2.2.1動物細(xì)胞培養(yǎng)課件-高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

動物細(xì)胞培養(yǎng)年級：高中二年級

學(xué)科：生物學(xué)（人教版）主講人：楊思杰

學(xué)校：四川省洪雅中學(xué)校1簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程學(xué)習(xí)目標(biāo)2簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞核移植動物細(xì)胞融合動物細(xì)胞工程是最基礎(chǔ)的技術(shù)問題:什么是動物細(xì)胞培養(yǎng)？1.概念：一、動物細(xì)胞培養(yǎng)從動物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長和增殖的技術(shù)。動物體組織單個細(xì)胞細(xì)胞生長和增殖取出分散適宜條件問題：動物組織的選擇：

幼齡動物or老齡動物幼齡個體的細(xì)胞分化程度低、分裂能力強，易培養(yǎng)。原理地位對象目的細(xì)胞增殖（有絲分裂）動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)獲得細(xì)胞或者細(xì)胞產(chǎn)物胚胎或幼齡動物的細(xì)胞動物體內(nèi)的細(xì)胞之所以能夠維持正常的生命活動，是因為機體給這些細(xì)胞提供了適宜的條件。你還記得有哪些條件嗎？充足的營養(yǎng)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境體外培養(yǎng)動物細(xì)胞需要滿足什么條件？動物細(xì)胞培養(yǎng)所需的基本條件營養(yǎng)物質(zhì)其他條件<<糖類氨基酸無機鹽維生素?zé)o菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓適宜的氣體環(huán)境2.培養(yǎng)條件：①營養(yǎng)條件：葡萄糖氨基酸無機鹽維生素問題：培養(yǎng)基的類型：

固體培養(yǎng)基or液體培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基or天然培養(yǎng)基將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按種類和所需量嚴(yán)格配制的培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基，也稱培養(yǎng)液由于人們對細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)尚未全部研究清楚。血清可以補充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、氨基酸、未知的促生長因子等。？動物血清培養(yǎng)基的構(gòu)成：合成培養(yǎng)基+血清等天然成分2.培養(yǎng)條件：②無菌無毒的環(huán)境：①對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理②在無菌環(huán)境下進行操作定期更換培養(yǎng)液無菌無毒③添加一定量的抗生素防止培養(yǎng)過程中的微生物污染思考：在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加適量的抗生素的目的是什么？思考：為什么要定期更換培養(yǎng)液？以便清除代謝物，防止細(xì)胞代謝物積累對細(xì)胞自身造成危害2.培養(yǎng)條件：③溫度、PH、滲透壓：一般與動物體內(nèi)相同①適宜的溫度：哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以______________為宜；②適宜的pH：多數(shù)動物細(xì)胞生存的適宜pH為___________③維持適宜的滲透壓的目的：36.5±0.5℃7.2-7.4維持細(xì)胞正常的形態(tài)和功能用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,在含有_______________和__________的混合氣體的__________2.培養(yǎng)條件：④氣體環(huán)境：動物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體主要有_____和______O2CO2細(xì)胞代謝所必需的維持培養(yǎng)液的pH95%空氣5%CO2CO2培養(yǎng)箱①組成不同氣體的作用是什么？②培養(yǎng)儀器（95%）空氣:（5%）CO2：CO2培養(yǎng)箱二、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程閱讀教材P44-45,思考并回答下列問題：1.為何動物細(xì)胞培養(yǎng)過程要將組織分散成單個細(xì)胞呢？可用什么方法？2.體外培養(yǎng)動物細(xì)胞有哪些類型？3.什么是細(xì)胞貼壁？什么是接觸抑制？4.什么是原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？5.為什么要進行分瓶培養(yǎng)？怎么處理？6.動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)有什么相同之處與不同之處？取動物組織分散成單個細(xì)胞傳代培養(yǎng)用機械法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)加培養(yǎng)液在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶內(nèi)1.取動物組織：部位原因動物胚胎或幼齡動物的組織、器官分化程度低，分裂能力強，易培養(yǎng)2.分散成單個細(xì)胞：原因①從動物體取出的成塊組織中，細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起，彼此限制了生長和增殖②利于細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，更易進行物質(zhì)交換問題1:常用胰蛋白酶分散細(xì)胞，這說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是什么成分？用胃蛋白酶行嗎？說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就失去活性，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，所以用胃蛋白酶不行。問題2:胰蛋白酶真的不會把細(xì)胞消化掉嗎，為什么？細(xì)胞膜的成分中含有蛋白質(zhì)，而胰蛋白酶能夠水解蛋白質(zhì)，因此，胰蛋白酶會把細(xì)胞消化掉。因此，胰蛋白酶處理的時間不能太長。取動物組織分散成單個細(xì)胞傳代培養(yǎng)用機械法或用胰蛋白酶、膠原蛋白酶等處理細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)加培養(yǎng)液在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶內(nèi)解決懸浮生長貼壁生長(大多數(shù)）細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、營養(yǎng)物質(zhì)缺乏等接觸抑制細(xì)胞分裂受阻②制成細(xì)胞懸液，分瓶培養(yǎng)①收集細(xì)胞①原代培養(yǎng)：指動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)。②傳代培養(yǎng)：分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)。③接觸抑制：當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞停止分裂增殖的現(xiàn)象。由于細(xì)胞之間有接觸抑制的特性，一般的正常細(xì)胞并不重疊于其他細(xì)胞之上生長，而是單層生長。癌細(xì)胞由于無接觸抑制而能夠繼續(xù)移動和增殖，導(dǎo)致細(xì)胞向三維空間擴展，發(fā)生堆積。是否接觸抑制可作為區(qū)別正常細(xì)胞與癌細(xì)胞的標(biāo)志之一。動物細(xì)胞培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)的概念和原理動物細(xì)胞培養(yǎng)的條