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文檔簡介

選修一生物技術(shù)實(shí)踐

課題1果酒和果醋的制作

五、實(shí)驗(yàn)案例

制作葡萄酒和葡萄醋

建議將實(shí)驗(yàn)安排在秋季的9月或10月進(jìn)行。在這段時(shí)間內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),有如下優(yōu)點(diǎn):(1)正值收獲

季節(jié),葡萄的價(jià)格便宜,品種多樣;(2)此時(shí)葡萄上的酵母菌數(shù)量多且生活力強(qiáng),發(fā)酵釀酒的效

果好;(3)溫度適宜,發(fā)酵現(xiàn)象非常明顯。實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。

L對(duì)發(fā)酵瓶、紗布、榨汁機(jī)、盛葡萄汁的器皿等實(shí)驗(yàn)用具進(jìn)行清洗并消毒。先用溫水反復(fù)沖洗幾次,

再用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精擦拭消毒,晾干待用。

2.取葡萄500g,去除枝梗和腐爛的子粒。

3.用清水沖洗葡萄1~2遍除去污物,注意不要反復(fù)多次沖洗。

4.用榨汁機(jī)榨取葡萄汁后,將其裝入發(fā)酵瓶中(裝置參見教材圖l-4b),或?qū)⑵咸汛虺蓾{后,用

潔凈的紗布過濾至發(fā)酵瓶中,蓋好瓶蓋。如果沒有合適的發(fā)酵裝置,可以用500mL的塑料瓶替

代,但注入的果汁量不要超過塑料瓶總體積的2/30

5.將發(fā)酵瓶置于適宜的溫度下發(fā)酵。

6.由于發(fā)酵旺盛期CO2的產(chǎn)量非常大,因此需要及時(shí)排氣,防止發(fā)酵瓶爆裂。如果使用簡易的發(fā)

酵裝置,如瓶子(最好選用塑料瓶),每天要擰松瓶蓋2~4次,進(jìn)行排氣。

7.10d以后,可以開始進(jìn)行取樣檢驗(yàn)工作。例如,可以檢驗(yàn)酒味、酒精的含量、進(jìn)行酵母菌的鏡

檢等工作。

8.當(dāng)果酒制成以后,可以在發(fā)酵液中加入醋酸菌或醋曲,然后將裝置轉(zhuǎn)移至30-35P的條件下發(fā)

酵,適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。如果找不到醋酸菌菌種或醋曲,可嘗試自然接種,但效果不是很好。如

果沒有充氣裝置,可以將瓶蓋打開,在瓶口蓋上紗布,以減少空氣中塵土等的污染。

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)果酒的制作是否成功

發(fā)酵后取樣,通過嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定。此外,還可用顯微鏡觀察酵母菌,并用重絡(luò)酸鉀檢驗(yàn)

酒精的存在。如果實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想,請學(xué)生分析失敗原因,然后重新制作。

(二)果醋的制作是否成功

首先通過觀察菌膜的形成、嗅味和品嘗進(jìn)行初步鑒定,再通過檢測和比較醋酸發(fā)酵前后的pH作進(jìn)

一步的鑒定。此外,還可以通過在顯微鏡下觀察發(fā)酵液中是否有醋酸菌,并統(tǒng)計(jì)其數(shù)量作進(jìn)一步鑒

定。

七、答案和提示

(-)旁欄思考題

L你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?

答:應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。

2.你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?

提示:需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮。例如,榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)

只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。

3.制葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在18-25℃?制葡萄醋時(shí),為什么要將溫度控制在30~

35℃?

答:溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20°C左右最適合酵母菌繁殖。因此需要將溫度控制在

其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為30~35℃,因此要將溫度控制在30~

35℃o

4.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過充氣口充氣?

答:醋酸菌是好氧菌,在將酒精變?yōu)榇姿釙r(shí)需要氧的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。

(二)[資料]發(fā)酵裝置的設(shè)計(jì)討論題

請分析此裝置中的充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的

膠管與瓶身連接?結(jié)合果酒、果醋的制作原理,你認(rèn)為應(yīng)該如何使用這個(gè)發(fā)酵裝置?

