高中生物2微生物的培養(yǎng)與應用達標測試新人教版選修1

專題2微生物的培養(yǎng)與應用

患圈遨板蒯然

（本試卷滿分100分，時間60分鐘）

一、選擇題（共15小題，每小題4分，共60分）

1.鑒別培養(yǎng)基是根據微生物的代謝特點在培養(yǎng)基中加入一些物質配制而成的，這些物質是

A.指示劑或化學藥品

B.青霉素或瓊脂

C.高濃度食鹽

D.維生素或指示劑

解析在培養(yǎng)基中加入青霉素或高濃度食鹽的目的是抑制某些微生物的生長，而加維生素，一般是為

微生物提供生長因子，起不到選擇和鑒別的作用，只有加入某種指示劑或化學藥品后，某些微生物與特定

的化學物質發(fā)生特定的化學反應，而表現出特有的菌落特征，可根據這些特征去判斷屬于哪種生物。

答案A

2.下列有關微生物的培養(yǎng)敘述錯誤的是

A.微生物在培養(yǎng)前要先對培養(yǎng)基進行滅菌處理再接種

B.培養(yǎng)液中溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑

C.純化大腸桿菌的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法

D.分離自養(yǎng)型微生物的方法是提供纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基

解析微生物培養(yǎng)前應對培養(yǎng)基先滅菌再接種，以防培養(yǎng)基被污染，A正確；酵母菌既能進行有氧呼

吸也能進行無氧呼吸，在有氧呼吸條件下大量繁殖，故溶氧量的變化會影響酵母菌的繁殖和代謝途徑，B

正確：篩選分離純化微生物的常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，C正確；用纖維素作為唯一碳源

的培養(yǎng)基是用來分離纖維素分解菌的，分離自養(yǎng)型微生物要用不加有機碳源的培養(yǎng)基，D錯誤。

答案D

3.下列操作不正確的是

A.接種前用肥皂洗雙手，再用酒精擦拭雙手

B.接種前用火焰灼燒接種環(huán)

C.培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后應立即將平板倒置

D.在酒精燈的火焰旁完成倒平板的操作

解析接種前用酒精擦拭雙手屬于消毒，A正確；接種前用火焰灼燒殺死接種環(huán)上的微生物，B正確；

培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿后，待平板冷卻凝固約5?10min后，再將平板倒過來放置，C錯誤；接種在酒精燈的

火焰旁完成屬于滅菌，防止雜菌污染，D錯誤。

答案C

4.關于微生物的相關說法正確的是

A.微生物既包含無細胞結構的生物、又包含有細胞結構的生物，既包含原核生物、又包含真核生物,

既包含單細胞生物、又包含多細胞生物

B.微生物就是形體微小、肉眼無法看見的生物

C.微生物都進行無性繁殖

D.煮沸消毒法不能殺死芽抱

解析微生物是指一切肉眼看不到或看不清楚，因而需要借助顯微鏡觀察的微小生物，包含無細胞結

構的生物、又包含有細胞結構的生物，既包含原核生物、又包含真核生物，既包含單細胞生物、又包含多

細胞生物，A正確，B錯誤；微生物的繁殖方式有兩種：無性生殖和有性生殖，C錯誤；煮沸消毒法能殺死

部分芽泡，D錯誤。

答案A

5.下列有關微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是

A.測定土壤樣品中的細菌數目，常用平板劃線法進行計數

B.在對微生物進行培養(yǎng)前，需要對微生物和培養(yǎng)基進行滅菌

C.酵母菌發(fā)酵過程產生的酒精，對其生長沒有影響

D.鑒定能分解纖維素的細菌時，需要在培養(yǎng)基中加入剛果紅染料

解析平板劃線法只能用于微生物的分離，不能用于微生物的計數，微生物的計數可以用稀釋涂布平

板法，A錯誤；在對微生物進行培養(yǎng)前，需要對培養(yǎng)基進行滅菌，但是微生物不能被滅菌，B錯誤；酵母

菌發(fā)酵過程產生的酒精，對其生長有影響，當酒精濃度達到一定值時，會對自身造成毒害，C錯誤；鑒定

能分解纖維素的細菌時，需要在培養(yǎng)基中加入剛果紅染料，D正確。

答案D

6.下列不屬于選擇培養(yǎng)基的是

A.培養(yǎng)金黃色葡萄球菌所用的加高濃度食鹽的培養(yǎng)基

B.分離自養(yǎng)型細菌所用的不含含碳有機物的培養(yǎng)基

C.加入伊紅-美藍用于檢測大腸桿菌的培養(yǎng)基

D.抑制乳酸菌而不抑制酵母菌的含抗生素的培養(yǎng)基

解析培養(yǎng)金黃色葡萄球菌培養(yǎng)基中加高濃度食鹽，只有金黃色葡萄球菌能夠耐鹽生存，其他微生物

的生存受抑制，所以屬于選擇培養(yǎng)基，A正確；不含含碳有機物的培養(yǎng)基只有自養(yǎng)型細菌能夠生存，其他

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微生物的生存受抑制，所以屬于選擇培養(yǎng)基，B正確；檢測大腸桿菌的培養(yǎng)基中加入伊紅一美藍試劑，這

