生理學(xué)學(xué)生實(shí)驗(yàn)報(bào)告

昆明理工大學(xué)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(供臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)使用)實(shí)驗(yàn)一坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本制備[1]實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.學(xué)習(xí)機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)基本的組織分離技術(shù)；2.學(xué)習(xí)和掌握制備蛙類坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的方法；3.了解刺激的種類。[2]實(shí)驗(yàn)原理蛙類的一些基本生命活動(dòng)和生理功能與恒溫動(dòng)物相似，若將蛙的神經(jīng)-肌肉標(biāo)本放在任氏液中，其興奮性在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)可保持不變。若給神經(jīng)或肌肉一次適宜刺激，可在神經(jīng)和肌肉上產(chǎn)生一個(gè)動(dòng)作電位，肉眼可看到肌肉收縮和舒張一次，表明神經(jīng)和肌肉產(chǎn)生了一次興奮。在機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)中常利用蛙的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本研究神經(jīng)、肌肉的興奮、興奮性，刺激與反應(yīng)的規(guī)律和肌肉收縮的特征等，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本是機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)的一項(xiàng)基本操作技術(shù)。[3]實(shí)驗(yàn)對(duì)象蛙[4]實(shí)驗(yàn)藥品任氏液[5]儀器與器械普通剪刀、手術(shù)剪、眼科鑷(或尖頭無齒鑷)、金屬探針(解剖針)、玻璃分針、蛙板(或玻璃板)、蛙釘、細(xì)線、培養(yǎng)皿、滴管、電子刺激器。[6]實(shí)驗(yàn)方法與步驟①破壞腦、脊髓取蛙一只，用自來水沖洗干凈(勿用手搓)。左手握住蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使頭前俯(以頭顱后緣稍稍拱起為宜)。右手持探針由頭顱后緣的枕骨大孔處垂直刺入椎管(圖3-1-1)。然后將探針改向前刺入顱腔內(nèi)，左右攪動(dòng)探針2～3次，搗毀腦組織。如果探針在顱腔內(nèi)，應(yīng)有碰及顱底骨的感覺。再將探針退回至枕骨大孔，使針尖轉(zhuǎn)向尾端，捻動(dòng)探針使其刺入椎管，搗毀脊髓。此時(shí)應(yīng)注意將脊柱保持平直。針進(jìn)入椎管的感覺是，進(jìn)針時(shí)有一定的阻力，而且隨著進(jìn)針蛙出現(xiàn)下肢僵直或尿失禁現(xiàn)象。若腦和脊髓破壞完全，蛙下頜呼吸運(yùn)動(dòng)消失，四肢完全松軟，失去一切反射活動(dòng)。此時(shí)可將探針反向捻動(dòng)，退出椎管。如蛙仍有反射活動(dòng)，表示腦和脊髓破壞不徹底，應(yīng)重新破壞。圖2-1-1搗毀蟾蜍脊髓①在操作過程中，應(yīng)給神經(jīng)和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影響標(biāo)本的興奮性。②標(biāo)本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘，使標(biāo)本興奮性穩(wěn)定，再開始實(shí)驗(yàn)效果會(huì)較好。[8]實(shí)驗(yàn)圖像[10]結(jié)果及分析①搗毀腦脊髓后的蛙應(yīng)有何表現(xiàn)？②制備好的神經(jīng)肌肉標(biāo)本為何要放在任氏液中？③如何判斷制備的神經(jīng)肌肉標(biāo)本的興奮性？[11]思考題①用各種刺激檢驗(yàn)標(biāo)本興奮性時(shí)，為什么要從中樞端開始？②刺激有幾種形式?

