【榴蓮籽多糖提取工藝探究開(kāi)題報(bào)告（含提綱）3100字】

榴蓮籽多糖提取工藝研究開(kāi)題報(bào)告課題來(lái)源多糖是由糖苷鍵相連，由許多的單糖分子進(jìn)行脫水處理后縮合而成的化合物，來(lái)源不相同的多糖其所含生物活性也不一樣。植物多糖[2,3]是多糖的一類，它是由多種單糖分子按一定的比例組合而成的，其種類豐富來(lái)源廣，在我們?nèi)粘Ｉ钪幸脖粡V泛的應(yīng)用。一些研究還表明，植物多糖具有一些生物效應(yīng)，如延緩老化過(guò)程和降低血糖水平。同時(shí)，植物多糖也可以作為一種來(lái)自于自然中的綠色保健食品添加劑。因此，植物多糖已經(jīng)成為人們?nèi)粘ｏ嬍持胁豢苫蛉钡某煞种?。植物多糖已被廣泛應(yīng)用于大生活領(lǐng)域中，例如醫(yī)學(xué)界、餐飲界等。此次實(shí)驗(yàn)主要研究了堿浸提法和水浸提法兩種方法。堿浸提法的基本原理是通過(guò)對(duì)生物堿的損傷作用來(lái)?yè)p傷植物表皮層，從而提高對(duì)該植體內(nèi)堿式胞外多糖的浸出。但是，對(duì)于堿液的萃取過(guò)程卻十分復(fù)雜，由于對(duì)其中的多糖液體中和，在萃取過(guò)程中極易引起水解，因此使得對(duì)于細(xì)胞外的多糖的生物活性和得率會(huì)大大降低。水浸提法是萃取植物多糖中最為普遍的傳統(tǒng)技術(shù)之一。水浸提法好處是更好的提取游離態(tài)多糖，而且原料易得，在提取過(guò)程中需要的材料設(shè)備簡(jiǎn)單易得，影響物質(zhì)也較少，而不足之處是所需的浸提時(shí)間多、作用持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、產(chǎn)量少、耗材時(shí)間久。通常通過(guò)二個(gè)途徑提取植物多糖，再經(jīng)過(guò)對(duì)比確定最終的提取途徑。在市面上絕大多數(shù)的榴蓮籽由于處理麻煩，或者干脆被當(dāng)作成加工副產(chǎn)品而扔掉了，這將帶來(lái)一定的資源損失與浪費(fèi)。所以，通過(guò)發(fā)展榴蓮籽多糖堿提和水提工藝，旨在為榴蓮籽多糖的綜合利用上提出了必要的理論基礎(chǔ)和技術(shù)條件，并促進(jìn)了廢物資源的可實(shí)現(xiàn)再利用與再利用，這很具有意義。而且在目前，以榴蓮籽為原材料的研發(fā)重點(diǎn)主要集中在了榴蓮的果肉和果殼上，從榴蓮籽黃酮萃取率和淀粉生產(chǎn)的萃取分離、提純過(guò)程及其結(jié)構(gòu)鑒定上，已經(jīng)有學(xué)者從榴蓮的外殼上獲得了總黃酮。為探究榴蓮籽多糖提取多糖的最佳條件，本研究分別采用了堿提法和水提法進(jìn)行對(duì)榴蓮籽多糖的提取，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取參數(shù)，并且進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)獲得最佳提取工藝參數(shù)以提高榴蓮籽多糖的提取率，可以為今后的榴蓮的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用和研究提供理論參考?？茖W(xué)依據(jù)隨著人們對(duì)植物多糖認(rèn)識(shí)不斷深入，多糖的提取工藝越來(lái)越多，選擇合適的提取工藝既能提高多糖提取率，又能保持多糖的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。水提醇沉法是植物多糖傳統(tǒng)提取方法，雖然它的操作流程比較簡(jiǎn)單，但是需要較長(zhǎng)時(shí)間才能將多糖提取出來(lái)，并且多糖得率低。例如，陳叢瑾等采用水提醇沉法提取香椿葉的總多糖，在提取的時(shí)間、溫度和料液比都適宜的條件下，需要提取5次，才能獲得最大的總多糖提取量。