《月季的花藥培養(yǎng)》復(fù)習(xí)課件

課題2月季的花藥培養(yǎng)1．花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩條途徑：一是

胚狀體途徑，二是愈傷組織途徑，這兩

種途徑主要取決于激素的種類及濃度配比。

2．影響花藥培養(yǎng)的主要因素是材料的選擇與培養(yǎng)基的組成。3．選擇單核靠邊期的花藥培養(yǎng)成功率最高。4．確定花粉發(fā)育時(shí)期的方法有醋酸洋紅法(最常用)和焙花青—鉻礬法(花粉細(xì)胞核不易著色時(shí))?；ǚ郯l(fā)育與花藥離體培養(yǎng)1．被子植物的花粉發(fā)育(1)花粉：由

經(jīng)過(guò)

分裂形成的

的生殖細(xì)胞。

(2)花粉發(fā)育過(guò)程及特點(diǎn)：小孢子母細(xì)胞↓

：4個(gè)單倍體細(xì)胞連在一起花粉母細(xì)胞減數(shù)單倍體小孢子四分體時(shí)期單核靠邊期原生質(zhì)雙核期：細(xì)胞中含有

和

，它們

分別形成一個(gè)

和一個(gè)

，其中

的生殖細(xì)胞形成

花粉管細(xì)胞核生殖細(xì)胞核營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞生殖細(xì)胞兩個(gè)精子↓(3)被子植物花粉的發(fā)育過(guò)程圖示：2．產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑(1)過(guò)程圖示：(2)形成原因：主要取決于培養(yǎng)基中

的種類及其

。激素濃度配比3．影響花藥培養(yǎng)的因素(1)主要因素：①材料的選擇：a．不同植物的誘導(dǎo)成功率

。

b．就同一種植物來(lái)說(shuō)，花期早期時(shí)的花藥比

的更容易產(chǎn)生花粉植株。

c．一般來(lái)說(shuō)，在單核期，細(xì)胞核

的時(shí)期，花藥培養(yǎng)成功率最高。很不相同后期由中央移向細(xì)胞一側(cè)②培養(yǎng)基的組成：培養(yǎng)基的

對(duì)花藥培養(yǎng)也有影響。生長(zhǎng)條件低溫預(yù)處理成分及比例1．花粉發(fā)育時(shí)期的單核期細(xì)胞具有哪些特征？提示：細(xì)胞含有濃厚的原生質(zhì)，核位于細(xì)胞的中央；隨著細(xì)胞不斷長(zhǎng)大，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)并分裂成一個(gè)生殖細(xì)胞核和一個(gè)花粉管細(xì)胞核，進(jìn)而形成兩個(gè)細(xì)胞——營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和生殖細(xì)胞。2．選取材料時(shí)，為什么要選取處于適宜時(shí)期花藥？提示：因?yàn)椋孩倩ǚ郯l(fā)育的過(guò)程中，只有某一時(shí)期對(duì)離體刺激敏感；②選擇單核期以前的花蕾接種，質(zhì)地幼嫩，極易破損；選擇單核期以后的花藥接種，花瓣已有松動(dòng)，又給材料的消毒帶來(lái)困難。1．花粉發(fā)育的“四分體”與動(dòng)物細(xì)胞減數(shù)分裂過(guò)程中“四分體”的比較