實(shí)驗(yàn)二心臟灌流[1]［實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

1.學(xué)習(xí)蛙離體心臟灌流方法。

2.觀察Na+、K+、Ca2+、H+、腎上腺素、乙酰膽堿等因素對(duì)心臟活動(dòng)的影響。

[2]［實(shí)驗(yàn)原理］

心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)需要一個(gè)適宜的內(nèi)環(huán)境(如Na+、K+、Ca2+等的濃度及比例、pH值和溫度)，而內(nèi)環(huán)境的變化則直接影響到心臟的正常節(jié)律性活動(dòng)。在體心臟還受交感神經(jīng)和迷走神經(jīng)的雙重支配，交感神經(jīng)末梢釋放去甲腎上腺素，使心肌收縮力加強(qiáng)，傳導(dǎo)速度加快，心率加快；迷走神經(jīng)末梢釋放乙酰膽堿，使心肌收縮力減弱，心肌傳導(dǎo)速度減慢，心率減慢。將失去神經(jīng)支配的離體心臟保持于適宜的理化環(huán)境中(如任氏液)，在一定時(shí)間內(nèi)仍能產(chǎn)生自動(dòng)節(jié)律性興奮和收縮。而改變?nèi)问弦旱慕M成成分，離體心臟的活動(dòng)就會(huì)受到影響。

[3]［實(shí)驗(yàn)對(duì)象］

蛙[4]［實(shí)驗(yàn)藥品］

任氏液、0.65％NaCl、2％CaCl2、1％KCl、1：10000腎上腺素、1：10000乙酰膽堿[5]［儀器與器械］

計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀)、張力換能器、蛙類常用手術(shù)器械一套、玻璃分針、蛙板、蛙釘、蛙心插管、蛙心夾、試管夾、滴管(7支)、試劑瓶(7個(gè))、燒杯、雙凹夾、萬能支架、細(xì)線。[6]［實(shí)驗(yàn)方法與步驟］1.標(biāo)本的制備

(1)離體蛙心標(biāo)本制備(斯氏蛙心插管法)

取蟾蜍一只，打開胸腔，暴露心臟。在主動(dòng)脈干下方穿雙線，一條在左主動(dòng)脈上端結(jié)扎作插管時(shí)牽引用；另一根在動(dòng)脈球上方打一活結(jié)備用(用以結(jié)扎和固定插管)。玻璃分針將心臟向前翻轉(zhuǎn),在心臟背側(cè)找到靜脈竇,在靜脈竇以外的地方做一結(jié)扎(切忽扎住靜脈竇),以阻止血液繼續(xù)回流心臟(也可不進(jìn)行此操作)。圖3-4-1插管進(jìn)入心室示意圖左手提起左主動(dòng)脈上方的結(jié)扎線，右手持眼科剪在左主動(dòng)脈根部(動(dòng)脈球前端)沿向心方向剪一斜口，將盛有少許任氏液、大小適宜的蛙心插管由此開口處輕輕插入動(dòng)脈球。當(dāng)插管尖端到達(dá)動(dòng)脈球基部時(shí)，應(yīng)將插管稍向后退(因主動(dòng)脈內(nèi)有螺旋瓣會(huì)阻礙插管前進(jìn))，并將插管尾端稍向右主動(dòng)脈方向及腹側(cè)面傾斜，使插管尖端向動(dòng)脈球的背部后方及心尖方向推進(jìn)，在心室收縮時(shí)經(jīng)主動(dòng)脈瓣進(jìn)入心室(見圖3-4-1)。注意插管不可插得過深，插管的斜面應(yīng)朝向心室腔，以免插管下口被心室壁堵住。

若插管中任氏液面隨心室的收縮而上下波動(dòng)，則表明插管進(jìn)入心室，可將動(dòng)脈球上已準(zhǔn)備好的松結(jié)扎緊，并固定于插管側(cè)面的鉤上，以免蛙心插管滑出心室。剪斷結(jié)扎線上方的血管，輕輕提起插管和心臟，在左右肺靜脈和前后腔靜脈下引一細(xì)線并結(jié)扎(參考圖3-4-1)，于結(jié)扎線外側(cè)剪去所有相連的組織則得到離體蛙心。此步操作中應(yīng)注意靜脈竇不受損傷并與心臟連結(jié)良好。最后，用任氏液反復(fù)換洗插管內(nèi)的任氏液，直到插管中無殘留血液為止。此時(shí)，離體蛙心標(biāo)本制備成功，可供實(shí)驗(yàn)。