超聲輔助提取法操作安全，效率高，在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用較廣泛。但因超聲波能會(huì)破壞糖鏈，降低多糖提取率，所以不能長(zhǎng)時(shí)間作用于多糖。王雪鋒等在超聲輔助提取法提取白芍花中的多糖試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在固液料1:20g/mL、超聲波輻射功率100W和浸泡時(shí)間120min條件下，如果超聲波輻射時(shí)間超過(guò)60min，多糖的提取率會(huì)下降。微波輔助提取植物多糖的優(yōu)點(diǎn)是對(duì)環(huán)境無(wú)污染，萃取多糖時(shí)間短，缺點(diǎn)是成本太高，無(wú)法進(jìn)行工廠化大規(guī)模使用，常在實(shí)驗(yàn)室中使用。Yang等在實(shí)驗(yàn)室中優(yōu)化微波輔助提取黑加侖多糖的條件，使其得率提高到10.6%。張鵬等發(fā)現(xiàn)在液料比35:1(mL/g)、微波功率550W、微波時(shí)間190s的實(shí)驗(yàn)室條件下，才能獲得較高的山竹殼多糖得率[fl}l0酶解提取法提取多糖具有高效、干凈、快捷，應(yīng)用前景廣泛等特點(diǎn)，但是酶的本質(zhì)是蛋白質(zhì)，在多糖中比較難去除。超聲輔助離子液體提取法具有無(wú)污染、耗時(shí)短、效率高等特點(diǎn)，因此被越來(lái)越廣泛的應(yīng)用于各種天然產(chǎn)物的活性成分提取中。林志'}}r-'等發(fā)現(xiàn)在6%離子液體[[BMIm]PF63ml、超聲功率630W、料液比1:35(g/ml)條件，只需要25min武夷山白花葛莖的多糖提取量就可以達(dá)到22.5mg/g，超聲輔助離子液體提取法能夠破壞白花葛莖粉末微觀結(jié)構(gòu)，加速內(nèi)容物的溶解。隨著工業(yè)的進(jìn)步，技術(shù)的發(fā)展，植物多糖提取方式日新月異，多種提取方法結(jié)合，能提高提取效率，縮短提取時(shí)間，降低工藝成本。研究?jī)?nèi)容本實(shí)驗(yàn)為了探索榴蓮籽的粗多糖提取工藝，以榴蓮籽脫脂粉為原材料，采用堿浸提法和水提取法制備粗多糖，通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取參數(shù)，利用苯酚-硫酸法測(cè)定多糖含量，并對(duì)各因素最優(yōu)參數(shù)條件下的樣品進(jìn)行粗多糖含量測(cè)定，粗多糖經(jīng)過(guò)調(diào)pH值除蛋白，上清液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀55℃下濃縮后加入4倍乙醇沉淀，靜置一夜后將沉淀物進(jìn)行真空冷凍干燥得經(jīng)純化的榴蓮籽多糖固體，測(cè)得粗多糖得率。最后，對(duì)兩種方案進(jìn)行了比較，并對(duì)提取率最高的方法進(jìn)行了正交試驗(yàn)，以找到最佳的提取條件。前言1材料與方法1.3.1榴蓮籽多糖提取工藝優(yōu)化1.3.2葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定1.3.3多糖含量測(cè)定1.4榴蓮籽多糖堿浸提法提取工藝1.4.1實(shí)驗(yàn)流程圖1.4.2榴蓮籽多糖堿提工藝1.4.3堿提榴蓮籽多糖提取單因素試驗(yàn)1.5榴蓮籽多糖熱水浸提法提取工藝1.5.1實(shí)驗(yàn)流程圖1.5.2熱水提取工藝1.5.3水提榴蓮籽多糖提取單因素試驗(yàn)2結(jié)果與分析2.1葡萄糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制2.2單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.2.1堿浸提法對(duì)榴蓮籽多糖提取含量的影響2.3.1水浸提法對(duì)榴蓮籽多糖提取含量的影響2.3方法比較結(jié)果2.4正交試驗(yàn)結(jié)果3結(jié)論擬采取的研究方法、技術(shù)路線、實(shí)驗(yàn)方案及可行性分析1榴蓮籽多糖提取工藝優(yōu)化將榴蓮籽用水沖凈，把里面的果肉去掉，瀝乾，然后用小刀把它切開(kāi)，放在太陽(yáng)下晾干，晾干后，用80目篩子篩后待用。