答:充氣口是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的;排氣口是在酒精發(fā)酵時(shí)用來排出CO2的;

出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個(gè)長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物

的污染,其作用類似巴斯德的鵝頸瓶。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口

連接氣泵,輸入氧氣。

(三)練習(xí)

2提示:大規(guī)模生產(chǎn)時(shí)需要進(jìn)行更為全面周詳?shù)目紤],如原料的來源與選擇、菌種的培育與選擇、

發(fā)酵的設(shè)備、發(fā)酵條件的自動(dòng)化控制,以及如何嚴(yán)格控制雜菌污染;等等。此外,無論是葡萄酒或

葡萄醋,實(shí)驗(yàn)時(shí)所檢測的發(fā)酵液,并非商品意義上的產(chǎn)品。在實(shí)際生產(chǎn)中還需沉淀過濾、滅菌裝瓶

等獲得成品酒或醋。葡萄酒還需在一定設(shè)施和條件下(如橡木桶和地窖)進(jìn)行后續(xù)發(fā)酵,以獲得特

定的風(fēng)味和色澤。

3提示:需考慮廠房、設(shè)備投資、原材料采購、工人人數(shù)及工資、產(chǎn)品種類、生產(chǎn)周期、銷售渠

道、利潤等問題。

課題2腐乳的制作

五、實(shí)驗(yàn)案例

制作腐乳

實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。

L將豆腐切成3cmx3cmx1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70%左右,水分過多則腐乳不易成

形。水分測定方法如下。

精確稱取經(jīng)研缽研磨成糊狀的樣品5~10g(精確到0.02mg),置于已知重量的蒸發(fā)皿中,均勻攤

平后,在100~105°C電熱干燥箱內(nèi)干燥4h,取出后置于干燥器內(nèi)冷卻至室溫后稱重,然后再烘

30min,直至所稱重量不變?yōu)橹埂?/p>

樣品水分含量(%)計(jì)算公式如下。

(烘干前容器和樣品質(zhì)量-烘干后容器和樣品質(zhì)量)/烘干前樣品質(zhì)量

2.將豆腐塊平放在鋪有干粽葉的盤內(nèi),粽葉可以提供菌種,并能起到保溫的作用。每塊豆腐等距離

排放,周圍留有一定的空隙。豆腐上面再鋪上干凈的粽葉。氣候干燥時(shí),將平盤用保鮮膜包裹,但

不要封嚴(yán),以免濕度太高,不利于毛霉的生長。

3.將平盤放入溫度保持在15~18℃的地方。毛霉逐漸生長,大約5d后豆腐表面叢生著直立菌

絲。

4.當(dāng)毛霉生長旺盛,并呈淡黃色時(shí),去除包裹平盤的保鮮膜以及鋪在上面的粽葉,使豆腐塊的熱量

和水分能夠迅速散失,同時(shí)散去霉味。這一過程一般持續(xù)36h以上。

5.當(dāng)豆腐涼透后,將豆腐間連接在一起的菌絲拉斷,并整齊排列在容器內(nèi),準(zhǔn)備腌制。

6.長滿毛霉的豆腐塊(以下稱毛坯)與鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)比為5:1。將培養(yǎng)毛坯時(shí)靠近平盤沒長直立菌

絲的一面統(tǒng)一朝向玻璃瓶邊,將毛坯分層盤立擺放在容器中。分層加鹽,并隨層加高而增加鹽量,

在瓶口表面鋪鹽厚些,以防止雜菌從瓶口進(jìn)入。約腌制8do

7.將黃酒、米酒和糖,按口味不同而配以各種香辛料(如胡椒、花椒、八角茴香、桂皮、姜、辣椒

等)混合制成鹵湯。鹵湯酒精含量控制在12%左右為宜[注]。

[注]酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長短有很大關(guān)系。酒精含量越高,對(duì)蛋白酶的抑制作

用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖

快,豆腐易腐敗,難以成塊。

8.將廣口玻璃瓶刷干凈后,用高壓鍋在100℃蒸汽滅菌30min。將腐乳咸坯擺入瓶中,加入鹵湯

和輔料后,將瓶口用酒精燈加熱滅菌,用膠條密封。在常溫情況下,一般六個(gè)月可以成熟。

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)是否完成腐乳的制作

學(xué)生是否完成腐乳的制作依據(jù)是:能夠合理地選擇實(shí)驗(yàn)材料與用具;前期發(fā)酵后豆腐的表面長有菌

絲,后期發(fā)酵制作基本沒有雜菌的污染。

(二)腐乳質(zhì)量的評(píng)價(jià)

制作成功的腐乳應(yīng)該具有以下特點(diǎn):色澤基本一致、味道鮮美、咸淡適口、無異味、塊形整齊、厚

薄均勻、質(zhì)地細(xì)膩、無雜質(zhì)。

(三)能否總結(jié)不同條件對(duì)腐乳風(fēng)味和質(zhì)量的影響。

學(xué)生能從鹽、酒的用量、發(fā)酵的溫度、發(fā)酵時(shí)間的長短,以及香辛料等因素中的某一因素來說明其

對(duì)腐乳風(fēng)味或質(zhì)量的影響。

七、答案和提示

(-)旁欄思考題

L你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長白毛是怎么一回事?

