血漿D-二聚體兩種檢測方法的臨床應(yīng)用對比分析及注意事項

血漿D-二聚體兩種檢測方法的臨床應(yīng)用對比分析及注意事項摘要：目的比較D-二聚體兩種檢測方式在臨床疾病診斷與鑒別診斷的應(yīng)用差別。方法：對256份枸櫞酸鈉抗凝血漿分別用全自動血凝分析儀進行纖維蛋白原等量單位（mg/LFEU）和全自動生化分析儀普通含量單位（mg/L）在測量D-二聚體時的一致性差別。結(jié)果用兩種檢測方法對同一份樣本的D-二聚體檢測無差異性，進行Kappa一致性檢驗。K值=0.95無差異性。

關(guān)鍵詞：D-二聚體，單位，差異，血凝分析儀，全自動生化分析

D-二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白的凝塊，是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子XⅢ交聯(lián)后，再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物，主要反映纖維蛋白溶解功能。當(dāng)有纖維蛋白凝塊形成時，纖溶酶原被激活成纖溶酶，啟動纖維蛋白溶解過程，因此D-二聚體的生成和其水平升高反映了血漿凝血系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)的激活。臨床上D-二聚體為體內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶亢進的分子標(biāo)志物。本研究是對凝血分析免疫透射比濁單位（mg/LFEU)與全自動生化分析儀單位（mg/L）在測量D-二聚體時的一致性差別。從而對臨床適應(yīng)性分析以及造成結(jié)果一致性交叉的原因分析。

材料和方法

1儀器與試劑：SYSMEXCA1500全自動血凝分析儀，配套的西門子醫(yī)療INNOVANCE

D-二聚體試劑及定標(biāo)質(zhì)控品，分析參數(shù)由西門子醫(yī)療診斷提供，D-二聚體的報告單位采用纖維蛋白原等量單位即（mg/LFEU）；

日立7180全自動生化分析儀，試劑、校準(zhǔn)品及室內(nèi)質(zhì)控品均由中生北控公司提供，報告單位為（mg/L）

2樣本要求

2.1抗凝劑0.109mol/L枸櫞酸鈉

2.2抗凝劑與全血比例為1:9，如果抗凝劑量減少使D-二聚體值升高，抗凝劑量多使D-二聚體偏低

3使用真空管抽取患者清晨空腹靜脈血并以3500r/min,離心15分鐘。

4血液與抗凝劑混勻時輕輕顛倒，避免用力震蕩而破壞凝血蛋白【1、6】

3方法同一份樣本利用兩種不同表達單位分別測量并記錄結(jié)果，凝血分析儀的正常參考值（00.55mg/lFEU)超過上限判斷為陽性，處于參考值范圍內(nèi)的判斷為陰性。生化分析儀的正常參考值（01.0mg/l)超過上限判斷為陽性，處于參考值范圍內(nèi)的判斷為陰性。

結(jié)果

ca1500陽性率37.11%

日立7180陽性率39.06%

無統(tǒng)計學(xué)意義，x2=2.25p>0.05,

二者陽性符合率35.15%

陰性符合率58.98%

總符合率94.14%

假陽性符合率5.85%

用spss13.0對兩種檢驗單位的試劑進行kappa一致性檢驗，得kappa值0.94二者有一致性

討論

因為D-二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白的凝塊，是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子ⅹⅢ交聯(lián)后，再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物，主要反映纖維蛋白溶解功能。所以當(dāng)前D-二聚體檢測的臨床意義主要用于排除靜脈血栓包括DVT和PV。VTE每年的人群發(fā)病率71/10萬，其中2/3的DVT,1/3則是PE靜脈造影是診斷的DVT的金標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)，但靜脈造影是一種侵入性診斷方法，存在風(fēng)險而且價格昂貴【3】。國外的一些材料表明若D-二聚體水平不高結(jié)合臨床癥狀可有效排除DVT，不需要超聲造影【4】。可以節(jié)約大量的醫(yī)療資源，因此D-二聚體的陰性預(yù)測值更有臨床意義。

當(dāng)前PE的癥狀與其他多鐘疾病常常被誤診為其他疾病，鑒別診斷困難，僅有很少的患者被真正診斷PE。有學(xué)者建議臨床低懷疑PE(如well積分<2)的患者加上D-二聚體可以可靠的排除PE【5】

除VTE外D-二聚體還是早期診斷DIC的敏感指標(biāo)，DIC早期纖溶受到抑制D-二聚體以升高為主，這時血中D-二聚體水平對早期發(fā)現(xiàn)危重患者DIC及時阻斷向纖溶亢進發(fā)展存在重大意義。

上述疾病理想D-二聚體升高或下降應(yīng)具有準(zhǔn)確快速的特點，而在不同單位狀態(tài)下D-二聚體卻存在敏感性和特異性的差別，甚至同一份樣本在陽性率，陽性符合率上都存在較大的差別。

造成這樣差異的原因：1標(biāo)準(zhǔn)化的問題

①D-二聚體沒有一個國際統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)品和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)品，②各家公司制備抗體的識別片段差別較大，生化測定D-二聚體試劑測定的是ＤＤ，ＤＹ，ＹＹ片段，報告單位為（ｍｇ／Ｌ）；凝血儀測定D-二聚體試劑選用新的８Ｄ３單克隆抗體位點，可以檢測ＸＤ，ＸＹ，ＤＸＤ，ＹＸＤ，ＸＸ，ＹＸＹ，ＸＸＤ片段，報告單位為纖維蛋白原等量單位（ｍｇ／ＬＦＥＵ）。③相同方法學(xué)在不同儀器之間的差異。

