《單體克隆抗體》名師課件2

單克隆抗體高二人教版西安電子科技大學附屬中學張博--錢江晚報張先生好心去獻了一次血，結果卻接到通知，他的血液不能用。街頭獻血檢出乙肝陽性

假陽性

張先生第二天請假去醫(yī)院做了復檢。

進行了一堆檢查后，醫(yī)生告訴他，各項指標正常，沒有得乙肝。新聞鏈接（1）一般情況下，醫(yī)院是如何檢測人體內是否存在乙肝病毒的？（2）抗體如何產生的？（3）一種效應B細胞能產生多種抗體嗎？（4）傳統(tǒng)獲得抗體的方法是什么？溫故知新不僅產量低、而且抗體的特異性差，純度低，靈敏度低?？乖瓌游矬w內從動物的血清中獲取抗體刺激效應B細胞傳統(tǒng)抗體的獲得方法：B1B2B3B4多種抗體單種抗體不僅產量低，而且抗體的特異性差，純度低，靈敏度低?？贵w不純篩選單一的B淋巴細胞（不能在體外大量增殖）抗原動物體內從動物血清中獲取抗體刺激效應B細胞傳統(tǒng)抗體獲得方法的缺點：單克隆抗體怎樣能得到既能無限增殖，又能產生特異性抗體的細胞？一個大膽的猜想德國科勒英國米爾斯坦單克隆抗體獲得雜交瘤細胞獲得能產生所需抗體的雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)1如何得到B淋巴細胞？2如何誘導B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合？3融合過程中會出現(xiàn)幾種類型的細胞？4上述過程得到的細胞哪種是我們需要的？其特點是什么？

怎樣淘汰我們不需要的細胞？5淘汰后的細胞所產抗體是單一的嗎？如何檢測？6如何獲得大量“單克隆抗體”？一單克隆抗體的制備過程提取單克隆抗體補充資料已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。一單克隆抗體的制備過程獲得雜交瘤細胞獲得能產生所需抗體的雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)1如何得到B淋巴細胞？2如何誘導B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合？3融合過程中會出現(xiàn)幾種類型的細胞？4上述過程得到的細胞哪種是我們需要的？其特點是什么？

怎樣淘汰我們不需要的細胞？5淘汰后的細胞所產抗體是單一的嗎？如何檢測？6如何獲得大量“單克隆抗體”？提取單克隆抗體多孔板陽性孔有限稀釋法（1）取出陽性孔培養(yǎng)液將其稀釋到每毫升10個細胞。（2）如果在多孔板中每孔加0.1毫升，使每孔內落入一個細胞。（3）根據(jù)檢測的陽性結果再次進行克隆化。通過適當?shù)南♂屵_到分離單個細胞進行培養(yǎng)的目的。一單克隆抗體的制備過程獲得雜交瘤細胞獲得能產生所需抗體的雜交瘤細胞動物細胞培養(yǎng)1如何得到B淋巴細胞？2如何誘導B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合？3融合過程中會出現(xiàn)幾種類型的細胞？4上述過程得到的細胞哪種是我們需要的？其特點是什么？

怎樣淘汰我們不需要的細胞？5淘汰后的細胞所產抗體是單一的嗎？如何檢測？6如何獲得大量“單克隆抗體”？提取單克隆抗體3、整個制備過程需要幾次篩選？細胞融合技術和動物細胞培養(yǎng)技術2、為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B細胞融合？繼承了雙親細胞的遺傳物質，不僅具有B細胞分泌抗體的能力，而且還有無限增殖的本領，因而可以獲得大量單克隆抗體?？偨Y提升4、單克隆抗體有什么優(yōu)點？特異性強，靈敏度高，并可以大量制備。1、本過程利用了細胞工程的哪些技術？第一次：得到雜交瘤細胞。第二次：在雜交瘤細胞中篩選出能產生所需抗體的雜交瘤細胞。二單克隆抗體的應用1作為診斷試劑抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體2用于治療疾病和運載藥物