體外診斷試劑分析性能評(píng)估(與“樣本”有關(guān)的文檔共18張)

體外診斷試劑分析性能評(píng)估準(zhǔn)確度、精密度第一頁，共18頁。什么是體外診斷？

IVD（InVitroDiagnosis），中文譯為體外診斷，是指在人體之外，通過對(duì)人體的樣品（血液、體液、組織等）進(jìn)行檢測(cè)而獲取臨床診斷信息的產(chǎn)品和服務(wù)，包括試劑、試劑產(chǎn)品、校準(zhǔn)材料、控制材料、成套工具、儀表、裝置、設(shè)備或系統(tǒng)。根據(jù)我國(guó)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局（SFDA）的《醫(yī)療器械分類目錄》標(biāo)準(zhǔn)，IVD設(shè)備屬于臨床檢驗(yàn)分析儀器類。第二頁，共18頁。體外診斷試劑概念《體外診斷試劑注冊(cè)管理辦法（試行）》第三條:

體外診斷試劑是指用于單獨(dú)使用或與儀器、器具、設(shè)備或系統(tǒng)組合使用，在疾病的預(yù)防、診斷、治療監(jiān)測(cè)、預(yù)后觀察、健康狀態(tài)評(píng)價(jià)以及遺傳性疾病的預(yù)測(cè)過程中，用于對(duì)人體樣本（各種體液、細(xì)胞、組織樣本等）進(jìn)行體外檢測(cè)的試劑、試劑盒、校準(zhǔn)品（物）、質(zhì)控品（物）等.第三頁，共18頁。分析樣本1:103％－101％＝2％（3）采用待評(píng)價(jià)系統(tǒng)，按照從低到高的濃度順序，每個(gè)樣本測(cè)（3）采用待評(píng)價(jià)系統(tǒng)，按照從低到高的濃度順序，每個(gè)樣本測(cè)體外診斷試劑分析性能評(píng)估加入濃度2＝55×[0.回收率1＝＝103％0)]＝5mmol/L（二）回收實(shí)驗(yàn)的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理方法（二）回收實(shí)驗(yàn)的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理方法（1）加入體積：加入的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)，如果高濃度的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液不易得到,加入體積亦不得超過原樣本體積的20%。（6）計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：回收率2＝＝99％（2）加入的溶劑應(yīng)不影響對(duì)待測(cè)物的測(cè)定。兩個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值小于±10%，定3次，取平均值，填入表1。（4）計(jì)算平均回收率：平均回收率==101%體外診斷試劑指導(dǎo)原則檢測(cè)線線性范圍可行性報(bào)告準(zhǔn)確度精密度干擾試驗(yàn)穩(wěn)定性參考值第四頁，共18頁。精密度評(píng)價(jià)

精密度是考察試劑盒對(duì)同一樣本重復(fù)測(cè)定時(shí)能否得到相同實(shí)驗(yàn)結(jié)果的能力的指標(biāo)，通常用重復(fù)多次樣本測(cè)量結(jié)果的變異系（CV%）表示，精密度評(píng)價(jià)是質(zhì)量控制的重要內(nèi)容。同時(shí)精密度是衡量體外診斷試劑批內(nèi)和批間變異的重要指標(biāo)，通常包括批內(nèi)和批間不精密度。第五頁，共18頁。

分析內(nèi)(intraassay)精密度：同一次實(shí)驗(yàn)內(nèi)（同一塊微孔板上或?qū)嶒?yàn)條件完全相同的情況下）同一樣本（如：質(zhì)控血清）重復(fù)測(cè)定（n≥10），測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)(CV%）應(yīng)不高于10.0%。分析內(nèi)精密度的變化或異常升高，應(yīng)從方法學(xué)改進(jìn)、實(shí)驗(yàn)室條件改變、操作失當(dāng)?shù)确矫媾挪樵颉５诹?，?8頁。

分析間(interassay)精密度：分析間精密度涵蓋的內(nèi)容非常廣泛，至少應(yīng)包含入下內(nèi)容：1、同一試劑盒，不同批次之間；2、同一試劑盒，同一批次，不同實(shí)驗(yàn)室之

間；3、同一試劑盒，同一批次，同一實(shí)驗(yàn)室，不同操作者之間；4、同一試劑盒，同一批次，同一操作者，有效期內(nèi)不同時(shí)間之間等。第七頁，共18頁。

不同層次的分析間精密度的意義不盡相同，在評(píng)價(jià)試劑盒質(zhì)量時(shí)應(yīng)引起質(zhì)量控制工作者的足夠認(rèn)識(shí)。評(píng)價(jià)分析間精密度時(shí)，同一樣本（如:質(zhì)控血清）在上述條件下重復(fù)測(cè)定(一般n≥10）,測(cè)定結(jié)果的變異系數(shù)（CV%）應(yīng)不高于15.0%。第八頁，共18頁。準(zhǔn)確度-回收實(shí)驗(yàn)（一）回收實(shí)驗(yàn)的基本要求

