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文檔簡介

檢測(十八)“生物技術(shù)實(shí)踐”課后強(qiáng)訓(xùn)卷1.(1)如圖是利用____________法進(jìn)行微生物接種,把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面得到的結(jié)果。(2)分析下面培養(yǎng)基的配方:NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、KCl、MgSO4·7H2O、H2O。若此培養(yǎng)基用于篩選分解尿素的細(xì)菌,則應(yīng)除去上述_______成分,并加入_______和葡萄糖,以補(bǔ)充______________源。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和________,以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時,通常采用________法,在鑒定過程中需要用____________作為對照。(4)橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解,使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生____________問題,所以一般采用壓榨法。解析:(1)據(jù)圖分析,圖示接種方法為平板劃線法,平板劃線操作就是將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。(2)題干所給的培養(yǎng)基配方中缺少碳源,氮源是NaNO3,若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌,則應(yīng)該使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基,同時尿素分解菌屬于異養(yǎng)型生物,需加入葡萄糖作為碳源。(3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時,通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干燥,以提高萃取效率。鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時,通常采用紙層析法,在鑒定過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品作為對照。(4)橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時會發(fā)生部分水解,使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生原料焦糊問題,所以一般采用壓榨法。答案:(1)平板劃線(2)NaNO3尿素碳源和氮源(3)干燥紙層析標(biāo)準(zhǔn)樣品(4)原料焦糊2、(2019·珠海一模)地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸,其中40%~60%被土壤中的某些微生物分解利用,這是因?yàn)樗鼈兡軌虍a(chǎn)生纖維素酶,某研究小組欲從土壤中分離得到纖維素分解菌,其操作流程如下所示,請回答相關(guān)問題。①土壤取樣→②選擇培養(yǎng)→③梯度稀釋→④鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)→⑤挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(1)研究小組將濾紙埋在土壤里,30天后再從已經(jīng)腐爛的濾紙上提取土樣篩選纖維素分解菌。請說說這么做的道理是什么?___________________________________________。(2)上述流程②成功的關(guān)鍵,是選擇培養(yǎng)基的配方中要以________為唯一碳源。流程④→⑤常用________染色法,④→⑤過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原因是________________。(3)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,無菌技術(shù)就是圍繞如何避免雜菌的污染展開的。請列舉幾項(xiàng)該研究小組應(yīng)該實(shí)施的無菌操作(如實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行)__________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。為了證明培養(yǎng)基是否受到外來雜菌污染。需要設(shè)置空白對照,對照培養(yǎng)基的處理是___________________。(4)若用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)纖維素分解菌落的數(shù)量,發(fā)現(xiàn)測定的結(jié)果往往比實(shí)際活菌數(shù)量要少,原因是_____________________。解析:(1)濾紙富含纖維素,能使纖維素分解菌相對聚集,故研究小組將濾紙埋在土壤里,30天后再從已經(jīng)腐爛的濾紙上提取土樣能篩選出纖維素分解菌。(2)要篩選出纖維素分解菌,在培養(yǎng)基中應(yīng)該加入纖維素作為唯一的碳源,流程④→⑤常用剛果紅染色法,④→⑤過程利用染色法能夠挑選出纖維素分解菌的原因是剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素,使培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過透明圈即可挑選纖維素分解菌。