答:豆腐上生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。

2.王致和為什么要撒許多鹽,將長毛的豆腐腌起來?

答:鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。

3.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?

答:含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形。

4.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的"皮"。這層"皮"是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有害

嗎?它的作用是什么?

答:"皮"是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的"體",使腐乳

成形。"皮"對(duì)人體無害。

(二)練習(xí)

1.答:越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口

的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。

課題3制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)泡菜腌制的質(zhì)量如何

可以根據(jù)泡菜的色澤和風(fēng)味進(jìn)行初步的評(píng)定,還可以在顯微鏡下觀察乳酸菌形態(tài),比較不同時(shí)期泡

菜壇中乳酸菌的含量。

(二)亞硝酸鹽含量的測定

配制的亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液與樣品液顯色后,目測比色效果如何,是否與標(biāo)準(zhǔn)液的濃度相吻合。如

果不吻合,還應(yīng)在已知濃度范圍內(nèi),改變濃度梯度,進(jìn)一步配制標(biāo)準(zhǔn)使用液。

(三)是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄

在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過程中,應(yīng)及時(shí)對(duì)泡菜中亞硝酸鹽含量進(jìn)行鑒定,比較不同時(shí)期亞硝酸鹽含量的變化及

其對(duì)泡菜質(zhì)量的影響。

七、答案和提示

(-)旁欄思考題

L為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶?

答:酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用。抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長,因此含有抗生

素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。

2.為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不吃存放時(shí)間過長、變質(zhì)的蔬菜?

答:有些蔬菜,如小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐

爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。

3.為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長一層白膜?你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的?

答:形成白膜是由于產(chǎn)膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營養(yǎng)豐富,其表面氧

氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。

(二)練習(xí)

2.答:果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵,果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿?/p>

的代謝,腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類,泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)

酵。

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)都巧妙地利用了天然菌種,都為特定的菌種提供了良好的生存條件,最終的發(fā)酵產(chǎn)物

不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物。

課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

五、實(shí)驗(yàn)安排及注意事項(xiàng)

(-)從菌種保藏中心購買菌種后,教師首先需要用平板劃線法純化培養(yǎng)所得菌種,并根據(jù)學(xué)生小

組的數(shù)目,準(zhǔn)備好數(shù)個(gè)平板。

(二)第1課時(shí)完成基礎(chǔ)知識(shí)的教學(xué),學(xué)習(xí)各種操作方法,并制備培養(yǎng)基。高壓蒸汽滅菌所需要的

時(shí)間較長,因此需要利用課下時(shí)間完成。課下完成后,再于第2課時(shí)完成大腸桿菌的純化培養(yǎng)。此

后安排學(xué)生連續(xù)觀察記錄3~4d。

(三)配制培養(yǎng)基時(shí),教師需要提示學(xué)生按照每個(gè)培養(yǎng)基消耗15-20mL的量來估算總用量。全

班同學(xué)的培養(yǎng)基可以集中起來,分批滅菌。

(四)滅菌后,培養(yǎng)基冷卻到55°C后應(yīng)及時(shí)進(jìn)行倒平板操作。如果不能及時(shí)操作,需要將培養(yǎng)基

放到55(左右的電熱箱中保溫,以防止瓊脂凝固。

(五)如果打算做本專題的第2或第3課題,建議此課題不僅要練習(xí)平板劃線操作,還要練習(xí)稀釋

涂布平板法操作。為此,教師需要提前1天用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,培養(yǎng)一夜后,于第2天將

培養(yǎng)液分發(fā)到各小組。

(六)實(shí)驗(yàn)后,所有用過的培養(yǎng)基、培養(yǎng)液等都需要統(tǒng)一進(jìn)行高壓蒸汽滅菌后再丟棄,否則將會(huì)造

成環(huán)境污染。

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)培養(yǎng)基的制作是否合格

如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2d后無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需

要重新制備。

(二)接種操作是否符合無菌要求

如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說明接種

操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說明接種過程中,無菌操作還未達(dá)到要求,

需要分析原因,再次練習(xí)。

(三)是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄

培養(yǎng)12h與24h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同,及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn),并

能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。

七、答案和提示

(-)旁欄思考題

1.無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的?

答:無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。

2.請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請選擇合適的方法。

(1)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿

(2)玻棒、試管、燒瓶和吸管

(3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手

答:(1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒。

(二)倒平板操作的討論

L培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50℃左右時(shí),才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫

度?