(1)被子植物花粉發(fā)育過(guò)程中的“四分體”是指由1個(gè)花粉母細(xì)胞經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂產(chǎn)生的連在一起的4個(gè)單倍體細(xì)胞，即“四分體”中的“四”指的是4個(gè)小孢子細(xì)胞。(2)減數(shù)分裂中的“四分體”是指在聯(lián)會(huì)狀態(tài)下的一對(duì)同源染色體，因?yàn)楹?條染色單體，所以叫做“四分體”，即“四分體”中的“四”指的是4條染色單體。2．菊花莖段組織培養(yǎng)與月季花藥培養(yǎng)比較項(xiàng)目?jī)?nèi)容菊花組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)理論依據(jù)細(xì)胞的全能性基本過(guò)程脫分化→再分化外植體細(xì)胞類型體細(xì)胞生殖細(xì)胞項(xiàng)目?jī)?nèi)容菊花組織培養(yǎng)月季的花藥培養(yǎng)操作流程制備培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培選材→消毒→接種→培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育影響因素選材、營(yíng)養(yǎng)、激素、pH、溫度、陽(yáng)光等培養(yǎng)結(jié)果正常植株單倍體植株生殖方式無(wú)性生殖有性生殖可育性可育高度不育，秋水仙素處理，使染色體加倍后可育花藥培養(yǎng)的操作過(guò)程鏡檢醋酸洋紅焙花青-鉻礬花絲酒精25℃左右分化培養(yǎng)基倍性變化1．在剝離花藥時(shí)，為什么要盡量不損傷花藥，還要徹底去除花絲？提示：損傷花藥接種后容易從受傷部位產(chǎn)生愈傷組織；與花絲相連的花藥不利于愈傷組織或胚狀體的形成。2．培養(yǎng)形成的植株還需要怎樣處理才能發(fā)育成正常植株？為什么要作進(jìn)一步的鑒定和篩選？提示：(1)用秋水仙素處理幼苗。(2)因?yàn)榛ㄋ幣囵B(yǎng)中，特別是通過(guò)愈傷組織形成的花粉植株，常常會(huì)出現(xiàn)染色體倍性的變化。1．鏡檢花粉發(fā)育時(shí)期的方法比較醋酸洋紅法焙花青-鉻礬法不同點(diǎn)方法的使用常用的方法花粉細(xì)胞核不易著色時(shí)，使用該方法步驟將花藥放在載玻片上→滴1滴1%醋酸洋紅→用鑷柄搗碎花藥→蓋上蓋玻片→鏡檢花藥在卡諾氏固定液中固定20min→取出，放在載玻片上→焙花青-鉻礬溶液染色→蓋上蓋玻片→鏡檢現(xiàn)象花粉細(xì)胞核染成深紅色花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色相同點(diǎn)都可通過(guò)鏡檢來(lái)確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期2．花粉植株出現(xiàn)染色體組數(shù)目變化的原因分析在花藥培養(yǎng)過(guò)程中，尤其是通過(guò)愈傷組織形成的花粉植株，常常會(huì)出現(xiàn)染色體組數(shù)目的變化，其原因有以下幾個(gè)方面：(1)花粉細(xì)胞的融合。(2)接種花粉過(guò)程中混有小孢子母細(xì)胞。(3)在材料的低溫預(yù)處理時(shí)低溫抑制了紡錘體的形成。(4)在雙核期時(shí)，生殖細(xì)胞核和花粉管細(xì)胞核并沒(méi)有形成兩個(gè)細(xì)胞，而是兩個(gè)核發(fā)生了融合。例一：關(guān)于被子植物花粉的形成，說(shuō)法正確的是(

)A．花粉的發(fā)育要經(jīng)歷四分體期、單核期和雙核期B．花粉是花粉母細(xì)胞經(jīng)有絲分裂形成的C．花粉發(fā)育經(jīng)歷的四分體期和減數(shù)第一次分裂的四分體時(shí)期的含義相同D．花粉母細(xì)胞形成花粉粒中精子的過(guò)程是一系列減數(shù)分裂的過(guò)程[解析]

花粉是花粉母細(xì)胞經(jīng)減數(shù)分裂及有絲分裂形成的，經(jīng)歷四分體期、單核期和雙核期等階段?；ǚ哿Ｖ械纳臣?xì)胞經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生2個(gè)精子。四分體期指4個(gè)小孢子連在一起，而減數(shù)分裂的四分體時(shí)期是指同源染色體配對(duì)后，1個(gè)四分體含4條染色單體的階段。[答案]

A例二：下列有關(guān)花藥離體培養(yǎng)的幾種說(shuō)法，錯(cuò)誤的是(

)A．材料的選擇最常用的方法是焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色B．材料消毒時(shí)需先用酒精浸泡，然后用氯化汞或次氯酸鈣溶液浸泡，最后用無(wú)菌水沖洗C．接種花藥后一段時(shí)間內(nèi)不需要光照，但幼小植株形成后需要光照D．若接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或形成胚狀體后，要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基，以便進(jìn)一步分化成再生植株[解析