②左手拉住腹主動(dòng)脈上結(jié)扎線頭，于動(dòng)脈球上剪一小口，將裝有魚用生理鹽水的的蛙心套管插入動(dòng)脈球，并順勢(shì)推入心室，此時(shí)可以看到套管內(nèi)的液面隨心臟搏動(dòng)而上下移動(dòng)。用滴管不斷更換套管中的灌流液，沖洗心室直至沒有血液為止，束緊備用線連同套管尖端一起結(jié)扎，并將線頭系在套管壁上的小突起上，達(dá)到固定作用。最后剪斷腹主動(dòng)脈，提起心臟用線盡量遠(yuǎn)離靜脈竇將其他血管結(jié)扎。在結(jié)扎外方剪斷各組織。此時(shí)心臟完全離體，借灌流液而正常搏動(dòng)。

2.實(shí)驗(yàn)裝置連接

按圖3-4-2將蛙心插管固定于支架上，在心室舒張時(shí)將連有一細(xì)線的蛙心夾在心臟舒張時(shí)夾住心尖，并將細(xì)線以適宜的緊張度與張力換能器相連。張力傳感器的輸出線與計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)或二道生理記錄儀的輸入通道相連。

圖3-4-2蛙心灌流的記錄儀描記裝置實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

(1)記錄心臟在只有任氏液時(shí)的收縮曲線，觀察心率及收縮幅度，并將其作為正常對(duì)照。

(2)Na+的作用：用吸管吸出插管中的任氏液后，換以等量的0.65％氯化鈉溶液，記錄并觀察心跳的變化。有變化出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)立即將插管內(nèi)液體吸出，并以等量任氏液換洗2～3次，至心跳恢復(fù)正常。

(3)Ca2+的作用：將1～2滴2％的氯化鈣溶液加入灌流液中，記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次，至心跳曲線恢復(fù)正常。

(4)K+的作用：將1～2滴2％的氯化鉀溶液加入灌流液中，記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次，至心跳曲線恢復(fù)正常。

(5)腎上腺素的作用：將1～2滴1：10000腎上腺素加入灌流液中，記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次，至心跳曲線恢復(fù)正常。

(6)乙酰膽堿的作用：將1～2滴1：10000乙酰膽堿加入灌流液中，記錄并觀察心跳變化。有變化出現(xiàn)時(shí)，應(yīng)立即以等量任氏液換洗數(shù)次，至心跳曲線恢復(fù)正常。

[7]［注意事項(xiàng)］

1.制備離體心臟標(biāo)本時(shí)，勿傷及靜脈竇。

2.蛙心夾應(yīng)在心室舒張期一次性?shī)A住心尖，避免因夾傷心臟而導(dǎo)致漏液。

3.每一觀察項(xiàng)目都應(yīng)先描記一段正常曲線，然后再加藥并記錄其效應(yīng)。加藥時(shí)應(yīng)在心跳曲線上予以標(biāo)記，以便觀察分析。

4.各種滴管應(yīng)分開，不可混用。

5.在實(shí)驗(yàn)過程中，插管內(nèi)灌流液面高度應(yīng)保持恒定；儀器的各種參數(shù)一經(jīng)調(diào)好，應(yīng)不再變動(dòng)。

6.給藥后若效果不明顯，可再適量滴加，并密切注意藥物劑量添加后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。給藥量必須適度，加藥出現(xiàn)變化后，就應(yīng)立即更換任氏液，否則會(huì)造成不可挽回的后果，尤其是K+，H+稍有過量，即可導(dǎo)致難以恢復(fù)的心臟停跳。

7.標(biāo)本制備好后，若心臟功能狀態(tài)不好(不搏動(dòng))，可向插管內(nèi)滴加1～2滴2%CaCl2或1：10000腎上腺素，以促進(jìn)(起動(dòng))心臟搏動(dòng)。在實(shí)驗(yàn)程序安排上也可考慮促進(jìn)和抑制心臟搏動(dòng)的藥物交換使用。

8.謹(jǐn)防灌流液沿絲線流入張力傳感器內(nèi)而損壞其電子元件。

[8][問題與解釋]

1.插管插入后,管中的液面不能隨心臟搏動(dòng)而波動(dòng),或波動(dòng)幅度不大，影響結(jié)果的觀察。(1)

