人教版高中生物選修一知識點總結(jié)（不全）

微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

一、微生物的培養(yǎng)基

1、概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

2,營養(yǎng)成分

（1）確定原則：根據(jù)微生物的需要。

（2）主要營養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、水和無機鹽。

（3）其他條件:PH、特殊營養(yǎng)和氧氣。

3、種類

（1）根據(jù)物理性質(zhì)可分液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)

基的區(qū)別是是否添加瓊脂等凝固劑。

（2）根據(jù)功能可分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基，區(qū)別如表：

種類制備方法用途舉例

選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某些化從眾多微生物中分離加入青霉素分離得到

學(xué)物質(zhì)或某種特殊的所需的微生物酵母菌和霉菌

營養(yǎng)物質(zhì)

鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種指鑒別不同種類的微生用伊紅美藍培養(yǎng)基鑒

示劑或化學(xué)藥品物別大腸桿菌（菌落呈

黑色）

4、培養(yǎng)基的制備

步驟：計算、稱量、溶化、調(diào)PH、滅菌、倒平板

思考1、培養(yǎng)基用什么方法滅菌？培養(yǎng)基滅菌后需要立即進行倒平板操作嗎？

提示1、培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。為防止燙傷，培養(yǎng)基需要冷卻到50°C左右才能

用來倒平板。

思考2、倒平板為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

提示2、通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。

思考3、平板冷凝后為什么要將平板倒置？

提示3、可以防止冷凝的水滴污染培養(yǎng)基，沖散菌落。

二、無菌技術(shù)

項目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍

消毒較為溫和的物理僅殺死物體表面煮沸消毒法日常用品

或化學(xué)方法或內(nèi)部的部分微

巴氏消毒法不耐高溫的液體

生物

（如牛奶）

化學(xué)藥劑消毒法用酒精擦拭雙手

用氯氣消毒水源

項目條件結(jié)果常用方法應(yīng)用范圍

滅菌強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所灼燒滅菌接種工具

有的微生物，包

干熱滅菌玻璃器皿、金屬

括芽抱和抱子

用具

高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基及容器

三、大腸桿菌的純化培養(yǎng)

1、原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞，使其長成單個菌落，這個菌落就是純

化的細菌菌落。

2、兩種微生物純化培養(yǎng)的方法

項目平板劃線法稀釋涂布平板法

純化原理通過連續(xù)劃線實現(xiàn)將菌液進行一系列的梯度稀

釋和涂布平板操作實現(xiàn)

注意事項每次劃線前后均需灼燒接種稀釋度要足夠高

環(huán)

菌體獲取在具有顯著的菌落特征的區(qū)從適宜稀釋度的平板上的菌

域菌落中挑取菌體落中挑取菌體

優(yōu)點可以根據(jù)菌落的特點獲得某既可以獲得單細胞菌落，又能

種微生物的單細胞菌落對微生物計數(shù)

缺點不能對微生物計數(shù)操作復(fù)雜需要涂布多個平板

3、菌種的保藏方法

（1）臨時保藏法：對于頻繁使用的菌種，先接種到固體斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入4℃

的冰箱中保藏。

（2）甘油管藏法：對于需要長期保存的菌種，先將菌液轉(zhuǎn)入滅菌后的甘油中，混合后放在

-20℃冷凍冰箱中保存。

思考1、微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法嗎？

提示1、不是。微生物的接種方法還包括斜面接種、刺穿接種等。微生物接種的核心是防止

雜菌的污染，保證培養(yǎng)物的純度。

思考2、平板劃線法中有那幾次灼燒接種環(huán)？其目的相同嗎？

灼燒時間目的

取菌種前殺死接種環(huán)上原有微生物

每次劃線前殺死上次劃線后接種環(huán)上殘留菌種，使本

次劃線的菌種直接來自上次劃線末端，使

每次劃線菌種數(shù)目減少，達到分離菌株的

目的。

接種結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染

環(huán)境和感染操作者

思考3、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？

提示3、以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

思考4、在做第二次及其以后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？目

的是什么?