(3)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,無菌技術(shù)是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,如對實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒,對實(shí)驗(yàn)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌。為了證明培養(yǎng)基是否受到外來雜菌污染。需要設(shè)置空白對照,對照培養(yǎng)基的處理是接種等量的無菌水,置于實(shí)驗(yàn)組相同的環(huán)境條件下培養(yǎng)。(4)當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,故用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)纖維素分解菌落的數(shù)量,測定的結(jié)果往往比實(shí)際活菌數(shù)量要少。答案:(1)濾紙富含纖維素,能使纖維素分解菌相對聚集(或人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境)(2)纖維素剛果紅剛果紅與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物,纖維素分解菌分泌的纖維素酶可以分解纖維素,使培養(yǎng)基中出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,通過透明圈即可挑選纖維素分解菌(3)對實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著和手進(jìn)行清潔和消毒,對實(shí)驗(yàn)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進(jìn)行滅菌接種等量的無菌水,置于與實(shí)驗(yàn)組相同的環(huán)境條件下培養(yǎng)(4)當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落3、根據(jù)生物技術(shù)實(shí)踐的有關(guān)知識,回答下列問題:(1)從土壤中分離能分解尿素的細(xì)菌時,所用的選擇培養(yǎng)基應(yīng)以________為唯一氮源。分解尿素的細(xì)菌由于含有脲酶,可將________________而使周圍環(huán)境的pH上升,在選擇培養(yǎng)基中加入________指示劑,對其進(jìn)行分離、鑒別。(2)由果酒制作轉(zhuǎn)為果醋制作時,需要調(diào)整的溫度范圍是________________________。在制作腐乳的過程中,加鹽和加酒都能夠抑制________________。(3)玫瑰精油是制作高級香水的主要成分,其適合用水蒸氣蒸餾法提取,理由是玫瑰精油具有____________________________的性質(zhì)。當(dāng)蒸餾瓶中的水和原料量一定時,蒸餾過程中影響玫瑰精油提取量的主要因素有蒸餾時間和____________。如果蒸餾過程中不進(jìn)行冷卻,則玫瑰精油提取量會下降,原因是___________________。(4)DNA在濃度為__________mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精可使DNA________(填“析出”或“溶解”)。解析:(1)從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時,應(yīng)該選用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。尿素分解菌合成的脲酶,將尿素分解成氨,氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高,導(dǎo)致酚紅指示劑變成紅色。(2)酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18~25℃,醋酸發(fā)酵時一般將溫度控制在30~35℃。在制作腐乳過程中,加鹽的目的是析出豆腐中的水分,使豆腐塊變硬,同時抑制微生物的生長,避免豆腐塊腐敗變質(zhì);加酒的目的是抑制微生物的生長,同時使腐乳具有獨(dú)特的香味。(3)玫瑰精油具有易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定等性質(zhì),故適合用水蒸氣蒸餾法提取。蒸餾時許多因素都會影響產(chǎn)品的品質(zhì),如蒸餾溫度、蒸餾時間等。蒸餾過程中要進(jìn)行冷卻,讓混合物重新分出油層和水層,若不冷卻則會有部分玫瑰精油隨水蒸氣揮發(fā)而流失,使玫瑰精油提取量下降。(4)DNA在濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。使用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻酒精可使DNA析出。答案:(1)尿素尿素分解成氨酚紅(2)由18~25℃調(diào)整為30~35℃微生物的生長(3)易揮發(fā)、難溶于水、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定蒸餾溫度部分玫瑰精油會隨水蒸氣揮發(fā)而流失(4)0.14析出4、葡萄種植基地為解決葡萄滯銷易腐爛問題,引進(jìn)果酒、果醋生產(chǎn)線進(jìn)行葡萄的深加工,獲得了較好效益。