2025屆長(zhǎng)春市重點(diǎn)中學(xué)生物高三上期末聯(lián)考試題含解析

2025屆長(zhǎng)春市重點(diǎn)中學(xué)生物高三上期末聯(lián)考試題注意事項(xiàng)：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書(shū)寫(xiě)，字體工整、筆跡清楚。3．請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書(shū)寫(xiě)的答案無(wú)效；在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．關(guān)于同位素標(biāo)記法的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．給小白鼠提供18O2，一段時(shí)間后，在其尿液中能檢測(cè)到18OB．給植物澆灌H218O，一段時(shí)間后在周?chē)諝庵械腛2、CO2、水蒸氣中都能檢測(cè)到18OC．核DNA分子的兩條鏈都用15N標(biāo)記的一個(gè)精原細(xì)胞，放入含14N的培養(yǎng)液中完成一次減數(shù)分裂形成的四個(gè)精細(xì)胞都含有15ND．分別用含有35S和32P的兩種培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，再用上述細(xì)菌分別培養(yǎng)病毒，檢測(cè)子代病毒的放射性可區(qū)分是DNA病毒還是RNA病毒2．下列有關(guān)植物激素的敘述，正確的是（）A．不同種類(lèi)植物激素作用的靶器官可能相同，作用效果可能相反B．胚芽鞘背光側(cè)和向光側(cè)對(duì)生長(zhǎng)素的敏感程度不同導(dǎo)致了向光性的產(chǎn)生C．生長(zhǎng)素是由植物特定器官合成的微量有機(jī)物D．植物激素作為信息分子，可以直接參與細(xì)胞內(nèi)的代謝活動(dòng)3．生物學(xué)與我們的生產(chǎn)、生活息息相關(guān)，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A．硅塵能破壞溶酶體膜，使其中的水解酶釋放出來(lái)，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而使人得硅肺B．給作物施廄肥，既能防止土壤板結(jié)，又能提高CO2濃度，有利于作物增產(chǎn)C．白化病患者體內(nèi)酪氨酸酶活性降低，從而表現(xiàn)出白化癥狀D．輸入葡萄糖鹽水是治療急性腸炎病人最常見(jiàn)的方法4．2019年12月1日是第32個(gè)“世界艾滋病日”，我國(guó)宣傳活動(dòng)主題是“社區(qū)動(dòng)員同防艾，健康中國(guó)我行動(dòng)”（英文主題為“Communitiesmakethedifference”）。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．HIV病毒是能夠引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)的物質(zhì)，因此屬于抗原B．HIV病毒破壞人體的免疫系統(tǒng)，因此艾滋病患者體內(nèi)檢測(cè)不到抗體C．HIV病毒首次侵入人體后，只發(fā)生特異性免疫，而不發(fā)生非特異性免疫D．當(dāng)HIV感染后，人體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能均下降5．下列關(guān)于科學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述，錯(cuò)誤的是A．魯賓和卡門(mén)利用同位素標(biāo)記法證明光合作用產(chǎn)生的O2來(lái)自于反應(yīng)物H2OB．赫爾希和蔡斯利用同位素標(biāo)記法證明噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNAC．桑格和尼克森在他人實(shí)驗(yàn)證據(jù)的基礎(chǔ)上提出了生物膜的流動(dòng)鑲嵌模型D．薩頓和摩爾根利用假說(shuō)-演繹法證明了基因在染色體上6．將同一紫色洋蔥鱗片葉外表皮制成兩組相同的臨時(shí)裝片，分別浸潤(rùn)在甲、乙兩種溶液中，測(cè)得液泡直徑的變化情況如圖所示。下列相關(guān)敘述，正確的是A．乙種溶液的濃度大于甲種溶液的濃度B．2-6min乙溶液中細(xì)胞的吸水能力逐漸增大C．甲溶液中的溶質(zhì)分子在2min后開(kāi)始進(jìn)入細(xì)胞D．甲溶液中細(xì)胞體積與液泡體積的變化量相等二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某生態(tài)農(nóng)業(yè)園為降低污染，提高效益，構(gòu)建了一個(gè)架上結(jié)葡萄、地面喂雞、水下養(yǎng)魚(yú)的立體觀光農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)園。雞食用部分葡萄葉片、掉落的果實(shí)和葡萄天蛾幼蟲(chóng)等害蟲(chóng)，雞糞喂魚(yú)，各類(lèi)農(nóng)副產(chǎn)品供游客消費(fèi)?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）構(gòu)建該生態(tài)園依據(jù)的生態(tài)學(xué)原理有______________________________________________________。該生態(tài)園吸引了大批游客前來(lái)觀光、休閑，這體現(xiàn)了生物多樣性的_____________價(jià)值。（2）雞在該生態(tài)系統(tǒng)中共占有_____________個(gè)不同的營(yíng)養(yǎng)級(jí)，其同化的能量一部分通過(guò)呼吸作用以熱能形式散失，一部分用于____________________________________________。（3）葡萄的開(kāi)花需要光的刺激，當(dāng)日照時(shí)間達(dá)到一定程度時(shí)，葡萄才能開(kāi)花。這說(shuō)明信息傳遞的作用是_____________________________________________。（4）與自然生態(tài)系統(tǒng)相比，該生態(tài)園在遭受害蟲(chóng)侵襲后更易崩潰的原因是_____________________________________________________。8．（10分）基因工程目前已成為生物科學(xué)的核心技術(shù)，在農(nóng)牧業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生等方面有良好的應(yīng)用前景?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）基因表達(dá)載體中的復(fù)制原點(diǎn)，本質(zhì)上是一段富含A—T堿基對(duì)的DNA序列，它易與引物結(jié)合而成為復(fù)制起點(diǎn)的原理是____________。