激光共聚焦顯微鏡技術(shù)說明

激光共聚焦顯微鏡技術(shù)說明序號具體技術(shù)(參數(shù))要求1一、配置清單：1、全電動倒置熒光顯微鏡主機1臺；2、激光器（405nm，488nm，543nm，639nm）及控制器1套；3、全復(fù)消色差物鏡（10x/0.45,20x/0.8,40x/0.95,63x/1.4）1套；4、熒光檢測器4個；5、透射光檢測器1個；6、控制和分析軟件1套；7、工作站1套；8、防震臺1張。2二、技術(shù)參數(shù)1.激光器部分1.1激光器：全部采用固體激光器，含二極管激光器405nm：額定功率≥30mW；二極管激光器488nm：額定功率≥30mW；二極管激光器543nm：額定功率≥25mW；二極管激光器639nm：額定功率≥25mW。1.2軟件可以直接調(diào)節(jié)所有激光器開關(guān)以及強度，并具有實驗中未使用自動進入關(guān)閉狀態(tài)（Switchoff）功能。2.掃描模塊2.1掃描器與顯微鏡一體化設(shè)計，一體化像差及色差校正。所有掃描器組件都直接耦合，無光纖連接。2.2掃描頭，檢測器，掃描模塊中的電子部件，均采用液態(tài)制冷方式，動態(tài)反饋系統(tǒng)保證溫度穩(wěn)定，減少信號干擾。2.3獨立的405激光校正，保證其與其他激光在XYZ精確吻合。2.4主分色鏡采用雙轉(zhuǎn)輪設(shè)計，10°小角度入射二向色鏡分光，最高可達100種激發(fā)光譜線組合方式。2.5主分色鏡對激光壓制達到99.99999%以上（OD7）。2.6復(fù)消色差針孔，針孔大小可直接軟件調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)范圍0.0-8Airyunits。2.7掃描分辨率：所有通道同時使用時，各通道均可達到8192x8192的分辨率。2.8掃描速度：13幅/秒（512x512像素）；線掃描速度6830線/秒（512x1像素，16位）。2.9線性分光，光譜范圍380-750nm。2.10熒光檢測器個數(shù)及類型：≥4個，包含≥2個超高靈敏度檢測器；≥2個PMT檢測器。2.11內(nèi)置檢測器收集范圍的精度和步進均為1nm可調(diào)。2.12具有實時電路系統(tǒng)（Realtime）監(jiān)控掃描過程，同步及數(shù)據(jù)采集，可選擇使用16位和8位A/D轉(zhuǎn)換的動態(tài)范圍。2.13在實時掃描預(yù)覽方式下（掃描過程中），均可以進行左右360°任意旋轉(zhuǎn)掃描線的方向，同時可以變倍以及移動掃描區(qū)域的中心。2.14Galvo掃描振鏡數(shù)量≤2個，減少激發(fā)熒光信號的折射損失，采用超快線掃及幀飛回技術(shù)。2.15掃描光學(xué)變倍：可以做≤0.7x的變倍掃描，且變倍連續(xù)可調(diào)。2.16熒光光譜分辨率：在全熒光檢測范圍內(nèi)光譜分辨率≤3nm。3.超高分辨率部分3.1超高分辨率檢測器采用≥4個組成的高靈敏度面陣列檢測器。3.2分辨率XY方向上≤120nm。3.3超高分辨率多通道成像：可以靈活選擇熒光收集波段。3.4超高分辨率成像可使用激光器波段：405nm，488nm，543nm，639nm。3.5熒光樣品制備：無需選擇特定的熒光標記物，常規(guī)的激光共聚焦樣品都可以進行超高分辨率成像。3.6超高分辨率成像深度：同一樣品具有與共聚焦相同的超高分辨率成像深度。4.顯微鏡主機4.1顯微鏡內(nèi)置電動調(diào)焦驅(qū)動馬達，最小步進≤10nm。4.2全電動掃描臺，最小步進0.1μm，具有獨立的控制器及操控手柄。4.3全套微分干涉部件（DIC），有與不同數(shù)值孔徑的物鏡一一對應(yīng)的棱鏡。4.4多功能長工作距離電動聚光鏡，數(shù)值孔徑≥0.55。4.5物鏡：10x干鏡，數(shù)值孔徑≥0.45；20x干鏡，數(shù)值孔徑≥0.8；40x干鏡，數(shù)值孔徑≥0.95；同時滿足工作距離≥250微米；63x油鏡，數(shù)值孔徑≥1.4；工作距離≥190微米。4.6配有專業(yè)共聚焦顯微鏡系統(tǒng)防震裝置。4.7配有專業(yè)共聚焦顯微鏡工作站系統(tǒng)。5.軟件部分及圖像工作站5.1智能化光路設(shè)置：通過選擇樣品的染料標記，提供3種光路配置模式，一鍵自動設(shè)置所有的光路。5.2自動預(yù)掃描功能，可以自動、快速設(shè)定掃描參數(shù)，減少熒光淬滅。5.3自動聚焦模塊：自動尋找樣品中的最佳聚焦位置，適用于透射光、反射光和熒光。5.4多維獲取圖像獲?。喊ǘ嗤ǖ罒晒?、Z軸序列掃描、時間序列掃描、區(qū)域掃描、旋轉(zhuǎn)掃描、變倍掃描、光譜掃描、多點掃描和大視野拼圖掃描等。5.5Z軸深度補償功能，自動補償由于樣品深度增加造成的信號衰減。5.6共定位分析模塊：對多通道熒光圖像中兩個通道之間的共定位進行定量分析。包括共定位系數(shù)，曼德爾系數(shù)，皮爾森系數(shù)等。5.7REUSE（重復(fù)調(diào)用）功能。再次調(diào)用存儲在每張圖像里的所有的拍照參數(shù)來重現(xiàn)實驗及進行精確對比。5.8三維圖像處理：3D和4D圖像渲染，有四種渲染方式（陰影、表面、透明及最大強度投影）并可進行不同渲染方式的結(jié)合（如透明結(jié)合表面渲染）；可實現(xiàn)三維空間的距離和角度測量；自定義式的3D和4D視頻制作與導(dǎo)出。

5.9交互式漂白，在進行圖像采集的同時（包括連續(xù)掃描和時間序列實驗），通過鼠標點擊對指定任意區(qū)域進行漂白。適用于主動光活化實驗、光轉(zhuǎn)化實驗或者快速光漂白實驗等。5.10光譜掃描及拆分功能，可以去除自發(fā)熒光，及熒光串?dāng)_。5.11圖像分析功能：具備直方圖分析和任意線的序列測量，長度、角度、面積、強度等的測量；定量的共定位分析；可根據(jù)要求編輯測量程序，對自定義的類和子類進行圖像分割、計數(shù)和面積、強度等的測量，并將結(jié)果以表格、列表和散點圖/直方圖形式顯示；可進行批量圖像分析。5.12圖像反卷積處理功能（Deconvolution）：提供≥3種圖像反卷積（Deconvolution）方式用于圖像處理，提高圖像的信噪比、對比度和分辨率。5.13原廠免費的離線圖像處理軟件：用于查看該設(shè)備拍攝的顯微圖像，調(diào)節(jié)對比度，對圖像添加標尺及標注；可進行常見的文件格式的數(shù)據(jù)導(dǎo)入/導(dǎo)出（如：JPEG,BMP,TIFF,BigTIFF,PNG,WDP,SUR,AVI,WMF,MOV,OME-TIF,ZVI）；具有≥1種二維圖像去模糊功能，可利用二維去模糊算法進