川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程 良種繁育技術 規(guī)范 茯苓菌種

Q/LB.□XXXXX-XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II引言 III1范圍 12規(guī)范性引用文件 13術語和定義 14菌種繁育技術 15包裝、標簽和運輸 3附錄A（資料性）原種、栽培種質(zhì)量要求 1前言本文件參照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由廣元市佳華中藥材種植有限公司提出并解釋。本文件起草單位：成都中醫(yī)藥大學、廣元市佳華中藥材種植有限公司、華潤三九現(xiàn)代中藥制藥有限公司、華潤三九（六安）中藥材產(chǎn)業(yè)發(fā)展有限公司、四川夏韻科技有限公司。本文件主要起草人：李敏、黎智、龍兆文、商婕、仰鐵錘、趙柳、胡嘉男、瞿雅懿、王杰、鄧磊、種葉敏、嚴泉謀、廉艷鋒、李文靜。本文件及其所代替文件的歷次版本發(fā)布情況為：——本次為首次發(fā)布。引言四川省人民政府高度重視川產(chǎn)道地藥材產(chǎn)業(yè)發(fā)展，2020年四川省藥品監(jiān)督管理局等11個部門聯(lián)合發(fā)布了《關于印發(fā)川產(chǎn)道地藥材全產(chǎn)業(yè)鏈管理規(guī)范及質(zhì)量標準提升示范工程工作方案的通知》（川藥監(jiān)發(fā)〔2020〕69號），明確提出了“三標準五規(guī)范二體系”（三五二）的工作目標，致力于促進川產(chǎn)道地藥材及飲片質(zhì)量提升。茯苓作為重要的川產(chǎn)道地藥材之一，享譽全國，是川產(chǎn)道地藥材產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要內(nèi)容。廣元市擁有豐富的松林資源，具有較好的茯苓產(chǎn)業(yè)基礎，為了響應省政府號召，進一步提升中藥材及飲片質(zhì)量安全保障能力及市場競爭力，規(guī)范企業(yè)生產(chǎn)行為，提高產(chǎn)品質(zhì)量和工作效益，在四川省林業(yè)和草原局、廣元市林業(yè)局、廣元市昭化區(qū)林業(yè)局的支持下，我公司聯(lián)合成都中醫(yī)藥大學、華潤三九現(xiàn)代中藥制藥有限公司在廣元市昭化區(qū)開展茯苓全產(chǎn)業(yè)鏈生產(chǎn)技術規(guī)范及質(zhì)量標準提升研究，共同起草制定了以下10個文件，用以指導茯苓生產(chǎn)?！?.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程種子種苗標準茯苓菌種（母種）——2.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程良種繁育技術規(guī)范茯苓菌種——3.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程種植技術規(guī)范茯苓——4.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程采收及產(chǎn)地初加工技術規(guī)范茯苓——5.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程產(chǎn)地趁鮮加工與炮制一體化技術規(guī)范茯苓——6.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程藥材及飲片質(zhì)量標準茯苓——7.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程商品規(guī)格等級標準茯苓——8.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程包裝貯藏運輸技術規(guī)范茯苓——9.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程質(zhì)量追溯體系要求茯苓——10.川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程川產(chǎn)道地藥材備案申請表茯苓《川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程良種繁育技術規(guī)范茯苓菌種》（Q/GJH0002-2024），在明確了茯苓母種的質(zhì)量要求基礎上，規(guī)定了茯苓原種、栽培種的培養(yǎng)基、接種、培養(yǎng)、貯藏等關鍵繁育流程，有利于保障茯苓菌種生產(chǎn)的穩(wěn)定性。川產(chǎn)道地藥材"三五二"工程良種繁育技術規(guī)范茯苓菌種范圍本文件規(guī)定了茯苓菌種繁育的術語和定義、菌種繁育技術、栽培種生產(chǎn)技術、包裝、標簽和運輸。本文件適用于廣元市佳華中藥材種植有限公司茯苓原種、栽培種的繁育。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。Q/GJH0001-2024川產(chǎn)道地藥材“三五二”工程種子種苗標準茯苓菌種（母種）術語和定義下列術語和定義適用于本文件。

