細(xì)菌性疾病監(jiān)測(cè)標(biāo)本采集常見(jiàn)問(wèn)題及技術(shù)要求

細(xì)菌性疾病監(jiān)測(cè)標(biāo)本采集常見(jiàn)問(wèn)題及技術(shù)要求合格樣本采集得前期工作明確采樣目得:通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)手段,對(duì)不明原因得病人或者人群進(jìn)行確診和溯源。以達(dá)到早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療、早隔離得目得。采前需知:樣本種類(lèi)？采集時(shí)間？信息？采集方法？樣本量？保存？送樣？做好準(zhǔn)備工作:落實(shí)參加人員(培訓(xùn))、樣本采集所需器材物品、防護(hù)措施、樣本得運(yùn)送方式及工具。認(rèn)真落實(shí)并實(shí)施:職責(zé)劃分與落實(shí)、溝通協(xié)調(diào)(省市間、市縣間、流調(diào)人員與檢驗(yàn)人員間),結(jié)果反饋。

2樣本采集得要求

及時(shí)性？病源樣本、腦脊液樣本、血清樣本合理性？雙份血(病例得急性期與恢復(fù)期血清;免疫成功率血清)信息得清晰與完整性？歸屬關(guān)系,采樣日期,檢測(cè)樣本編號(hào)與樣本來(lái)源者一致性問(wèn)題采樣部位得準(zhǔn)確性？樣本量足夠？腦脊液、血清密閉性:防治泄漏避免污染:廢棄物得處理3采前準(zhǔn)備(一)人員得培訓(xùn):人員相對(duì)固定(尤其就是實(shí)驗(yàn)室人員);采樣器材得準(zhǔn)備;采樣基本信息登記表;個(gè)人防護(hù)措施:隔離衣、口罩、手套、鞋套等樣品得運(yùn)輸和保存措施;4采前準(zhǔn)備(二)鼻咽拭子:平板、無(wú)菌咽拭子、壓舌板;血樣本:平板(增菌液)、一次性注射器、采血管、止血帶、無(wú)菌棉簽;腦脊液:平板、無(wú)菌保存管;信息記錄:油性筆、簽字筆、采樣單;樣品保存措施:冰排、冷藏箱、熱水袋等(視樣本種類(lèi)選擇);其她:試管架、剪刀、酒精/碘酒、膠布、酒精燈、防護(hù)用品、垃圾袋等。5樣本得采集樣本得采集樣本得處理常見(jiàn)問(wèn)題及要求6流腦CSF樣本

如果為疑似腦膜炎病例,腦脊液就是分離和鑒別病原菌得最佳樣本。采集過(guò)程應(yīng)無(wú)菌操作,至少1～3mL?？捎?、1～0、5mL直接接種巧克力或雙抗巧克力平板,其余應(yīng)立即送至微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行樣本處理與保存。適宜檢測(cè)得樣本為腦脊液(CSF)、血液、皮膚黏膜瘀點(diǎn)或瘀斑組織液及鼻咽拭子。7流腦血液樣本無(wú)菌操作抽取發(fā)熱患者全血5～10mL,取0、1～0、5ml直接接種巧克力或雙抗巧克力平板,1mL用來(lái)作血清學(xué)檢測(cè),其余采集后應(yīng)立即注入30ml增菌用得葡萄糖肉湯增菌液內(nèi)。患者應(yīng)采集發(fā)病早期和恢復(fù)期雙份全血各約1mL,檢測(cè)血清中特異性抗體滴度。。瘀點(diǎn)或瘀斑選取患者皮膚上得新鮮瘀點(diǎn)或瘀斑,生理鹽水消毒后用針頭挑破,擠出組織液,用消毒得玻片直接蘸取組織液涂片,革蘭氏染色鏡檢。也可用無(wú)菌棉簽沾取組織液接種含雙抗得葡萄糖肉湯管中,送至微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。8流腦鼻咽拭子樣本得采集:對(duì)病人密切接觸者和健康人群進(jìn)行帶菌檢驗(yàn)時(shí)采集鼻咽拭子。

采樣時(shí)令受檢者張開(kāi)口,用無(wú)菌棉拭子探入口腔內(nèi)懸雍垂后面得鼻咽部位,涂抹該部位粘膜分泌物,直接接種雙抗巧克力平板,也可將咽拭子放入液體雙抗增菌管內(nèi),一送至微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)。