樣的培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基，C錯誤；含抗生素的培養(yǎng)基，可以抑制乳酸菌的生長，而不能抑制酵母菌的

生長，所以該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，D正確。

答案C

7.將細菌放在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，它會繁殖并形成菌落（如下圖）。某實驗小組想檢驗兩種抗生素的

殺菌作用，下列哪個實驗方案最合適

解析根據題意分析本實驗的目的是檢驗兩種抗生素的殺菌作用，該實驗應遵循對照原則，即設計只

有細菌的空白對照組，實驗組是含有A抗生素和含有B抗生素，然后進行對比分析，符合分析的圖示只有

C,故C正確。

答案C

8.下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，有關敘述錯誤的是

成分含量成分含量

NaN023gFeSO,0.01g

K2HPO41g葡萄糖30g

瓊脂15gH201000mL

MgSO4?7H2O0.5g青霉素0.1萬單位

A.依物理性質劃分，該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基

B.由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌或毛

霉

C.本培養(yǎng)基中青霉素的添加滿足了微生物生長對特殊營養(yǎng)物質的要求

D.若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細菌，應除去青霉素和NaNO”并應加入尿素

解析從培養(yǎng)基成分看，配方中含有有瓊脂等凝固劑，屬于固體培養(yǎng)基；依用途劃分，該培養(yǎng)基中加

入青霉素，因此屬于選擇培養(yǎng)基，A正確；由培養(yǎng)基的原料可知，葡萄糖屬于有機碳源，因此所培養(yǎng)微生

物的同化作用類型是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌或毛霉，B正確；本培養(yǎng)基中青霉素的添加是為

了篩選能夠抗青霉素的微生物，C錯誤；若用該培養(yǎng)基分離能分解尿素的細菌，應除去青霉素和NaNOs,并

應加入尿素，D正確。

答案C

9.培養(yǎng)基是微生物生長、分離、鑒別的營養(yǎng)基礎，下列有關微生物培養(yǎng)及培養(yǎng)基的描述錯誤的是

A.微生物培養(yǎng)基的配方中必須包含的成分有碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子及瓊脂

B.不論何種培養(yǎng)基，在各成分溶化后都要進行滅菌操作，滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌

C.接種微生物常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法

D.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可以鑒定分解尿素的細菌

解析微生物培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質有碳源、氮源、水和無機鹽等，有的還需要生長因子等特殊的營

養(yǎng)，固體和半固體培養(yǎng)基需要瓊脂，液體培養(yǎng)基不需要瓊脂，A錯誤；不論何種培養(yǎng)基，在各成分溶化后

都要進行滅菌操作，滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌，B正確；篩選和分離微生物常用的接種方法有稀釋

涂布平板法和平板劃線法，C正確：以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑可以出現紅色的環(huán)帶的

菌落，說明其為分解尿素的細菌，D正確。

答案A

10.下列關于“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數實驗”的敘述，錯誤的是

A.該實驗所用培養(yǎng)基是尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基

B.一般選用10"、IO：IO'倍的稀釋液進行平板培養(yǎng)

C.每隔2d統(tǒng)計一次菌落數，選取菌落數目穩(wěn)定時的記錄作為結果

D.稱取土壤、稀釋土壤溶液、涂布平板都要在火焰旁進行

解析為了能分離出分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中只能含有尿素一種氮源，目的是淘汰不能分解尿素的

其他微生物，A正確；樣品的稀釋度越高，在平板上生成的菌落數目就越少，一般選用10'、IO)IO,倍的

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稀釋液進行平板培養(yǎng)，B正確；每隔24h統(tǒng)計一次菌落數，選取菌落數目穩(wěn)定時的記錄作為結果，C錯誤;

為了減少被雜菌感染的機會，在稱取土壤、稀釋土壤溶液、涂布平板都要在火焰旁進行，D正確。

答案C

11.在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現透明圈的菌落是

A.分解尿素的細菌B.硝化細菌

C.分解纖維素的細菌D.乳酸菌

解析纖維素分解菌可以產生纖維素酶將纖維素分解為葡萄糖，剛果紅可以與纖維素結合形成紅色的

復合物，而在纖維素分解菌的菌落周圍，由于缺少纖維素所以會出現透明圈，故C項正確，A、B、D項錯

誤。

考點：本題考查微生物的分離和培養(yǎng)的相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間的

內在聯系的能力。

答案C

12.在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用剛果紅染色法，這種方法能夠通過顏色反應直接對纖維素

