃~22℃,大于等于10℃年積溫4500～5500℃,年降水量1000～1300mm，無霜期300d以上的區(qū)域。5.3.1.6透光率二年生三七適宜的光照強(qiáng)度12%～15%，三年生三七適宜的光照強(qiáng)度15%～20%。5.3.2生物防控5.3.2.1生防菌劑用木霉（Trichodermaspp.）、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)或解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefaciens)生防菌劑對三七種苗（子）進(jìn)行浸泡，在植株展葉期時(shí)進(jìn)行噴施，藥劑施用方法參照使用說明書。5.3.2.2施用時(shí)間和次數(shù)移栽時(shí)或出苗后進(jìn)行第1次施藥，之后每隔5d～7d施藥1次，連續(xù)施藥3次～4次。施用過生防菌劑的田塊不得施用殺菌劑。5.3.3化學(xué)防控5.3.3.1種子（苗）處理對疑是帶病種子或種苗按以下要求進(jìn)行處理：4DB53/TXXXXX—XXXXa)用40%菌核凈可濕性粉劑400倍液、58%瑞毒霉錳鋅可濕性粉劑500倍液浸種或處理種苗15Min～20Min；b)或用65%代森錳鋅可濕性粉劑按種子重量0.2%～0.5%拌種、拌苗后播種、移栽；5.3.3.1農(nóng)藥使用使用農(nóng)藥應(yīng)符合GB/T8321.10和DB53/T三七農(nóng)藥使用準(zhǔn)則的規(guī)定，并交替輪換用藥，每隔7d5.2.3.4中心病株處理發(fā)現(xiàn)中心病株時(shí)，連根挖出，帶出七園外銷毀，病塘用生石灰處理。對病株周圍50m范圍內(nèi)噴施58%瑞毒霉錳鋅和65%代森錳鋅等藥劑，每隔7d噴1次，連噴3次。5.2.3.5保護(hù)性藥劑防控當(dāng)病情指數(shù)在5以下時(shí)，可采用以藥劑下配方進(jìn)行防治：a)65%代森錳鋅可濕性粉劑500倍液；b)50%福美雙可濕性粉劑500倍～700倍液；c)75%百菌清可濕性粉劑400倍～600倍液；d)50%異菌脲可濕性粉劑800倍～1000倍液。5.2.3.6治療性藥劑防控當(dāng)病情指數(shù)大于5時(shí)，應(yīng)采用以下藥劑單獨(dú)使用或兩種藥劑混合使用：a)10%寶麗安（多氧霉素）可濕性粉劑1000倍～1500倍液；b)3%多抗霉素可濕性粉劑100倍～200倍液；c)30%愛苗乳油2500倍液；d)10％世高(10%苯醚甲環(huán)唑)水散性顆粒劑2000倍液；e)50%速克靈(50%腐霉利)可濕性粉劑1200倍液；f)58%瑞毒霉錳鋅可濕性粉劑500倍液。6采收用藥后間隔30d以上采收。5DB53/TXXXXX—XXXX（資料性附錄）柯赫氏法則和中心病株調(diào)查表A.1柯赫氏法則確定某種生物是否是病原生物應(yīng)遵循的原則與操作程序1）在病植物上常伴隨一種病原生物存在2）該生物可在離體或人工培養(yǎng)基上分離和純化3）將該純培養(yǎng)物接種到相同品種的健康植株上，表現(xiàn)出與原來相同的癥狀4）從接種發(fā)病的植物上再次分離到該生物的純培養(yǎng)，性狀與原來記錄的相同。A.2中心病株調(diào)查中心病株調(diào)查表見表A.1。表A.1三七圓斑病中心病株調(diào)查表面積/m2地勢土壤海拔/m溫度/℃濕度/%降雨/mm遮陰棚材料遮陰棚透光率/%前茬作物有無病史七齡有無病害調(diào)查株數(shù)/株發(fā)病株數(shù)/株發(fā)病率/%病情分級病情指數(shù)/%6DB53/TXXXXX—XXXX（資料性附錄）三七圓斑病癥狀、病原及發(fā)生特點(diǎn)B.1三七圓斑病癥狀三七根、根莖、芽、莖、葉、葉柄、花、花軸、果實(shí)、果柄等均能被侵染，但以莖、葉受害嚴(yán)重。