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文檔簡介
2024年甘肅省職業(yè)院校技能大賽學(xué)生組食品藥品與糧食類食品安全
與質(zhì)量檢測賽項
食品微生物檢驗技能考核
任務(wù)1菌落總數(shù)測定(樣品3)現(xiàn)場操作規(guī)程及要求
賽位號:
【注意事項】:
1.考慮競賽的時間要求以及公平公正的大賽原則,本項目操作規(guī)程在參照國家標(biāo)準(zhǔn)GB
4789.2-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定》的基礎(chǔ)上略有改動。
2.大賽提供的所有玻璃器材均是經(jīng)過嚴(yán)格滅菌的,達到無菌要求。競賽由組委會統(tǒng)一準(zhǔn)備
質(zhì)控樣品,每位選手獨立一份質(zhì)控樣,能夠保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確度的可評價性。
3.選手提前10分鐘進場。選手入場后可檢視儀器設(shè)備,如有問題可提出更換;比賽正式
開始后不再處理任何儀器設(shè)備問題,一切后果選手自負(fù)。
4.比賽過程中請做好相應(yīng)的安全防護措施,并進行設(shè)備使用登記。
6.比賽時間:50分鐘,每超時2分鐘扣1分,超時10分鐘停止操作。
質(zhì)控樣(模擬食品)菌落總數(shù)測定
由組委會統(tǒng)一準(zhǔn)備樣品,在參照GB4789.2-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品
微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定》基礎(chǔ)上略有改動,完成質(zhì)控樣(模擬食品)中菌
落總數(shù)的測定。
1.準(zhǔn)備工作
根據(jù)微生物檢驗工作相關(guān)要求,利用比賽現(xiàn)場提供儀器和材料等,獨立完成
各項準(zhǔn)備工作及正確標(biāo)識。
2.樣品稀釋
用10毫升改良吸管吸取現(xiàn)場提供的質(zhì)控樣原液25毫升至盛有225毫升的滅
菌生理鹽水中,制成10-1樣品勻液。用1毫升的改良吸管吸取1毫升10-1勻液至
9毫升生理鹽水試管中制成10-2樣品勻液,依次稀釋至10-3、10-4等。同時選擇3
個適宜稀釋度分別吸取1毫升樣品勻液至兩個無菌培養(yǎng)皿中。用9毫升的生理鹽
水試管作為空白使用。
3.傾注培養(yǎng)基
每個培養(yǎng)皿傾注約15-20毫升的培養(yǎng)基,待凝固后,倒置放入培養(yǎng)袋。在培
養(yǎng)袋上寫上批次號和工位號及相關(guān)記錄。經(jīng)裁判確認(rèn)后,培養(yǎng)袋放在超凈工作臺
上即可。
(4)培養(yǎng)
每一批次結(jié)束后由志愿者統(tǒng)一放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),36℃±1℃培養(yǎng)24±1小
時左右,即置冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>
2024年甘肅省職業(yè)院校技能大賽學(xué)生組食品藥品與糧食類食品安全
與質(zhì)量檢測賽項
食品微生物檢驗技能考核
任務(wù)2細(xì)菌染色鑒別(樣品3)現(xiàn)場操作規(guī)程及要求
賽位號:
注意事項:
1.大賽統(tǒng)一提供標(biāo)準(zhǔn)菌株供選手染色鏡檢使用,注意每位選手限做1片,鏡檢結(jié)果需舉手
示意裁判確認(rèn)。
2.選手提前10分鐘進場。選手入場后可檢視儀器設(shè)備,如有問題可提出更換;比賽正式
開始后不再處理任何儀器設(shè)備問題,一切后果選手自負(fù)。
3.比賽過程中請做好相應(yīng)的安全防護措施,并進行設(shè)備使用登記。
4.比賽時間:30分鐘,每超時2分鐘扣1分,超時10分鐘停止操作。
細(xì)菌染色鑒別
正確挑取給定菌株典型菌落進行革蘭氏染色、鏡檢(限做1片),并對菌株
形態(tài)進行判斷。
1.制片
取菌種培養(yǎng)物常規(guī)涂片、干燥、固定。
2.革蘭氏染色
依次用結(jié)晶紫初染、碘液媒染、酒精脫色、番紅復(fù)染。
革蘭氏染色溶液A——結(jié)晶紫染色液
革蘭氏染色溶液B——革蘭氏碘液
革蘭氏染色溶液C——95%乙醇
革蘭氏染色溶液D——番紅復(fù)染液
3.鏡檢
依次使用低倍鏡,高倍鏡和油鏡進行觀察,油鏡鏡檢結(jié)果需舉手示意裁判。
載玻片需寫上批次號和工位號,無需清理,放置桌面即可。完成相應(yīng)整理工作。
按照規(guī)定要求找到視野,油鏡下鏡檢結(jié)果需舉手示意裁判。載玻片需寫上批
次號和工位號,無需清理,放置桌面即可。
4.完成菌株形態(tài)鑒別報告
2024年甘肅省職業(yè)院校技能大賽學(xué)生組食品藥品與糧食類食品安全
與質(zhì)量檢測賽項
食品微生物檢驗技能考核
任務(wù)3菌落總數(shù)測定(樣品3)結(jié)果報告