分解菌進行篩選。某同學在實驗時得到了如圖所示的結果，則纖維素分解菌位于

A.①②B.③

C.②③D.①②③

解析在篩選纖維素分解菌的過程中，通常用剛果紅染色法。剛果紅與纖維素形成的紅色復合物，在

纖維素被分解后將不再存在，因此在培養(yǎng)基上會出現以纖維素分解菌為中心的透明圈，據此可判斷圖示中

的纖維素分解菌位于③。

答案B

13.從土壤中篩選纖維素分解菌的實驗設計正確的是

A.土壤取樣一梯度稀釋一稀釋涂布平板一發(fā)酵培養(yǎng)

B.土壤取樣一選擇培養(yǎng)一稀釋涂布平板一挑選菌落

C.土壤取樣一梯度稀釋一選擇培養(yǎng)一挑選菌落

D.土壤取樣一梯度稀釋一稀釋涂布平板一選擇培養(yǎng)一挑選菌落

解析從土壤中篩選纖維素分解菌的正確的流程是：土壤取樣一選擇培養(yǎng)-*稀釋涂布平板一挑選菌

落，其中選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，因此需要在稀釋涂布平板之前進行，最后根據菌落

的特征挑選纖維素分解菌。綜上分析，B項正確，A、C、D三項均錯誤。

答案B

14.下列有關分解纖維素微生物的分離的敘述，錯誤的是

A.纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵

B.對分解纖維素的微生物進行了初步篩選后，無需再進行其他實驗

C.纖維素酶的測定方法，一般是對所產生的葡萄糖進行定量測定

D.纖維素酶是一種復合酶

解析纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種，A項正確；初步篩選只是分離純化的第一步,

為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵產生纖維素酶的實驗，B項錯誤；纖維素酶的測定方法，

一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產生的葡萄糖進行定量的測定，C項正確；纖維素酶是一種復合

酶，一般認為它至少包括三種組分，即G酶、&酶和葡萄糖昔酶，D項正確。

答案B

15.有關纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基正確的敘述是

A.可以增加纖維素分解菌的濃度

B.可以減少纖維素分解菌的濃度

C.所用培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基

D.所用培養(yǎng)基是平板培養(yǎng)基

解析使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基可以增加纖維素分解菌的濃度，A正確、B錯誤；所用

培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，鑒定時需要使用固體培養(yǎng)基，C錯誤；所用培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基，鑒定時需要使用

固體培養(yǎng)基，D錯誤。

答案A

二、非選擇題（共4小題，共40分）

16.（10分）（2019?全國卷山）回答下列與細菌培養(yǎng)相關的問題。

（1）在細菌培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是（填“蛋白陳”“葡萄糖”

或“NaNO」）。通常，制備培養(yǎng)基時要根據所培養(yǎng)細菌的不同來調節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原因是

________________________________________________________________________________________O

硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上（填“能夠”或“不能”）生長，原因是

______________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

（2）用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板________（填“倒置”或“正置”）。

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(3)單個細菌在平板上會形成菌落，研究人員通?？筛鶕涞男螤?、大小、顏色等特征來初步區(qū)分

不同種的微生物，原因是.

(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經過處理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微

生物。

解析(D蛋白陳富含有機氮化合物，也含有一些維生素和糖類，能夠為微生物提供碳源和氮源，不

同細菌的生長環(huán)境不同，要為不同細菌提供不同的pH環(huán)境；硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型細菌，可以利用空

氣中的C0?作碳源，所以硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上能夠生長。

(2)為防止平板培養(yǎng)基皿蓋上的冷凝水倒流污染培養(yǎng)基，因而將平板倒置。

(3)一定培養(yǎng)條件下，不同細菌形成的菌落的特征不同，這是區(qū)分菌種的重要判斷依據。

(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經過滅菌過理，這種處理可以殺死丟棄物中所有的微生物。

答案(1)蛋白陳不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細菌可以利用空氣中的CO?作

為碳源

⑵倒置

(3)在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現出各自穩(wěn)定的菌落特征

(4)滅菌

17.(10分)(2018?課標全國I)將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。在

馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。

回答下列問題：

(DM培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制的生長，加入了鏈霉素的培

養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。

(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質，營養(yǎng)物質類型除氮源外還有

(答出兩點即可)。氮源進入細胞后，可參與合成的生物大分子有____(答也兩點即可)。

(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩

選出能產淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是，該方法能篩選出產淀粉酶微生物的原理是

__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________O

(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數量，在同一稀釋倍數下得到以

下結果：

甲同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是110、140和149,取平均值133；

乙同學涂布了3個平板，統(tǒng)計的菌落數分別是27、169和176,取平均值124。

有人認為這兩位同學的結果中，乙同學的結果可信度低，其原因是

解析本題主要考查微生物的培養(yǎng)與應用。（1）鏈霉素可抑制細菌生長，從功能上看，添加鏈霉素的

培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（2）微生物正常生長需要的營養(yǎng)物質有無機鹽、氮源、碳源等。氮源進入細胞后，