提示:可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒

平板了。

2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰?

答:通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。

3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置?

答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以

使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。

4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微

生物嗎?為什么?

答:空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生

物。

(三)平板劃線操作的討論

L為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接

種環(huán)嗎?為什么?

答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒

接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接

來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到

菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作

者。

2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線?

答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。

3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?

答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的

數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。

(四)涂布平板操作的討論

涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第

2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?

提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證"無菌"。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸

任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。

(五)練習(xí)

L提示:可以從微生物生長需要哪些條件的角度來思考。例如,微生物的生長需要水、空氣、適宜

的溫度,食品保存可以通過保持干燥、真空的條件,以及冷藏等方法來阻止微生物的生長。

2提示:可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。例如,這三種培養(yǎng)技

術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營養(yǎng),但無土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無菌的條件,而其他兩種

技術(shù)都要求嚴(yán)格的無菌條件。

3提示:這是一道開放性的問題,答案并不惟一,重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與,從不同的角度思考

問題。例如,正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門獨(dú)立的學(xué)科;

巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品

的保存等。

課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

四、研究思路

(-)篩選菌株

微生物的選擇培養(yǎng),是指利用培養(yǎng)基的組成使適宜生長的特定微生物得到較快繁殖的技術(shù),也稱為

微生物的“選擇培養(yǎng)"。在本課題提供的選擇培養(yǎng)基的配方中,尿素是培養(yǎng)基中的惟一氮源,因

此,原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。但實(shí)際上,微生物的培養(yǎng)是一個(gè)非常復(fù)雜的問

題,有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖,因此能夠在選擇培養(yǎng)基上生長的微生物

不一定是所需要的微生物,還需要進(jìn)一步的驗(yàn)證。

(二)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目

統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的理論依據(jù)是:當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落,來源于樣品

稀釋液中的一個(gè)活菌。因此,恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅晒Φ亟y(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,通

常將幾個(gè)稀釋度下的菌液都涂布在平板上,培養(yǎng)后再選擇菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

教材中用楷體字編排的實(shí)例是為了說明設(shè)置重復(fù)組的重要性。第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板,沒有

設(shè)置重復(fù)組,因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題,涂布了3個(gè)平板,但

是,其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn),說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,因此,不能

簡單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。這個(gè)實(shí)例啟示學(xué)生,在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí),一定要涂布至少3

個(gè)平板,作為重復(fù)組,才能增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。在分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),一定要考慮所設(shè)置的

重復(fù)組的結(jié)果是否一致,結(jié)果不一致,意味著操作有誤,需要重新實(shí)驗(yàn)。

(三)設(shè)置對(duì)照

A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同,可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同,二是由于培養(yǎng)基污染或操

作失誤。究竟是哪個(gè)原因,可以通過實(shí)驗(yàn)來證明。實(shí)驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用

與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果結(jié)果與A同學(xué)一致,則證明A無誤;如果結(jié)果不同,則證明A

同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況

下進(jìn)行培養(yǎng),作為空白對(duì)照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過這個(gè)事例可以看出,實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有

說服力,對(duì)照的設(shè)置是必不可少的。

五、實(shí)驗(yàn)案例

土壤中某樣品細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。

L土壤取樣從肥沃、濕潤的土壤中取樣。先鏟去表層土3cm左右,再取樣,將樣品裝入事先準(zhǔn)備

好的信封中。

2.制備培養(yǎng)基準(zhǔn)備牛肉膏蛋白月東培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基將菌液稀釋相同的倍數(shù),在牛肉膏蛋白月東培

養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目,因此,牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基可以作為對(duì)

照,用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。由于初次實(shí)驗(yàn),對(duì)于稀釋的范圍沒有把握,因此選

擇了一個(gè)較為寬泛的范圍:稀釋倍數(shù)為103~107.每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基,1個(gè)牛肉

膏蛋白陳培養(yǎng)基,因此共需要15個(gè)選擇培養(yǎng)基,5個(gè)牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基。此外,還需要準(zhǔn)備8

個(gè)滅菌的試管和1個(gè)滅菌的移液管。

3彳微生物的培養(yǎng)與觀察參考課本中圖2-7的實(shí)驗(yàn)流程示意圖,將10g土樣加入盛有90mL無菌生

理鹽水的錐形瓶中(錐形瓶體積為250mL),充分搖勻,吸取上清液1mL,轉(zhuǎn)移至盛有9mL的

生理鹽水的無菌大試管中,依次等比稀釋至107稀釋度,并按照由107~103稀釋度的順序分別吸

取0.1mL進(jìn)行平板涂布操作。按照濃度從低到高的順序涂布平板,不必更換移液管。

將涂布好的培養(yǎng)皿放在30°C溫度下培養(yǎng)。隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長,會(huì)有不同的菌落產(chǎn)生。比較牛肉

