DB11T 1053.3-2013 實(shí)驗(yàn)用魚(yú) 第3部分：遺傳質(zhì)量控制

備案號(hào):40368-2014DB11北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布 ——第6部分：環(huán)境條件。本部分主要起草人：崔宗斌、岳秉飛、孫德明、張博實(shí)驗(yàn)用魚(yú)第3部分：遺傳質(zhì)量控制指經(jīng)人工飼養(yǎng)、繁育，對(duì)其攜帶的微生物及寄生蟲(chóng)實(shí)行控制，遺傳背景明確或者來(lái)源清楚的用于在一個(gè)魚(yú)群內(nèi)，任何個(gè)體基因組中98.6%以上的等位位點(diǎn)為純合時(shí)定義為全同胞兄妹交配培育而成，品系內(nèi)所有個(gè)體都可以追溯到一對(duì)共同的祖先，其近交系數(shù)（inbreeding以非近親交配方式進(jìn)行繁殖的實(shí)驗(yàn)用魚(yú)群體，2后面的字母小寫(xiě)，一般不超過(guò)4個(gè)字母。保持者與種群名稱為保持封閉群實(shí)驗(yàn)用魚(yú)的遺傳基因的穩(wěn)定，封閉群應(yīng)大于100對(duì)，采取群體循環(huán)或隨對(duì)基礎(chǔ)群，凡在子代留有種魚(yú)的雙親都應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)生產(chǎn)群，按表1要求從每個(gè)近交系中隨機(jī)抽4選擇分列于近交系斑馬魚(yú)25對(duì)染色體、劍尾魚(yú)24對(duì)不同染色體上的5個(gè)以上未發(fā)現(xiàn)遺傳變異，遺傳質(zhì)量有一個(gè)位點(diǎn)的分子或生化標(biāo)記與增加檢測(cè)位點(diǎn)數(shù)目和增加檢兩個(gè)或兩個(gè)以上位點(diǎn)的標(biāo)記基因選擇位于近交系斑馬魚(yú)25對(duì)染色體、劍尾魚(yú)24對(duì)染色體上的10個(gè)選擇位于近交系斑馬魚(yú)25對(duì)染色體、劍尾魚(yú)24對(duì)染色體上的5個(gè)以上位點(diǎn)，作為遺b)用于保種及生產(chǎn)的繁殖系譜及記錄c)封閉繁殖，保持魚(yú)的基因異質(zhì)性及多態(tài)性，避免近交系數(shù)隨6A.1.1斑馬魚(yú)基因的全名一般用小寫(xiě)斜體英文字母表示，其對(duì)應(yīng)的基因符號(hào)至少包含三個(gè)字母，A.1.3斑馬魚(yú)的基因?yàn)椴溉閯?dòng)物的同源基因（orA.1.6當(dāng)與哺乳動(dòng)物同源性較高但又無(wú)法確認(rèn)是否為同源基因時(shí)，一般在該哺乳動(dòng)物基因名A.1.7對(duì)于斑馬魚(yú)測(cè)序計(jì)劃中獲得的新基因，一般用測(cè)序研究單人注：在文獻(xiàn)中，有時(shí)將一個(gè)眾所周知的常用蛋白符號(hào)放入括弧內(nèi)，附在根據(jù)同源基因命名的符號(hào)型時(shí)，一般用Df(Chr##)xxxallele表示，染色體序號(hào)用兩位數(shù)字表示，如Chr03表示三號(hào)染色體；相互易位時(shí)，這時(shí)涉及到兩條染色體，一般要對(duì)每條染色體進(jìn)行明確的描述。通用表示形式為：T(Chr##;Chr##)xxxallele,##U.##L和T(Chr表示由研究者描述的易位的主要特征及其等位基因；##U.##L表示染色體的上臂（upperarm）和下臂在斑馬魚(yú)中，描述等位基因野生型用上標(biāo)“+”表示，等位基因突變型則采用上標(biāo)的實(shí)驗(yàn)室分配字分配字母前加上“d”。例如：lof+表示lof基因的野生型等位基因，lofdt2則表示lof顯性等位基因非連鎖基因座：純合子的不同基因座依1～25號(hào)染色體順序排列，其間用分號(hào)隔開(kāi)，如ednrb1b140;未定位基因座的基因型按字母順序排列在“{}”中，并附在已定位的不同染色體基因型之后。如對(duì)于前者，用等位基因名上標(biāo)加轉(zhuǎn)基因Tg上標(biāo)，如arnthi2639cTg；對(duì)A.5增強(qiáng)子、啟動(dòng)子、基因誘捕載體和誘捕斑馬魚(yú)品增強(qiáng)子、啟動(dòng)子、基因誘捕載體的命名與轉(zhuǎn)基因構(gòu)載體的命名基本相同，需要將相應(yīng)的Tg改為Pt），），質(zhì)的品系。