1.操作者應(yīng)熟悉待評(píng)價(jià)系統(tǒng)的操作。

2.編寫系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，其中包括校準(zhǔn)程序和室內(nèi)質(zhì)控程序，采用合適的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品并保持系統(tǒng)處于正常狀態(tài)。

3.待評(píng)價(jià)系統(tǒng)的處理。進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)該對(duì)待評(píng)價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行初步評(píng)價(jià)，并且對(duì)待評(píng)價(jià)系統(tǒng)進(jìn)行精密度及線性評(píng)價(jià)（參考相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)），只有在以上評(píng)價(jià)完成并且符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求后，才可進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn)。第九頁，共18頁。（二）回收實(shí)驗(yàn)的評(píng)估及數(shù)據(jù)處理方法1.實(shí)驗(yàn)樣本的基本要求和制備方法

（1）選擇合適濃度的常規(guī)檢測(cè)樣本，分為體積相同的3-4份。

（2）在其中2-3份樣本中加入不同濃度相同體積的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液制備待回收分析樣本，加入體積小于原體積的10%，制成2-3個(gè)不同加入濃度的待回收分析樣本，計(jì)算加入的待測(cè)物的濃度。

（3）在另一份樣本中加入同樣體積的無待測(cè)物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本。第十頁，共18頁。2.實(shí)驗(yàn)過程

用待評(píng)價(jià)系統(tǒng)對(duì)待回收分析樣本和基礎(chǔ)樣本進(jìn)行測(cè)定，通常對(duì)樣本進(jìn)行3次重復(fù)測(cè)定，計(jì)算均值，取其均值進(jìn)行下述計(jì)算。3.數(shù)據(jù)處理及結(jié)果報(bào)告

（1）加入濃度n=標(biāo)準(zhǔn)液濃度n×[標(biāo)準(zhǔn)液加入體積/(樣本體積+標(biāo)準(zhǔn)液體積)]

（2）計(jì)算回收率：回收率n=第十一頁，共18頁。（3）計(jì)算平均回收率：平均回收率=（4）計(jì)算每個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值：

每個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值＝回收率n－平均回收率

如差值超過±10%，應(yīng)查找原因并糾正，重新進(jìn)行評(píng)估。 （5）計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：

比例系統(tǒng)誤差=|100%-平均回收率|

第十二頁，共18頁。（6）結(jié)果評(píng)估：

結(jié)果至少應(yīng)滿足相關(guān)國(guó)際及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)滿足臨床需求。第十三頁，共18頁。4.范例——某法測(cè)定血清葡萄糖回收率（1）樣本制備： ①基礎(chǔ)樣本血清：血清1ml（葡萄糖濃度5.5mmol/L）+蒸餾水0.1ml;

基礎(chǔ)樣本濃度＝5.5/(1+0.1)=5mmol/L ②回收樣本1:血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液（濃度22mmol/L）; ③回收樣本2：血清1ml+0.1ml葡萄糖水溶液（濃度55mmol/L）。（2）計(jì)算加入濃度：

加入濃度1＝22×[0.1/(0.1＋1.0)]＝2mmol/L

加入濃度2＝55×[0.1/(0.1＋1.0)]＝5mmol/L（3）采用待評(píng)價(jià)系統(tǒng)，按照從低到高的濃度順序，每個(gè)樣本測(cè)第十四頁，共18頁。定3次，取平均值，填入表1。表1回收濃度1＝7.06-5＝2.06mmol/L回收濃度2＝9.95-5＝4.95mmol/L回收率1＝

＝103％第十五頁，共18頁。

回收率2＝

＝99％（4）計(jì)算平均回收率：平均回收率=

=101%（5）計(jì)算每個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值：分析樣本1:103％－101％＝2％分析樣本2：99％－101％＝－2％兩個(gè)樣本回收率與平均回收率的差值小于±10%，（6）計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=|100%-101%|=1%（7）結(jié)果評(píng)估：1%

（CLIA88）,該方法的回收實(shí)驗(yàn)（準(zhǔn)確度）可接受。第十六頁，共18頁。（三）、其他應(yīng)注意的問題： （1）加入體積：加入的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)，如果高濃度的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液不易得到,加入體積亦不得超過原樣本體積的20%。 加入的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)液體積量不應(yīng)影響樣本基質(zhì)；并且保證在加樣過程中的取樣準(zhǔn)確度。 （2）加入的溶劑應(yīng)不影響對(duì)待