啟動(dòng)子與復(fù)制原點(diǎn)的化學(xué)本質(zhì)____________（填“相同”或“不同”），啟動(dòng)子功能的含義主要是________________________。（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，可在PCR擴(kuò)增儀中進(jìn)行的三步反應(yīng)是____________。若在PCR擴(kuò)增儀中加入模板DNA分子100個(gè)，則經(jīng)過(guò)30次循環(huán)后，DNA分子數(shù)量將達(dá)到____________個(gè)。（3）植物基因工程技術(shù)主要用于提高農(nóng)作物的抗逆能力，如抗蟲(chóng)性、抗病性等。我國(guó)的抗蟲(chóng)棉就是通過(guò)____________法導(dǎo)人抗蟲(chóng)基因____________基因培育成功的；抗病毒的轉(zhuǎn)基因小麥?zhǔn)菍?dǎo)入抗病毒基因培育的，使用最多的抗病毒基因有________________________。9．（10分）人體內(nèi)的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥。然而，為心?；颊咦⑸浯髣┝康幕蚬こ蘴-PA會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血，其原因在于t-PA與纖維蛋白結(jié)合的特異性不高。研究證實(shí)，將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血副作用。據(jù)此，先對(duì)天然的t-PA基因進(jìn)行序列改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。（注：下圖表示相關(guān)的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質(zhì)粒，新霉素為抗生素。）回答下列問(wèn)題：（1）己知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA，而絲氨酸的密碼子為UCU，因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計(jì)為_(kāi)___。（2）若t-PA改良基因的粘性末端如圖所示，那么需選用限制酶____和____切開(kāi)質(zhì)粒pCLY11，才能與t-PA改良基因高效連接，在連接時(shí)需要用到___酶。（3）應(yīng)選擇____（能／不能）在加入新霉素的培養(yǎng)基中生存并形成菌落的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，目的是____。在加入新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞并非都是目的菌株，需選擇呈____色的菌落，進(jìn)一步培養(yǎng)、檢測(cè)和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。（4）以上制造性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過(guò)程稱(chēng)為_(kāi)___工程。10．（10分）草甘膦是一種除草劑，科研人員利用基因工程技術(shù)獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。操作過(guò)程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：注：GUS基因表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)染色能從無(wú)色變成藍(lán)色（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體首先需用能產(chǎn)生不同________的限制性核酸內(nèi)切酶分別處理草甘膦抗性基因和Ti質(zhì)粒，這種處理的目的是________________________，再用________________處理。Ti質(zhì)粒的功能是________________________________________。（2）用含潮霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行圖中篩選1的目的是________________________，篩選2的目的是_________________________。（3）取某品種水稻的幼胚，先進(jìn)行________處理，然后接種到含________的培養(yǎng)基中，誘導(dǎo)形成愈傷組織，用于獲得目的植株。（4）將大腸桿菌用Ca2+溶液處理，是否完成了轉(zhuǎn)化？________（填“是”或“否”），理由是________________________________________________________。11．（15分）人血清白蛋白（HSA）是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，在維持血漿滲透壓、抗凝血等方面起著重要作用，具有重要的醫(yī)用價(jià)值。如圖是用基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。（1）為獲取HSA基因，首先要提取人血細(xì)胞中的mRNA，利用_______法合成cDNA，再利用PCR技術(shù)進(jìn)行快速擴(kuò)增，在這一過(guò)程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成_______，PCR過(guò)程中，溫度降低到55℃的目的是_________________。（2）構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體時(shí)，需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子，而不能選擇其他物種和組織細(xì)胞的啟動(dòng)子，原因可能是_________________。（3）在利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過(guò)程中，為了吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，需添加_________物質(zhì)。（4）選用大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)有____________（答出兩點(diǎn)即可）。但相比于水稻胚乳細(xì)胞，利用大腸桿菌獲得的rHSA也有一些缺點(diǎn)，請(qǐng)從生物膜系統(tǒng)的角度進(jìn)行分析_____________________。（5）利用上述方法獲得的rHSA不能直接用于臨床醫(yī)療，你推測(cè)的原因是_____________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

