實驗四.酶的特異性

實驗四.酶的特異性【實驗目的】

學習酵母蔗糖酶（粗提液）和唾液淀粉酶的制備，了解酶的特異性及檢測方法?！緦嶒炘怼?/p>

酶是生物催化劑，酶對所作用的底物有嚴格的選擇性，即酶的特異性。淀粉和蔗糖都是非還原性糖，分別為唾液淀粉酶和蔗糖酶的專一底物。淀粉被唾液淀粉酶水解生成具有還原性的麥芽糖，蔗糖被蔗糖酶水解生成具有還原性的葡萄糖和果糖。

Benedict試劑（含有Cu2+）常用于檢驗還原糖的存在，其被還原后生成磚紅色的Cu2O沉淀?！酒鞑募霸噭浚ㄒ唬┢鞑模?/p>

1.恒溫水浴鍋2.試管及試管架

3.離心機4.吸量管

5.燒杯、量筒、漏斗等（二）試劑：

1.2%蔗糖

2.1%淀粉（內(nèi)含0.3%的NaCl）

3.唾液淀粉酶溶液

4.蔗糖酶溶液

5.Benedict試劑【實驗步驟】（一）淀粉酶的特異性1.唾液淀粉酶溶液的制備：先用蒸餾水漱口，然后用潔凈試管1支，取唾液（無泡沫）約2ml，蒸餾水20倍稀釋，備用。2.取試管5支，標號，按下表所列的次序操作：試劑試管編號123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—唾液淀粉酶（ml）——1.01.01.0蒸餾水（ml）1.01.0——1.0

3.搖勻，置37℃恒溫水浴保溫10min，然后每管加入Benedict試劑2ml，再放沸水浴5min。觀察各管顏色變化，并解釋實驗結(jié)果。(二)蔗糖酶的特異性1.蔗糖酶溶液的制備：取活性干酵母1.0g，置于研缽中，加少量蒸餾水及石英砂研磨提取約10min，再加蒸餾水至總體積約為20ml，過濾或離心，濾液或上清液備用。2.取試管5支，標號，按下表所列的次序操作：試劑試管編號123451%淀粉溶液（ml）1.0—1.0——2%蔗糖溶液（ml）—1.0—1.0—蔗糖酶（ml）——1.01.01.0蒸餾水（ml）1.01.0——1.03.搖勻，置37℃恒溫水浴保溫10min，然后每管加入Benedict試劑2ml，再放沸水浴5min。觀察各管顏色變化，并解釋實驗結(jié)果?！咀⒁馐马棥?/p>

唾液的稀釋倍數(shù)因人而異，有時差別很大，稀釋倍數(shù)可以是50～300倍?！舅伎碱}】1、若將淀粉酶和蔗糖酶煮沸1min，實驗結(jié)果會發(fā)生什么樣的變化？

2、酶作用的專一性有哪幾種？移液槍的使用部分用具與試劑量程的調(diào)節(jié)

1.按照從大體積調(diào)為小體積的方法調(diào)節(jié)。2.用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上的旋鈕，使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字。注意：千萬不要將旋鈕旋出最大量程，否則會卡住內(nèi)部機械裝置或者彈簧彈出而損壞了移液槍。

微量移液器的使用方法槍頭（吸液嘴）的裝配

在將槍頭（pipettetips）套上移液槍時，正確的方法是將移液槍（器）垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動即可使其緊密結(jié)合。

移液的方法

1.吸取液體時，用大拇指將按鈕按下至第一停點，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2－3毫米。

2.然后慢慢松開按鈕回原點。3.接著將按鈕按至第一停點排出液體，稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。最后松開按鈕。

移液器的正確放置

使用完畢，可以將其豎直掛在移液槍架上，但要小心別掉下來。當移液器槍