注:鼻咽拭子相比口咽拭子可以產(chǎn)生較高得陽(yáng)性結(jié)果,因此咽拭子采集部位很重要9咽拭子采集10流腦注意事項(xiàng)

腦膜炎奈瑟菌對(duì)溫度較為敏感,溫度過(guò)高或過(guò)低均可導(dǎo)致菌株死亡。采集樣本后,應(yīng)盡量做到旁床接種,若無(wú)可能則應(yīng)在最短時(shí)間內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行接種培養(yǎng)。

接種過(guò)得培養(yǎng)基可在室溫(20℃～25℃)放置4～6小時(shí),運(yùn)送溫度不低于18℃不高于37℃。切記不能低溫運(yùn)送。用于進(jìn)行血清抗體及分子生物學(xué)檢測(cè)得CSF和血液樣本應(yīng)冷藏條件下送檢。

1112大家應(yīng)該也有點(diǎn)累了，稍作休息大家有疑問(wèn)的，可以詢(xún)問(wèn)和交流百日咳

適宜檢測(cè)得樣本為腦脊液(CSF)、鼻咽拭子

鼻咽抽吸物、血液?？鹊?/p>

用咳碟法采集樣品時(shí),應(yīng)在病人咳嗽時(shí),將包－姜(Bordet－Gengou)或炭瓊脂培養(yǎng)基平板打開(kāi)放在病人口前10cm處,使病人對(duì)準(zhǔn)平板表面咳嗽數(shù)次,直接收集病人咳出得飛沫。然后蓋好平皿蓋送檢。平板暴露時(shí)間以15s為宜。13百日咳鼻咽拭子及其保存液:聚丙烯纖維頭得塑料拭子

由于百日咳多發(fā)于兒童,所以采樣時(shí),病兒得頭部斜依于母親得胸懷,母親以雙手固定病兒得頭部,醫(yī)師以右手執(zhí)棉拭子,左手按病人得頭頂部,使頂端稍向下彎得棉拭子自前鼻孔進(jìn)入,沿下鼻道得底部向緩緩深入,由于鼻道呈弧形,不可用力過(guò)猛,以免發(fā)生外傷出血。待棉拭子頂端到達(dá)鼻咽腔后壁時(shí),將棉拭子稍留片刻,以待反射性咳嗽,然后輕輕旋轉(zhuǎn)一周,緩緩取出棉拭子接種平板后放入保存液中。14

百日咳×15培養(yǎng)平板底部貼標(biāo)簽,現(xiàn)場(chǎng)劃線法接種至碳瓊脂培養(yǎng)基上,接種后鼻拭子放回帶有轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基得拭子管中。注意:將接觸鼻咽后壁得拭子頂端劃線,而非拭子頭側(cè)面劃線。百日咳24小時(shí)內(nèi),≥20℃運(yùn)輸鼻咽拭子本登記表5%CO2,37℃培養(yǎng)7-14天

Genebox接種后得鼻拭子隨同培養(yǎng)基平板冷藏運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,-20℃以下低溫凍存待送檢。16百日咳病人血清樣本

無(wú)菌操作抽取患者早期和恢復(fù)期雙份全血各約1mL放入無(wú)菌血清管中,旋緊蓋子,做好標(biāo)記,盡快送檢。檢測(cè)血清中特異性抗體滴度。

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百日咳－樣本采集得最佳時(shí)期(周)1818白

喉

適宜檢測(cè)得樣本為血液、咽拭子、假膜。病人咽拭子樣本:用無(wú)菌長(zhǎng)柄棉拭子從疑似患者咽喉假膜邊緣蘸取樣本或同時(shí)采取鼻咽拭子接種血平板或亞蹄酸鉀血平板送檢。帶菌者或疑似病人咽拭子樣本:由于未見(jiàn)到假膜,故應(yīng)采集鼻咽部或扁桃體粘膜上得分泌物接種亞蹄酸鉀血平板送檢。病人血清樣本:無(wú)菌操作抽取患者早期和恢復(fù)期雙份全血各約1mL放入無(wú)菌血清管中,旋緊蓋子,做好標(biāo)記,盡快送檢待檢。1920白喉注意事項(xiàng):在鼻咽拭子樣本采集前12