放射性同位素標(biāo)記法在生物學(xué)中具有廣泛的應(yīng)用：（1）用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)外殼，用32P標(biāo)記噬菌體的DNA，分別侵染細(xì)菌，最終證明DNA是遺傳物質(zhì)；（2）用3H標(biāo)記氨基酸，探明分泌蛋白的合成與分泌過(guò)程；（3）15N標(biāo)記DNA分子，證明了DNA分子的復(fù)制方式是半保留復(fù)制；（4）卡爾文用14C標(biāo)記CO2，研究出碳原子在光合作用中的轉(zhuǎn)移途徑，即CO2→C3→有機(jī)物；（5）魯賓和卡門(mén)用18O標(biāo)記水，證明光合作用所釋放的氧氣全部來(lái)自于水。【詳解】A、小白鼠吸入18O2后，18O2參與有氧呼吸第三階段產(chǎn)生H218O，故在其尿液中能檢測(cè)到18O，A正確；B、給植物澆灌H218O，H218O參與光反應(yīng)形成18O2，H218O參與有氧呼吸第二階段產(chǎn)生C18O2，因此一段時(shí)間后在周?chē)諝庵械腛2、CO2、水蒸氣中都能檢測(cè)到18O，B正確；C、兩條鏈都用15N標(biāo)記的DNA，放入含14N的培養(yǎng)液中復(fù)制一次得到的都是一條鏈15N，一條鏈14N的DNA，故完成一次減數(shù)分裂形成的四個(gè)精細(xì)胞都含有15N，C正確；D、DNA和RNA都含有32P，不含35S，分別用含有35S和32P的兩種培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，再用上述細(xì)菌分別培養(yǎng)病毒，得到的子代病毒的放射性一樣，故不能區(qū)分是DNA病毒還是RNA病毒，D錯(cuò)誤。故選D。2、A【解析】

植物激素是指由植物體內(nèi)產(chǎn)生，能從產(chǎn)生部位運(yùn)送到作用部位，并對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育有顯著影響的微量有機(jī)物。不同激素之間的作用有協(xié)同作用和拮抗作用，如脫落酸可抑制種子萌發(fā)，而赤霉素可促進(jìn)種子萌發(fā)。【詳解】A、不同植物激素作用的靶器官可能相同，但作用效果可能相反，如用一定濃度的脫落酸處理馬鈴薯塊莖，可抑制其發(fā)芽，而用一定濃度的赤霉素處理馬鈴薯塊莖，可促進(jìn)其發(fā)芽，A正確；B、胚芽鞘向光生長(zhǎng)是由于單側(cè)光照下，生長(zhǎng)素由向光側(cè)向背光側(cè)轉(zhuǎn)移，背光側(cè)比向光側(cè)生長(zhǎng)素分布多，生長(zhǎng)快，B錯(cuò)誤；C、生長(zhǎng)素是由植物特定部位合成的微量有機(jī)物，不是特定器官合成的，C錯(cuò)誤；D、植物激素只對(duì)細(xì)胞的代謝起調(diào)節(jié)作用，不直接參與細(xì)胞代謝，D錯(cuò)誤。故選A。3、C【解析】