可以用于合成含氮大分子物質，如核酸、蛋白質等。（3）淀粉遇碘液顯藍色，若淀粉被水解，則產淀粉酶

的菌落周圍的淀粉被水解，形成以菌落為中心的透明圈。（4）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數目時，為保證

統(tǒng)計結果的準確性，一般選擇菌落數在30?300的平板進行計數，取結果差別不大組別的平均值，進而得

出計數結果。而乙同學的結果中，1個平板的計數結果與另2個相差懸殊，即乙同學的結果可信度低。

答案（D細菌選擇（2）碳源、無機鹽蛋白質、核酸（3）碘液淀粉遇碘液顯藍色，產淀粉酶

的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈（4）乙同學的結果中，1個平板的計數結果與另2個相差懸殊，結果

的重復性差

18.（10分）如圖表示，研究者從土壤中篩選分解尿素的細菌技術的相關實驗，請據圖回答下列問題：

（1）進行過程①和②的目的分別是和;圖中弧線箭頭上“？”的具

體操作是?

（2）進行培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調節(jié)pH的先后順序是。倒平板時，待平

板冷卻凝固后，應將平板倒過來放置，并用記號筆在皿底上標明培養(yǎng)微生物的名稱、平板上培養(yǎng)樣品的稀

釋度、制作者姓名、培養(yǎng)日期及等信息。純化菌種時為了得到單一菌落，常采用的

接種方法是和o

（3）在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入。

培養(yǎng)后，若出現_______色就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的細菌。

（4）研究者可以通過觀察培養(yǎng)形成的菌落的、隆起程度等特征，來判斷培

養(yǎng)基上是否感染了其他細菌。在實驗中，研究者每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數目，并選取菌落數目穩(wěn)定時

的記錄作為結果，這樣可以防止________________________。

解析分析過程圖：從土壤中分離尿素分解菌的流程是土壤取樣、樣品稀釋、培養(yǎng)與觀察、細菌計數。

進行過程①是利用尿素為唯一氮源進行初步選擇培養(yǎng)，進行過程②選?、龠^程培養(yǎng)的菌種再次用尿素為氮

源進行擴大培養(yǎng)，目的是增加分解尿素的細菌的數量，過程③是稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)，以鑒定并挑選

所需的分解尿素的菌落；最后通過測定胭酶的活性進一步確定分離菌種類型。

（1）結合分析可知，進行過程①和②的目的分別是選擇培養(yǎng)和增加分解尿素的細菌的數量.圖中弧線

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箭頭上“？”的具體操作是挑出菌落。

（2）進行培養(yǎng)基配制和滅菌時，為了防止調節(jié)PH過程中培養(yǎng)基被雜菌感染的機會，應先調節(jié)pH后滅

菌。倒平板時，待平板冷卻凝固后，應將平板倒過來放置，并用記號筆在皿底上標明培養(yǎng)微生物的名稱、

平板上培養(yǎng)樣品的稀釋度、制作者姓名、培養(yǎng)日期及培養(yǎng)基種類等信息。純化菌種時為了得到單一菌落，

常采用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。

（3）根據尿素的分解細菌將尿素分解后產生堿性物質氨，氨與酚紅指示劑相遇變紅的原理，需要在以

尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)后，若出現紅色就可以鑒定其含有能夠分解尿素的細菌。

（4）根據不同細菌形成的菌落特征不同，研究者可以通過觀察培養(yǎng)形成的菌落的形狀、大小、顏色、

隆起程度等特征，來判斷培養(yǎng)基上是否感染了其他細菌。研究者每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數目，并選取

菌落數目穩(wěn)定時的記錄作為結果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足導致遺漏細菌數目。

答案（1）選擇培養(yǎng)增加分解尿素的細菌的數量挑出菌落（2）先調節(jié)pH后滅菌培養(yǎng)基種類

平板劃線法稀釋涂布平板法（后兩空位置可顛倒）（3）酚紅指示劑紅（4）形狀、大小、顏色因培養(yǎng)

時間不足導致遺漏細菌數目

19.（10分）植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：

（1）分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖首

醐可將分解成?

（2）在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅（CR）時，CR可與纖維素形成_______色復合物。用含有CR的該

種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現以該