插管插到了主動(dòng)脈的螺旋瓣中，未進(jìn)入心室。

(2)插管插到了主動(dòng)脈壁肌肉和結(jié)締組織的夾層中。

(3)插管尖端抵觸到心室壁。

(4)插管尖端被血凝塊堵塞。

2.插管后，心臟不跳動(dòng)。

(1)心室或靜脈竇受損。

(2)插管尖端深入心室太多；或尖端太粗，心臟太小(魚類容易出現(xiàn))影響到心室臟的收縮。(3)心臟機(jī)能狀態(tài)不好。[9][實(shí)驗(yàn)圖像]氯化鈉氯化鈣氯化鉀腎上腺素乙酰膽堿

[10][實(shí)驗(yàn)結(jié)果]

剪貼記錄曲線，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析討論。

實(shí)驗(yàn)三影響尿液生成的因素[1][實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯

學(xué)習(xí)用膀胱套管或輸尿管套管引流的方法，觀察不同生理因素對(duì)動(dòng)物尿量的影響。加深對(duì)尿生成調(diào)節(jié)的理解。

[2][實(shí)驗(yàn)原理]

尿是血液流過腎單位時(shí)經(jīng)過腎小球?yàn)V過，腎小管重吸收和分泌而形成的，凡對(duì)這些過程有影響的因素都可影響尿的生成。腎小球的濾過作用取決于腎小球的有效濾過壓，其大小取決于腎小球毛細(xì)血管血壓，血漿的膠體滲透壓和腎小囊內(nèi)壓。影響腎小管重吸收作用主要是管內(nèi)滲透壓和腎小管上皮細(xì)胞的重吸收能力，后者又為多種激素所調(diào)節(jié)。

[3][實(shí)驗(yàn)對(duì)象]

兔

[4][實(shí)驗(yàn)藥品]醫(yī)用酒精、生理鹽水、溫?zé)岬纳睇}水，利尿激素。

[5][儀器與設(shè)備]

計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)(或二道生理記錄儀、電子刺激器)、壓力換能器、保護(hù)電極、記滴器、恒溫浴槽、哺乳動(dòng)物手術(shù)器械一套、兔手術(shù)臺(tái)、氣管插管、膀胱導(dǎo)管(或輸尿管導(dǎo)管)、動(dòng)脈插管、注射器(1ml、20ml)及針頭、燒杯、試管架及試管、酒精燈等。

[6][方法與步驟]

1.標(biāo)本的制備

(1)實(shí)驗(yàn)兔在實(shí)驗(yàn)前應(yīng)給予足夠的菜和飲水。

(2)稱重動(dòng)物，耳緣靜脈注射20%的氨基甲酸乙酯溶液(5ml·kg-1體重)進(jìn)行麻醉，待動(dòng)物麻醉后仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上。

(3)在頸部手術(shù)

①暴露氣管，施氣管插管；②分離左側(cè)頸總動(dòng)脈，按常規(guī)將充滿肝素生理鹽水的動(dòng)脈插管插入其內(nèi)，通過血壓換能器連至記錄裝置，描記血壓。③分離右側(cè)的迷走神經(jīng)，穿線備用，用溫生理鹽水紗布覆蓋創(chuàng)面。

(4)尿液的收集可選用膀胱導(dǎo)管法或輸尿管插管法。

.①膀胱導(dǎo)尿法

自恥骨聯(lián)合上緣向上沿正中線作4cm長(zhǎng)皮膚切口，再沿腹白線剪開腹壁及腹膜(勿傷腹腔臟器)，找到膀胱，將膀胱向尾側(cè)翻至體外(勿使腸管外露，以免血壓下降)。再于膀胱底部找出兩側(cè)輸尿管，認(rèn)清兩側(cè)輸尿管在膀胱開口的部位。小心地從兩側(cè)輸尿管下方穿一絲線，將膀胱上翻，結(jié)扎膀胱頸部。然后，在膀胱頂部血管較少處作一荷包縫合，再在其中央剪一小口，插入膀胱導(dǎo)管，收緊縫線、結(jié)扎固定。膀胱導(dǎo)管的喇叭口應(yīng)對(duì)著輸尿管開口處并緊貼膀胱壁。膀胱導(dǎo)管的另一端通過橡皮導(dǎo)管和直管連接至記滴器，并在它們中間充滿生理鹽水。