賽位號:
注意事項:
1.本環(huán)節(jié)一共包括2個子任務(wù),子任務(wù)1為選手前一天做的菌落總數(shù)測定培養(yǎng)后平板菌落
計數(shù)及報告;子任務(wù)2為完成給定情景樣品的菌落總數(shù)測定結(jié)果記錄填寫、計算、報告
以及判定。
2.子任務(wù)1選手完成計數(shù)后需舉手示意裁判,確認(rèn)后計數(shù)結(jié)果才有效。
3.比賽過程中請做好相應(yīng)的安全防護措施。
4.比賽時間:40分鐘,時間到即停止操作。
子任務(wù)1:完成選手前一天菌落總數(shù)測定培養(yǎng)后平板菌落計數(shù)及相關(guān)計算,
按要求如實填寫相關(guān)記錄表格和檢測報告。
子任務(wù)2:已知某批次鮮牛奶(巴氏殺菌乳,樣品編號20230128)檢樣菌落
總數(shù)測定數(shù)據(jù)及產(chǎn)品微生物限量要求(書面統(tǒng)一提供),分別完成該樣品菌落總
數(shù)測定結(jié)果記錄填寫、計算、報告以及單項判定。
2024年甘肅省職業(yè)院校技能大賽學(xué)生組食品藥品與糧食類食品安全
與質(zhì)量檢測賽項
食品微生物檢驗技能考核
任務(wù)4微生物致病菌檢驗(虛擬仿真)(樣品3)操作規(guī)程
賽位號:
【注意事項】
1.請按照順序完成操作,操作結(jié)束之前,請勿退出軟件,一旦退出,后果自負(fù)。
2.電腦或軟件出現(xiàn)異常,請及時報告現(xiàn)場裁判。
3.操作完成后,系統(tǒng)自動打分。在報告第一頁空白處簽署“賽位號,我已確認(rèn)”字樣。選
手在賽位上安靜等待至比賽結(jié)束,現(xiàn)場裁判宣布比賽結(jié)束前不得離場。
4.比賽時間60分鐘,到時立刻停止,否則視為作弊。
微生物致病菌檢驗(虛擬仿真)
利用信息化技術(shù)手段,依據(jù)GB4789.4-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生
物學(xué)檢驗沙門氏菌檢驗》;SN/T1870-2016《出口食品中食源性致病菌檢測方法
實時熒光PCR法》完成沙門氏菌的檢測,包括預(yù)增菌、增菌、分離培養(yǎng)、生化
試驗、血清學(xué)鑒定和分子生物學(xué)檢驗等。
一、實驗室安全排查及規(guī)范操作
1.生物安全實驗室的防護要求
2.生物實驗室隱患查找、意外情況的緊急處理等
二、沙門氏菌檢驗
1、預(yù)增菌
2、增菌
3、分離
4、生化試驗
5、血清學(xué)鑒定
三、實時熒光法檢驗沙門氏菌
1、模板DNA的制備
2、DNA濃度和純度的測定
3、實時熒光PCR儀檢測
2024年甘肅省職業(yè)院校技能大賽學(xué)生組食品藥品與糧食類食品安全
與質(zhì)量檢測賽項
食品微生物檢驗技能考核
任務(wù)1菌落總數(shù)測定(樣品3)現(xiàn)場操作規(guī)程及要求
賽位號:
【注意事項】:
1.考慮競賽的時間要求以及公平公正的大賽原則,本項目操作規(guī)程在參照國家標(biāo)準(zhǔn)GB
4789.2-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定》的基礎(chǔ)上略有改動。
2.大賽提供的所有玻璃器材均是經(jīng)過嚴(yán)格滅菌的,達到無菌要求。競賽由組委會統(tǒng)一準(zhǔn)備
質(zhì)控樣品,每位選手獨立一份質(zhì)控樣,能夠保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確度的可評價性。
3.選手提前10分鐘進場。選手入場后可檢視儀器設(shè)備,如有問題可提出更換;比賽正式
開始后不再處理任何儀器設(shè)備問題,一切后果選手自負(fù)。
4.比賽過程中請做好相應(yīng)的安全防護措施,并進行設(shè)備使用登記。
6.比賽時間:50分鐘,每超時2分鐘扣1分,超時10分鐘停止操作。
質(zhì)控樣(模擬食品)菌落總數(shù)測定
由組委會統(tǒng)一準(zhǔn)備樣品,在參照GB4789.2-2022《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品
微生物學(xué)檢驗菌落總數(shù)測定》基礎(chǔ)上略有改動,完成質(zhì)控樣(模擬食品)中菌
落總數(shù)的測定。
1.準(zhǔn)備工作
根據(jù)微生物檢驗工作相關(guān)要求,利用比賽現(xiàn)場提供儀器和材料等,獨立完成
各項準(zhǔn)備工作及正確標(biāo)識。
2.樣品稀釋
用10毫升改良吸管吸取現(xiàn)場提供的質(zhì)控樣原液25毫升至盛有225毫升的滅
菌生理鹽水中,制成10-1樣品勻液。用1毫升的改良吸管吸取1毫升10-1勻液至
9毫升生理鹽水試管中制成10-2樣品勻液,依次稀釋至10-3、10-4等。同時選擇3
個適宜稀釋度分別吸取1毫升樣品勻液至兩個無
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