第三章 滅菌與無菌空氣的制備課件

第三章滅菌與無菌空氣的制備第三章滅菌與無菌空氣的制備

第一節(jié)培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備的滅菌

(Sterilization)一、消毒與滅菌方法消毒：指用物理或化學(xué)方法殺死物料、容器、器具內(nèi)外的病原微生物。滅菌：指用物理或化學(xué)方法殺死或除去環(huán)境中所有微生物。第三章滅菌與無菌空氣的制備工業(yè)生產(chǎn)上的滅菌方法有加熱滅菌、化學(xué)藥劑滅菌、射線滅菌等?；瘜W(xué)藥劑滅菌、射線滅菌用于無菌間、培養(yǎng)室及車間空氣滅菌。

干熱滅菌：火焰滅菌、烘箱滅菌加熱滅菌濕熱滅菌：巴氏滅菌、間歇滅菌、高壓蒸汽滅菌二、濕熱滅菌原理

致死溫度：指殺死微生物的最低溫度。第三章滅菌與無菌空氣的制備致死時間：在致死溫度下殺死全部微生物所需要的時間。1.微生物的熱阻

熱阻：微生物對熱的抵抗力。

微生物對濕熱的相對抵抗力微生物名稱大腸桿菌細(xì)菌芽孢霉菌孢子病毒相對抵抗力13×1062～101～5第三章滅菌與無菌空氣的制備2.微生物的熱死規(guī)律——對數(shù)殘留定律

100℃時不同時間微生物存活數(shù)時間（min）存活數(shù)（個/mL)時間（min）存活數(shù)（個/mL)0679119×1071.2×1078×1065×1063×106152025301×1062×1052×104≈0第三章滅菌與無菌空氣的制備5菌的死亡率（活菌的減少率）:

與任何時候殘留的活菌數(shù)N成正比。對數(shù)殘留定律：N—殘留的活菌數(shù)（個）

t—受熱時間（min)K—反應(yīng)速度常數(shù)（min-1)第三章滅菌與無菌空氣的制備

將上式積分得：兩邊取對數(shù)：對數(shù)殘留規(guī)律公式：

—開始滅菌時原有活菌數(shù)（個）

—經(jīng)過t時間滅菌后的殘留菌數(shù)（個）第三章滅菌與無菌空氣的制備3.反應(yīng)速度常數(shù)k

在相同溫度下，k值愈小，則此微生物愈耐熱。同一種微生物在不同溫度下，k值也不相同，滅菌溫度愈低，k值愈小，溫度愈高，k值愈大。

121℃某些細(xì)菌芽孢的k

值細(xì)菌芽孢名稱K值min-1枯草芽孢桿菌FS5230硬脂嗜熱芽孢桿菌FS1518硬脂嗜熱芽孢桿菌FS617產(chǎn)氣梭狀芽孢桿菌PA36793.8～2.60.772.91.8第三章滅菌與無菌空氣的制備4．培養(yǎng)基滅菌溫度的選擇實驗測定：加熱溫度每升高10℃

物質(zhì)化學(xué)反應(yīng)1.5～2

芽孢熱死反應(yīng)5～10

微生物營養(yǎng)細(xì)胞熱死反應(yīng)35

第三章滅菌與無菌空氣的制備結(jié)論：溫度升高，菌死亡速率大于培養(yǎng)基成分破壞的速率。不同溫度滅菌時間及培養(yǎng)基破壞情況

在實際生產(chǎn)中為了既達(dá)到滅菌目的又較好地保存營養(yǎng)成分，最好采用高溫快速滅菌法。溫度（℃）滅菌時間（min)營養(yǎng)成分破壞（%）溫度（℃）滅菌時間（min)營養(yǎng)成分破壞（%）1001101151204003015499.36750271301401500.50.080.0182＜1第三章滅菌與無菌空氣的制備三、影響培養(yǎng)基滅菌的其它因素1．培養(yǎng)基成分

2．PH值

pH值對滅菌時間的影響溫度（℃）孢子數(shù)（個/mL)滅菌時間（min）pH6.1pH5.3pH5.0pH4.7pH4.5120115110100100001000010000100008257074072565720512351803133015031324150第三章滅菌與無菌空氣的制備3．培養(yǎng)基中的顆粒

4．泡沫

四、工業(yè)滅菌方法

1．連續(xù)滅菌（連消）(Continuoussterilization):

是采用專一滅菌設(shè)備—-連消塔，在高溫下對液體培養(yǎng)基進(jìn)行短時間加熱滅菌。優(yōu)點：（1）培養(yǎng)基受熱時間短（可在20～30s達(dá)到預(yù)定滅菌溫度），營養(yǎng)成分破壞少；（2）質(zhì)量均勻；（3）適用于自動控制。適用條件：大規(guī)模生產(chǎn)，培養(yǎng)基中不含有固體顆?；蚺菽^少。第三章滅菌與無菌空氣的制備第三章滅菌與無菌空氣的制備第三章滅菌與無菌空氣的制備第三章滅菌與無菌空氣的制備第三章滅菌與無菌空氣的制備2.分批滅菌(實消):(Batchsterilization)

指培養(yǎng)基在發(fā)酵罐中滅菌。優(yōu)點：無需專一滅菌設(shè)備，但易發(fā)生局部過熱而破壞營養(yǎng)成分的現(xiàn)象。適用條件：當(dāng)培養(yǎng)基中含有固體顆粒或培養(yǎng)基有較多泡沫時，以采用分批滅菌為好。對于容積小的發(fā)酵罐，連續(xù)滅菌的優(yōu)點不明顯，而采用分批滅菌比較方便。第三章滅菌與無菌空氣的制備3.設(shè)備滅菌

(Stearilizationoffermenter)

實罐滅菌時，發(fā)酵罐