②輸尿管插管法

沿膀胱找到并分離兩側(cè)輸尿管，在靠近膀胱處穿線將它結(jié)扎；再在此結(jié)扎前約2厘米的近腎端穿一根線，在管壁剪一斜向腎側(cè)的小切口，插入充滿生理鹽水的細(xì)塑料導(dǎo)尿管并用線扎住固定，此時(shí)可看到有尿滴滴出。再插入另一側(cè)輸尿?qū)Ч?。將兩插管并在一起連至記滴器。手術(shù)完畢后，用溫生理鹽水紗布覆蓋腹部切口。圖3-7-1兔輸尿管及膀胱導(dǎo)尿法1、輸尿管2、插膀胱導(dǎo)管部位3、膀胱導(dǎo)管2.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(1)記錄正常情況下每分鐘尿分泌的滴數(shù)。

(2)耳緣靜脈注射38℃的0.9%NaCl溶液20ml，觀察尿量的變化。(3)耳緣靜脈注射去利尿激素1ml，觀察尿量的變化。

(4)上腹部手術(shù)：上腹部剪毛,切開胸骨劍突部位的皮膚，沿腹白線切開長(zhǎng)約2cm的切口，小心分離、暴露劍突軟骨及骨柄，用金冠剪剪斷劍骨柄,將縛有長(zhǎng)線的金屬鉤鉤于劍突中間部位，線的另一端連張力換能器,記錄呼吸。(5)迷走神經(jīng)的作用：切斷一側(cè)迷走神經(jīng)，呼吸運(yùn)動(dòng)有何變化?

[7][注意事項(xiàng)]

1.選擇家兔體重在2.5-3.0kg左右，實(shí)驗(yàn)前給兔多喂菜葉，或用橡皮導(dǎo)尿管向兔胃內(nèi)灌入40～50ml清水，以增加基礎(chǔ)尿量。

2.手術(shù)動(dòng)作要輕揉，腹部切口不宜過大，以免造成損傷性閉尿。剪開腹壁避免傷及內(nèi)臟。

3.因?qū)嶒?yàn)中要多次進(jìn)行耳緣靜脈注射，因此要注意保護(hù)好兔的耳緣靜脈。應(yīng)從耳緣靜脈的遠(yuǎn)端開始注射，逐漸向耳根部推進(jìn)。

4.輸尿管插管時(shí)，注意避免插入管壁和周圍的結(jié)締組織中；插管要妥善固定，不能扭曲，否則會(huì)阻礙尿的排出。

5.實(shí)驗(yàn)順序的安排是：在尿量增加的基礎(chǔ)上進(jìn)行減少尿生成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，在尿量少的基礎(chǔ)上進(jìn)行促進(jìn)尿生成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)需在上一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)作用消失，血壓、尿量基本恢復(fù)正常水平時(shí)再開始。

6.刺激迷走神經(jīng)強(qiáng)度不宜過強(qiáng)，時(shí)間不宜過長(zhǎng)，以免血壓過低，心跳停止。

[8][問題分析]

1.開始實(shí)驗(yàn)尚未給藥時(shí)，尿量就很少或無尿

(1)

兔體缺水

(2)

兔本身機(jī)能狀況低下，

(3)

輸尿管插管未插入輸尿管內(nèi)，或輸尿管堵塞，或輸尿管扭曲。

(4)腹部切口過大，引起抗利尿激素分泌，血壓下降，尿量減少。

(5)

氣溫太低，動(dòng)物未保溫，血管收縮，尿量減少。[9][實(shí)驗(yàn)圖像]正常一側(cè)神經(jīng)被剪兩側(cè)神經(jīng)被剪增大無效腔

[10][實(shí)驗(yàn)結(jié)果]

剪貼實(shí)驗(yàn)結(jié)果，記錄各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)所見的血壓(包括收縮壓、舒張壓、平均壓)和尿量變化。分析這些變化產(chǎn)生的原因。

[11][思考題]