其生產(chǎn)流程如圖所示,據(jù)圖回答:(1)在篩選菌種A時,需要在接種前用________________法對葡萄果汁進(jìn)行滅菌。對于需要長期保存的菌種,可以采用______________的方法。(2)在純化菌種A時接種了5個平板,每個平板均接種了0.1mL樣品并培養(yǎng)。其中乙平板的菌落分布如圖,純化菌種A的接種方法是________________,推測出現(xiàn)平板乙可能的操作失誤是涂布不均勻。其余的甲、丙、丁、戊平板的菌落數(shù)分別是180、220、480、200,則樣品中菌種A的數(shù)量為________個/mL,用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果,一般________(填“低于”或“高于”)實(shí)際值。解析:(1)葡萄果汁作為篩選菌種A時的培養(yǎng)基,需要在接種前用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌;需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏法。(2)分析圖中乙平板的菌落分布特點(diǎn),可以推知采用的純化方法是稀釋涂布平板法;根據(jù)題意,樣品中菌種A的數(shù)量為(180+220+200)÷3÷0.1=2000(個/mL);由于稀釋涂布平板法的個別菌落可能來自兩個或多個細(xì)胞,所以用該方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果,一般低于實(shí)際值。答案:(1)高壓蒸汽滅菌甘油管藏(2)稀釋涂布平板法2000低于5、青蒿素是從黃花蒿的莖葉中提取的無色針狀晶體,易溶于有機(jī)溶劑,不溶于水,不易揮發(fā)。請回答以下問題:(1)從黃花蒿中提取青蒿素時,應(yīng)采用___________法,所選用的有機(jī)溶劑為____________(填“乙醇”或“乙酸乙酯”),通常在提取前將黃花蒿莖葉進(jìn)行粉碎和______,以提高效率。提取過程中宜采用_________加熱以防止燃燒、爆炸,加熱時瓶口要安裝________________裝置,所得液體濃縮前進(jìn)行_______________。(2)玫瑰精油是從玫瑰花中提取的,其原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來,形成油水混合的乳濁液呈_________色,此時向乳濁液中加入氯化鈉,就會出現(xiàn)明顯的分層現(xiàn)象,可用分液漏斗將其分開,然后再加入_______________,經(jīng)過濾可得到純精油。解析:(1)根據(jù)題干信息“青蒿素易溶于有機(jī)溶劑、不溶于水、不易揮發(fā)”,所以應(yīng)采用萃取法從黃花蒿中提取青蒿素。乙醇是水溶性有機(jī)溶劑,萃取中能與水混溶而影響萃取效果,所以乙醇不能用于青蒿素的萃??;乙酸乙酯不與水混溶,沸點(diǎn)高,因此可用于青蒿素的萃取。通常在提取前將黃花蒿莖葉進(jìn)行粉碎和干燥,以提高效率。提取過程中宜采用水浴加熱以防止燃燒、爆炸,加熱時瓶口要安裝回流冷凝裝置,所得液體濃縮前進(jìn)行過濾。(2)玫瑰精油是從玫瑰花中提取的,其原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來,形成油水混合的乳濁液呈乳白色,此時向乳濁液中加入氯化鈉,就會出現(xiàn)明顯的分層現(xiàn)象,可用分液漏斗將其分開,然后再加入無水硫酸鈉吸水,經(jīng)過濾可得到純精油。答案:(1)萃取乙酸乙酯干燥水浴回流冷凝(冷凝回流或冷凝)過濾(2)乳白無水硫酸鈉6、(2019·重慶模擬)下圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程。請回答:(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以______為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加______作指示劑,產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成_____色。(2)腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程示意圖如下:eq\x(豆腐長出毛霉)→eq\x(A)→eq\x(加鹵湯裝瓶)→eq\x(密封腌制)圖中A代表_____________。在配制鹵湯中酒的含量一般控制在______左右。(3)工廠利用蘋果生產(chǎn)果汁、果酒和果醋的大致工藝流程如下:eq\x(蘋果)eq\o(→,\s\up7(預(yù)處理),\s\do5())eq\x(果汁)eq\o(→,\s\up7(發(fā)酵),\s\do5())eq\x(果酒)eq\o(→,\s\up7(發(fā)酵),\s\do5())eq\x(果醋)嚴(yán)格控制發(fā)酵條件是保證發(fā)酵正常進(jìn)行的關(guān)鍵,直接關(guān)系到是否能得到質(zhì)量高、產(chǎn)量多的理想產(chǎn)物,通常所指的發(fā)酵條件包括___________________(至少寫出兩項(xiàng))。(4)玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)中,對初步接收到的乳濁液進(jìn)行如下處理:eq\x(\a\al(玫瑰油與水,的混合物))eq\o(→,\s\up7(試劑),\s\do5(A))eq\x(\a\al(分,層))eq\o(→,\s\up7(裝置),\s\do5(B))eq\x(\a\al(油,層))eq\o(→,\s\up7(試劑),\s\do5(C))eq\x(\a\al(無水玫,瑰精油))eq\o(→,\s\up7(\a\vs4\al(過濾)),\s\do5())eq\x(\a\al(較純凈的,玫瑰精油))試劑A是_________,試劑C的作用是___________________。