動物疫病流行病學調(diào)查技術(shù)規(guī)范 第4部分 豬流行性腹瀉

ICSFORMTEXT?????FORMTEXT點擊此處添加中國標準文獻分類號FORMTEXT?????DB4117DBFORMTEXT41/FORMTEXTXXXXX—FORMTEXTXXXXFORMTEXT?????FORMTEXT動物疫病流行病學調(diào)查技術(shù)規(guī)范第4部分豬流行性腹瀉FORMDROPDOWNFORMTEXT?????FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX發(fā)布FORMTEXTXXXX-FORMTEXTXX-FORMTEXTXX實施FORMTEXT????????發(fā)布DB4117/T169.1—2014I動物疫病流行病學調(diào)查技術(shù)規(guī)范豬流行性腹瀉范圍本標準規(guī)定了豬流行性腹瀉流行病學調(diào)查的目的任務(wù)、范圍、工作程序及工作要求。本標準適用于轄區(qū)內(nèi)豬流行性腹瀉的發(fā)生情況、臨床癥狀、流行強度、流行規(guī)律及免疫效果的調(diào)查；發(fā)現(xiàn)疑似或確認發(fā)生豬流行性腹瀉后開展的緊急流行病學調(diào)查，以核實疫情，查明疫源、確定疫病三間（時間、空間和豬群間）分布，為制定有效控制、撲滅豬流行性腹瀉措施及解除疫情封鎖提供科學依據(jù)。規(guī)范性引用文件NY/T544豬流行性腹瀉診斷技術(shù)NY/T541動物疫病實驗室檢驗采樣方法DB41/T1673-2018動物疫病防控技能競賽操作規(guī)范DB41/T1702-2018豬血樣與組織樣品采集技能操作規(guī)范DB4117/T169.1-2020動物疫病流行病學調(diào)查技術(shù)規(guī)范總則術(shù)語和定義豬流行性腹瀉豬流行性腹瀉是由尼多目、冠狀病毒科、a-冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉引起的豬的一種高度接觸傳染性的腸道疾病，以嘔吐、腹瀉、脫水和哺乳仔豬高死亡率為主要特征。動物疫情測報網(wǎng)絡(luò)簡稱測報網(wǎng)絡(luò)，是由市、縣動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)為監(jiān)測主體，以部分養(yǎng)殖企業(yè)為監(jiān)測網(wǎng)點所組成的動物疫情測報系統(tǒng)。全市測報網(wǎng)絡(luò)分為市級和縣級。市、縣級測報網(wǎng)絡(luò)分別指市級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)、縣級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)負責的測報網(wǎng)絡(luò)。市、縣級動物疫情測報網(wǎng)絡(luò)監(jiān)測網(wǎng)點（簡稱市、縣級監(jiān)測網(wǎng)點）分別指由市級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)、縣級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)負責監(jiān)測的樣品采集點?，F(xiàn)場調(diào)查生物安全防護4.1先調(diào)查排除后采樣調(diào)查過程中凡發(fā)現(xiàn)急性死亡的動物，如需現(xiàn)場解剖和采樣，懷疑有炭疽時，讀的解剖。應(yīng)采集血樣，進行血液膜片鏡檢，確定不是炭疽后，方可解剖采樣。4.2調(diào)查采樣人員應(yīng)加強個人防護，穿戴口罩、工作帽、防護服、防護靴、雙層手套，必要時戴防護眼鏡、面罩。