溶酶體中含有多種水解酶（水解酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)），能夠分解很多種物質(zhì)以及衰老、損傷的細(xì)胞器，清除侵入細(xì)胞的病毒或病菌，被比喻為細(xì)胞內(nèi)的“酶?jìng)}庫(kù)”“消化系統(tǒng)”，溶酶體屬于生物膜系統(tǒng)，由高爾基體出芽形成。內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是在神經(jīng)、體液和免疫調(diào)節(jié)的共同作用下，通過(guò)機(jī)體的各器官，系統(tǒng)的分工合作，協(xié)調(diào)統(tǒng)一而實(shí)現(xiàn)的，內(nèi)環(huán)境的理化性質(zhì)包括滲透壓、溫度和酸堿度。【詳解】硅塵（SiO2）能破壞溶酶體膜，使其中的水解酶釋放出來(lái)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，最終導(dǎo)致肺功能受損，A正確；給作物施廄肥，通過(guò)微生物的分解作用，既能防止土壤板結(jié)，又能提高CO2濃度，有利于作物增產(chǎn)，B正確；白化病患者體內(nèi)不能合成酪氨酸酶，從而表現(xiàn)出白化癥狀，C錯(cuò)誤；患急性腸炎的病人會(huì)丟失大量的消化液，包括水分和無(wú)機(jī)鹽，所以脫水時(shí)需要及時(shí)補(bǔ)充水分，同時(shí)也需要補(bǔ)充體內(nèi)丟失的無(wú)機(jī)鹽，輸入葡萄糖鹽水是常見(jiàn)的治療方法，D正確；故選C。4、D【解析】

（1）病原體是指引起傳染病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲(chóng)等生物。（2）免疫分為特異性免疫和非特異性免疫。（3）艾滋病的傳播途徑主要有：性傳播、靜脈注射吸毒（與他人共用被感染者使用過(guò)的、未經(jīng)消毒的注射工具，是一種非常重要的HIV傳播途徑）、母嬰傳播（在懷孕、生產(chǎn)和母乳喂養(yǎng)過(guò)程中，感染HIV的母親可能會(huì)傳播給胎兒及嬰兒）、血液及血制品傳播（輸入被HIV污染的血液及其血液制品）等?！驹斀狻緼、HIV病毒是能夠引起機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)的生物，屬于病原體，A錯(cuò)誤；B、感染HIV病毒也能發(fā)生體液免疫，故艾滋病患者體內(nèi)能檢測(cè)到抗體，B錯(cuò)誤；C、HIV病毒首次侵入人體后，即發(fā)生特異性免疫，也發(fā)生非特異性免疫，C錯(cuò)誤；D、當(dāng)HIV感染后，T細(xì)胞受損，人體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能均下降，D正確。故選D。5、D【解析】

本題主要考查重要遺傳實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)方法、人類(lèi)對(duì)遺傳物質(zhì)的探究歷程，要求考生了解人類(lèi)對(duì)遺傳物質(zhì)的探究歷程，識(shí)記每位科學(xué)家采用的方法、實(shí)驗(yàn)過(guò)程及實(shí)驗(yàn)結(jié)論，再準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識(shí)記層次的考查?！驹斀狻眶斮e和卡門(mén)利用同位素標(biāo)記法證明光合作用產(chǎn)生的O2來(lái)自于反應(yīng)物H2O，A正確；赫爾希和蔡斯利用同位素標(biāo)記法證明噬菌體的遺傳物質(zhì)是DNA，B正確；桑格和尼克森在他人實(shí)驗(yàn)證據(jù)的基礎(chǔ)上提出了生物膜的流動(dòng)鑲嵌模型，C正確；薩頓利用類(lèi)比推理的方法提出基因在染色體上的假說(shuō)，摩爾根等人采用假說(shuō)--演繹法，通過(guò)果蠅的雜交實(shí)驗(yàn)證明了基因在染色體上，D錯(cuò)誤。故選D。6、B【解析】

分析題圖可知，在2分鐘之前，處于甲溶液中的洋蔥表皮細(xì)胞液泡的直徑減小的速度更快，因此甲溶液濃度大，A錯(cuò)誤；2-6min乙溶液中細(xì)胞的直徑不斷減小，則其吸水能力逐漸增大，B正確；甲溶液中2min后細(xì)胞已經(jīng)開(kāi)始吸收水分了，說(shuō)明在這之前溶質(zhì)分子已經(jīng)開(kāi)始進(jìn)入細(xì)胞了，C錯(cuò)誤；由于細(xì)胞壁的伸縮性很小，所以甲溶液中細(xì)胞體積與液泡體積的變化量是不相等的，D錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握植物細(xì)胞質(zhì)壁分離的原理，根據(jù)單位時(shí)間液泡直徑下降的速率判斷兩種溶液的濃度大小。二、綜合題：本大題共4小題7、物質(zhì)的循環(huán)利用、能量的多級(jí)利用直接兩生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖等生命活動(dòng)種群的繁衍離不開(kāi)信息傳遞該生態(tài)園營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，抵抗力穩(wěn)定性差【解析】