葉片病斑初期呈水漬狀，而后變?yōu)楹诤稚珗A形，有明顯輪紋，病健交界處可見黃色暈圈，最后病斑合并脫落或腐爛。葉柄和枝柄受害則呈暗褐色水漬狀縊縮，脫落；莖桿受害后病斑變褐折垂，潮濕環(huán)境下病斑表面生稀疏白色霉層即孢子層，見圖B.1。B.2三七圓斑病病原三七圓斑病的病原為半知菌亞門，絲孢綱，暗色菌科，菌剌孢屬槭菌刺孢M(jìn)ycocentrosporaacerina(Hartig)Deighton。病菌在PDA培養(yǎng)基上初期菌落疏展、無色，后變綠色、灰色或紫紅色,最后變成黑色。光照條件下產(chǎn)生明顯的玫瑰紅色，菌落呈同心輪紋狀擴(kuò)展。菌絲有隔，寬4μm～7μm。菌落中心常形成念珠狀串生的膨大菌絲細(xì)胞，厚壁、深褐色，即厚垣抱子。厚垣孢子深褐色，長橢圓形或矩圓形，大小為15μm～30μm×15μm～20μm。將培養(yǎng)基上菌落切割后，加入無菌水，于18℃光照培養(yǎng)1d～2d，可產(chǎn)生大量分生孢子梗和分生孢子。分生孢子梗短菌絲狀，淡褐色，分枝，有隔膜，合軸式延伸，7μm~24μm×4μm～7μm。產(chǎn)孢細(xì)胞合生，圓桶形，孢痕平截。分生孢子單生、頂側(cè)生，倒棍棒形，具長喙，基部平截，淡褐色，大小為54μm～250μm×7.7μm～14μm，4個(gè)～16個(gè)隔膜，隔膜處微突起。少數(shù)孢子具有一個(gè)從基部細(xì)胞側(cè)生出的刺狀附屬絲，大小為25μm～124μm×2μm～3μm,見圖B.1。B.3三七圓斑病發(fā)生特點(diǎn)三七圓斑病的發(fā)生與溫度和濕度的關(guān)系較為密切，低溫高濕多發(fā)病，且發(fā)病率隨產(chǎn)區(qū)海拔的升高而增加。當(dāng)日均溫在21℃以下時(shí)，空氣相對濕度達(dá)80%以上，持續(xù)2d～3d小雨天氣或日降雨量達(dá)15㎜以上時(shí)，圓斑病即可發(fā)生，且發(fā)病率隨產(chǎn)區(qū)海拔的升高而增加，主要集中于海拔1700m以上的高山地區(qū)，海拔1400m～1600m的地區(qū)零星發(fā)生，其發(fā)病早、持續(xù)時(shí)間長、危害重。該病害發(fā)病初期，病株零星發(fā)生，而到中后期則具有明顯的發(fā)病中心。7DB53/TXXXXX—XXXX圖B.1三七圓斑病的癥狀與病原注：A：葉部病斑；B：葉柄癥狀；C：莖桿癥狀；D:中心病株；E：田間病害；F：槭菌刺孢分生孢子；G:槭菌刺孢產(chǎn)孢結(jié)構(gòu)及分生孢子；H:槭菌刺孢厚垣孢子8DB53/TXXXXX—XXXX（資料性附錄）病情分級、危害程度、調(diào)查表格和統(tǒng)計(jì)方法C.1病情分級圓斑病病情分級標(biāo)準(zhǔn)見表c.1。表C.1三七圓斑病病情分級標(biāo)準(zhǔn)癥狀植株無病植株個(gè)別葉片發(fā)病，葉片不脫落植株1/3葉片發(fā)病，有1小葉～2小葉脫落1個(gè)復(fù)葉柄發(fā)病或僅花序和花軸發(fā)病或植株葉片總數(shù)1/2脫落莖稈發(fā)病，或2/3葉片脫落地上部分枯死或僅剩莖稈C.2病害危害程度病害危害程度劃分標(biāo)準(zhǔn)見表c.2。表C.2病害危害程度劃分標(biāo)準(zhǔn)病情指數(shù)1輕發(fā)生2中等偏輕5～10310～154中等偏重15～255大發(fā)生C.3病情調(diào)查圓斑病病情系統(tǒng)調(diào)查表見表c.3。表C.3三七圓斑病病情系統(tǒng)調(diào)查表9DB53/TXXXXX—XXXX地點(diǎn)田塊類型七齡生育期調(diào)查株數(shù)發(fā)病株數(shù)病株率（%）病情