2

采血量及貯存條件

采血量不足會因抗凝劑將血液過分稀釋而使結(jié)果偏低，反之結(jié)果升高。即使發(fā)現(xiàn)血量不足，也不能將其他抗凝血或普通管導(dǎo)入以免干擾。存放溫度和時間對血漿D-二聚體的影響，有研究發(fā)現(xiàn)放置延【6】長和溫度升高可出現(xiàn)假陽性結(jié)果，因此立即送檢并2小時出報告，不能立即檢測的應(yīng)28℃保存，24小時不能檢測的應(yīng)提取血漿20℃凍存。

3

患者自身的因素

年齡和生理變化隨著年齡的增長D-二聚體水平上升。妊娠婦女隨孕期的延長D-二聚體也升高，雙胎或多胎升高的幅度會更明顯【7】。劇烈運動可使組織纖溶酶激活物（tPA）D-二聚體大量的釋放到血液循環(huán)中，致纖溶升高【1】

4

飲食和藥物

研究發(fā)現(xiàn)高【8】脂飲食所致高脂血癥患者組織纖溶酶激活物（tPA）活性降低從而使D-二聚體降低，造成假陰性。使用尿激酶，鏈激酶和基因重組組織型纖溶酶激活物（rtPA）等能直接能將纖溶酶原轉(zhuǎn)化成纖溶酶使D-二聚體升高，另外口服避孕藥和雌性激素能降低纖溶活性使D-二聚體下降，還有研究發(fā)現(xiàn)【9】某些抗高血壓的藥物（氯舒莎坦）使（rPA）活性升高從而D-二聚體升高。所以在患者D-二聚體升高或降低時應(yīng)考慮患者的服藥，飲食和自身的生理狀態(tài)對D-二聚體的影響。

5由于惡性腫瘤患者體內(nèi)可能存在大量的嗜異性抗體會在方法學(xué)上對檢測起到影響。有研究發(fā)現(xiàn)急性白【1012】血病，肝癌，卵巢癌，惡性黑色素瘤，大腸癌等惡性腫瘤患者D-二聚體升高。

D-二聚體目前公認(rèn)敏感性在90%以上，而特異性在4060%左右因此在【13】診斷疾病時其意義在于陰性結(jié)果，既適用與排除性診斷而非確證性診斷。同時不同的D-二聚體定量分析的表達單位有多種如纖維蛋白等量單位即（mg/lFEU）和普通含量單位（mg/l）進一步導(dǎo)致相同檢測方法的測定值無法進行比較，在臨床中常出現(xiàn)診斷上的問題便是同一份樣本用不同的D-二聚體檢測儀器其結(jié)果可能相差320倍【1415】

綜上所述我們認(rèn)為①在某一次D-二聚體升高時其后應(yīng)進行連續(xù)監(jiān)測，并及時排除其他干擾因素。②盡量在同一家醫(yī)院采用同一種方法同一臺儀器連續(xù)檢測③建議各實驗室避免頻繁更換試劑廠家。④建議個醫(yī)院建立本地區(qū)的D-二聚體檢測體系的參考值范圍，以確保臨床診斷的治療提供有價值的數(shù)據(jù)。

參考文獻：

1宋艷茹，楊小紅，李貞潔.直腸癌手術(shù)前后

D二聚體檢測值的影響因素分析【J】.醫(yī)學(xué)與護理，2010

3SejgalJB,EngJ,TamarizLJ,etalReviewof

theevidenceondiagnosisofdeepwenousthrombosisandpulmonaryembolism【J】.Annfammed,2007,5(1):6373

4PanteghinM.Poresentissuesinthedeterminationoftroponinsandothermarkersofcardiacdamage【J】.Cinbiochem,2000,33(1):5254

5CayWEJrDiagnosingthecauseofchestpain【J】AmFamPhysician,2005,72(10):20122021

6王學(xué)峰，王鴻利。血栓與止血的檢測及應(yīng)用【M】.1版.上海：世界圖書出版公司，2002

7王鴻利，王學(xué)峰。血栓病臨床新技術(shù)【M】.北京：人民軍醫(yī)出版社，2003

8居嶺，王健。高血脂對纖溶系統(tǒng)活性的影響【J】.微循環(huán)學(xué)雜志，2000,10（4）:5253

9孫東升，王錫田，張繼業(yè)，等。氯沙坦對高血壓病人血壓、凝血和纖溶活性的影響【J】.國外醫(yī)學(xué)·心血管疾病分冊，2001,28(6):355358

10任敏，肖菁，武加標(biāo).檢測血漿D二聚體、P選擇素在急性白血病DIC診斷中的臨床意義【J】.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2009,37（6）：447448

11RICHINIM，leGALG,deLUCIAS,etal.clincalusefulnessof

Ddimertestingincancerpatintswithsuspectedpulmornaryembolism

【J】.ThrmbHasemost,2006,95(4):715719

12CHABLOZP,REBERCBOEHLENF,etal.TAFIantigenandDdimerlevelsdueingnormalpregnancyandatdelivery【J】.BrJHaematol,2001,115(1):150152

13王鴻利，王學(xué)峰。D二聚體檢測方法及臨床應(yīng)用【J】.現(xiàn)代實用醫(yī)學(xué)，2004,84（2）:171173.

14CowtherMA,BatesSM,KeeneyM,etalhumandervedDdimerforexternalqualityassessment:resultsoffoursueveysinOntarion【J】.AmJClinPathol,20