1.農(nóng)業(yè)生態(tài)工程的原理：生物群落共生原理，多種成分相互協(xié)調(diào)和促進(jìn)和功能原理以及物質(zhì)和能量多層次多途徑利用和轉(zhuǎn)化的原理。2.信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用：（1）個(gè)體：生命活動(dòng)的正常進(jìn)行，離不開(kāi)信息的作用。（2）種群：生物種群的繁衍，離不開(kāi)信息傳遞。（3）群落和生態(tài)系統(tǒng)：能調(diào)節(jié)生物的種間關(guān)系，經(jīng)維持生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定。3.生態(tài)價(jià)值：直接價(jià)值、間接價(jià)值、潛在價(jià)值。【詳解】（1）根據(jù)以上分析可知，人類(lèi)構(gòu)建該生態(tài)園依據(jù)的生態(tài)學(xué)原理主要有物質(zhì)的循環(huán)利用、能量的多級(jí)利用；該生態(tài)園吸引了大批游客前來(lái)觀光、休閑，這體現(xiàn)了生物多樣性的直接價(jià)值。（2）在該食物網(wǎng)中，由于雞食用部分葡萄葉片、掉落的果實(shí)，同時(shí)也吃葡萄天蛾幼蟲(chóng)等害蟲(chóng)，所以雞占兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)。雞同化的能量一部分通過(guò)呼吸作用以熱能形式散失，一部分用于生長(zhǎng)、發(fā)育和繁殖等生命活動(dòng)。（3）葡萄的開(kāi)花需要光的刺激，當(dāng)日照時(shí)間達(dá)到一定程度時(shí)，葡萄才能開(kāi)花。在此過(guò)程中起作用的光屬于物理信息，這說(shuō)明信息傳遞的作用是

種群的繁衍離不開(kāi)信息傳遞。（4）與自然生態(tài)系統(tǒng)相比，該生態(tài)園在遭受害蟲(chóng)侵襲后更易崩潰的原因是該生態(tài)園營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，抵抗力穩(wěn)定性差?！军c(diǎn)睛】本題考查生態(tài)系統(tǒng)的構(gòu)建原理和功能的知識(shí)點(diǎn)，要求學(xué)生掌握農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)構(gòu)建以及的生態(tài)學(xué)原理，把握生態(tài)系統(tǒng)能量流動(dòng)的過(guò)程和流經(jīng)每一營(yíng)養(yǎng)級(jí)時(shí)的去向，識(shí)記信息傳遞在生態(tài)系統(tǒng)中的作用和生物多樣性的價(jià)值以及實(shí)例，這是該題考查的重點(diǎn)。8、A-T堿基對(duì)多，相對(duì)氫鍵少，DNA易解旋相同啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄成mRNA高溫變性，低溫退火、中溫延伸100×230花粉管通道Bt毒蛋白病毒外殼蛋白基因和病毒的復(fù)制酶基因【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，每次循環(huán)可分為變性、復(fù)性、延伸三步。在循環(huán)之前，常需要進(jìn)行一次預(yù)變性，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。PCR過(guò)程為:變性，當(dāng)溫度上升到90℃以上時(shí)，氫鍵斷裂，雙鏈DNA解旋為單鏈。復(fù)性，當(dāng)溫度降低到50℃左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。延伸，溫度上升到72℃左右，溶液中的四種脫氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈。【詳解】（1）基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因、標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)等，所以復(fù)制原點(diǎn)和啟動(dòng)子化學(xué)本質(zhì)相同，都是一段特定的DNA序列。已知復(fù)制原點(diǎn)中含A-T堿基對(duì)多，因此含氫鍵少，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，易解旋，可做為復(fù)制的起點(diǎn)，而啟動(dòng)子是驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄成mRNA的。（2）PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因包括三步反應(yīng)：高溫變性（氫鍵斷裂）、低溫退火（復(fù)性）形成氫鍵和中溫延伸形成子鏈。PCR擴(kuò)增儀可以自動(dòng)調(diào)控溫度，實(shí)現(xiàn)三步反應(yīng)循環(huán)完成。PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的原理是DNA雙鏈復(fù)制，結(jié)果使DNA呈指數(shù)增長(zhǎng)，即2n（n為擴(kuò)增循環(huán)的次數(shù)），所以100個(gè)DNA分子，30次循環(huán)，使DNA數(shù)量可達(dá)到100×230個(gè)。（3）植物基因工程培育抗蟲(chóng)抗病等轉(zhuǎn)基因植物用到的抗蟲(chóng)基因有Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制劑基因等，我國(guó)的抗蟲(chóng)棉就是利用花粉管通道法導(dǎo)入Bt毒蛋白基因培育的；抗病毒基因有病毒外殼蛋白基因和病毒的復(fù)制酶基因。【點(diǎn)睛】基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的關(guān)鍵步驟，熟知基因表達(dá)載體中各部分的結(jié)構(gòu)和功能是解答本題的關(guān)鍵，最后一問(wèn)提醒學(xué)生要關(guān)注生物科學(xué)的新進(jìn)展。9、AGAXmɑⅠBglⅡDNA連接酶不能以便篩選出導(dǎo)入質(zhì)粒pCLY1I的大腸桿菌白蛋白質(zhì)【解析】