嚴格遵守生物安全操作的相關(guān)規(guī)定，嚴防人蓄共患病感染，同事，應(yīng)做好環(huán)境消毒以及動物活組織的無害化處理，避免污染環(huán)境，防止疫病傳播。4.2.1個人防護穿戴順序依次是口罩、工作帽、防護服、防護眼睛、防護靴、雙層手套，將手套套在防護服袖口外面。4.2.2個人防護脫掉順序依次是脫第一層手套、摘下防護眼睛、脫防護服、脫防護靴、摘帽子、脫一只手套、摘口罩、脫掉另一只手套。常規(guī)調(diào)查對市轄區(qū)內(nèi)養(yǎng)豬場戶、屠宰場、獸醫(yī)門診等市、縣級監(jiān)測網(wǎng)點及固定流行病學調(diào)查點開展的日常流行病學調(diào)查。目的任務(wù)調(diào)查市轄區(qū)內(nèi)豬豬流行性腹瀉的發(fā)生情況，了解其臨床癥狀、流行強度和流行規(guī)律，提出防控措施，為預(yù)警預(yù)報提供依據(jù)。常規(guī)調(diào)查程序縣級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)以縣級監(jiān)測網(wǎng)點和固定流行病學調(diào)查點為流行病學調(diào)查點，每月實施1次，每個調(diào)查點每年不少于2次，每月對調(diào)查數(shù)據(jù)進行分析匯總同時填寫附錄A、附錄B并上報至市級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)。市級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)以市級監(jiān)測網(wǎng)點和固定流行病學調(diào)查點為流行病學調(diào)查點，每月實施1次，每個調(diào)查點每年不少于2次，每月對全市調(diào)查數(shù)據(jù)進行分析匯總同時填寫附錄A、附錄B相關(guān)表格并上報至省、市級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)。常規(guī)調(diào)查要求采用詢問、信訪、問卷填寫、現(xiàn)場查看、測量和檢測等方式進行流行病學調(diào)查，同時分動物種類填寫常規(guī)流行病學調(diào)查表及相關(guān)養(yǎng)殖場信息（附錄A、附錄B）。緊急調(diào)查在常規(guī)調(diào)查過程中發(fā)現(xiàn)疑似或確診豬流行性腹瀉后啟動的流行病學調(diào)查。目的任務(wù)掌握豬流行性腹瀉的發(fā)生情況，分析可能擴散范圍，提出防控措施建議，提高突發(fā)疫情應(yīng)急處置工作的針對性、有效性；探尋豬流行性腹瀉的病因及風險因素，分析疫情發(fā)展規(guī)律，預(yù)測疫病暴發(fā)或流行趨勢，評估控制措施效果，增強防控工作的主動性、前瞻性。豬流行性腹瀉爆發(fā)時，對報告的時間進行最初的核實、確定傳染源、傳播途徑和暴露因素，查明病原傳播擴散和流行情況，以便采取有效措施防止疫情擴散，在一定時間內(nèi)，調(diào)查動物群體中的疾病時間和疾病現(xiàn)象，描述動物群體的混病狀況、三間分布和動態(tài)過程，提供有關(guān)致病因子，環(huán)境和畜主因素的病因線索，為進一步研究病因因素，制定防控對策提供依據(jù)；評估防控措施實施效果及疫苗等生物制品使用效果，等等。診斷指標6.2.1流行特點本病一年四季均可發(fā)生，主要發(fā)生在每年的12月到翌年的3月，有時也發(fā)生于夏季、秋季。各種年齡的豬均可感染，尤其是1周齡內(nèi)的哺乳仔豬，發(fā)病率和死亡率可高達100%。病豬、帶毒豬和隱性感染豬是本病的主要傳染源。病毒通過糞-口途徑或感染母豬的乳汁進行傳播。