采用索氏抽提機(jī)，用索氏抽提機(jī)對(duì)干燥的榴蓮籽粉末進(jìn)行多次提取，將其油脂浸入溶劑，制得榴蓮籽粉末。2榴蓮籽多糖堿提工藝將榴蓮籽脫脂粉1.0克，按固液比例1:30g/mL，6%的氫氧化鈉濃度進(jìn)行配料，均勻混合后置于35℃的恒溫水浴鍋中，浸泡1小時(shí)，重復(fù)兩次以上操作，并在4000r/min下進(jìn)行15分鐘的離心，再進(jìn)行上清液的提取，即多糖浸提液。將所得到的多糖提取物，取0.1mL在50mL容量的瓶子中，定容到刻度線。取容量瓶中2毫升轉(zhuǎn)移到試管中，慢慢加入1毫升5%的苯酚和5毫升的濃硫酸，在490nm處進(jìn)行分光光度測(cè)量。將上清液的pH值分別調(diào)到4.6和4.3，并且每次調(diào)完pH后都在4000r/min下離心15分鐘，收集上清液。將提取的上清液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中，在55℃下進(jìn)行濃縮，并注意觀察防止跑料，當(dāng)濃縮到一定體積時(shí)，室溫下按加入4倍的無(wú)水乙醇，密封，在4℃下放置一晚。經(jīng)沉淀后，離心收集沉淀，置于冰箱冷凍一日，然后放于凍干機(jī)內(nèi)進(jìn)行真空冷凍干燥48小時(shí)，最終稱量，得到了一種經(jīng)加工處理的榴蓮籽粗多糖，得經(jīng)純化的水提型榴蓮籽多糖，稱量其重量。3熱水提取工藝將榴蓮脫脂粉1.00克，按1:70g/mL比例加入蒸餾水，混合均勻，置于90℃的恒溫浴缸中1小時(shí)，重復(fù)兩次以上操作，在4000r/min下進(jìn)行15分鐘的離心，再進(jìn)行上清液的提取，即多糖浸提液。將所得到的多糖提取物，取0.1mL在50mL容量的容量瓶中，定容到刻度線。將2mL的樣品放入試管，然后分別添加5%苯酚1mL和濃硫酸5mL，混合均勻，冷卻到在室溫下進(jìn)行分光光度測(cè)量。調(diào)整pH值，將上清液的pH值依次調(diào)整到4.6和4.3，并在4000r/min下離心15分鐘。將上清液放入循環(huán)蒸發(fā)器中，在55℃下濃縮。注意不要跑料，濃縮后，加入四倍的無(wú)水乙醇，并在4℃下儲(chǔ)存過(guò)夜。沉淀處理后，經(jīng)離心收集沉淀，置于冰箱冷藏一日，然后放于凍干機(jī)內(nèi)48小時(shí)進(jìn)行真空冷凍干燥，最終稱量，得到了一種經(jīng)純化的水提型榴蓮籽多糖。研究計(jì)劃及預(yù)期成果通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)對(duì)提取參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，并通過(guò)苯酚硫酸法測(cè)量多糖含量。用堿性提取法從榴蓮種子中提取粗多糖的最佳提取如下：采用1:30g/mL固液比，35℃，6%氫氧化鈉濃度，對(duì)榴蓮籽多糖進(jìn)行浸提。在這條件下，粗多糖含量為51.5%，純化的粗多糖得量為4.1%。水的最佳提取方法是1:40g/mL固液比例，提取溫度90℃，提取時(shí)間2.5小時(shí)。相比之下，水提取法的多糖含量更高。根據(jù)L9(33)的正交分析，找到了A2B2C2的最佳參數(shù)組合，即固液比1:40g/mL，提取溫度90℃，提取時(shí)間2.5小時(shí)。得到的粗多糖含量為73.91%，純化的粗多糖得率為7.28%。特色或創(chuàng)新之處已具備的條件和尚需解決的問(wèn)題主要設(shè)備：主