提示4、劃線后，線條末端細菌的數(shù)目要比線條起始處少，每次從上一次劃線的末端開始，

能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。

這樣做的目的是將聚集的菌落逐步分散以便獲得單個菌落。

四、微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)

1、微生物的選擇培養(yǎng)

原理人為提供有利于目的菌種生長的條件，同時抑制其他微生物的生長

實例①培養(yǎng)基中加入青霉素分離得到霉菌和酵母菌

②培養(yǎng)基中加入高濃度食用鹽用于分離金黃色葡萄球菌

③培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)能得到耐高溫的微生物

④以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離能分解尿素的細菌

⑤以纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基用于分離纖維素分解菌

⑥以石油作為唯一碳源的培養(yǎng)基用于分離能消除石油污染的微生物

2、微生物的計數(shù)方法

(1)顯微鏡直接計數(shù)法:

原理利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計數(shù)一定容積的樣品中微生物

的數(shù)量

方法用計數(shù)板計數(shù)

缺點不能區(qū)分死菌與活菌而使計數(shù)結(jié)果偏大

(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)：

原理當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中

的一個活菌落，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，計算樣品中的活菌數(shù)

計算公式每ml樣品中的菌落數(shù)=(c/v)xM,其中C代表某一稀釋度下平板上生長的平均

菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積(ml),M代表稀釋倍數(shù)。

操作設(shè)置重復(fù)組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結(jié)果的準確，一般選

擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù)

缺點當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，因此統(tǒng)計結(jié)果

可能偏小

3、土壤中分解尿素的細菌的計數(shù)

實驗原理(1)能合成版酶的細菌才能分解尿素

(2)配置以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長的細菌就是能分解尿素的細菌

數(shù)量統(tǒng)計(1)直接計數(shù)法(顯微鏡下用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板)

(2)間接計數(shù)法：稀釋涂布平板法

實驗流程土壤取樣---->配置土壤溶液和制備培養(yǎng)基----->系列稀釋

涂布平板與培養(yǎng)----->菌落計數(shù)

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)與發(fā)酵工程

一、果醋與果酒的制作

1、制作原理與條件

果酒制作果醋制作

菌種酵母菌醋酸菌

原理無氧呼吸產(chǎn)生酒精(1)。2、糖源充足：糖—>醋酸

(2)有。2、缺少糖源：乙醇—乙醛

醋酸

條溫度酒精發(fā)酵18-25℃最適為30-35℃

件

空氣前期：需氧需充足的氧氣

后期：不需氧

時間10-12d7-8d

2、制作流程

3、果酒、果醋發(fā)酵裝置

(1)通用裝置

裝置圖結(jié)構(gòu)目的

進氣「充氣口醋酸發(fā)酵時連接充氣泵，

輸入無菌空氣；制酒時關(guān)

排氣口

閉充氣口

排氣口用來排出C0

月2

-超J——

出料口￡_-?,■長而彎曲的膠管防止空氣中微生物的污染

圖1出料口便于取料，及時檢測發(fā)酵

進行的情況

（2）裝置分析

a、因酵母菌的繁殖需要空氣，醋酸菌是好氧菌，所以在果酒制作的前期和果醋制作的

整個過程中都需氧。因酵母菌產(chǎn)生酒精是在無氧條件下進行的，故應(yīng)控制充入氧的量，應(yīng)在

充氣口設(shè)置開關(guān)。

b、由于酒精發(fā)酵過程中產(chǎn)生CO2,因此又需設(shè)排氣口；為防止空氣中微生物的污染，排氣

口應(yīng)連接一個長而彎的膠管。

C、因要對發(fā)酵的情況進行及時監(jiān)測，故應(yīng)設(shè)置出料口便于取料。

思考1、你認為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先出去枝梗？為什么？

提示1、應(yīng)該先沖洗葡萄然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增加被雜菌污

染的機會。

思考2、你認為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？

提示2、要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并進行酒精消毒；每

次排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。

思考3、制葡萄酒時，為什么要將溫度控制在18~25支?制葡萄醋時，為什么要將溫度控制在

30~35℃?

提示3、溫度是酵母菌、醋酸菌生長和發(fā)酵的重要條件。20。（：左右最適合酵母菌的繁殖和發(fā)

酵，因此制葡萄酒時一般將溫度控制在18~25。（：；醋酸菌的最適生長溫度為30~35度，因此

制葡萄醋時要將溫度控制在30~35?？?/p>

思考4、為什么葡萄酒常呈深紅色？

提示4、在發(fā)酵過程中，隨著酒精度數(shù)的提高，紅葡萄皮的色素進入發(fā)酵液，使葡萄酒呈深

紅色。

二、腐乳的制作

1、菌種：主要是霉菌

2、原理

雷白酶

（1）蛋白質(zhì)_________________>肽、氨基酸

（1）脂肪脂肪