6.2.2臨床癥狀病豬首先表現(xiàn)為嘔吐、多發(fā)生在吮乳或吃食后，吐出的胃內(nèi)容物呈黃色或乳白色。隨后出現(xiàn)水樣腹瀉，腹瀉物呈灰黃色、灰色，或呈透明水樣，順肛門流出，沾污臀部。表現(xiàn)脫水、眼窩下陷，行走蹣跚，精神沉郁，食欲減退或停食。癥狀與年齡大小有關(guān)，年齡越小癥狀越重。1周齡以內(nèi)的仔豬在發(fā)生腹瀉3～4天后，常因嚴重脫水而死亡。斷乳豬、育肥豬以及母豬癥狀較哺乳仔豬輕，表現(xiàn)精神不振、厭食，持續(xù)腹瀉4～7天后逐漸恢復(fù)正常，少數(shù)豬生長發(fā)育不良。成年豬表現(xiàn)為厭食和腹瀉，個別表現(xiàn)為嘔吐。6.2.3病理變化肉眼可見的病理變化只限于小腸，可見小腸膨脹，腸壁變薄，外觀明亮，腸管內(nèi)有黃色或灰色液體或帶有氣體。腸系膜充血及腸系膜淋巴腫大，組織學檢查可見小腸絨毛細胞的空泡形成和脫落，腸絨毛萎縮、變短，絨毛高度與隱窩深度從正常的7:1降低為3:1，超微結(jié)構(gòu)的變化，主要發(fā)生在腸細胞的胞漿，可見細胞器的減少，產(chǎn)生電子半透明區(qū)，微絨毛終末網(wǎng)消失。細胞變得扁平，細胞脫落，進入腸腔。在結(jié)腸也可見到細胞變化，但未見到脫落。6.2.4實驗室檢測6.2.4.1樣品采集按照NY/T544和NY/T541的要求采集病料并填寫樣品采集登記表（見附錄C)。6.2.4.2病原分離與鑒定a)病原分離、鑒定可用細胞培養(yǎng)法。b)病原鑒定采用豬流行性腹瀉直接免疫熒光法。c)豬流行性腹瀉病毒核酸的檢測采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（RT-PCR）或熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)（熒光RT-PCR）法。d)豬流行性腹瀉抗原雙抗體夾心ELISA檢測法。6.2.4.3血清學檢測a)豬流行性腹瀉病毒抗體間接ELISA檢測法。b)豬流行性腹瀉血清中和試驗。6.2.4.4結(jié)果判定只要實驗室檢測中的任何一種方法的結(jié)果成立，即可判斷為豬流行性腹瀉。調(diào)查程序市、縣級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)接到疑似病例報告或調(diào)查中發(fā)現(xiàn)疑似病例，應(yīng)立即核實信息，進一行初步調(diào)查并填寫緊急流行病學調(diào)查表（見DB4117/T217.1-2019規(guī)范性附錄B、附錄D、附錄E、附錄F），同時按規(guī)定報告疫情至市動物疫情行政管理部門。市動物疫情行政管理部門接到報告后立即組織市動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)開展現(xiàn)場調(diào)查。市級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)按照市級動物疫情行政管理部門的要求及時派專業(yè)技術(shù)人員深入現(xiàn)場開展流行病學調(diào)查。采集樣品進行實驗室檢測疑似豬流行性腹瀉時，應(yīng)立即按照GB/T18090-2008和NY/T541的要求采集病料并填寫樣品采集登記表（附錄C），進一步進行實驗室診斷

