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動物試驗(小鼠)的一般操作技術(shù)實習曰期:—11—13一目的和規(guī)定:通過實際操作,使學生掌握試驗的一般操作措施,包括動物的抓去和固定、編號被毛的清除給藥途徑麻醉采血和處死等措施。二實習內(nèi)容:1試驗動物的抓取2試驗動物性別的鑒定3試驗動物編號的標識措施4試驗動物被毛的清除5試驗動物的給藥途徑和措施6試驗動物的麻醉7試驗動物的采血8試驗動物的處死措施9解剖三試驗的措施1小鼠的抓?。鹤トr先用手將鼠尾提起,放在試驗臺上,輕輕拉尾,用左手拇指和食指抓住小鼠兩耳和頭頸部皮膚,將鼠置于左手中心,用左手無名指和小指按住尾巴和後肢,即可做其他試驗操作作用。2小鼠性別的鑒定:抓取小鼠後,觀測動物肛門與生殖器之間的距離。距離遠的為雄性,距離近的為雌性。成熟的雄性小鼠可看到小鼠睪丸的輪廓。3小鼠編號的標識措施:用被毛染色法做小鼠編號。用苦味酸(黃色),一般左前肢為1,左側(cè)腹部為2,左後肢為3,頭頸部為4,背部為5,尾根部為6,右前肢為7,右腹部為8,右後肢為9。用兩種顏色可以染到99。4小鼠被毛清除:有剪毛法,拔毛法,剃毛法,用硫化鈉脫毛法。5給藥途徑和措施:給藥途徑有經(jīng)口灌胃法,經(jīng)呼吸道吸入,經(jīng)皮膚吸入和注射給藥法。用一支特制的灌胃針進行灌胃,小鼠一般給1.5ml如下。用注射器抽好液體,然後抓取小鼠,針頭延側(cè)角通過食管進入胃內(nèi),然後將液體注入。6小鼠的麻醉:麻藥有揮發(fā)性的和非揮發(fā)性兩種。給藥途徑有吸入性麻醉,注射給藥。小鼠一般用腹部麻醉的措施。用水合氯醛300ml/kg,根據(jù)小鼠的體重給藥0.25ml。抓取小鼠後,使針頭和腹部成30度的角,刺入腹腔,回抽若無回血或者腸內(nèi)容物可以注入。注入麻藥5分鐘後,小鼠失去知覺。7小鼠的采血的措施:有靜脈采血法,尾部采血法,眼眶靜脈采血法和心臟采血法。將小鼠裝入固定盒中,露出尾部,用二甲苯圖擦,使尾靜脈充盈。用鋒利的刀片切斷一根尾靜脈即可用毛細管采血,也可用細注射器從尾靜脈采血。8小鼠的處死措施:用頸椎脫臼的措施或者注射過量的麻藥使小鼠死亡。9解剖:從腹部開始,查看腹部臟器,以肝臟胃脾腎輸尿管姨小腸大腸膀胱前列腺性腺次序。然後再看胸部,看到肺臟心臟胸腺等器官,并在直視的狀況下進行了心臟的采血。然後再看頸部的解剖。最終解剖頭部。四討論和結(jié)論:通過本次試驗,我們學到了試驗動物的一般操作技術(shù),如抓取和固定、編號被毛的清除給藥途徑麻醉采血和處死等措施。為後來進入臨床進行試驗研究做好了初步的準備。試驗匯報(三)一、試驗?zāi)康模?。掌握豚鼠、兔、狗的一般操作措施,包括豚鼠的抓取和固定、編號、性別鑒定、給藥、麻醉、采血、處死的措施。2.兔子的抓取和固定、被毛的清除、性別的鑒定、給藥、采血和處死的措施。3.犬的抓取和固定、采血的措施。二、試驗對象:豚鼠,兔,犬。三、試驗環(huán)節(jié):(一):豚鼠:抓取和固定:先用手掌抓住背部,將手張開,用拇指和食指握住頸部,再拿起來。編號:同大鼠。性別鑒定:雄性生殖孔呈圓形,雌性生殖孔呈橢圓形。給藥、麻醉、采血(無尾靜脈采血)、處死同大鼠。(二):兔:1.抓取和固定:當兔子安靜下來時,用右手抓住頸部的被毛與皮膚,提起兔,然後用左手托住其臀部,兔身的重量大部分落在手上。2.被毛的清除:多采用剪毛法。剪毛部位事先用紗布蘸生理鹽水予以濕潤,用彎頭手術(shù)剪緊貼其皮膚依次將所需部位的被毛剪去。3.性別的鑒定:將生殖器附近的皮膚拔開,雄性可見一圓形孔,裏面露出陰莖;雌性此處為一條朝向尾巴的長縫,呈橢圓形間隙,下端有陰道開口處。4.給藥:(1)經(jīng)口灌胃法:灌胃時用一木制的張口器(紡錘狀,正中開小孔)橫放于上下鄂之間,用繩固定。這時用左手抓住其嘴,右手將一細導(dǎo)尿管由張口器中央小孔插入,進入食管和胃。經(jīng)導(dǎo)尿管緩慢注入5ml生理鹽水。(2)耳緣靜脈注射法:剪去耳緣部被毛,酒精擦拭并輕彈欲注射部位,增進靜脈充盈。然後以左手拇指和食指壓住耳根部,右手持注射器,順血管方向刺入靜脈,進針1cm,有血液回流後注入生理鹽水2ml。5.采血:(1)經(jīng)耳緣靜脈采血:進針措施同耳緣靜脈注射法。(2)耳動脈切割采血:剪去耳動脈表面被毛,酒精消毒皮膚。于耳動脈尖端處劃破動脈并采血。(3)心臟采血:剪去心前區(qū)被毛,選用左側(cè)心臟搏動最明顯的肋間靠近胸骨緣為穿刺點(由劍肋角由下往上左側(cè)第三肋間處)。消毒皮膚,左手固定,右手持連有七號針頭的注射器與穿刺點垂直進針。順利回抽到血液後即可采血。6.處死:空氣栓塞法:同心臟采血法進針到心臟後注入20ml空氣。(三):犬:1.抓取與固定:畢格犬抓取輕易。固定也相對輕易。捆綁犬時先綁扎犬嘴。綁扎措施:用繃帶從下頜繞到上頜打一結(jié)。然後繞向下頜再打一結(jié),最終將蹦帶牽引到頭後,在頸頂上打第三個結(jié)。在這個結(jié)上在打一種活結(jié)。2.采血:(1)橈側(cè)靜脈采血法:抓取和固定好後剪去注射部位的被毛。用膠皮管綁住其前肢,使靜脈充盈。試驗者左手托住其前肢,右手持連有7號針頭的注射器刺入內(nèi)側(cè)面皮下的橈側(cè)靜脈。進針1cm後回抽見血,即可采血。
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