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實驗用高倍顯微鏡觀察葉綠體和線粒體(5年5考)(安徽卷,山東卷、江蘇卷、……)[要點突破]1.實驗原理(1)葉綠體呈綠色、扁平的橢球形或球形,不需染色,制片后直接觀察。(2)線粒體呈無色,有短棒狀、圓球狀、線形、啞鈴形等,用健那綠染成藍綠色后制片觀察。2.實驗步驟(1)觀察葉綠體eq\x(\a\al(制作蘚類葉,片臨時裝片))eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(在潔凈的載玻片中央滴一滴清水,,用鑷子取-片蘚類的小葉,或取菠菜葉稍帶些葉肉的下表皮,,放入水滴中,蓋上蓋玻片))↓eq\x(低倍顯微鏡下找到葉片細胞)↓eq\x(高倍顯微鏡下觀察葉綠體的形態(tài)和分布)(2)觀察線粒體eq\x(\a\al(制作人的,口腔上皮,細胞臨時,裝片))eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(在潔凈的載玻片中央滴一滴健那綠染液,,用消毒牙簽刮自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁后,涂抹于染液中,,蓋上蓋玻片))↓eq\x(低倍顯微鏡下找到口腔上皮細胞)↓eq\x(高倍顯微鏡下觀察)eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(線粒體被染成藍綠色,細胞質(zhì)接近無色))3.注意的問題線粒體和葉綠體觀察實驗的6個注意點(1)健那綠染液是專一性對線粒體染色的活體染料,可使活細胞中線粒體呈現(xiàn)藍綠色,而細胞質(zhì)接近無色。(2)實驗過程中的臨時裝片要始終保持有水狀態(tài)。(3)要漱凈口腔,防止雜質(zhì)對觀察物像的干擾。(4)用菠菜葉稍帶葉肉的下表皮的原因:靠近下表皮的葉為柵欄組織,葉綠體大而排列疏松,便于觀察;帶葉肉是因為表皮細胞不含葉綠體。(5)葉綠體在弱光下以橢球形的正面朝向光源,便于接受較多的光照;在強光下則以側(cè)面朝向光源,以避免被強光灼傷。(6)蓋蓋玻片時,一定要緩慢且與載玻片成45°夾角,蓋玻片一側(cè)先接觸液滴,防止裝片下產(chǎn)生氣泡。[典例透析]【典例1】(·山東理綜,6)只有在保持細胞活性的條件下,才能顯示細胞中某物質(zhì)或結(jié)構(gòu)的實驗是()。A.蘇丹Ⅲ染色觀察花生種子子葉細胞中的脂肪B.龍膽紫染色觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞的有絲分裂C.健那綠(詹納斯綠B)染色觀察動物細胞的線粒體D.甲基綠、派洛寧(吡羅紅)染色觀察動物細胞中的DNA和RNA解析依據(jù)題干中提供的信息“只有在保持細胞活性的條件下”來判斷,選項A中不需要保持細胞活性;選項B中在用龍膽紫染色觀察洋蔥根尖分生區(qū)細胞之前需用鹽酸和酒精混合液解離,此時細胞已被殺死;選項D中需用鹽酸處理后再染色,故D中細胞也無需保持細胞的活性。答案C【典例2】(·江蘇單科,10)將有關(guān)生物材料直接制成臨時裝片,在普通光學(xué)顯微鏡下可以觀察到的現(xiàn)象是()。A.菠菜葉片下表皮保衛(wèi)細胞中具有多個葉綠體B.花生子葉細胞中存在多個橘黃色脂肪顆粒C.人口腔上皮細胞中線粒體數(shù)目較多D.紫色洋蔥鱗片葉外表皮細胞中細胞核清晰可見解析當(dāng)用光學(xué)顯微鏡觀察時,可從菠菜葉片下表皮保衛(wèi)細胞中直接觀察到葉綠體,且呈綠色;細胞中的脂肪顆粒、線粒體和細胞核,本身不具有顏色,需經(jīng)特殊染色處理后,才能夠觀察到。答案A規(guī)律總結(jié)玻片標(biāo)本的制作適用于顯微觀察,凡需在顯微鏡下觀察的生物材料,必須先制成玻片標(biāo)本。常用的方法有:(1)壓片法(如洋蔥根尖細胞的有絲分裂)。壓片的一般過程是:取材→固定→解離(對不易分散的材料用鹽酸處理)→漂洗→染色→壓片→觀察。(2)裝片法(如高倍
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