?，F(xiàn)場調(diào)查人員進一步核實情況后，采集有關(guān)信息，詳細、全面、準確收集相關(guān)信息。現(xiàn)場調(diào)查人員根據(jù)獲取的信息，描述動物疫情現(xiàn)狀（時間、空間和群間分布等），分析疫病來源，推測發(fā)病的原因，判斷疫情發(fā)展趨勢，提出控制措施建議。調(diào)查評估報告調(diào)查結(jié)束后及時撰寫本次調(diào)查評估報告。內(nèi)容包括疫情發(fā)生的總體情況描述、引起發(fā)病的主要原因、采取的防控措施及效果評價、應(yīng)吸取的經(jīng)驗教訓、對今后工作的建議等。懷疑疫情擴散時，在高風險地區(qū)開展追蹤調(diào)查。對現(xiàn)場調(diào)查人員的調(diào)查評估報告進行審核并及時上報至市動物疫情行政管理部門。工作要求市、縣級動物疫病預(yù)防控制機構(gòu)要明確專人負責動物疫病緊急流行病學調(diào)查工作，嚴格執(zhí)行工作程序。調(diào)查步驟和內(nèi)容組織準備、確定疫情存在、建立病例定義、開展調(diào)查按照DB4117/T217.1-2019執(zhí)行。結(jié)果分析和報告描述病例的三間分布、建立并驗證假設(shè)、措施建議及報告按照DB4117/T217.1-2019執(zhí)行。附錄A

（規(guī)范性附錄）豬場/戶流行病學調(diào)查表場/戶名稱豬場啟用時間年月豬場地址縣鄉(xiāng)/鎮(zhèn)/街道辦村；東經(jīng)度，北緯度。1．現(xiàn)養(yǎng)殖情況（頭）種公豬經(jīng)產(chǎn)母豬后備母豬哺乳仔豬保育仔豬生長育肥豬去年出欄數(shù)（頭）現(xiàn)存欄2．防疫狀況動物防疫條件合格證：□有□無防疫設(shè)施：□場舍有門禁□入口有消毒設(shè)施□進場消毒、換膠靴□定期消毒□養(yǎng)殖場相對獨立病死動物無害化處理設(shè)施：□場內(nèi)有□場內(nèi)無□交無害化處理廠3．疫苗使用情況疫苗種類種豬仔豬育肥豬名稱疫苗生產(chǎn)企業(yè)名稱疫苗生產(chǎn)企業(yè)名稱疫苗生產(chǎn)企業(yè)4．今年臨床疑似疫病發(fā)病情況（時間是發(fā)病的月份；發(fā)病數(shù)、死亡數(shù)是絕對數(shù)，不是%）。病種種豬哺乳仔豬保育仔豬育肥豬時間發(fā)病數(shù)死亡數(shù)時間發(fā)病數(shù)死亡數(shù)時間發(fā)病數(shù)死亡數(shù)時間發(fā)病數(shù)死亡數(shù)主要癥狀：本表格僅作為流行病學調(diào)查專用，信息嚴格保密，請如實填寫。填表人：聯(lián)系電話：填表日期：年月日附錄B

（規(guī)范性附錄）豬疫苗臨床應(yīng)用效果流行病學調(diào)查表養(yǎng)殖場戶名稱啟用時間地址市縣（區(qū)、市）鄉(xiāng)（鎮(zhèn)）村一、養(yǎng)殖情況種公豬母豬仔豬育肥豬存欄數(shù)二、口蹄疫疫苗應(yīng)用情況疫苗類型疫苗毒株生產(chǎn)企業(yè)三、免疫注射安全（免疫注射3天內(nèi)，發(fā)生的臨床現(xiàn)象）生產(chǎn)企業(yè)免疫數(shù)應(yīng)激反應(yīng)數(shù)應(yīng)激發(fā)病數(shù)應(yīng)激死亡數(shù)妊娠母豬數(shù)流產(chǎn)數(shù)種豬————母豬仔豬————育肥豬————四、疫苗使用后有效性（免疫保護期內(nèi)，口蹄疫發(fā)病情況）生產(chǎn)企業(yè)免疫數(shù)發(fā)病時間發(fā)病數(shù)死亡數(shù)種公豬母豬仔豬育肥豬總體評價：□好□一般□效果不明顯□無效免疫程序：填表人：聯(lián)系方式：填表時間：年月日說明：本表格僅作為流行病學調(diào)查專用，信息嚴格保密。附錄C

（規(guī)范性附錄）

樣品采集登記表縣/鄉(xiāng)名稱：被采樣單位名稱采樣地點聯(lián)系人聯(lián)系電話郵編動物類別樣品名稱采樣日期動物種類日齡存欄量樣品數(shù)量樣品編號被采樣動物臨床情況被采樣動物免疫情況免疫病種疫苗類型疫苗廠家疫苗批號免疫次數(shù)末次免疫劑量末次免疫至采樣的間隔天數(shù)檢測目的被采樣單位蓋章或簽名年月日采樣單位蓋章采樣人簽名