鹽堿化土壤作物品種篩選與評價技術規(guī)程

1鹽堿化土壤作物品種篩選與評價技術規(guī)程本文件規(guī)定了耐鹽堿作物品種萌發(fā)期、苗期耐鹽堿性鑒定、鑒定方法及耐鹽堿性評價標準。本文件適用于玉米、向日葵、大豆等耐鹽堿作物品種種質(zhì)資源的耐鹽堿性快速鑒定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T3543農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程GB/T3543.4農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程發(fā)芽試驗GB4404.1糧食作物種子第1部分：禾谷類3術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1耐鹽堿saline-alkalinetolerance指作物在鹽堿脅迫下，其生長發(fā)育和產(chǎn)量形成對鹽堿脅迫的反應能力。3.2鹽害指數(shù)saltinjuryindexofseedlings在鹽脅迫條件下，反映苗期鹽害率和鹽害程度的指標4鑒定方法4.1萌發(fā)期耐鹽堿性鑒定4.1.1種子準備種子純度、凈度、水分應符合GB/T4404.1中對作物種子質(zhì)量的要求。種子發(fā)芽率大于95%，禁止包衣或拌種。挑選出籽粒飽滿一致的種子用5%次氯酸鈉浸泡15min消毒后，用蒸餾水沖洗晾干后置于培養(yǎng)皿15cm中。4.1.2脅迫處理將發(fā)芽紙放入培養(yǎng)皿中，注入混合鹽堿脅迫溶液，待發(fā)芽紙吸水飽和時，瀝去多余溶液，將種子均勻擺放在發(fā)芽紙上，種子間保持一定間距。每皿10粒種子。每隔1d用稱重法補存水分，保持各處理2相對濃度不變；在第3d重新更換一次相應處理液，第7d天觀察種子發(fā)芽情況。按當?shù)佧}漬化土壤鹽堿化土壤實際鹽分組成類型，采用NaCl、Na2SO4、NaHCO3三種單鹽混合比例按9:11:2配比。向日葵鹽堿脅迫濃度設置6個梯度，分別為：0mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、100mmol/L、125mmol/L。4.1.3性狀調(diào)查將發(fā)芽皿放入光照培養(yǎng)箱中，在每24h提供8h光照條件下，25℃恒溫培養(yǎng)，第2d、4d、6d和8d調(diào)查發(fā)芽種子數(shù)。4.1.4萌發(fā)期耐鹽堿率4.1.4.1相對發(fā)芽勢脅迫率相對發(fā)芽勢脅迫率按照公式（1）計算。Rge(%)=[(Cge-Tge)/Cge]×100(1)式中：Rge―相對發(fā)芽勢脅迫率，Cge―對照發(fā)芽勢，發(fā)芽處理后第5d統(tǒng)計種子發(fā)芽數(shù)，Tge―處理發(fā)芽勢，發(fā)芽處理后第5d統(tǒng)計種子發(fā)芽數(shù)。4.1.4.2相對發(fā)芽率脅迫率相對發(fā)芽率脅迫率按照公式（2）計算。Rgr(%)=[(Cgr-Tgr)/Cgr]×100(2)式中：Rgr―相對發(fā)芽率脅迫率，Cgr―對照發(fā)芽率，發(fā)芽處理后第7d統(tǒng)計種子發(fā)芽數(shù)，Tgr―處理發(fā)芽率，發(fā)芽處理后第7d統(tǒng)計種子發(fā)芽數(shù)。4.1.4.3相對根長脅迫率相對根長脅迫率按照公式（3）計算。Rrl(%)=[(Crl-Trl)/Crl]×100(3)式中：Rrl―相對根長脅迫率，Crl―對照根長，培養(yǎng)7d時測定，Trl―處理根長，培養(yǎng)7d時測定。4.1.4.4相對鹽堿脅迫率相對鹽堿脅迫率按照公式（4）計算。RSA(%)=[(Rge+Rgr+Rrl)/3]×100(4)式中：RSA―相對鹽堿脅迫率4.2苗期耐鹽堿性鑒定34.2.1種子處理挑選出籽粒飽滿一致的種子用5%次氯酸鈉浸泡15min消毒后，用蒸餾水沖洗晾干后置于石英砂盆播內(nèi)。4.2.2水培準備育種加速期培養(yǎng)法，挑選出發(fā)芽一直的夢萌發(fā)期幼苗，置于事先準備好的水培裝置內(nèi)中，每一個品種30株。4.2.3脅迫處理按當?shù)佧}漬化土壤鹽堿化土壤實際鹽分組成類型，采用NaCl、Na2SO4、NaHCO3三種單鹽混合比例按9:11:2配比。向日葵鹽堿脅迫濃度設置6個梯度，分別為：0mmol/L、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、250mmol/L。玉米和大豆鹽堿脅迫濃度設置6個梯度，分別為：0mmol/L、25mmol/L、50mmol/L、75mmol/L、100mmol/L、125mmol/L。4.2.3抗逆指標檢測4.2.3.1生理指標可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游離脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指標。4.2.3.2檢測方法參照《植物生理生化實驗原理和技術》，從植株頂端連續(xù)向下取3片～4片葉片。5耐鹽堿性評價標準5.1苗期耐鹽堿率(i=0,1,2,.5)（5）式中：SS──苗期耐鹽堿率；STi──苗情類別；SNi──每類苗情株數(shù)；TN──檢測樣本總株數(shù)。5.2評價標準根據(jù)耐鹽指數(shù)對材料萌發(fā)期耐鹽堿性評價，詳見下表1。4表1苗期鹽堿性分級標準0.0%～20%120.1%～40%240.1%～60%360.1%～80%480.1%～100%56綜合評價6.1因子確定對種子萌發(fā)期發(fā)芽率、萌發(fā)指數(shù)、耐鹽堿率和苗期葉片中可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、丙二醛含量、游離脯氨酸含量、超氧化物歧化酶活性等指標進行主成分分析，確定耐鹽堿性評價指標。6.2評價方法6.3隸屬度確定運用隸屬函數(shù)法對關鍵特征因子各指標進行標準化處理，然后計算隸屬函數(shù)值。反隸屬函數(shù)值計算公式:式中：Xi──各指標測定值；Xmin──各測定指標的最小值；Xmax──各測定指標的最大值。當某一指標與玉米耐鹽堿性成正相關時，用公式（1當某一指標與玉米耐鹽堿性成負相關時，則6.4權重確定采用標準差系數(shù)法，計算標準差系數(shù)，歸一化后得到每個指標的權重系數(shù)。