基因工程的基本操作步驟：獲取目的基因→構(gòu)建基因表達(dá)載體→導(dǎo)入受體細(xì)胞→得到轉(zhuǎn)基因生物→目的基因檢測(cè)與鑒定。蛋白質(zhì)工程可以通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求?！驹斀狻浚?）根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則，絲氨酸的密碼子為UCU，則其編碼序列為T(mén)CT，所以模板鏈的堿基序列為AGA。（2）若要質(zhì)粒pCLY11與t-PA突變基因高效連接，需質(zhì)粒和突變基因切割后產(chǎn)生黏性末端能堿基互補(bǔ)配對(duì)，t-PA突變基因切割后的黏性末端分別為：-GGCC和-CTAG，故質(zhì)粒pCLY11需要用XmaI和Bg/II切割，連接時(shí)需要應(yīng)DNA連接酶。（3）由于質(zhì)粒上以新霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，所以選擇不能再加入新霉素的培養(yǎng)基中生存并形成菌落的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，以便篩選出導(dǎo)入質(zhì)粒pCLY1I的大腸桿菌。重組質(zhì)粒的mlacZ序列被破壞，表達(dá)產(chǎn)物使細(xì)胞呈白色，故在加入新霉素的培養(yǎng)基中形成菌落的受體細(xì)胞需選擇呈白色的菌落，進(jìn)一步培養(yǎng)、檢測(cè)和鑒定，以選育出能生產(chǎn)改良t-PA蛋白的工程菌株。（4）通過(guò)對(duì)基因的改造實(shí)現(xiàn)對(duì)蛋白質(zhì)的改造，稱(chēng)為蛋白質(zhì)工程?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程和蛋白質(zhì)工程的知識(shí)，識(shí)記基因工程和蛋白質(zhì)工程的操作步驟，難點(diǎn)是對(duì)運(yùn)載體結(jié)構(gòu)的分析，10、黏性末端防止經(jīng)同一種限制酶切割后，具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相連接、Ti質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒相連接DNA連接酶Ti質(zhì)粒有T-DNA片段，將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體DNA獲得含基因表達(dá)載體的農(nóng)桿菌篩選目的基因表達(dá)的愈傷組織消毒植物激素否大腸桿菌用Ca2+

溶液處理，只成為了感受態(tài)細(xì)胞，無(wú)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞、維持穩(wěn)定和進(jìn)行表達(dá)的過(guò)程【解析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．2、目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程，稱(chēng)為轉(zhuǎn)化?！驹斀狻浚?）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，為了避免因用同一種限制酶切割后，具有相同黏性末端的目的基因和目的基因相連接、Ti質(zhì)粒和Ti質(zhì)粒相連接的情況出現(xiàn)，所以用能產(chǎn)生不同黏性末端的限制性核酸內(nèi)切酶分別處理草甘膦抗性基因和Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶處理以便獲得目的基因和質(zhì)粒正確連接的基因表達(dá)載體，Ti質(zhì)粒有T-DNA片段，能將目的基因整合到受體細(xì)胞染色體