膏培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基中菌落的數(shù)量、形態(tài)等,并做好記錄。

挑選選擇培養(yǎng)基中不同形態(tài)的菌落接入含酚紅培養(yǎng)基的斜面中,觀察能否產(chǎn)生如課本中圖2-10的

顏色反應(yīng)。

4.細(xì)菌的計(jì)數(shù)當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí),選取菌落數(shù)在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下,至

少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù),然后求出平均值,并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)

目。

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落

對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長,說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目

明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目,說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。

(二)樣品的稀釋操作是否成功

如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30~300的平板,則說明稀釋操作比較成功,并能夠進(jìn)行

菌落的計(jì)數(shù)。

(三)重復(fù)組的結(jié)果是否一致

如果學(xué)生選取的是同一種土樣,統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn),教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起

分析產(chǎn)生差異的原因。

七、答案和提示

(-)旁欄思考題

1.想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)?

答:統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值,然后

按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。

2.為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素

的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?

答:這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本

中:好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2185萬,放線菌數(shù)約為477萬,霉菌數(shù)約為23.1萬。因此,為

獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離,同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的

條件。

(二)練習(xí)

2提示:反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生

物多為厭氧菌,接觸空氣后會(huì)死亡,因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基

外,還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。

課題3分解纖維素的微生物的分離

五、實(shí)驗(yàn)案例

土壤中纖維素分解菌的分離

實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。

L土樣采集土樣采集的方法與本專題課題2類似。土樣的采集要選擇富含纖維素的環(huán)境,這是因

為在纖維素含量豐富的環(huán)境,通常會(huì)聚集較多的分解纖維素的微生物。如果找不到合適的環(huán)境,可

以將濾紙埋在土壤中,過一個(gè)月左右也會(huì)有能分解纖維素的微生物生長。

2.選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)需要的儀器有:250mL錐形瓶、無菌稱量瓶、藥匙、1mL和10mL的移液

管、天平、搖床、溫度計(jì)等。

培養(yǎng)基的制備參照課本旁欄中的比例配制。在250mL錐形瓶中裝入30mL培養(yǎng)基,用8層紗布做

成瓶塞,將瓶口塞緊,再在瓶塞外包裹兩層包裝紙(或報(bào)紙),用線繩扎緊,在121°C下高壓蒸

汽滅菌20min0

選擇培養(yǎng)的操作:稱取土樣20g,在無菌條件下加入裝有30mL培養(yǎng)基的搖瓶中。將搖瓶置于搖

床上,在30℃下振蕩培養(yǎng)1~2d,至培養(yǎng)基變混濁。此時(shí)可以吸取0」mL培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋

和涂布平板,也可以按課本中所述,重復(fù)選擇培養(yǎng)的步驟一次,然后再進(jìn)行梯度稀釋和涂布平板。

3.剛果紅染色法分離纖維素分解菌這一步所需要的儀器有:無菌培養(yǎng)皿、涂布器、1mL移液管,

裝有9mL無菌水的20mL大試管,溫箱等。

培養(yǎng)基的制備參照課本旁欄中的比例配制。在500mL三角瓶中裝入200mL培養(yǎng)基,在121。(:下

高壓蒸汽滅菌20min。

倒平板操作:將滅菌后的固體培養(yǎng)基熔化,按無菌操作的要求,在無菌的培養(yǎng)皿中倒入15-20mL

培養(yǎng)基,凝固后待用。

制備菌懸液:按照本專題課題1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋,稀釋最大

倍數(shù)至106。

涂布平板:將稀釋度為104~106的菌懸液各取0.1mL,滴加在平板培養(yǎng)基上,用涂布器將菌液涂

布均勻,在30℃倒置培養(yǎng),至菌落長出。每個(gè)稀釋度下需涂布3個(gè)平板,并注意設(shè)置對(duì)照。剛果

紅染色的具體操作步驟參照課本[資料三]O

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落:對(duì)照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌

落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明可能獲得了分解纖維素的微

生物。

(二)分離的結(jié)果是否一致:由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最容易

分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)

果。

七、答案和提示

(-)旁欄思考題

L本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同?

答:本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟

一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖

后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。

2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?

答:由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因

此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。

3.將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?

答:將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)

境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。

4.想一想,這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?你打算選用哪一種方法?

提示:參看本課題參考資料的內(nèi)容。

5.為什么選擇培養(yǎng)能夠"濃縮"所需的微生物?