1.靜脈快速注射生理鹽水對(duì)尿量有何影響，為什么？

2.靜脈注射利尿激素對(duì)尿量有何影響，為什么？迷走神經(jīng)在節(jié)律性呼吸運(yùn)動(dòng)中起何作用？

實(shí)驗(yàn)四心血管活動(dòng)的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)[1][實(shí)驗(yàn)?zāi)康腯

學(xué)習(xí)記錄哺乳動(dòng)物動(dòng)脈血壓的直接測(cè)定方法，并觀察神經(jīng)-體液因素對(duì)心血管活動(dòng)的調(diào)節(jié)。

[2][實(shí)驗(yàn)原理]

在正常生理情況下，心血管活動(dòng)受神經(jīng)、體液和自身機(jī)制的調(diào)節(jié)。心臟受交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)的支配。心交感神經(jīng)興奮時(shí)，使心率加快、心肌收縮力加強(qiáng)，心內(nèi)興奮傳導(dǎo)加快，心輸出量增加、動(dòng)脈血壓升高。心迷走神經(jīng)興奮時(shí)，使心率減慢、心房肌收縮力減弱、房室傳導(dǎo)減慢，從而使心輸出量減少、動(dòng)脈血壓下降。在神經(jīng)調(diào)節(jié)中以頸動(dòng)脈竇-主動(dòng)脈弓的減壓反射尤為重要，當(dāng)動(dòng)脈血壓升高時(shí)，壓力感受器發(fā)放沖動(dòng)增加，通過中樞反射性引起心率減慢、心肌收縮力減弱、心輸出量下降、血管舒張和外周阻力降低，使血壓降低。反之，當(dāng)動(dòng)脈壓下降時(shí)，壓力感受器發(fā)放沖動(dòng)減少，神經(jīng)調(diào)節(jié)過程又使血壓回升。支配血管的交感縮血管神經(jīng)興奮時(shí)，使血管收縮、外周阻力增加、動(dòng)脈血壓升高。

家兔的壓力感受器的傳入神經(jīng)在頸部從迷走神經(jīng)分出，自成一支，稱為減壓神經(jīng)，其傳入沖動(dòng)隨血壓變化而變化。

心血管活動(dòng)還受腎上腺素和去甲腎上腺素等體液因素的調(diào)節(jié)。它們對(duì)心血管的作用既有共性，又有特殊性。關(guān)鍵取決于心、血管壁上哪一種受體占優(yōu)勢(shì)。腎上腺素對(duì)α與β受體均有激活作用，去甲腎上腺素主要激活α受體而對(duì)β受體作用很小，因而使外周阻力增加，動(dòng)脈血壓升高，但對(duì)心臟的作用要比腎上腺素弱。

[3][實(shí)驗(yàn)對(duì)象]

家兔。

[4][實(shí)驗(yàn)藥品]

生理鹽水，20%氨基甲酸乙脂（或3%戊巴比妥鈉），肝素（500

U·ml-1），1:

10000腎上腺素，1:

10000去甲腎上腺素，1:

10000乙酰膽堿。

[5][儀器與器械]

計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)（或二道生理記錄儀、刺激器），兔手術(shù)臺(tái)，手術(shù)器械一套，氣管插管，動(dòng)脈夾，動(dòng)脈套管、血壓換能器，保護(hù)電極，棉線，紗布，棉球、注射器（50、10、2

ml），支架，雙凹夾。[6][實(shí)驗(yàn)方法與步驟]

1.實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：（1）麻醉和固定：家兔稱重后，耳緣靜脈緩慢注射20％氨基甲酸乙酯（5

ml·kg-1）或3%戊巴比妥鈉（1

ml·kg-1）進(jìn)行麻醉。當(dāng)動(dòng)物四肢松軟，呼吸變深變慢，角膜反射遲鈍時(shí)，表明動(dòng)物已被麻醉，即可停止注射。將麻醉的家兔仰臥位固定于兔手術(shù)臺(tái)上。（2）分離頸部神經(jīng)、血管和插氣管插管

