DB65T 4504-2022 馬血液梨形蟲檢測技術(shù)規(guī)程

2024-2-23發(fā)布2024-4-10實施I路167號)。新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)聯(lián)系電話傳真：0991-876345125.1.3樣品DNA提取10×PCR緩沖液(buffer)(不含Mg2)3655上游引物F112下游引物R11235.1.4.3PCR反應(yīng)參數(shù)5.1.4.4結(jié)果判定擴(kuò)增結(jié)束后配置含有熒光核酸凝膠染色試劑的1.0%的瓊脂糖凝膠，PCR產(chǎn)物加入6×上樣緩沖液 設(shè)置100V的電壓進(jìn)行核酸電泳，電泳結(jié)束后在凝膠成像系統(tǒng)上觀察電泳結(jié)果。若電泳條帶大小約為280bp,判定為陽性，若無特異性條帶或條帶大小不在±280bp,則判定為陰性，見圖1。5.2.1主要設(shè)備、材料和試劑5.2.2樣品采集、保存應(yīng)滿足5.1.3的要求。45.2.4檢測方法10×PCR緩沖液(buffer)(不含3655上游引物F112下游引物R112365.2.4.4結(jié)果判定擴(kuò)增結(jié)束后配置含有熒光核酸凝膠染色試劑的5 6(資料性)A.1馬泰勒蟲生活史包括在馬屬動物體內(nèi)和硬蜱體內(nèi)兩個階段。攜帶有馬泰勒蟲子孢子的硬蜱在叮隨硬蜱的唾液進(jìn)入馬屬動物體內(nèi)，子孢子首先侵入淋巴細(xì)胞進(jìn)行裂殖生殖，形成裂殖體，裂殖體成熟后從淋巴細(xì)胞內(nèi)破裂釋放裂殖子，進(jìn)入紅細(xì)胞內(nèi)發(fā)育形成配子體，配子體在紅病馬屬動物時紅細(xì)胞內(nèi)配子體隨硬蜱的叮咬吸血進(jìn)入硬蜱體內(nèi)，結(jié)合形成合子，進(jìn)蜱的腸管、體腔、馬氏管等各個器官，反復(fù)進(jìn)行無性分裂的孢子生殖，最后子，隨著硬蜱再次叮咬馬匹時進(jìn)而傳播至馬匹體內(nèi)造成感染。馬泰勒蟲生活史見圖A.1。(資料性)駑巴貝斯蟲生活史B.1駑巴貝斯蟲生活史包括在馬屬動物體內(nèi)和硬蜱體內(nèi)兩個階段。成蜱吸取患病馬屬動物血液時，配子體也隨著血液進(jìn)入硬蜱腸道內(nèi)。進(jìn)入腸道的蟲體大部分被破壞，只有少數(shù)在腸道內(nèi)容物中被釋放出來，這時的蟲體為動合子，隨后動合子進(jìn)入卵母細(xì)胞內(nèi)休眠，直到卵發(fā)育為子蜱并開始采食時才開始進(jìn)行孢子生殖并形成對哺乳動物具有感染性的子孢子。子孢子隨子蜱的叮咬進(jìn)入到馬屬動物體內(nèi)，進(jìn)入紅細(xì)胞后進(jìn)行裂殖生殖，產(chǎn)生裂殖子，最后在紅細(xì)胞內(nèi)形成配子體。當(dāng)蜱再次叮咬患病馬屬動物時，紅細(xì)胞內(nèi)的配子體又隨著蜱