這樣的品系是以雄的AB系斑馬魚(yú)與雌的TU系斑馬魚(yú)交配，子代雌魚(yú)與AB系雄魚(yú)反復(fù)回交108剪取斑馬魚(yú)TU或AB等品系的尾鰭，參照標(biāo)準(zhǔn)平dNTP(2.5mmol/L)因?yàn)橐洲q小至幾個(gè)bp的DNA片段，所以需要利用分辨率較高的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行0.5mol/LEDTA稱取10gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到盛有約90m0.5mol/LEDTA0.5mol/LEDTA(丙烯酰胺加水定容至100mL，過(guò)濾。低溫貯存，配一次最多將100mg的溴化乙啶溶于10mL），GGCGATTCCTACAATTCTTCGAAAGTCCTGTGTTGAAGGTGGGCACATCGTCATATAATGCACAATACTGGAATGACACTGGGAAGTCCATGTTGGCATCTACAGTGTTGAGAAACGGTCAGGAACACTGGCACGTACACAAGGGGAATCGTGAACTCGTAACTCATTGTAATAGCAGTAATGACGTGCAATGTTTGTTTCAGACCTCATTGTAATAGCAGTAATGACGTGCAATGTTTGTTTCAGACCCTGCTGTTACTGGGTCAGTGACTGCATGATAATGCCAAACCTGCTGTTACTGGGTCAGTGACTGCATGATAATGCCAAACAAACGTGGCAGAAATGAAACCCCATTTGTAGAAGAATCCAGTTGCATTAGAGCCTTATCCTGTGTTCTTATGCTCTGTGACTGGAGCAGCGATACTCACACAGTTCACTAGGTAAGACTCTTGAAGCTCTCTTTAATGTTGGACTGCTGCCTTTAATCCATAGCCTTAGCGACACATACCTGGCACTCGTCTCCTGAGAAGGATTCCACCAGTTGAGAAGGGAGAAACGGCTGTTGGGTTGACTTGCAGGAAAGACACCATCACTGAGCTTTAGGCGCAATAACAAGGTATCTCGGTTAACGGGAGTGGCAGGGATATTTGACTTGAATGTTCCCAAATACTGAATCTGCGGATCTGTTCATCGAGGTTCCATTTAATAAAGGAATCACTACTCTTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTTTCATTTAATAAAGGAATCACTACTCTTAGTCAGTTTACTAACCTTGCTTTAAAGAGCGTCAAGATGTGTGGCCTAACAGTACCATTCTTGGATCTCGACAACTCTGCTTCCAGTCCAGCAGAAATTGCACAGCTGGTTAGACTTGTTTAGGCATGCATCATGCTTGACATCCAGATCAGTGCTGGTTATGCATCCAGTTGTTTGGCATTGGGACATCACAGATTCACCACTTTAAGGCGAAACACCAAACCAGCACCACCTTTCAGTTTCAGCGGCACACTTAACACCAGTTGGCTGTTACCTTGTTTGAAAGTACAGCGGTAAGAAGCAGTTGGCTGTTACCTTGTTTGAAAGTACAGCGGTAAGAAGCTTGGACTAGCACTGTCCTTTACCAAACACATCAGTGCACAAACTTGGACTAGCACTGTCCTTTACCAAACACATCAGTGCACAAACTGGTGTGGTGACATATCCTGGGCTTCTTCTCCACAGAGGATAAAGCCTGGCCGTAAATCTGTGTTCAAACTACGACAAGCAGAGCTTCAGGTTCTTCTGGCAAGCAGTGCGACAGGTAGCATTTCAGGAACTTCTCCTTGTTTGTTGGAGCTTCATGCTGAGGAACTTGCAGAAACAGGCTGAGACATTAATCTTACTGAGGAGGAGGTTCTGCTGAGGACAATGTTGGCACAATCATGGTATCCAGGGTCTGGAATCACTGTGAAAGTTCAGTCATCTGCTTAGGACACTCCACCATGAGTGCATGAAGACAGAGCAGAGGTCCTTCCTGAAGCACTGAGTGTGAAAGGTTTTACTGTATTTCTCTGACACAGGAAATAGTATGGCGAATCATATGGGAGTCGTTAACTATGAGGCAGTCCGTTCAACTGATCCGTGAGTTGTCCAAGCTGCTCATGTCACTCGGGGACAGGGTACAGGTAAGGGATGAGGACATGAGCTTGGTGACCAAA