茯苓Poria為多孔菌科真菌茯苓Poriacocos（Schw.）Wolf的干燥菌核。

原種Secondarystrain由茯苓母種經(jīng)小規(guī)模擴大培養(yǎng)，供制作栽培種的茯苓純菌絲菌種，亦稱二級種。

栽培種Tertiarystrain由茯苓原種經(jīng)擴大培養(yǎng)而得，直接用于茯苓栽培的純菌絲菌種，亦稱生產(chǎn)種、三級種。菌種繁育技術母種應選用符合Q/GJH0001-2024要求的母種。原種生產(chǎn)原種培養(yǎng)基配方小麥粒90%、松木屑10%、營養(yǎng)液（1%蔗糖、0.5%NH4NO3或(NH4)2SO4），pH為5.0～6.0。配制將小麥粒精選，除去癟粒、雜質(zhì)，洗凈。置40℃左右的營養(yǎng)液中浸泡10h，取出，瀝干，與一半的松木屑混勻，裝于500ml原種瓶（袋）中，邊裝邊振搖，并稍壓實，裝至瓶（袋）肩處。將另一半松木屑用營養(yǎng)液潤濕，覆蓋于培養(yǎng)基表面，厚約0.5cm。擦凈瓶（袋）內(nèi)、外壁沾附物，塞棉塞，扎口。滅菌將配制的培養(yǎng)基用0.1373MPa壓力（溫度126℃）滅菌2h，或用流通蒸汽（100℃）滅菌8h～10h，冷卻后備用。接種選取質(zhì)量合格的母種，用無菌操作法挑取長寬各1.5cm左右的母種塊（連同培養(yǎng)基），移于原種培養(yǎng)基上端中央，隨即蓋塞或扎口。接種環(huán)境要求防塵性能良好，易于清洗和消毒，換氣方便，空氣潔凈。培養(yǎng)在溫度25℃～30℃、空氣濕度60%～70%環(huán)境下培養(yǎng)約15d至菌絲充滿至瓶（袋）體約2/3，移入10℃～25℃的常溫培養(yǎng)室內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)5d～10d至菌絲長滿。培養(yǎng)環(huán)境要求防塵性能良好，避光，便于清洗和消毒；墻壁厚度適當，利于控溫、控濕，便于通風；有防蟲防鼠措施。貯藏原種質(zhì)量及抽樣檢驗要求參照附錄A執(zhí)行，經(jīng)檢驗合格后，應置于10℃～25℃的常溫培養(yǎng)室內(nèi)貯藏。貯藏環(huán)境要求避光、無污染，濕度控制在60%～70%，貯藏前對貯藏環(huán)境紫外滅菌約1h。貯藏期不宜超過30d。栽培種生產(chǎn)栽培種培養(yǎng)基配方粗玉米粉30%、小麥粒20%、松木屑48%、蔗糖1%、熟石膏1%，pH約7.0。配制首先將蔗糖溶于水，將粗玉米粉、小麥粒與熟石膏混勻，再加入松木屑，拌勻，然后加入蔗糖水翻拌均勻，繼續(xù)加水使培養(yǎng)基含水量65%～70%（即緊握培養(yǎng)基料使指尖稍見滲水為度）。放置30min，待水分均勻滲入料中進行裝袋；將菌種袋撐開，裝料，每袋400g左右，壓實，擦凈袋口內(nèi)外壁沾附物，扎口。滅菌同4.2.1.3。接種用無菌操作法，將原種瓶（袋）打開，除去表面的菌膜及表面培養(yǎng)物。接種匙取5g左右略加搗碎的原種塊移于栽培種培養(yǎng)基上，封口。接種環(huán)境要求防塵性能良好，易于清洗和消毒，換氣方便，空氣潔凈。培養(yǎng)將接種后的栽培種連同周轉(zhuǎn)箱一起置于培養(yǎng)室內(nèi)，菌種堆疊層數(shù)不超過5層，須整齊碼放。在溫度25℃～30℃、空氣濕度60%～70%環(huán)境下培養(yǎng)約20d至菌絲生長延伸到容器頂端2cm～3cm處，移入10℃～25℃的常溫培養(yǎng)室內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)5～8d，至菌絲長滿。培養(yǎng)環(huán)境要求防塵性能良好，避光，便于清洗和消毒；墻壁厚度適當，利于控溫、控濕，便于通風；有防蟲防鼠措施。貯藏栽培種質(zhì)量及抽樣檢驗要求參照附錄A執(zhí)行，經(jīng)檢驗合格后，置于10℃～25℃的常溫培養(yǎng)室內(nèi)，按批號歸類就地貯藏。若栽培種數(shù)量較多，應分層碼放整齊，疊放不超過5層。貯藏環(huán)境要求避光、無污染，濕度控制在60%～70%，貯藏前對貯藏環(huán)境紫外滅菌約1h。檢驗合格的栽培種應盡快使用，貯藏期不宜超過30d。剔雜、清場剔雜原種、栽培種培養(yǎng)過程中，應經(jīng)常檢查培養(yǎng)室內(nèi)溫度、濕度變化及菌絲生長情況，發(fā)現(xiàn)菌絲長速明顯緩慢，菌絲稀疏、不均、發(fā)黑、雜菌污染等情況，應及時剔出。清場每一批次原種、栽培種生產(chǎn)完成后，均應進行清場，包括清除生產(chǎn)中的廢棄物，做好環(huán)境的清潔，將物品歸位，并做好清場記錄。包裝、標簽和運輸5.1包裝栽培種出場時應當使用外包裝，外包裝應使用木、竹框，疊放層數(shù)以不破損底層栽培種為宜。5.2標簽每個包裝應標明菌種名稱、基原、數(shù)量、批號、生產(chǎn)單位、接種日期等。5.3運輸栽培種運輸時應有防曬、防雨、防凍、防震設施與措施。4

（資料性）

原種、栽培種質(zhì)量要求質(zhì)量要求及檢驗方法原種、栽培種質(zhì)量要求及檢驗方法見表A.1。原種、栽培種質(zhì)量要求及檢驗方法項目要求檢驗方法菌絲外觀菌絲生長量長滿容器肉眼觀察菌絲體特征潔白濃密、生長旺盛、菌索粗壯清晰肉眼觀察，必要時使用放大鏡觀察菌絲體表面生長均勻、無角變、無高溫抑制線肉眼觀察菌絲分泌物有無色或少量棕黃色水珠肉眼觀察雜菌菌落無肉眼觀察氣味有茯苓菌種特有的清香味，無酸、臭、霉等異味鼻嗅抽樣方法及要求同一接種時間的原種或栽培種為一批，按組批隨機抽樣。原種、