答:在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適

應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。

(二)練習(xí)

2.答:流程圖表示如下。

土壤取樣一選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)一梯度稀釋一將

菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上一挑選單菌落一發(fā)酵培養(yǎng)

課題1植物芳香油的提取

五、實(shí)驗(yàn)案例

案例一玫瑰精油的提取

5月上、中旬是玫瑰的盛開期,最好是選用當(dāng)天采摘的鮮玫瑰花。將花瓣用清水沖洗,去掉上面的

灰塵等雜質(zhì),瀝干水分。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,從玫瑰花中提取玫瑰精油可采取水中蒸儲(chǔ)

法。本實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。

L稱取50g玫瑰花瓣,放入500mL的圓底燒瓶中,加入200mL蒸儲(chǔ)水。按教科書圖6-2所示安

裝蒸儲(chǔ)裝置。蒸儲(chǔ)裝置包括:鐵架臺(tái)兩個(gè)、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸儲(chǔ)瓶、橡膠塞、蒸儲(chǔ)頭、溫度計(jì)、

直型冷凝管、接液管、錐形瓶,以及連接進(jìn)水口和出水口的橡皮管。所有儀器必須事先干燥,保證

無水。整套蒸儲(chǔ)裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分通過加熱進(jìn)行蒸播,中部將蒸儲(chǔ)物

冷凝,右邊的部分用來接收。安裝儀器一般都按照自下而上、從左到右的順序。拆卸儀器的順序與

安裝時(shí)相反。具體安裝順序和方法如下。

(1)固定熱源一酒精燈。

(2)固定蒸儲(chǔ)瓶,使其離熱源的距離如教科書中圖6-2所示,并且保持蒸儲(chǔ)瓶軸心與鐵架臺(tái)的水

平面垂直。

(3)安裝蒸儲(chǔ)頭,使蒸儲(chǔ)頭的橫截面與鐵架臺(tái)平行。

(4)連接冷凝管。保證上端出水口向上,通過橡皮管與水池相連;下端進(jìn)水口向下,通過橡皮管

與水龍頭相連。

(5)連接接液管(或稱尾接管)。

(6)將接收瓶瓶口對(duì)準(zhǔn)尾接管的出口。常壓蒸儲(chǔ)一般用錐形瓶而不用燒杯作接受器,接收瓶應(yīng)在

實(shí)驗(yàn)前稱重,并做好記錄。

(7)將溫度計(jì)固定在蒸儲(chǔ)頭上,使溫度計(jì)水銀球的上限與蒸儲(chǔ)頭側(cè)管的下限處在同一水平線上。

2.蒸儲(chǔ)裝置安裝完畢后,可以在蒸儲(chǔ)瓶中加幾粒沸石,防止液體過度沸騰。打開水龍頭,緩緩?fù)ㄈ?/p>

冷水,然后開始加熱。加熱時(shí)可以觀察到,蒸儲(chǔ)瓶中的液體逐漸沸騰,蒸氣逐漸上升,溫度計(jì)讀數(shù)

也略有上升。當(dāng)蒸氣的頂端達(dá)到溫度計(jì)水銀球部位時(shí),溫度計(jì)讀數(shù)急劇上升。在整個(gè)蒸儲(chǔ)過程中,

應(yīng)保證溫度計(jì)的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴??刂普魞?chǔ)的時(shí)間和速度,通常以每秒