(5)桉樹油一般從新鮮的桉樹葉中提取,過程如下:eq\x(\a\al(桉樹葉,+水))→eq\x(A)→eq\x(\a\al(油水,混合物))→eq\x(\a\al(分離,油層))→eq\x(除水)→eq\x(桉樹油)提取桉樹油釆用的方法是_________________。解析:(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨,故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源,鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑。由于尿素被脲酶分解成氨,氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高,從而使酚紅指示劑變紅。(2)腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程:豆腐長出毛霉→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。在配制鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。(3)生產(chǎn)果酒、果醋時需控制的發(fā)酵條件包括:溫度、溶氧量、pH等。(4)玫瑰精油的提取實(shí)驗(yàn)中,對初步接收到的乳濁液要先用NaCl改變?nèi)芤旱拿芏龋蛊涑霈F(xiàn)分層現(xiàn)象,然后用分液漏斗獲得含有一定水的油層,再加入無水硫酸鈉,除去玫瑰油中的水分,再過濾除去固體硫酸鈉就可以得到玫瑰精油了。(5)提取桉樹油釆用的方法是水蒸氣蒸餾法。答案:(1)尿素酚紅紅(2)加鹽腌制12%(3)溫度、溶氧量、pH(4)NaCl除去玫瑰精油中的水分(5)水蒸氣蒸餾法7.(2018·南充模擬)泡菜制作簡單,易于儲存,開胃提神,醒酒去膩,老少適宜,是家喻戶曉的一種佐餐菜肴。以下是有關(guān)泡菜制作的一些問題,請分析作答:(1)制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質(zhì)量比約為________,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用,原因是______________________。(2)在泡菜腌制過程中經(jīng)常向壇口邊緣的水槽中補(bǔ)充水分目的是提供________環(huán)境。在發(fā)酵初期會有氣泡從壇沿水槽內(nèi)的水中間歇性溢出,這些氣泡來源于_____________________________________。(3)發(fā)酵后期,乳酸含量繼續(xù)增加,當(dāng)達(dá)到1.2%以上時,發(fā)酵速度漸漸變緩甚至停止,主要原因是________________________。(4)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能的原因是______________________。(5)發(fā)酵過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽,亞硝酸鹽在特定條件下會轉(zhuǎn)變成致癌物________,所以在發(fā)酵過程中應(yīng)定期測定亞硝酸鹽的含量,以把握取食泡菜的最佳時機(jī)。亞硝酸鹽含量的檢測方法是________,在檢測泡菜中亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)中,必須先制備已知濃度的____________,將顯色反應(yīng)后的樣品與其進(jìn)行比對。解析:(1)制備泡菜的鹽水中鹽與清水的質(zhì)量比約為1∶4,鹽水需煮沸并冷卻后才可使用,加熱煮沸是為了殺滅雜菌,冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響。(2)在泡菜腌制過程中,經(jīng)常向壇口邊緣的水槽中補(bǔ)充水分目的是提供無氧環(huán)境。在發(fā)酵初期會有氣泡從壇沿水槽內(nèi)的水中間歇性溢出,這些氣泡是微生物呼吸作用產(chǎn)生的氣體和泡菜壇中剩余的空氣。(3)發(fā)酵后期,乳酸含量繼續(xù)增加,當(dāng)達(dá)到1.2%以上時,pH過低會抑制了乳酸菌的生長,從而使發(fā)酵速度漸漸變緩甚至停止。(4)若制作的泡菜“咸而不酸”,最可能是鹽過多抑制了乳酸菌發(fā)酵。(5)發(fā)酵過程中會產(chǎn)生亞硝酸鹽,亞硝酸鹽在特定條件下會轉(zhuǎn)變成致癌物亞硝胺,所以在發(fā)酵過程中應(yīng)定期測定亞硝酸鹽的含量,以把握取食泡菜的最佳時機(jī)。亞硝酸鹽含量的測定利用比色法,在檢測泡菜中亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)中,必須先制備已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液,將顯色反應(yīng)后的樣品與其進(jìn)行比對。答案:(1)1∶4加熱煮沸是為了殺滅雜菌,冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響(2)無氧微生物呼吸作用產(chǎn)生的氣體和泡菜壇中剩余的空氣(3)pH過低抑制了乳酸菌的生長(4)鹽過多抑制了乳酸菌發(fā)酵(5)亞硝胺比色法標(biāo)準(zhǔn)顯色液8.(2018·遂寧模擬)檸檬是常用的

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