：頸部剪毛，沿頸部正中線切開皮膚5~7

cm，用止血鉗鈍性分離皮下組織及淺層肌肉，暴露和分離氣管；分離左、右兩側(cè)頸總動(dòng)脈（左頸總動(dòng)脈盡量分離長(zhǎng)些，以做動(dòng)脈插管用。當(dāng)向頭端追索到甲狀軟骨上緣，可見到左頸動(dòng)脈分支為頸外和頸內(nèi)動(dòng)脈，在頸內(nèi)動(dòng)脈基部有一膨大處，為頸動(dòng)脈竇。分離右側(cè)的迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)。在分離的氣管、頸總動(dòng)脈及神經(jīng)下方各穿一不同顏色的線備用(見5-1)。圖3-5-1頸部分離(3)進(jìn)行氣管插管（圖3-5-2）圖3-5-2氣管插管示意圖(4)進(jìn)行動(dòng)脈插管做插管手術(shù)前經(jīng)耳緣靜脈注射肝素（500

U·kg-1），在左側(cè)頸總動(dòng)脈插入動(dòng)脈插管（圖3-5-3）。圖3-5-3頸動(dòng)脈插管示意圖2．連接實(shí)驗(yàn)裝置：

計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)

將動(dòng)脈插管通過三通與血壓換能器連接，血壓換能器與計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)的壓力通道連接；刺激電極與系統(tǒng)的刺激輸出連接；減壓神經(jīng)的記錄電極導(dǎo)線與系統(tǒng)的一個(gè)通道連結(jié)。啟動(dòng)計(jì)算機(jī)生物信號(hào)采集處理分析系統(tǒng)，按系統(tǒng)程序提示進(jìn)行血壓信號(hào)定標(biāo)，調(diào)整放大增益。

3.實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

（1）記錄正常情況下減壓神經(jīng)放電波形和動(dòng)脈血壓波形，觀察二者變化關(guān)系，注意觀察減壓神經(jīng)的群集性放電與血壓的波動(dòng)是否同步?每一群集性放電持續(xù)時(shí)間?血壓正常值是多少?同時(shí)辨認(rèn)血壓波的一級(jí)波和二級(jí)波，三級(jí)波(圖7.10-2)：圖3-5-4兔頸總動(dòng)脈的血壓曲線（示波器記錄）一級(jí)波（心搏波）：由心室舒縮活動(dòng)所引起的血壓波動(dòng)，心縮時(shí)上升，心舒時(shí)下降，其頻率與心率一致。二級(jí)波（呼吸波）：由呼吸運(yùn)動(dòng)所引起的血壓波動(dòng)，吸氣時(shí)血壓先下降，繼而上升，呼氣時(shí)血壓先上升，繼而下降，其頻率與呼吸頻率一致。三級(jí)波：不常出現(xiàn)，可能由心血管中樞的緊張性活動(dòng)的周期變化所致。

（2）夾閉頸總動(dòng)脈

用動(dòng)脈夾夾閉右側(cè)頸總動(dòng)脈10～15

s，觀察血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。在出現(xiàn)一段明顯變化后，突然放開動(dòng)脈夾，血壓又有何變化。

（3）牽拉頸總動(dòng)脈

手持左側(cè)頸總動(dòng)脈上的遠(yuǎn)心端結(jié)扎線，向心臟方快速牽拉3

s。觀察血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。若持續(xù)牽拉，血壓與減壓神經(jīng)放電會(huì)有何變化？

（4）靜脈注射乙酰膽堿

待血壓基本穩(wěn)定后,

由耳緣靜脈注入1:10000乙酰膽堿0.2～0.3

ml，觀測(cè)血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。注意動(dòng)脈血壓降低到何種程度時(shí)，群集型放電才減少?或完全停止及其恢復(fù)過程。

（5）靜脈注射去甲腎上腺素

待血壓基本穩(wěn)定后，由耳緣靜脈注入1:10000去甲腎上腺素0.2～0.3

ml，觀測(cè)血壓與減壓神經(jīng)放電的變化。注意何時(shí)沖動(dòng)發(fā)放增多?何時(shí)分辨不出群集形式?直到血壓繼續(xù)增加而發(fā)放沖動(dòng)的頻率不再增加(圖3-5-5)。圖3-5-5家兔