2滴為宜。蒸儲(chǔ)完畢,應(yīng)先撤出熱源,然后停止通水,最后拆卸蒸儲(chǔ)裝置,拆卸的順序與安裝時(shí)相

反。

3.收集錐形瓶中的乳白色的乳濁液,向錐形瓶中加入質(zhì)量濃度為0」g/mL的氯化鈉溶液,使乳化

液分層。然后將其倒入分液漏斗中,用分液漏斗將油層和水層完全分開。打開頂塞,再將活塞緩緩

旋開,放出下層的玫瑰精油,用接收瓶收集。向接收瓶中加入無水硫酸鈉,吸去油層中含有的水

分,放置過夜。

為了更好地將油、水兩層液體分離,操作時(shí)應(yīng)注意正確使用分液漏斗。分液漏斗的使用方法如下。

(1)首先把活塞擦干,為活塞均勻涂上一層潤滑脂,注意切勿將潤滑脂涂得太厚或使?jié)櫥M(jìn)入

活塞孔中,以免污染萃取液。

(2)塞好活塞后,把活塞旋轉(zhuǎn)幾圈,使?jié)櫥植季鶆?。并用水檢查分液漏斗的頂塞與活塞處是

否滲漏,確認(rèn)不漏水后再使用。

(3)將分液漏斗放置在大小合適的、并已固定在鐵架臺(tái)上的鐵圈中,關(guān)好活塞。將待分離的液體

從上部開口處倒入漏斗中,塞緊頂塞,注意頂塞不能涂潤滑脂。

(4)取下分液漏斗,用右手手掌頂住漏斗頂塞并握住漏斗頸,左手握住漏斗活塞處,大拇指壓緊

活塞,將分液漏斗略傾斜,前后振蕩(開始振蕩時(shí)要慢)。

(5)振蕩后,使漏斗口仍保持原傾斜狀態(tài),左手仍握在漏斗活塞處,下部管口指向無人處,用拇

指和食指旋開活塞,使其釋放出漏斗內(nèi)的蒸氣或產(chǎn)生的氣體,以使內(nèi)外壓力平衡,這一步操作也稱

做"放氣”。

(6)重復(fù)上述操作,直至分液漏斗中只放出很少的氣體時(shí)為止。再將分液漏斗劇烈振蕩2~3

min,然后將漏斗放回鐵圈中,待液體靜置分層。

案例二橘皮精油的提取

課前準(zhǔn)備

在實(shí)驗(yàn)前一天,教師需要準(zhǔn)備新鮮的、沒有霉?fàn)€的橘皮,用量可根據(jù)實(shí)驗(yàn)人數(shù)來決定。用清水沖洗

橘皮,去掉灰塵等雜質(zhì),瀝干水分后,將橘皮攤放在干燥通風(fēng)處。將晾干的橘皮浸泡在pH大于

12、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為7%~8%的石灰水中,時(shí)間為16-24h,中間翻動(dòng)2~3次。浸泡好的橘皮呈黃

色、無白芯、稍硬、脆而不斷、具有彈性。這樣的橘皮在壓榨時(shí)不易打滑,橘油的噴射力強(qiáng);壓榨

后的殘?jiān)暑w粒狀,殘?jiān)械暮康?,黏稠度不太高,過濾時(shí)比較順利,不易堵塞篩孔。

提取橘皮精油的具體步驟如下。

1.將浸泡后的橘皮,用流動(dòng)的水漂洗,洗凈后撈起、瀝干。切記一定要將橘皮徹底沖洗干凈。然后

將橘皮粉碎至3mm大小,放入家用榨汁機(jī)或手動(dòng)壓榨機(jī)中粉碎。粉碎時(shí)加入與橘皮同質(zhì)量的質(zhì)量

分?jǐn)?shù)為0.25%的小蘇打和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的硫酸鈉溶液,并調(diào)節(jié)pH為7~8。

2.在榨出的油水混合液中加入明帆,使之沉淀并變澄清,然后用布袋過濾,除去糊狀殘?jiān)T賹⒌?/p>

到的混合物,用6000r/min~8000r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行高速離心。在正常情況下,離心后獲得的香

精油將是澄清透明的。

3.分離出的香精油往往帶有少量水分和蠟質(zhì)等雜質(zhì),為了進(jìn)一步除去雜質(zhì),可以將分離的產(chǎn)品放在

5℃~10℃的冰箱中,靜置5~7d,讓雜質(zhì)與水下沉。然后用吸管吸出上層澄清的油層,再通過

墊有濾紙或石棉紙的漏斗進(jìn)行減壓抽濾,得到黃色油狀的橘皮精油。

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)是否提取出了植物精油

觀察學(xué)生提取出的玫瑰精油或橘皮精油,從顏色、氣味等方面來評(píng)價(jià)所提取的精油的純度和質(zhì)量。

從玫瑰花提取的芳香油是淺黃色至黃色的液體,并帶有甜韻的玫瑰香;從橘皮提取的橘皮精油無色

透明,具有誘人的橘香味。本課題只是對(duì)兩種精油進(jìn)行了初步的提取,其中仍然含有大量的雜質(zhì)。

(二)出油率的計(jì)算

根據(jù)教科書提供的公式計(jì)算出油率。如果出油率高,說明實(shí)驗(yàn)方案設(shè)計(jì)合理;如果出油率低,教師

可以幫助學(xué)生從實(shí)驗(yàn)方法的選擇、實(shí)驗(yàn)過程的操作等各方面分析原因,改進(jìn)后再作嘗試。

七、答案和提示

練習(xí)

L答:植物芳香油一般都是由2~3種芳香油混合調(diào)配而成的,其中的基底油常取自植物的種子或

果實(shí),比如胡桃油、甜杏油?;子团c其他芳香油調(diào)配在一起,能夠加強(qiáng)功效。

從玫瑰花中提取出的玫瑰油稱為“液體黃金",是世界香料工業(yè)不可取代的原料,多用于制造高級(jí)

香水等化妝品。提取出的玫瑰油不含有任何添加劑或化學(xué)原料,是純天然的護(hù)膚品,具有極好的抗

衰老和止癢作用,能夠促進(jìn)細(xì)胞再生、防止肌膚老化、平撫肌膚細(xì)紋,還具有使人放松、愉悅心情

的功效。

杏仁油富含礦物質(zhì)和維生素,是一種質(zhì)地輕柔、高滲透性的保濕劑。

熏衣草精油取自熏衣草花,具有怡神、助睡眠、舒緩壓力的作用,此外它還具有降壓、止痛、促進(jìn)

細(xì)胞再生的功能,可以用于治療燙傷和蚊蟲叮咬、預(yù)防和改善脫發(fā)。

檸檬精油取自檸檬果皮,具有消除緊張、焦慮、振奮精神的作用,可用于治療神經(jīng)衰弱、關(guān)節(jié)炎,

還具有促進(jìn)血液循環(huán)、殺菌止痛、平衡油脂分泌、舒緩肌膚老化、滋養(yǎng)頭發(fā)的功效。

茶樹精油具有新鮮、強(qiáng)烈的藥草香味,能改善毛孔阻塞,凈化肌膚,抗感染,對(duì)治療青春痘有奇

效。它也能消除疲勞、緩解壓力。

天竺葵精油能收斂皮膚,平衡、調(diào)理、潤滑中干性皮膚和敏感性皮膚,改善橘皮樣表皮,還有助于

恢復(fù)精力,平緩心情。

茉莉精油能防止肌膚老化,對(duì)中干性皮膚和敏感性皮膚具有良好的保濕和滋潤作用,尤其對(duì)女性的

妊娠紋和內(nèi)分泌有獨(dú)特的改善效果。

橙花精油具有清新的水果香味,不但能使人鎮(zhèn)靜,還能防止中干性肌膚的老化現(xiàn)象發(fā)生,給肌膚賦

予青春活力,促進(jìn)皮膚再生。

2.建議:教師可以組織學(xué)生進(jìn)行一次社會(huì)調(diào)查,并要求學(xué)生寫出詳細(xì)的調(diào)查報(bào)告。

課題2胡蘿I、素的提取

五、實(shí)驗(yàn)案例

胡蘿卜素的提取

提取胡蘿卜素的主要步驟如下。

L選取500g新鮮的胡蘿卜,用清水洗凈,瀝干、切碎,然后在40。(2的烘箱中烘干,時(shí)間約需2

h,將干燥后的胡蘿卜進(jìn)一步粉碎過篩。注意胡蘿卜的粉碎一定要徹底。

2.將樣品放入500mL圓底燒瓶中,加入200mL石油醍混勻,按教科書中圖6-7所示安裝萃取回

流裝置,萃取30min,然后過濾萃取液,除去固體物質(zhì)。

3才安教科書中圖6-2所示安裝蒸播裝置,對(duì)萃取的樣品進(jìn)行濃縮。具體的操作步驟及注意事項(xiàng)見本

專題課題1的案例1?

4.收集接受器中的樣品,觀察樣品的顏色和氣味,并通過紙層析進(jìn)行鑒定。層析時(shí)注意選擇干凈的

濾紙,為了防止操作時(shí)對(duì)濾紙的污染,應(yīng)盡量避免用手直接接觸濾紙,可以帶手套進(jìn)行操作。點(diǎn)樣

時(shí)應(yīng)注意點(diǎn)樣斑點(diǎn)不能太大(直徑應(yīng)小于0.5cm),如果用吹風(fēng)機(jī)吹干,溫度不宜過高,否則斑

點(diǎn)會(huì)變黃。將點(diǎn)好樣的濾紙卷成筒狀,卷紙時(shí)注意濾紙的兩邊不能相互接觸,以免因毛細(xì)管現(xiàn)象導(dǎo)

致溶劑沿濾紙兩邊的移動(dòng)加快,溶劑前沿不齊,影響結(jié)果。

六、課題成果評(píng)價(jià)

(-)確定提取胡蘿卜素的最佳方案

在進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)時(shí),教師可以將學(xué)生分組,每組可以采用不同的有機(jī)溶劑和時(shí)間進(jìn)行萃取,比較各組

的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,確定提取胡蘿卜素的最佳方案。

(二)是否出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的層析帶

如果萃取樣品中出現(xiàn)了和標(biāo)準(zhǔn)樣品一樣的層析帶,說明提取胡蘿卜素

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